烟碱在中枢神经系统中的保护作用研究进展

本文综述了在不同的实验模型中烟碱所表现出的对中枢神经系统的保护作用。并探讨了烟碱的保护作用面理。烟碱的保护作用主要是由烟碱受体倡导的，抑制由钙离子内流引起的一氧化氮合成，促进某些细胞因子合成以及其他级联反应实现。     

三环哌酯对培养交感神经元烟碱受体的阻断作用

目的:观察烟碱受体拮抗剂三环哌酯对烟碱诱发电流的作用.方法:用高阻抗封接膜片箝全细胞记录技术在培养的新生大鼠颈上神经节观察三环哌酯对烟碱诱发电流的作用.结果:三环哌酯竞争性地抑制烟碱诱发电流,其抑制作用没有电压依赖性,但能加速烟碱受体失敏.结论:三环哌酯抑制神经元烟碱受体的作用部位在变构位点而不是在离子通道或乙酰胆碱识别位点.     

六甲溴铵阻断交感神经元烟碱受体的机理

使用膜片钳全细胞记录技术，观察了六甲溴铵(C₆)对培养新生大鼠颈上交感节(SCG)神经元烟碱受体的阻断作用，并对其作用机理进行了研究. 本实验发现C₆对神经元烟碱受体的抑制作用具有明显的浓度依赖性和电压依赖性，可明显加速烟碱受体的失敏，提示C₆主要以阻断受体开放离子通道的方式拮抗烟碱受体.     

烟碱诱导的海马脑片CA_1区长时程增强呈钙离子依赖性(英文)

目的:观察钙离子在烟碱诱导的大鼠海马脑片CA_1区长时程增强中的作用。方法:细胞外记录离体海马脑片CA_1区锥体细胞层群体峰电位。结果:至少烟碱1μmol·L~(-1)可诱导海马CA_1区长时程增强形成。移去脑脊液中的钙离子,烟碱不能诱导CA_1区长时程增强形成。硝苯地平1与10μmol·L~(-1)部分抑制而Tharpsigargin 1与10μmol·L~(-1)完全抑制烟碱诱导的长时程增强形成。结论:烟碱诱导的海马CA_1区长时程增强呈钙离子依赖性,胞外钙内流和胞内钙释放都参与了长时程增强形成。     

二氢—β—刺桐啶碱对大鼠骨骼肌细胞烟碱诱发电流的抑制作用

目的:观察二氢—β—刺桐啶碱(dHβE)对大鼠骨骼肌细胞烟碱诱发电流的抑制作用并确定其在烟碱受体上的作用位点。方法:取新生Wistar大鼠骨骼肌细胞体外培养获得肌球,用膜片钳全细胞记录技术观察肌球给予不同浓度dHβE后对烟碱诱发电流的影响。结果:骨骼肌细胞烟碱(浓度40~160μmol.L-1)诱发电流及dHβE(浓度0~40μmol.L-1)对其的抑制作用均具有量效关系;dHβE作用于烟碱识别位点而非烟碱受体离子通道。结论:膜片钳技术使探讨烟碱受体拮抗药的作用位点成为可能。     

烟碱对大脑皮层毒蕈碱型受体与其激动剂和拮抗剂结合的调节

烟碱对大脑皮层毒蕈碱型受体与其激动剂和拮抗剂结合的调节汪海，崔文玉，刘传缋（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０，中国）关键词烟碱；烟碱受体；毒蕈碱受体；大脑皮质；氧颤莫林；奎纽定二苯羟乙酸目的：研究烟碱对脑Ｍ受体结合性能的调节作用．方法：...     

大鼠颈上神经节烟碱受体失敏后毒蕈碱受体的活性增强

目的：在单个培养的大鼠颈上交感神经元上研究失敏烟碱受体(N受体)对毒蕈碱受体(M受体)活性的影响．方法：采用全细胞膜片筘技术．结果：对神经元喷射烟碱可激活N受体诱发一内向电流,烟碱持续作用导致N受体快速失敏．氧化震颤素和毛果芸香碱均能激活M受体诱发一外向电流,M受体没有出现失敏现象．长时间持续喷射烟碱使N受体完全失敏后M受体激活所诱发外向电流的幅度与正常相比明显增大,而一旦去除烟碱,失敏的N受体对烟碱的敏感性将会逐步恢复,在此过程中M受体增加的活性也随之消失：另外,失敏的N受体对M受体活性的增强作用还可被美加明阻断．结论：大鼠交感神经元N受体失敏后M受体对其激动剂的反应增强．     

烟碱及其重酒石酸盐诱发行为和脑电惊厥的特征

在清醒小鼠上，烟碱游离碱及其重酒石酸盐均可剂量依赖性地诱发行为和脑电?惊厥. 烟碱游离碱1.0 mg·kg^-1 iv在所有受试动物上均可诱发行为惊厥伴脑电癫痫样放电，并可被神经元型N受体拮抗剂美加明拮抗，但不被M受体拮抗剂阿托品和肌肉型N受体拮抗剂加拉碘铵所拮抗. 烟碱重酒石酸盐诱发行为?惊厥的作用较强，但诱发脑电惊厥的作用较弱，行为惊厥与脑电惊厥有明确的分离现象. 提示烟碱游离碱1.0 mg·kg^-1 iv诱发行为惊厥与其?激动中枢N受体有关.     

中枢N受体对M受体介导体温降低作用的调节

在清醒大鼠上，可进中枢的Ｎ受体拮抗剂美加明可对抗Ｎ受体激动剂烟碱降低体温的作用，增强Ｍ受体激动剂氧化震颤素降低体温的作用；不进中枢的外周Ｎ受体拮抗剂六甲溴铵不影响烟碱和氧化震颤素的上述作用．每天３次ｓｃ烟碱２．５ｍｇ·ｋｇ－１，连续７ｄ，大鼠对烟碱降低体温的作用产生慢性耐受后，氧化震颤素降低体温的作用无显著变化．提示以体温变化为指标，美加明封闭中枢Ｎ受体功能后，中枢Ｍ受体对其激动剂的敏感性增强；反复给予烟碱诱导中枢Ｎ受体功能失敏后，中枢Ｍ受体对其激动剂的敏感性无显著变化．     

Physostigmine blocked nicotinic acetylcholine receptors in rat sympathetic ganglion neurons

目的：研究毒扁豆碱阻断交感节神经元烟碱受体的作用机理．方法：以培养的新生大鼠颈上交感节神经元为标本，使用全细胞膜片箝技术，观察毒扁豆碱对交感节烟碱受体选择性激动剂ＤＭＰＰ诱发电流的影响．结果：毒扁豆碱（５－２０μｍｏｌ·Ｌ－１）以浓度依赖性方式抑制ＤＭＰＰ诱发电流，促进诱发电流的衰减，其抑制作用没有电压依赖性，毒扁豆碱２００μｍｏｌ·Ｌ－１不能激活烟碱受体．结论：与骨骼肌烟碱受体相比，交感神经元烟碱受体表现出不同的药理学特性．毒扁豆碱通过作用于变构位点抑制交感神经元烟碱受体，不影响其开放的离子通道和激动剂结合位点．     

库容性Ca~(2+)内流介导大鼠远端结肠平滑肌收缩

目的探讨库容性Ca2+内流(capac itative Ca2+entry,CCE)是否参与大鼠远端结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。方法利用器官离体装置、张力换能器、Powerlab 4/25T数据采集分析系统测定远端结肠平滑肌的张力。结果毒胡萝卜素(thapsigargin,TG,10 nmol.L-1~1μmol.L-1)诱导结肠平滑肌条产生持续的张力性收缩,不同浓度TG所致的同步收缩反应张力不同。在无钙Krebs液(包含1 mmol.L-1EDTA)中使用TG将肌条培养35 m in后,再加入Ca2+2.5mmol.L-1,比未使用TG处理的肌条产生的收缩张力明显提高(99%±28%vs70%±8%)。且TG耗竭胞内钙库后再复钙所致的收缩效应,不受L型钙通道阻断剂verapam il影响,但可被SOC通道阻断剂La3+减弱。结论TG耗竭胞内钙库后再复钙诱导的大鼠远端结肠平滑肌收缩反应由CCE介导,提示CCE是提供大鼠远端结肠平滑肌收缩的激活信号Ca2+的来源之一,参与完成结肠平滑肌兴奋-收缩偶联过程。     

心肌钙反常模型细胞因子的表达及地尔硫卓的干预作用

目的探讨心肌钙反常模型诱导心肌细胞因子的表达及地尔硫卓的干预作用。方法采用Langendorff装置对离体大鼠心脏进行钙反常灌流(无钙灌流液5min,立即换正常钙灌流液灌流30min),建立心肌细胞钙超载模型。设立钙超载组、正常对照组、无钙对照组、钙超载给药组(地尔硫卓)和无钙给药组。电镜和光镜观察心肌病理和超微结构的变化。原子分光光度计检测心肌钙离子浓度,RT-PCR法测心肌细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β1和IL-10的表达。结果钙超载组光镜下未见明显炎症细胞浸润,电镜结果显示心肌细胞膜、细胞核和线粒体明显破坏。与正常对照组比较,TNF-α、IL-1β和IL-6明显增高,而TGF-β1和IL-10无明显变化。钙超载给药组(地尔硫卓)显示心肌损伤明显改善,TNF-α、IL-1β和IL-6明显下降。正常对照组、无钙对照组和无钙给药组心肌光镜和电镜下无明显差异,心肌Ca2+浓度差异无统计学意义,细胞因子的表达差异也无统计学意义。结论心肌钙反常模型诱导心肌表达TNF-α、IL-1β和IL-6,对TGF-β1和IL-10无明显影响,地尔硫卓能抑制心肌细胞钙超载诱导的TNF-α、IL-1β和IL-6表达。     

用Fura-2测定突触体内游离Ca2+浓度及Ca2+通道激动剂和阻断剂的影响

用Fura-2测定大鼠突触体内游离Ca²⁺浓度,探讨Ca²⁺通道激动剂和阻断剂对突触体内钙浓度的影响。测得突触体内Ca²⁺浓度为200～400 nmol/L。观察了不同浓度KCl,CaCl₂,NMDA和谷氨酸对突触体内Ca²⁺增加的影响以及维拉帕米及MgCl₂对KCl和NMDA引起钙内流的阻断作用。本实验提供一个研究突触体内Ca²⁺变化的准确而稳定的方法,并对测定中几个影响因素加以讨论。     

Effects of nonylphenol on the calcium signal and catecholamine secretion coupled with nicotinic acetylcholine receptors in bovine adrenal chromaffin cells

Nonylphenol (NP) is the most critical metabolite of alkylphenol polyethoxylate detergents. NP is known as an endocrine disruptor with estrogenic activities and as an inhibitor of endoplasmic reticulum Ca(2+)-ATPase. Estrogen has modulatory roles on ligand-gated ion channels, such as nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs). Ca(2+)-ATPase inhibitors can modulate the cytosolic calcium concentration ([Ca(2+)](c)]) and thus can affect the calcium signaling coupled with nAChRs. Therefore, NP is predicted to have complex effects on the Ca(2+) signaling and secretion coupled with nAChRs. This study investigated these effects using bovine adrenal chromaffin cells. The results show that NP suppressed the Ca(2+) signaling coupled with nAChRs and voltage-operated Ca(2+) channels in a dose-dependent manner, with IC(50)s of 1 and 5.9 microM, respectively. Estradiol exhibits similar suppression but much lower inhibitory potencies. NP alone induced a transient rise in [Ca(2+)](c) in the presence or absence of extracellular calcium. Thapsigargin, an endoplasmic reticulum Ca(2+)-ATPase inhibitor, partially suppressed the [Ca(2+)](c) rise induced by NP, but NP totally blocked the [Ca(2+)](c) rise induced by thapsigargin. This illustrates that NP can cause Ca(2+) release from thapsigargin-insensitive pools. Thapsigargin suppressed the Ca(2+) signaling coupled with nAChRs but increased that coupled with voltage-operated Ca(2+) channels. We propose that three routes are responsible for the effects of NP on nAChRs: named receptor channels, voltage-gated Ca(2+) channels, and Ca(2+)-induced Ca(2+) release. Three routes are related to the characteristics of NP as steroid-like compounds and Ca(2+)-ATPase inhibitor.     

钙离子跨膜转运与血小板聚集阈值

钙离子作为第二信使物质,调节着众多的生理反映。本文从钙离子的跨膜转运对血小板聚集的影响出发,提出一种数学模型方法,力图以胞浆内游离钙浓度作为指标去研究和标志血小板的聚集特性,它从一个侧面去反映血小板的老化程度或病态程度。     

铅对大鼠脑突触体钙调素的抑制作用

用体外法,将大鼠脑突触体膜,在不同浓度的Pb~(2+)作用下分别测定CaM依赖的Ca~(2+)-ATP酶和CaM活性的IC_(50)值。结果表明,Pb~(2+)对Ca~(2+)-ATP酶活性IC_(50)为 1.62mM;对CaM活性IC_(50)为3.85mM。当向不含CaM的脑突触体加入3.0～10.0μg的外源性CaM后,被Pb~(2+)抑制的Ca~(2+)-ATP酶活性均有显著的逆转而恢复或接近正常水平。推测Pb~(2+)主要直接作用在脑突触体膜的CaM,通过CaM分子构象改变,抑制Ca~(2+)-ATP酶,这可能是铅神经毒性的分子基础。     

杏花雨对外源性高钙致大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的探讨杏花雨注射液对外源性高钙所致线粒体损伤的保护作用.观察杏花雨对离体线粒体是否具有保护作用,从而进一步完善银杏叶提取物抗脑缺血损伤的机制.方法新鲜制备的大鼠脑线粒体悬液,分别与不同浓度Ca2 以及不同浓度的杏花雨注射液进行孵育,观察线粒体基质游离钙、线粒体活性以及线粒体膜肿胀度的变化.结果与正常对照组比较外源性高钙导致大鼠脑线粒体严重钙超载(P＜0.01),线粒体活性下降(P＜0.01),540 nm处线粒体悬液吸光度值显著下降,线粒体明显肿胀(P＜0.01);于钙离子损伤前给予杏花雨孵育,线粒体基质游离钙浓度明显降低(P＜0.01),线粒体活性显著升高(P＜0.01),吸光度值有明显升高,显示线粒体肿胀度减轻(P＜0.01).结论外源性高钙可使线粒体基质游离钙含量升高,产生线粒体通透性转换(mitochondria permeability transition,MPT),使线粒体活性降低,功能障碍.杏花雨通过缓解线粒体钙超载,防止产生MPT,从而恢复线粒体功能.提示杏花雨抑制线粒体钙超载可能是其对缺血再灌注脑损伤的保护作用机制.     

20(S)-人参皂苷Rg_3对脑缺血大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的研究20(S)-人参皂苷Rg3对脑缺血所致大鼠脑线粒体损伤的保护作用,探讨20(S)-人参皂苷Rg3抗缺血性脑中风的机制。方法用栓线法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca2+等。结果大鼠MCAO后24 h,脑线粒体损伤明显,表现为肿胀、膜流动性降低,膜磷脂降解、呼吸功能衰减,呼吸酶、SOD活性降低,Ca2+、MDA含量升高;静脉注射20(S)-人参皂苷Rg3(5,10 mg.kg-1)能明显抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低,膜磷脂降解,减少脑缺血引起的线粒体肿胀,抑制NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性的降低,改善线粒体呼吸功能;同时20(S)-人参皂苷Rg3能明显降低脑缺血大鼠脑神经细胞线粒体MDA含量、升高SOD活性、抑制Ca2+过多摄入。结论20(S)-人参皂苷Rg3对缺血脑神经细胞线粒体的损伤有明显的保护作用,该作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、拮抗Ca2+有关。     

钠钙交换体及其抑制剂在脑缺血中的作用

在神经细胞中,钠钙交换体对胞内钙离子的调控起着非常重要的作用。缺血／再灌注使细胞外的钙通过钠钙交换体的反向模式内流,造成内钙超载,导致脑细胞损伤。现今,选择性抑制其反向模式的苄氧基苯基衍生物得到了较多的研究,并可能成为一个新的治疗脑缺血的有潜力靶点。     

Svate-Ⅲ对原代培养的大鼠皮层神经元钙激活钾通道作用

目的 观察Svate-Ⅲ对原代培养新生SD大鼠皮层神经元上钙激活钾通道作用。方法 采用膜片钳单通道记录技术。结果 Svate-Ⅲ在胞外可使钙激活钾通道开放概率增加,开放时程延长,在一定范围内表现出浓度依赖性。结论 Svate-Ⅲ可激活钙激活钾通道,可能对神经元有直接保护作用。