两种连苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶的比较

目的：超氧化物歧化酶（SOD）的测活方法很多,目前国内多采用连苯三酚自氧化法,本方法有两种,一种是经典的Marklund连苯三酚自氧化法,简称420nm法;另一种是对420nm法作了改进的微量连苯三酚自氧化法,简称325nm法。本文就这两种方法的特点及换算关系做了比较,希望可以改变SO研制及应用中活力计算混乱的局面。方法：在严格控制实验条件一致的情况下,对2种方法对比考察,对所得数据进行线性回归统计。结果：325nm与420nm法间活力单位的比值为1／2．5,且325nm法的灵敏度高于420nm法,但重现性较差。     

氯唑沙宗残留溶剂检测方法研究

目的：建立统一的、适合于不同生产企业的氯唑沙宗残留溶剂检测方法。方法：采用两种极性的毛细管色谱柱（SPB-1和HP—FFAP）和两种温度系统，对来自于不同企业的氯唑沙宗样品进行残留溶剂筛选考查，结合生产企业工艺信息确定被测残留溶剂种类；采用聚乙二醇（Supelco—Wax）色谱柱，以N，N-二甲基甲酰胺为溶解介质、正丙醇为内标，顶空进样法检测氯唑沙宗中的甲醇、乙醇、醋酸丁酯和氯苯。结果：经筛选考查实验，供试样品中筛查出甲醇和乙醇两种残留溶剂。4种被测残留组分的线性关系良好（r=0．99995～0．99999，n=8）；3种浓度的平均加样回收率（n=13）为93．8—102．4％（RSD为0．5～2．3％）；4种残留溶剂的最低检测限为0．00015～0．00027％；本方法的日间重复性良好，三种浓度的对照品溶液3d重复进样，峰面积比值的RSD（n=9）为0．65—2．93％。结论：筛选考查实验结果为被测残留溶剂种类的确定提供了可靠的依据；所建立的残留溶剂检测方法结果准确、灵敏度高、重现性好，并适合于不同生产企业的质量控制。     

RP-HPLC测定颠茄片中3种主要成分含量

目的建立1种测定颠茄片中3种主要成分含量的方法。方法采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）、外标法定量。结果线性关系：阿托品在7．55～37．75μg／ml内良好，山莨菪碱在2．32～20．88μg／ml良好，东莨菪碱在2．5～12.5μg／ml良好。平均回收率：阿托品100．5％（n=3，RSD=1．3％），东莨菪碱99．3％（n=3，RSD=1．6％），山莨菪碱99．9％（n=3，RSD=1．4％）。3种莨菪碱在此条件下能完全分离。结论此方法准确、快速分析颠茄片中3种主要成份，灵敏度高，重现性好，药品用量少，可控制颠茄片的质量。     

HPLC法测定复方利血平片中维生素B1、B6、泛酸钙和氢氯噻嗪的含量

目的：建立复方利血平片中维生素B1、维生素B6、泛酸钙和氢氯噻嗪含量测定的HPLC法。方法：采用phenomenex的Synergi Hydro—RP色谱柱（150mm×4．6mm，4μm），以乙腈、0．02mol·L^-1磷酸氢二钾溶液和0．005mol·L^-1庚烷磺酸钠（用磷酸调节pH至3．0±0．05）为流动相，采用梯度洗脱，流速为1．0mL·min^-1，用二极管阵列检测器检测，检测波长210nm，柱温36℃。结果：维生素B1的线性范围为7．752～77．52μg mL^-1（r=0．9992），精密度RSD为0．99％（n=7），重现性RSD为1．62％（n=7），平均回收率为98．63％，RSD为1．59％（n=9）；维生素B6的线性范围为7．580～75．80μg·mL^-1（r=0．9995），精密度RSD为0．62％（n=7），重现性RSD为1．17％（n=7），平均回收率为99．17％，RSD为1．26％（n=9）；泛酸钙的线性范围为7．904—79．04μg·mL^-1（r=0．9997），精密度RSD为0．58％（n=7），重现性RSD为0．95％（n=7），平均回收率为98．37％，RSD为0．92％（n=9）；氢氯噻嗪的线性范围为25．62～256．2μg·mL^-1（r=0．9995），精密度RSD为0．19％（n=7），重现性RSD为1．36％（n=7），平均回收率为99．12％，RSD为1．06％（n=9）。结论：本方法操作简便，结果准确、可靠，可同时测定复方利血平片中维生素B1、维生素B6、泛酸钙和氢氯噻嗪的含量。     

马来酸依那普利残留溶剂检测方法研究

目的：建立统一的、适合于不同生产企业的马来酸依那普利残留溶剂检测方法。方法：采用2种极性的毛细管色谱柱（SPB-1和HP—FFAP）和2种温度系统，对来自于不同企业的马来酸依那普利样品进行残留溶剂筛选考察，结合生产企业工艺信息确定被测残留溶剂种类；采用HP—FFAP色谱柱，以N，N-二甲基乙酰胺为溶解介质，丁酮为内标，按内标法和顶空进样方式检测马来酸依那普利中的6种残留溶剂；以二甲基亚砜（DMSO）为溶解介质，按外标法和液体进样方式检测马来酸依那普利中的N，N-二甲基甲酰胺。结果：所检测的马来酸依那普利样品中未筛查出残留溶剂；6种残留组分顶空进样检测的线性关系良好（r=0．9981～0．9999，n=8），3种浓度的平均加样回收率（n=6）为92．31％-118．80％（RSD为0．13％～8．04％）；N，N-二甲基甲酰胺液体进样检测的线性关系良好（r=0．9997，n=7），3种浓度的平均加样回收率（n=6）为94．85％～95．45％（RSD为0．93％～3．75％）；7种残留溶剂的最低检测限为0．00005％-0．004％；2种方法的日间重复性均良好。顶空进样法3种浓度的对照品溶液3d重复进样，峰面积比值的RSD（n=9）为0．16％～4．4％；N，N-二甲基甲酰胺液体进样的3种浓度对照品溶液3d重复进样，峰面积的RSD（n=9）为0．59％～2．6％。结论：筛选考察实验结果为被测残留溶剂种类的确定提供了可靠的依据；所建立的残留溶剂检测方法结果准确、灵敏度高、重现性好，并适合于不同生产企业的质量控制。     

永停滴定法测定盐酸丁卡因含量

目的：建立永停滴定法测定盐酸丁卡因的含量，并与药典方法相比较。方法：永停滴定法滴定条件为以极化电压为50mv、电流计的灵敏度为10^-9A、门限制为60格，以亚硝酸钠滴定液（0．05mol·L^-1）滴定盐酸丁卡因，用永停法指示滴定终点，从而计算出盐酸丁卡因的含量；药典方法为非水滴定法。以t检验法对两种测定方法的结果进行分析。结果：永停滴定法测得的平均回收率为99．65％（RSD=0．66％，n=5），其测定结果与非水滴定法的测定结果基本一致。结论：本方法操作简便、快速、准确、重现性好，可用于盐酸丁卡因含量测定。     

津源胶囊质量标准研究

目的建立津源胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中的西洋参、黄连进行定性鉴别，用高效液相色谱（HPLC）法测定盐酸小檗碱的含量。结果定性鉴别方法重现性好、专属性强，含量测定方法的平均回收率为99．16％，RSD为1．2％（n=6）。结论该方法简便、快速、灵敏度高、重现性好，能有效控制津源胶囊的质量。     

高效液相色谱法测定四味土木香散中氧化苦参碱含量

目的建立蒙药四味土木香散中氧化苦参碱的含量测定方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法，色谱柱为氨基柱，流动相为乙腈-无水乙醇-3％磷酸（80：10：10），检测波长为220nm。结果氧化苦参碱进样量在0.198-1．98μg范围内与峰面积线性关系良好，平均加样回收率为98．81％，RSD为1、49％。结论HPLC法简便快速，重现性好，灵敏度高。     

高效液相色谱法测定复方喘咳片中氨茶碱含量

目的 用高效液相色谱法（HPLC法）测定复方喘咳片中氨茶碱的含量。方法 流动相为甲醇-水（20：80），色谱柱为C18柱，紫外检掣波长为272nm。结果 氨茶碱浓度在0．2210-5．5266μg／mL范围内与峰面积线性关系良好，平均回收率为99-98％（n=9），RSD为0．2％。结论 HPLC法灵敏度高、专属性强、重现性好，快速简便。     

高效液相色谱法测定维C银翘片中牛蒡子苷含量

目的建立维C银翘片中牛蒡子苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法，色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水（45：55），检测波长为280nm。结果牛蒡子苷进样量在1．8～14．4μg范围内与峰面积线性关系良好，r=0．9996（n=5），精密度的RSD=1．02％（n=10），平均加样回收率为99．1％，RSD=0．77％（n=5）。结论该方法准确、灵敏、重现性好，可作为维C银翘片中牛蒡子苷的定量分析方法。     

超氧化物歧化酶的两种邻苯三酚测活法比较

为使SOD 测活结果规范化.对常规的两种邻苯三酚自氧化测活方法（420nm法和325nm法）进行了比较.结果发现.325nm法（邻苯三酚终浓度0.1mmol/L）测定的SOD活力为420nm法（邻苯三酚终浓度0.2 mmol/L）的 2.6倍左右,与以往报道不符,而且在低浓度下,邻苯三酚加量的变化会明显影响活性测定结果。     

海洛因成瘾者红细胞SOD活性的研究

本文用邻苯三酚自氧化抑制法测定了44例海洛因成瘾者和20例健康人血红细胞超氧化物岐化酶(SOD)活性。发现海洛因成瘾组SOD活性明显低于正常对照组,两者有显著差异(P<0.001),并对SOD活性下降原因进行了初步探讨。     

新疆葡萄干超氧化物歧化酶的分离提纯

本文首次对新疆葡萄干中超氧化物歧化酶进行了分离提纯.酶活力测定采用微量邻苯三酚自氧化法.结果表明:100g新疆葡萄干经粗抽提,丙酮两步沉淀,Sephadex G-100柱层析,DEAE-52柱层析,得2.73mg酶蛋白,比活为408.8u/mg pro,纯化倍数为92.9,达电泳纯.     

超氧化物歧化酶活性测定的间苯三酚替代试探

本文用间苯三酚替代邻苯三酚测定超氧化物歧化酶活性得到较为满意的效果.间苯三酚自氧化的适宜浓度为5mmol/L,pH8.8,348nm处有一特定紫外吸收峰.有较好的重复性.     

The antioxidant effect of rebamipide on oxygen free radical production by H. pylori-activated human neutrophils: in comparison with N-acetylcysteine, ascorbic acid and glutathione.

Helicobacter pylori(H. pylori)-activated neutrophils produce the oxygen-derived free radicals (OFRs) which play an important role in gastric mucosal cell damage. Rebamipide (2-(4-chlorobenzoylamino)-3-[2-(1H)-quinolinon-4-yl] propionic acid) is an antiulcer compound, which protects gastric mucosa against OFR-mediated injury. In order to investigate the effects of rebamipide on OFR production and to compare the antioxidant activity of rebamipide with those of three known antioxidants, N-acetylcysteine (AC), ascorbic acid (Vit C) and glutathione (GSH), the antioxidant activities were determined by luminol-dependent chemiluminescence (ChL) assay and pyrogallol autoxidation assay. The ChL value was markedly elevated immediately after the addition of H. pylori into the medium containing neutrophils. The antioxidant activity of 1.0 mM rebamipide was greater than that of 0.1 mM rebamipide in the luminol-dependent ChL assay, while in the pyrogallol autoxidation assay, the antioxidant activity of 1.0 mM rebamipide was similar to that of 0.1 mM rebamipide. Rebamipide inhibited OFR generation in the pyrogallol autoxidation assay, with the potency being in the order of GSH > Vit C > rebamipide > AC. In the luminol-dependent ChL assay, the antioxidant activity of rebamipide was the greatest among them. These results indicate that rebamipide is a potent antioxidant and scavenges OFRs produced by H. pylori effectively in luminol-dependent ChL assays.     

石斛多糖抗氧化活性研究

目的研究石斛多糖的体内、体外抗氧化活性。方法①体外抗氧化实验：用化学反应法检测石斛多糖对邻苯三酚自氧化反应产生的超氧阴离子和Fenton反应产生的羟自由基的清除作用;②体内抗氧化实验：昆明种小鼠随机分为空白对照组、小剂量组、中剂量组和大剂量组,每组10只。研究石斛多糖对小鼠血清及肝组织中SOD、GSH-Px、MDA的影响。结果石斛多糖具有清除羟基自由基和超氧阴离子自由基的作用,可显著提高小鼠血清和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力,降低丙二醛（MDA）含量。结论石斛多糖具有明显的抗氧化活性,为进一步开发石斛药材提供依据。     

玉米功能短肽的制备及其类超氧化物歧化酶活性研究

目的制备具有类超氧化物歧化酶 (SOD)活性的玉米功能短肽 ,并与SOD进行活性比较。方法以玉米蛋白粉为原料 ,采用酶水解的方法 ,经SephadexG 2 5分离 ,以TNBS法测定各组分的平均链长 ,用邻苯三酚自氧化法测定各组分的抗氧化活性 ,同时与SOD进行活性比较。结果含有 2～ 6个氨基酸残基的玉米功能短肽 ,对邻苯三酚自氧化具有较好的抑制作用 ,玉米功能短肽 (浓度 10mg ml)的抑制率为 2 1.78%。结论玉米功能短肽具有较好的类超氧化物歧化酶活性     

Automated flow-injection spectrophotometric determination of catecholamines (epinephrine and isoproterenol) in pharmaceutical formulations based on ferrous complex formation

A novel automated flow-injection spectrophotometric method for the determination of catecholamines (epinephrine and isoproterenol) has been developed based on the formation of their coloured complexes with Fe(II) in aminoacetic-carbonate buffer pH 8.3 and measuring of the absorbance peaks at the lambda(max) of 530 nm. A fully automated FIA system controlled by home-made software (FIA-MOD) was used for optimising the chemical and manifold parameters and running of routine measurements. The calibration graph was linear in the range of 5-200 mg l(-1) for epinephrine with an RSD of 0.24% (n = 5; c = 150 mg l(-1)) and 10-300 mg(-1) for isoproterenol with an RSD of 0.13% (n = 5; c = 200 mg l(-1)). Measurement throughput was 120 h(-1) ensuring a sample throughput of 40 h(-1) analysed in triplicate. Common excipients for tablets and injections were found not interfering. The proposed method was applied for the assay of various commercial pharmaceutical formulations containing epinephrine and isoproterenol and for the content uniformity test for the isoproterenol tablets. The assay results with RSD 2-4% (n = 3) were comparable with those obtained with the official USP XXIII methods (mean difference 1.9%).     

1,6-二磷酸果糖对阿霉素导致大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的　研究 1,6 二磷酸果糖 (FDP)对阿霉素 (ADM )导致大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法　给大鼠腹腔注射ADM ( 2 5 0mg·kg-1,隔日 1次 ,共 6次 )处理大鼠 ;给ADM处理的大鼠腹腔注射不同剂量的FDP(隔日 1次 ,共 2 1次 )进行干预。分别用TBA法、硝酸还原酶法、DTNB法、邻苯三酚自氧化法测定心肌的脂质过氧化物 (LPO)含量、一氧化氮 (NO)含量、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)活性、超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ;用透射电镜技术和TUNEL法检测心肌细胞凋亡 ;用原位杂交法检测心肌的诱导型一氧化氮合酶 (iN OS)mRNA表达。结果　FDP( 3 0 0 ,60 0 ,12 0 0mg·kg-1)干预ADM处理的大鼠后 ,均可降低心肌的LPO及NO含量、减少心肌细胞的凋亡数量、降低心肌iNOSmRNA的表达水平、增加心肌的SOD及GPx活性。结论　FDP抑制ADM导致心肌细胞凋亡 ,减轻ADM对心肌的毒性损伤 ,其机制2 0 0 1 0 4 12收稿 ,2 0 0 1 0 5 30修回 广西自然科学基金 (No 982 40 0 1)和广西教育厅科学基金 (No 1999 34 9)资助1 广西肿瘤研究所生化室 ,南宁　 5 30 0 2 1作者简介 :阳冠明 ,男 ,39岁 ,医学硕士 ,副研究员 ,硕士生导师。Tel:0 771 5 35 8130 (O) ,5 35 130 5 (H) ;林善修 ,男 ,67岁 ,教授 ,博士生导师可能与其保护心肌的SOD及GPx活性、抗脂质?     

1,6-二磷酸果糖对阿霉素导致大鼠心肌酪氨酸硝基化的影响

目的　研究 1,6 二磷酸果糖 (FDP)对阿霉素 (ADM )导致大鼠心肌酪氨酸硝基化的影响。方法　给大鼠腹腔注射ADM(2 5 0mg·kg-1,隔日 1次 ,共 6次 )处理大鼠 ;给ADM处理的大鼠腹腔注射不同剂量的FDP(隔日 1次 ,共2 1次 )进行干预。分别用TBA法、硝酸还原酶法、邻苯三酚自氧化法测定心肌的脂质过氧化物 (LPO)含量、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ;分别用原位杂交法、免疫组织化学法检测心肌的诱导型一氧化氮合酶 (iN OS)mRNA表达、硝基酪氨酸 (NT) ,半定量分析心肌的iNOSmRNA表达水平、NT水平。结果　FDP(30 0 ,6 0 0 ,12 0 0mg·kg-1)干预ADM处理的大鼠后 ,均可显著降低心肌的LPO及NO含量、显著降低心肌的iNOSmRNA表达水平、显著降低心肌的NT水平、显著增加心肌的SOD活性 (P <0 0 1)。结论　FDP抑制ADM导致心肌酪氨酸硝基化而减轻ADM对心肌的毒性损伤。其机制可能与FDP抑制ADM引起心肌的iNOSmRNA表达而使心肌产生NO减少 ,以及FDP保护心肌的SOD活性而增强心肌清除超氧阴离子的能力 ,从而减少心肌生成过氧亚硝基阴离子有关