氧化苦参碱对淋巴细胞增殖的影响

研究了氧化苦参碱对人扁桃体淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞在不同丝裂原存在时对增殖能力的影响。结果表明：根据人扁桃体淋巴细胞对ＰＨＡ，ＳＡＣ反应能力的不同，氧化苦参碱可使低反应性的人扁桃体淋巴细胞增殖能力提高，而对高反应性的人扁桃体淋巴细胞及正常小鼠脾细胞增殖则表现为抑制作用。提示氧化苦参碱对淋巴细胞增殖的影响和细胞状态密切相关。     

氧化苦参碱对小鼠淋巴结T细胞增殖的双向作用

目的检测氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠淋巴结T细胞增殖的影响,探讨OMT对免疫系统的作用机制,为临床用OMT治疗免疫相关性疾病提供理论和实验依据.方法利用CFDA-SE染色,流式细胞术检测淋巴细胞在多克隆刺激剂Con A和OMT的共同作同下荧光强度的变化,并应用CELLQuest软件分析OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖的影响程度.结果 500、125和31μg/mLOMT对小鼠淋巴结T细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而16、8、4、2μg/mL OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖起促进作用,但其剂量依赖关系不明显.结论 CFDA-SE染色和流式细胞术是分析淋巴细胞增殖的有力工具:OMT对小鼠淋巴结T细胞的增殖呈双向作用.     

柚皮甙对刀豆蛋白A刺激的小鼠淋巴结细胞增殖和细胞周期的影响

目的研究柚皮甙(NG)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠淋巴结细胞增殖和细胞周期的影响。方法无菌分离小鼠肠系膜淋巴结细胞,以50、100和200μmol/L的柚皮甙作用于刀豆蛋白A刺激和非刺激的淋巴结细胞,运用MTT法检测淋巴结细胞的增殖率和存活率;以相同浓度的NG作用于ConA刺激的淋巴结细胞,运用流式细胞术和Western-blot分别检测淋巴结细胞的细胞周期分布和P21WAF1的表达。结果50、100和200μmol/L NG对淋巴结细胞增殖无明显作用,并无药物毒性作用,但显著抑制ConA诱导的淋巴结细胞增殖(P<0.01),抑制率分别为24.5%、49.1%和72.4%,使细胞周期停滞在G0/G1期,并诱导P21WAF1的表达,具有浓度依赖性。结论NG可能通过诱导P21WAF1表达,使淋巴结细胞的细胞周期停滞于G0/G1期,从而抑制ConA诱导的淋巴结细胞的增殖。     

川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响

川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响与剂量有关。在１００￣１０００μｇ／ｍｌ时，川芎嗪对正常小鼠和荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖反应有明显的抑制作用，在亚适浓度Ｃｏｎ Ａ（２μｇ／ｍｌ）作用下，正常小鼠和荷瘤小鼠脾淋巴细胞对川芎嗪的反应性不同，荷瘤小鼠灌川芎嗪后，其淋巴细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量明显增加，对ＰＨＡ刺激的反应性不因荷瘤而降低，提示川芎嗪具有免疫调整作用。     

BDEO对小鼠淋巴细胞增殖和活化的影响

目的 观察苄基苯基酮衍生物溴苯基二羟基苯基乙酮肟（BDEO）对体外丝裂原刀豆蛋白A （Con A）刺激的小鼠脾脏淋巴细胞以及外周血液淋巴细胞增殖和活化的影响及分子机制。 方法 Con A诱导体外淋巴细胞增殖和活化,分别用细胞计数法和MTT法检测BDEO对体外淋巴细胞的转化率和增殖的影响,ELISA法测定caspase-9活性,Western blot检测Bax、Bak、Bcl-2和Cyt C（线粒体内及胞质中）以及cleaved caspase-9和cleaved caspase-3水平;进一步在整体动物水平观察腹腔注射Con A〔15 mg/（kg·d）〕和BDEO〔3、6 mg/（kg·d）〕,小鼠脾脏细胞、外周血液淋巴细胞转化率以及腹腔巨噬细胞的吞噬率。 结果 BDEO在0.3~1 μmol/L下抑制体外淋巴细胞的增殖和转化率（P<0.05）,3~30 μmol/L时抑制作用逐步减弱。Caspase-9活性随BDEO浓度升高先升高后下降,而线粒体上的促凋亡蛋白Bax、Bak水平先上升后降低,而抑凋亡蛋白Bcl-2以及线粒体中Cyt C水平先降低后升高,胞质中的Cyt C、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3水平先升高后降低。另外腹腔注射BDEO对小鼠体内的脾脏淋巴细胞和外周血液淋巴细胞的转化率以及腹腔巨噬细胞的吞噬功能具有显著抑制作用。结论 BDEO可能主要通过线粒体内源性途径,激活caspase-3通路调节淋巴细胞的增殖和活化,较低浓度时抑制淋巴细胞的增殖和活化,高浓度下抑制作用减弱。这揭示BDEO具有免疫抑制活性。     

天灸后环磷酰胺小鼠血清对淋巴细胞增殖效应的影响

为研究天灸的免疫调查作用，采用天灸与环磷酰胺（ＣＴＸ）化疗后的小鼠血清，观察其对正常小鼠林巴细胞的增殖效应的影响，结果表明：ＣＴＸ小鼠血清对ＣｏｎＡ刺激的正常小鼠脾淋巴细胞增于效应有明显的抑制作用，不同天灸方法均可显减轻ＣＴＸ小鼠血清的这种抑制作用，但不同天灸方法之间的效应未见明显差异。     

川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响

川芎嗪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响与剂量有关。在１００～１０００μｇ／ｍｌ时，川芎嗪对正常小鼠和荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖反应有明显的抑制作用。在亚适浓度ＣＯｎＡ（２μｇ／ｍｌ）作用下，正常小鼠和荷瘤小鼠脾淋巴细胞对川芎嗪的反应性不同，荷瘤小鼠湛服川芎嗪后，其淋巴细胞￣３Ｈ－ＴｄＲ掺人量明显增加，对ＰＨＡ刺激的反应性不因荷瘤而降低，提示川芎嗪具有免疫调整作用。     

青蒿琥酯对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的探讨青蒿琥酯(Artesunate,Art)对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝法分别检测Art对正常和刀豆蛋白A诱导的小鼠脾细胞增殖的影响。结果 Art对正常增殖的淋巴细胞活性无明显影响;剂量≥12.5μg/mL时,对刀豆蛋白A诱导的淋巴细胞增殖表现出较强的抑制活性(P<0.01),且抑制作用随药物浓度的增加而提高。结论 Art具有较强的抑制淋巴细胞增殖活性。     

氧化苦参碱抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎及淋巴细胞增殖

目的 探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响.方法 建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化;利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响.结果 OMT对DNFB所致小鼠ACD呈剂量依赖性抑制作用,且与同等剂量HCT作用效果相似,但副作用明显减小;体外实验证明,在500、125和31 μg/mL组OMT对小鼠淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制.结论 OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制作用,而且抑制小鼠淋巴细胞增殖;OMT是一种免疫抑制剂.     

玉屏风散提取液对小鼠脾淋巴细胞增殖及转化的影响

目的研究玉屏风散提取液对小鼠脾淋巴细胞增殖、转化的影响。方法分别制备玉屏风散水煎液、玉屏风散蒸馏水超声提取液、玉屏风散无水乙醇超声提取液和玉屏风散乙酸乙酯超声提取液。分离健康昆明种小鼠原代脾淋巴细胞进行体外培养,培养基中分别加入不同剂量上述药液使终末浓度达到1.67 mg.mL-1、3.33 mg.mL-1、8.33 mg.mL-1、16.67 mg.mL-1(折合生药)进行细胞培养,以0 mg.mL-1组为对照组。培养72 h后加入2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(WST-8)用酶标法分别检测4种玉屏风散提取液对脾淋巴细胞增殖和刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞转化的影响。结果与对照组相比,玉屏风散(1.67 mg.mL-1、3.33 mg.mL-1、8.33 mg.mL-1、16.67 mg.mL-1)可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖和ConA诱导的脾淋巴细胞转化(P<0.01)。除1.67 mg.mL-1玉屏风散乙酸乙酯超声提取液外,其他剂量的玉屏风散超声提取液促进小鼠脾淋巴细胞增殖和ConA诱导的脾淋巴细胞转化的效果均低于同剂量组的玉屏风散水煎液(P<0.05)。结论玉屏风散可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖和ConA诱导的脾淋巴细胞转化,但玉屏风散的超声提取条件需进一步摸索。     

牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞增殖的双向调节作用

目的从牛大力(Millettia Speciosa Champ.)提取纯化多糖,流式细胞术检测多糖对刀豆蛋白A(Con A)刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响,探讨牛大力多糖对免疫系统的调节作用机制,为临床用牛大力治疗多种慢性疾病提供理论和实验依据。方法提取、纯化牛大力多糖,利用CFDA-SE染色,流式细胞术检测多糖对Con A刺激引起的小鼠T淋巴细胞增殖的影响。结果终浓度为160μg/mL、800μg/mL、4 mg/mL、20 mg/mL的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而终浓度为5、25、50、125μg/mL的多糖对小鼠T淋巴细胞增殖起促进作用,剂量依赖关系不明显。结论牛大力多糖对小鼠T淋巴细胞的增殖呈双向调节作用。     

重症肌无力病人胸腺提取液对人淋巴细胞增殖的影响

用~3H-TdR掺入法观察了不同稀释度的重症肌无力病人胸腺提取液(TEMG)对成人外周血淋巴细胞增殖的影响。结果表明:1:5稀释度的TEMG对植物血凝素(PHA)诱导的人淋巴细胞增殖与空白对照相比有明显的抑制作用(P<0.001),而对正常未经PHA诱导的淋巴细胞增殖无影响,当稀释度为1:500时,TEMG对PHA诱导的人淋巴细胞增殖有明显的促进作用(P<0.05)。提示:TEMG有人胚胸腺素类物质存在。     

CCK-8法检测疟原虫HGXPRT蛋白刺激对淋巴细胞的增殖作用

目的检测疟原虫HGXPRT蛋白刺激淋巴细胞的增殖效果. 方法以HGXPRT蛋白免疫小鼠后制备淋巴细胞,与相应刺激物共同培养后采用CCK-8法检测淋巴细胞的增殖情况. 结果不同浓度的HGXPRT对淋巴细胞的刺激效果不同,以5μg/ml时刺激增殖效果最好. 结论 HGXPRT对淋巴细胞具有增殖作用.     

K562细胞survivin基因表达对淋巴细胞增殖和功能的影响

目的探讨K562细胞中survivin基因的表达对淋巴细胞增殖和功能的影响。方法将融合重组质粒pEGFP-C1-survivin和靶向survivin基因的RNAi的重组质粒pTZU6^＋1-survivin分别转染K562细胞,得到K562/survivin^＋和K562/survivin^-2种细胞,用G418筛选K562/survivin^＋细胞,用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法及免疫细胞化学法检测K562/survivin^＋和K562/survivin^-2种细胞中survivinmRNA及蛋白水平的表达,并与K562细胞作对照。将这3种细胞与健康人外周血单个核细胞（PBMC）混合培养（MLTC）,检测混合培养体系中淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性及培养上清中IFN-γ水平。结果K562/survivin^＋组的淋巴细胞增殖指数明显低于其余两组。survivin基因的表达水平与NK细胞活性呈负相关。混合培养上清中分泌的IFN-γ,K562/survivin＋组是K562组的1/4.5,是K562/survivin^-组的1/8。结论高表达的survivin可以抑制淋巴细胞的增殖、NK细胞活性及IFN-γ的分泌。     

无抗菌活性的红霉素衍生物对体外培养T淋巴细胞增殖的影响

目的:观察无抗菌活性的红霉素衍生物对体外培养T淋巴细胞增殖的影响,探讨其抗炎活性的机制。方法:利用MTT方法比较9种红霉素衍生物对体外培养T淋巴细胞增殖影响的不同。结果:红霉素、克拉霉素、N-去甲基红霉素衍生物、9(S-)羟基红霉素和十二元环红霉素衍生物抑制T淋巴细胞增殖的活性较明显,其IC50值分别是(606.28±35.43)(、431.62±25.60)、(367.31±32.60)(、425.62±32.08)和(176.38±10.42)μmol/L,其中十二元环红霉素衍生物的IC50值明显低于红霉素和克拉霉素。结论:红霉素及其衍生物具有抑制T淋巴细胞增殖的活性,此活性可能与其抗炎活性有一定关联。     

曲古抑菌素A对小鼠混合淋巴细胞培养中淋巴细胞增殖和IL-2表达的影响

目的 研究曲古抑菌素A(TSA)对小鼠体外混合淋巴细胞培养中淋巴细胞增殖及IL-2表达的影响,探讨TSA对T细胞免疫功能的影响.方法 采用0.16、0.8、4、20、100、500 nmol/L倍比浓度TSA作用于BALB/c及C57BL小鼠混合淋巴细胞培养体系.根据不同的OD值测定12、24、48 h各浓度TSA对T淋巴细胞增殖的抑制率;相同浓度梯度TSA再作用于经丝裂霉素处理过的BALB/c淋巴细胞与C57BL淋巴细胞单向混合淋巴细胞培养体系,以环磷酰胺作对照,应用流式细胞技术观察其对IL-2表达的影响.结果 TSA可以抑制小鼠混合淋巴细胞培养中T淋巴细胞的增殖,这种抑制能力表现出明显的量效及时效依赖性;TSA也显著抑制经刺激激活的小鼠T淋巴细胞的IL-2的表达,并且随着TSA浓度的升高,IL-2表达逐步下降.但与CTX比较有显著性差异(P<0.01).结论 TSA能抑制混合淋巴细胞培养中淋巴细胞的增殖.减少激活T淋巴细胞IL-2的表达,降低T细胞的免疫活性,能够减弱对外来抗原刺激的免疫应答.     

Study on lymphocyte activation and proliferation induced by anti-CD3 McAb

Summary T cell activation and proliferation via CD₃-TCR complex were investigated by lymphocyte DNA synthesis in vitro. Several interfering factors were also discussed. The result indicated that lymphocyte activation and proliferation are calciumdependent. A rise of cytoplasmic free Ca²⁺ quickly following activation with CD₃ McAb is mainly due to intracellular mobilization of Ca²⁺, while lymphocyte proliferation needs both intracellular mobilization of Ca²⁺ as well as influx of extracellular Ca²⁺. It was confirmed that CTX sensitive G protein plays a role in regulating T cell proliferation by pretreatment with CTX suppressing lymphocyte³H-TdR incorporation obviously. PLC and PKC inhibitor neomycin and P. S. S could also decrease T cell proliferation.     

烧伤对外周血T淋巴细胞增殖和白细胞介素2产生的影响

目的　探讨烧伤患者伤后免疫功能紊乱的可能机制以及烧伤患者病情监测、免疫状况评估的观察指标。方法　检测4 0名正常志愿者和6 5例烧伤患者伤后不同时间外周血T淋巴细胞增殖反应和白细胞介素2 (IL 2 )产生能力。结果　中度以上烧伤后患者外周血T淋巴细胞增殖反应和IL 2产生能力开始下降,与对照组比较具有显著性差异(P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,且IL 2产生能力与T淋巴细胞增殖反应基本相一致。结论　T淋巴细胞增殖反应和白细胞介素 2 (IL 2 )产生能力是影响烧伤患者免疫功能的众多原因中的重要原因之一,因此通过观察烧伤患者伤后外周血T淋巴细胞增殖反应和白细胞介素2 (IL 2 )产生能力对烧伤病情的监测及免疫状况的评估有一定的临床意义。