腺相关病毒载体及其介导的自杀基因疗法

自杀基因疗法是肿瘤治疗的方法之一。腺相关病毒（AAV）载体介导的自杀基因疗法尤其备受关注。通过对AAV载体的选择改建，调控外源基因的有效表达，提高基因转染的效率，充分发挥自杀基因的杀伤作用及旁观者效应来达到治疗肿瘤的目的。本文就AAV载体及其介导的自杀基因疗法方面的进展作一综述。     

腺相关病毒载体与肿瘤免疫治疗的研究进展

腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷性病毒,属细小病毒科,是基因转移最为理想的载体之一.AAV介导肿瘤相关基因感染树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),可以内源性持续表达肿瘤相关抗原,并由MHCⅠ类途径得到充分提呈、放大免疫激发CTL的能力,但不影响DC的成熟度.AAV介导抗肿瘤血管生成基因,有抑制肿瘤生长的作用,并且克服了单克隆抗体生产过程中提纯的困难;AAV介导免疫相关基因具有直接抑制肿瘤细胞增殖或免疫调节的作用;AAV介导抑癌相关基因可以诱导肿瘤细胞凋亡;AAV介导自杀基因可以抑制肿瘤的生长.     

腺病毒及腺相关病毒介导的自杀基因疗法对肿瘤的杀伤作用

用病毒治疗肿瘤是一种日益引起人们重视的肿瘤治疗手段 [1 ] 。早在 2 0世纪5 0年代 ,人们就开始利用腺病毒 (aden-ovirus,Ad)的细胞毒性进行治疗宫颈癌的试验。自杀基因疗法的原理是将“自杀”基因转移入宿主细胞的基因组中 ,这种基因编码的酶能使非活性的前药转化为细胞毒性的代谢物 ,诱导靶细胞产生“自杀”效应 ,从而达到清除肿瘤细胞的目的。Ad及 AAV介导的基因转移系统因其独特的生物学特性得到广泛的应用。1　腺病毒及腺相关病毒腺病毒基因组为线性双链 DNA ,长36 kb,10 0 m u(m apunit)。Ad基因组由非结构性早期基因 (E1 ～ E4…     

CD基因靶向治疗与放疗联合应用的研究进展

基因治疗作为治疗恶性肿瘤的1种新手段，正愈来愈受到重视和关注，肿瘤基因治疗的原理是将目的基因用基因转移技术导入靶细胞，使其表达此基因而获得特定的功能和效应．继而执行或介导对肿瘤的杀伤和抑制作用，最终达到直接或是间接杀灭肿瘤细胞的目的。自杀基因疗法：又称病毒介导的酶-药物前体疗法（virys—directed enzyme prodrug therapy，VDEPT）．     

SCF或（和）GM—CSF体内基因转染对“自杀基因”疗法抗肿瘤作用的增？…

目的 通过增强体内抗原提呈功能提高“自杀基因”疗法疗效,探讨其相关免疫学机理。方法 采用腺病毒介导的ＳＣＦ,ＧＭ－ＣＳＦ基因体内转染联合ＣＤ／５ＦＣ“自杀基因”疗法治疗小鼠的ＣＴ２６结肠腺癌,观察肿瘤的生长和荷瘤小鼠的存活期,不同方法所诱导的ＣＴＬ杀伤活性及肿瘤局部的细胞因子表达。结果 一次性低剂量腺病毒介导的ｍＧＭ－ＣＳＦ或（和）ｍＳＣＦ基因的体内转染,能增强“自杀基因”疗法的疗效,在肿瘤局部出     

腺病毒介导CD/5FC“自杀基因”疗法对人肝癌裸鼠和小鼠结肠腺癌的治疗作用研究

“自杀基因”疗法应用于肿瘤治疗时,通常是在肿瘤局部直接转染“自杀基因”,以期达到在肿瘤局部发挥抗肿瘤作用而避免全身毒性.在本实验中,我们观察了腺病毒介导的“自杀基因”疗法(CD/5FC系统)对人肝细胞癌SMMC-7721及小鼠结肠腺癌CT26的生长抑制作用,证实了腺病毒介导的CD/5FC系统在体外能杀伤人肝癌细胞SMMC-7721,并且能明显地抑制裸鼠SMMC-7721肿瘤模型的生长,对小鼠的结肠腺癌CT26也有一定的治疗作用.同时观察了以AFP启动子驱动的CD基因合并5FC的使用对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤作用,证实了以肝癌特异启动子驱动的CD基因能在高表达AFP的肝癌细胞HepG2中特异表达,合并5FC的使用能在体外特异地杀伤HepG2细胞.这一组织特异性的“自杀基因”系统能特异地抑制高水平分泌AFP的人肝细胞癌裸鼠模型7721AFP( )的生长,上述研究结果表明,腺病毒介导的CD/5FC系统是一个有效的治疗方案,组织特异性的表达调控更能体现该疗法的实用价值.     

自杀基因治疗恶性肿瘤的研究现状及展望

肿瘤的自杀基因疗法是近年来肿瘤基因治疗的研究热点,是一种具有潜在临床应用前景的新的肿瘤基因治疗策略.本文就近年来自杀基因疗法在肿瘤治疗中取得的研究进展,分别从作用机制、自杀基因系统、旁观者效应、自杀基因的转导以及联合基因治疗等几个方面进行综述.     

HSV-tk基因联合其他疗法治疗肿瘤进展

基因导向性酶前体药物疗法（gene directed enzyme prodrug therapy,GDEPT）,亦称自杀基因疗法（suicide gene therapy）,为目前肿瘤生物治疗最引人注目的研究领域,是继手术、放疗和化疗等传统疗法之后,一种具有良好应用前景的肿瘤治疗新措施。自杀基因的表达产物能将无毒性的前体药物代谢成为毒性产物,干扰核酸代谢影响肿瘤细胞DNA合成,从而导致肿瘤细胞死亡。目前研究最深入且与肿瘤治疗关系最密切的自杀基因是TK及CD基因。单纯疱疹病毒一腺苷激酶（herpeslsimples virus-thrmidine kinase,HSV-tk）／丙氧鸟苷（gancyclovir,GCV）是目前应用最多的自杀基因治疗系统。     

腺病毒介导的CD/5FC自杀基因疗法对小鼠结肠腺癌的治疗作用及相关免疫机理的研究

大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶CD可以将前体药物5FC代谢为毒性产物5FU,具有抗肿瘤作用.本课题我们观察了腺病毒介导的CD/5FC自杀基因疗法对小鼠结肠癌生长的治疗作用并探讨其作用机理.结果表明,首先,CD/5FC自杀基因疗法小鼠结肠癌CT26体内外生长均具有显著的抑制作用,4O%的荷瘤小鼠经过治疗后长期存活;其次,我们还研究了自杀基因疗法治疗肿瘤时可能涉及的免疫机理.结果发现在以CD/5FC系统治疗结肠腺癌小鼠过程中能在一定程度上诱导出机体的抗肿瘤免疫反应,包括脾脏CT6L活性的增高、肿瘤局部浸润免疫细胞表达,DEC-205、B7-2、I-A~(b,d)分子增加等.本实验结果提示虽然CD/5FC系统可以诱导机体产生一定的抗肿瘤免疫反应,但其程度不够显著.     

自杀基因对乳腺癌放疗的增敏作用

自杀基因联合放射治疗恶性肿瘤是一种非常具有潜力和临床应用价值的治疗手段,但应用自杀基因进行的大量基础研究和临床试验发现,这一疗法并不令人满意.首先,体内凡是转染自杀基因的细胞都可能被前体药物的代谢产物杀死,该治疗的特异性较差.其次,导入体内的自杀基因不能长期稳定表达,疗效难于长期维持,治疗后肿瘤仍容易复发或转移.