辛伐他汀对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇代谢和SR-A表达的影响

目的探讨不同浓度辛伐他汀对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇代谢和SR-A表达的影响。方法以50 nmol/L佛波酯诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞,氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导巨噬细胞建立泡沫细胞模型,通过不同浓度辛伐他汀干预后,油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,高效液相色谱检测细胞内游离胆固醇和胆固醇酯含量,W estern b lot检测SR-A蛋白的表达。结果与ox-LDL组比较,辛伐他汀处理组巨噬细胞的油红O染色阳性细胞数和细胞内胆固醇酯含量均显著减少（P均〈0.01）,同时SR-A蛋白表达明显下降（P〈0.01）,呈剂量依赖性。结论辛伐他汀可抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化,可能与辛伐他汀抑制SR-A的表达,从而减弱巨噬细胞对ox-LDL的摄取有关。     

丹参多酚酸盐对单核细胞分化为泡沫细胞过程中清道夫受体A表达的干预作用

使用佛波醇酯（PMA）诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞，将其分为对照组、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）组、ox-LDL＋丹参多酚酸盐组（低、中、高浓度组），应用流式细胞仪测定巨噬细胞SR-A表达水平。结果镜下观察到单核细胞株THP-1在PMA诱导下转变为泡沫细胞；ox-LDL处理组SR-A蛋白表达水平较对照组明显增加（P〈0.01）；丹参多酚酸盐组较其他两组均明显减弱（P均〈0.01），且随浓度增加SR-A表达明显减弱（P均〈0.01）。认为ox-LDL能够明显刺激巨噬细胞表达SR-A，丹参多酚酸盐能够下调ox-LDL刺激的巨噬细胞表达SR-A，可能是其抗动脉粥样硬化斑块形成的机制之一。     

白细胞介素37对THP-1源巨噬细胞泡沫化的影响

目的:研究白细胞介素(白介素)-37对人THP-1源巨噬细胞泡沫化的影响及机制。方法:体外培养THP-1,用佛波酯(PMA)刺激24h使其分化为巨噬细胞后,进行以下处理:①用IL-37和(或)ox-LDL刺激THP-1源巨噬细胞24h;②用不同浓度的IL-37和ox-LDL同时刺激24h;③用ox-LDL刺激THP-1源巨噬细胞24h,再加IL-37干预24h,收集细胞。采用油红染色观察各组泡沫细胞所占细胞总数的比例,TC试剂盒测定细胞内TC的含量,利用RT-PCR、Western blot实验方法从mRNA水平和蛋白水平测定泡沫细胞清道夫受体CD36和SRA和ABCA-1的表达。结果:与对照组比较,IL-37能够明显减少泡沫细胞的形成,降低泡沫细胞TC的聚集[(303.10±8.90)ng/mg∶(150.40±7.36)ng/mg,P0.01],显著抑制巨噬细胞清道夫受体CD36和SRA的表达,并增强ABCA-1的表达,且作用效果与溶度呈正相关。对ox-LDL诱导的泡沫细胞,给予IL-37后仍能够显著上调ABCA1的表达,显著下调SRA、CD36的表达。结论:白细胞介素-37可抑制THP-1源巨噬细胞的泡沫化,其作用机制可能是通过IL-37抑制清道夫受体CD36和SRA、促进ABCA-1的表达实现的。     

瑞舒伐他汀对TPH-1巨噬细胞清道夫受体CD_（36）、SR-AⅠ表达的影响

目的观察瑞舒伐他汀对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的TPH-1巨噬细胞清道夫受体CD36和SR-AⅠ表达的影响。方法体外培养TPH-1巨噬细胞,分三组置6孔培养板中。对照组为正常生长的TPH-1巨噬细胞;ox-LDL组加入100 mg/L的ox-LDL培养24 h,诱导巨噬细胞泡沫化;瑞舒伐他汀组加入100 mg/L的ox-LDL培养24 h,诱导巨噬细胞泡沫化,然后加入瑞舒伐他汀10μmol/L培养2 h。检测各组细胞内清道夫受体CD36、SR-AⅠ蛋白及其mRNA。结果与对照组相比,ox-LDL组CD36、SR-AⅠ蛋白及其mRNA表达增加（P均〈0.05）;与ox-LDL组相比,瑞舒伐他汀组CD36、SR-AⅠ蛋白及mRNA表达明显降低（P均〈0.05）。结论瑞舒伐他汀可降低ox-LDL诱导的TPH-1巨噬细胞中清道夫受体CD36、SR-AⅠ的表达。     

核因子κB通过Sortilin促进荷脂THP-1巨噬细胞泡沫化

目的探究核因子κB(NF-κB)是否通过分拣蛋白Sortilin影响荷脂THP-1巨噬细胞脂质代谢和泡沫化。方法 NF-κB激活剂PMA或其特异性抑制剂PDTC孵育荷脂THP-1巨噬细胞,qRT-PCR检测Sortilin mRNA水平,Western blot检测Sortilin蛋白表达;沉默荷脂THP-1巨噬细胞Sortilin同时加入PMA孵育,胞内胆固醇流出行液体闪烁计数器检测,胞内脂质含量行高效液相色谱法检测,胞内脂滴情况用油红O染色显示。结果 PMA孵育处理荷脂THP-1巨噬细胞后Sortilin mRNA水平及蛋白表达上调,PDTC孵育处理后Sortilin mRNA水平及蛋白表达下调;PMA孵育处理荷脂THP-1巨噬细胞内脂质流出减少,脂质蓄积程度增加,泡沫细胞形成加剧,而PMA与Sortilin shRNA共处理后,其胞内脂质流出增多,胞内脂质蓄积程度减轻,泡沫细胞形成受抑。结论 NF-κB通过促进Sortilin表达,导致巨噬细胞内脂质流出受抑,胞内脂质蓄积程度加重,从而加剧泡沫细胞形成。     

荷叶生物碱对THP-1源性巨噬细胞CD36及PPARγ表达的影响

目的观察荷叶生物碱对THP-1源性巨噬细胞CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ(PPARγ)表达的影响,探讨荷叶生物碱干预CD36表达及其信号传导途径。方法 THP-1单核细胞分化为巨噬细胞后,随机分为四组:空白对照组、ox-LDL组、荷叶生物碱组、环格列酮组,油红O染色观察THP-1巨噬细胞内脂质变化,RT-PCR和Western blot检测CD36和PPARγ的mRNA和蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,经ox-LDL干预后,THP-1巨噬细胞内脂质蓄积增加,CD36和PPARγ的表达增加;与ox-LDL组比较,经荷叶生物碱干预后,THP-1巨噬细胞内脂质积蓄减少,CD36和PPARγ的表达减少;与荷叶生物碱组比较,经环格列酮干预后,THP-1巨噬细胞内脂质无明显变化,CD36和PPARγ的表达增加。结论荷叶生物碱通过下调CD36的表达抑制巨噬细胞泡沫化进展,荷叶生物碱可能是通过下调PPARγ来抑制CD36的表达。     

腹部脂肪组织分泌抵抗素样分子α促进清道夫受体表达

目的探讨腹部脂肪组织抵抗素样分子α(RELMα)mRNA及蛋白表达情况,研究其对与动脉粥样硬化密切相关的巨噬细胞清道夫受体B(CD36)及平滑肌细胞清道夫受体A(SR-A)表达的影响。方法取C57BL/6J小鼠腹部脂肪组织,体外培养巨噬细胞及平滑肌细胞,用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL,ox-LDC组)以及终浓度为3×10~(-6)mmol/L(A组)、9×10~(-6)mmol/L(B组)、2.7×10~(-5)mmol/L(C组)的RELMα刺激培养细胞,对照组加等量生理盐水刺激细胞。采用RT-PCR及免疫组织化学检测脂肪细胞内RELMα表达,采用流式细胞仪检测CD36及SR-A表达。结果小鼠腹部脂肪组织可见RELMαmRNA蛋白阳性表达。与对照组比较,ox-LDL组CD36荧光强度明显增强,SR-A表达阳性率明显升高(P<0.01);与ox-LDL组比较,A、B、C组SR-A表达阳性率明显升高(P<0.05)。结论小鼠腹部脂肪组织能分泌RELMα,其不影响巨噬细胞CD36的表达,但能促进ox-LDL诱导的平滑肌细胞SR-A表达,提示腹部脂肪组织可能通过RELMα,影响SR-A表达从而促进动脉粥样硬化进展。     

别嘌呤醇抑制巨噬细胞脂质蓄积的作用机制

目的采用氧化型低密度脂白(ox-LDL)构建小鼠巨噬细胞泡沫化模型,探讨别嘌呤醇对泡沫化进程中脂质蓄积的影响及其机制。方法体外培养小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,用ox-LDL或Dil-ox-LDL孵育细胞构建泡沫化模型。用不同浓度别嘌呤醇处理细胞,MTT法筛选出合适的实验浓度。将合适浓度的别嘌呤醇作用于细胞,在共聚焦荧光显微镜下观察Dil-ox-LDL孵育后RAW264.7细胞内脂质蓄积情况;酶学终点法定量检测细胞内总胆固醇的变化;半定量﹑荧光定量RT-PCR法和蛋白免疫印迹法分别检测细胞中LXRα和ABCA1 mRNA和蛋白的表达水平。结果与ox-LDL诱导的泡沫化模型组相比,别嘌呤醇组脂质蓄积显著下降,总胆固醇含量明显下调。别嘌呤醇在mRNA和蛋白水平上引起LXRα和ABCA1的高表达。结论别嘌呤醇具有抑制ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞泡沫化进程的作用,并通过上调LXRα-ABCA1途径来调节细胞内胆固醇的含量。     

过表达Atg5蛋白对巨噬细胞泡沫化程度的影响

目的探讨过表达Atg5蛋白对巨噬细胞泡沫化程度的影响。方法采用Atg5慢病毒和对照组病毒感染Raw264.7巨噬细胞,建立对照细胞系(对照组)和Atg5过表达细胞系(观察组)。两组细胞分别加入50 mL/L ox-LDL诱导形成泡沫化细胞。采用Western blot分析两组细胞蛋白p62、LC3、CD36和SR-A的变化;采用高效液相法检测两组细胞内胆固醇脂(CE)、游离胆固醇(FC)和总胆固醇(TC)的变化;采用免疫荧光和电子显微镜分析两组细胞内脂滴的含量;采用ELISA检测两组细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平。结果与对照组比较,观察组细胞自噬底物p62水平显著下调,LC3-II水平显著上调(P0.05)。与对照组比较,观察组巨噬细胞CE、FC和TC含量均显著下调(P0.05)。观察组细胞脂质水平和脂滴的数量较对照组明显下降(P0.05)。与对照组比较,观察组细胞炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平显著下调(P0.05)。结论自噬核心蛋白Atg5过表达可显著提高巨噬细胞自噬水平,可能通过自噬降解胞内胆固醇等脂质,预防巨噬细胞泡沫化,进而降低动脉粥样硬化的发生。     

脑肠肽Ghrelin通过生长激素促分泌素受体下调人源单核细胞株THP-1源性泡沫细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达的实验研究

目的 探讨脑肠肽Ghrelin对人源单核细胞株THP-1源性泡沫细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达的调控作用及其调控途径.方法 体外培养人源单核细胞株THP-1,由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,继而在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)存在条件下进一步转变为泡沫细胞,油红O染色法鉴定泡沫细胞形成.运用PT-PCR法和Western blot法分别检测Ghrelin干预后及拮抗生长激素促分泌素受体(GHS-R)后ACAT-1 mRNA水平与ACAT-1蛋白表达,采用酶法,通过荧光分光光度计检测细胞内胆固醇含量并计算胆固醇酯含量.结果 Ghrelin可明显减少细胞内胆固醇酯的含量,并能显著降低单核/巨噬细胞泡沫化过程中ACAT-1 mRNA水平和蛋白表达(P均<0.01).拈抗GHS-R后,Ghrelin抑制泡沫细胞形成的效应被阻断,且GHS-R特异性拮抗剂浓度越高,该阻断作用越明显.浓度为10~(-5)、5×10~(-5)、10~(-4)mol/L的GHS-R特异性拈抗剂组ACAT-1mRNA水平与蛋白表达分别为1.14±0.04、1.58±0.03、2.40±0.16和1.25±0.09、1.77±0.11、2.30±0.09,明显高于Ghrelin组0.89±0.05和0.86±0.08(P均<0.05).结论 Ghrelin可能通过ACAT-1转录翻译水平的下调抑制泡沫细胞的形成,从而延缓动脉粥样硬化的发生,且该效应通过GHS-R途径发挥作用.     

氧化低密度脂蛋白、荷叶生物碱对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的影响

目的：了解不同浓度氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）及荷叶生物碱对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1（ABCA1）表达的影响。方法：用佛波酯（PMA）诱导THP-1源性单核细胞分化为巨噬细胞：以不同浓度的ox-LDL孵育其24h;50mg/L的ox-LDL孵育使该细胞成为泡沫细胞,再以不同浓度荷叶生物碱对其进行干预24h。以PCR和蛋白质免疫印迹法（Western blot）分别检测不同浓度ox-LDL及荷叶生物碱干预下各组细胞ABCA1的表达。以油红O染色观察各组细胞。结果：镜下：ox-LDL处理组细胞内脂滴的大小与多少随着ox-LDL的浓度的增加而增加;随荷叶生物碱浓度的升高而减少。ABCA1mRNA表达量：ox-LDL各组的表达量均较空白对照组明显升高[25mg/L组：（1.4677±0.0907）,50mg/L组：（2.0510±0.1065）,100 mg/L组：（1.5356±0.0903）比0mg/L组：（1.00）,P均〈0.05],荷叶生物碱各组细胞的表达量[荷叶生物碱25mg/L：（1.0460±0.0580）,50mg/L：（0.8391±0.0661）,100mg/L：（1.1003±0.0752）]表达量均较单纯50mg/L ox-LDL干预组（0.5136±0.0632）明显升高（P均〈0.05）。ABCA1蛋白的表达与ABCA1mRNA表达水平改变相一致。结论：ox-LDL可上调PMA诱导的THP-1单核细胞源性巨噬细胞内ABCA1的表达,使其细胞内脂质蓄积。荷叶生物碱既使上述细胞内ABCA1表达上调,又使其细胞内脂质蓄积减少。     

不对称二甲基精氨酸对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响

目的 观察不对称二甲基精氨酸（ADMA）对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响.方法 THP-1单核细胞给予160nmol/L佛波酯（PMA）孵育48h,诱导分化成巨噬细胞,与80mg/L氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育24h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,用油红O染色在光镜下鉴定泡沫细胞形态及变化.再以不同浓度ADMA（1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L）作用泡沫细胞24h,以20μmol/L ADMA作用泡沫细胞不同时间（0h,6h,12h,24h,48h）,酶比色法检测泡沫细胞内胆固醇的含量.结果 ①单核细胞加人PMA诱导48h后,分化为巨噬细胞,再经ox-LDL诱导24h后转化为泡沫细胞.②与对照组相比,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L,30μmol/L的ADMA作用于,THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞24h后,细胞内胆固醇含量均明显增加（P＜0.01）,③与对照组相比,20μmol/L的ADMA作用于THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞12h,24h,48h,细胞内胆固醇含量均明显增加（P＜0.01）.结论 ①单核细胞株THP-1经PMA诱导后,可分化为巨噬细胞,再经ox-LDL诱导后,可转化为泡沫细胞.②ADMA可以增加THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇的含量.     

异鼠李素通过抑制泡沫细胞形成增加动脉粥样硬化斑块稳定性的机制研究

背景 泡沫细胞的形成是动脉粥样硬化重要的病理基础,其是由巨噬细胞吞噬大量胆固醇和三酰甘油后转化而来.因此,如何促进巨噬细胞的脂质代谢、抑制其转化为泡沫细胞是延缓动脉粥样硬化病情进展的关键.目的 分析异鼠李素通过抑制泡沫细胞形成增加动脉粥样硬化斑块稳定性的机制.方法 本实验时间为2020年8月至2021年10月.动物实验...     

单核细胞株THP-1分化为泡沫细胞过程中清道夫受体A变化及阿托伐他汀的干预作用

目的 研究单核细胞株THP-1分化为巨噬细胞、泡沫细胞过程中细胞清道夫受体A（SRA）表达、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）分泌及应用阿托伐他汀干预的情况。方法 佛波醇酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,将其分为对照组、OX-LDL组（泡沫细胞组）、OX-LDL＋阿托伐他汀组（再分为低、中、高浓度3组）。用ELISA法,测定细胞培养液中MCP-1浓度。将SRA特异性结合配体DiI-Ac-LDL与细胞孵育,应用荧光显微镜观察各组细胞SRA蛋白表达及活性情况。并将MCP-1浓度与SRA蛋白活性进行相关性分析。结果400倍光镜下观察到细胞株THP-1在佛波醇酯诱导下转变为泡沫细胞。与对照组相比,OX-LDL组MCP-1表达升高,6h后升高明显（P〈0．05）,12h达高峰（P〈0．01）,24h后逐渐下降（P〈0．01）。阿托伐他汀药物干预,呈剂量依赖性降低MCP．1水平。OX-LDL组SRA蛋白活性水平明显高于对照组（P〈0．01）。阿托伐他汀干预,呈剂量依赖性下调SRA蛋白活性水平。各组细胞12hMCP．1浓度与SRA蛋白活性水平呈明显正相关（r=0．683,P〈0．01）。结论SRA、炎症因子MCP-1在THP-1细胞分化为泡沫细胞过程中发挥重要作用,阿托伐他汀抑制MCP-1与SRA表达,可能是其抗动脉粥样硬化形成的重要机制。     

槟榔碱对泡沫细胞胆固醇流出和ABCA1表达的影响

目的 探讨槟榔碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的鼠源性巨噬细胞性泡沫细胞形成的影响及可能机制.方法 采用体外培养的鼠源性巨噬细胞株作为研究对象,加入ox-LDL (50 mg/L)诱导泡沫细胞,同时加入不同浓度的槟榔碱处理,油红0染色进行形态学观察,高效液相色谱法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)的水平,3H标记的胆固醇测定胆固醇流出率.采用实时定量PCR和蛋白印迹法分别检测细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1( ABCA1)的表达.结果 ox-LDL处理48 h后,与正常巨噬细胞相比,油红O染色阳性细胞显著增加,细胞体积明显增大,形态多呈圆形或不规则形;槟榔碱(10-6、10-5和10-4mol/L)组油红O染色阳性细胞数比泡沫细胞模型组显著减少,细胞体积明显缩小.与泡沫细胞模型组相比,槟榔碱(10-5和10-4mol/L)显著性降低细胞内TC、FC、CE水平及CE/TC,显著性增加细胞胆固醇流出率和ABCA1的表达.结论 槟榔碱抑制ox-LDL诱导的鼠源性巨噬细胞性泡沫细胞形成,上调泡沫细胞中ABCA1的表达.     

NOD1/RIP2信号通路对巨噬细胞炎性活化的作用

目的以人单核细胞株THP-1为基础,探讨NOD1/受体相互作用蛋白2(RIP2)信号通路对巨噬细胞炎性活化及表型的影响。方法用160 nmo L/L的佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞诱导分化成巨噬细胞,分别用10、25和50 mg/L浓度的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激THP-1源性巨噬细胞24 h,以空白组为对照组。应用RT-PCR法检测NOD1和RIP2的mRNA表达情况;应用Western blot法检测NOD1和RIP2的蛋白表达情况;应用ELISA法检测细胞培养液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的分泌;应用流式细胞学检测巨噬细胞表面抗原CD16、CD68表达。结果 ox-LDL能以剂量依赖的方式激活THP-1源性巨噬细胞中NOD1/RIP2信号通路,随着ox-LDL刺激浓度的增加,NOD1、RIP2的mRNA和蛋白表达水平升高(P0.05)。NOD1/RIP2信号通路激活后能使细胞培养物上清液中炎症因子MIF和MCP-1的表达增加,随着ox-LDL刺激浓度的增加,MCP-1和MIF的分泌增多(P0.05)。NOD1/RIP2信号通路激活后能改变巨噬细胞表面抗原CD16、CD68的表达,随着ox-LDL刺激浓度的变化,巨噬细胞表面抗原CD16/CD68的平均荧光强度发生变化,其中50 mg/L组能显著下调CD16/CD68的表达(P0.01)。结论巨噬细胞中NOD1/RIP2信号通路能被ox-LDL以剂量依赖的方式激活,NOD1/RIP2信号通路激活后能导致巨噬细胞的炎性活化及其表型变化,这可能是其参与动脉粥样硬化形成和发展过程的主要机制。     

CD36介导氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞泡沫化和凋亡

为探讨清道夫受体ＣＤ３６在氧化型低密度脂蛋白诱导Ｕ９３７细胞泡沫化和凋亡中的作用,用氧化型低密度脂蛋白温育Ｕ９３７细胞,观察Ｕ９３７细胞泡沫化过程中ＣＤ３６的表达时序和泡沫细胞的凋亡;用ＣＤ３６单克隆抗体阻断Ｕ９３７细胞的吞噬作用,观察Ｕ９３７细胞吞噬蓄积胆固醇和细胞凋亡的改变。细胞胆固醇以修饰的酶荧光法测定;用流式细胞术检测异硫氰酸荧光素－抗ＣＤ３６单克隆抗体特异标记的ＣＤ３６和细胞的凋亡情况;用逆转录聚合酶链反应检测ＣＤ３６ｍＲＮＡ的表达。结果发现,８０ｍｇ／Ｌ氧化型低密度脂蛋白与Ｕ９３７细胞温育２４ｈ可增加细胞内总胆固醇,４８ｈ时可形成典型的泡沫细胞;ＣＤ３６表达呈现时序性改变,６ｈ即可检出ＣＤ３６表达增高,２４ｈ达到最高值,４８ｈ表达略有降低,ＣＤ３６ｍＲＮＡ的转录与ＣＤ３６的表达一致。用２００ｍｇ／Ｌ     

血清淀粉样P物质对泡沫细胞形成的影响

目的通过观察泡沫细胞形成、脂滴形态以及脂滴表面蛋白分子表达的情况,探讨血清淀粉样P物质(SAP)对泡沫细胞发生发展的影响。方法利用THP-1细胞,通过佛波酯(PMA)处理48 h,诱导其分化成为巨噬细胞,再用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)联合脂多糖(LPS)诱导其成为泡沫细胞作为对照组,实验组在上述过程中加入不同浓度SAP(10、20 mg/L)进行干预。采用油红O染色分析SAP对泡沫细胞形成的影响,观察脂质蓄积;同时利用Bodipy493/503染色,在荧光显微镜下观察泡沫细胞内脂滴形态及数量;提取上述泡沫细胞内的脂质,通过试剂盒定量测定细胞内甘油三酯(TG)和胆固醇酯(CE)含量;利用Western blot对脂滴表面相关的蛋白进行分析,如乙酰辅酶A羧化酶(ACC1)、脂肪分化相关蛋白(ADRP)、47 k Da的尾连蛋白(TIP47)、组蛋白去甲基化酶(JMJD3)、脂肪酸合成酶(FAS)的表达水平。结果油红O染色和Bodipy493/503染色显示,实验组细胞内的脂滴大小更大、数量更多,且20 mg/L SAP干预组较10 mg/L SAP干预组趋势更明显;脂质定量检测结果显示,实验组TG、CE含量增高,20 mg/L SAP干预组较10 mg/L SAP干预组更高; Western blot结果显示,SAP能够增强ADRP、TIP47、JMJD3、FAS的表达水平,除了FAS在不同SAP浓度干预组表达水平一样外,其余均随着SAP浓度的增加表达水平也增强。结论 SAP能够促进泡沫细胞形成,增强脂质蓄积; SAP能够增强相关脂蛋白的表达水平。