29例免疫性血小板减少性紫癜中调节性T细胞/Th17细胞的改变

目的探讨调节性T细胞/Th17细胞在免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者中的表达及意义。方法应用流式细胞术检测29例ITP患者和28例正常人外周血中的CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞(Treg)、CD4+IL-17A+T细胞(Th17)占总CD4+T细胞的比例,并评价其与血小板计数的相关性;酶联免疫吸附(ELISA)法测定血浆中IL-10I、L-17水平;RT-PCR法检测外周血Foxp3 mRNA、RORc mRNA的表达水平。结果与正常对照组比较,ITP患者组外周血CD4+CD25+T/CD4+T细胞比例升高(P<0.05)、Treg/CD4+T细胞比例明显下降(P<0.05),Th17/CD4+T细胞比例组间比较差异无统计学意义(P>0.05),Treg/Th17细胞比值明显降低(P<0.05)。ITP患者血浆中IL-10水平明显低于正常对照组(P<0.05),而IL-17水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ITP患者组较正常对照组外周血中转录因子Foxp3 mRNA水平明显降低(P<0.05),而RORc mRNA表达则较对照组明显升高(P<0.05)。Treg/CD4+T细胞比例及Treg/Th17细胞比值在效佳组显著高于效差组(P<0.05),Th17/CD4+T细胞比例效佳组显著低于效差组(P<0.05)。治疗前血小板计数与Treg/CD4+T细胞比例、Treg/Th17细胞比值成正相关(P<0.05),而与Th17/CD4+T细胞比例则无显著相关性(P>0.05)。结论 ITP患者存在Treg/Th17细胞平衡紊乱,T细胞亚群的功能失调可能与ITP免疫发病机制有关,并与糖皮质激素治疗效果有关。     

卫氏并殖吸虫感染及IL-2对小鼠细胞免疫功能影响的观察

本文以抗小鼠L_3T_4、LyT_3单克隆抗体检测小鼠脾细胞中T_h、T_s数、~3H-TdR掺入法淋巴细胞转化试验及白细胞介素2(IL-2)活性测定的方法,对经口接种卫氏并殖吸虫囊坳小鼠及感染此虫并接受IL-2治疗的小鼠进行了细胞免疫功能的动态观察.结果显示感染小鼠脾细胞中T_h减少、T_s增多;T_h/T_s比值降低.Con-A诱导的淋巴细胞转化受抑制.IL-2诱导及活性测定中,靶细胞掺入cpm值降低.提示卫氏并殖吸虫的感染可使小鼠细胞免疫功能紊乱、降低.接受IL-2治疗组,脾T淋巴细胞转化及IL-2活性水平高于感染组,接近正常对照组;提示IL-2对增强感染卫氏并殖吸虫的小鼠细胞免疫功能有一定作用.     

男性冠心病患者血浆雌二醇和睾酮的变化及临床意义

本文就男性冠心病患者血浆雌二醇(E_2)及睾酮(T)的变化进行了观察,初步结果为冠心病组E_2明显高于正常,T与正常相比无显著差异、E_2/T比值也显著增高,AMI组T显蒋低于正常,E_2与正常组无显著差异,E_2/T比值也明显升高。本文并就此与中医肾虚的关系进行了讨论。     

胸腔积液患者T淋巴细胞亚群及T_s细胞活性的研究

用抗人T细胞单克隆抗体及Con A诱导T_s细胞法,检查了结核性胸膜炎和癌性胸膜炎患者外周血和胸水中的T细胞亚群及外周血T_s细胞活性。结果:恶性组外周血OKT_3~+、OKT_4~+、OKT_8~+细胞百分率均较对照组明显下降,T_s细胞活性明显增高;结核组仅有OKT_3~+,OKT_4~+细胞的减少,OKT_8~+细胞及T_s细胞活性无明显改变;T_4/T_8比值两组均较健康对照组明显下降。结核性胸膜炎胸水与对照组外周血,自身外周血及癌性胸水比较,OKT_3~+细胞、OKT_4~+细胞百分率明显升高;而癌性胸水中各T淋巴细胞亚群百分率较自身外周血无差异。本实验结果提示:良恶性胸腔积液患者之间存在着不同的免疫调节异常。结核性胸膜炎患者局部和外周血免疫反应存在着差异。     

急性原发免疫性血小板减少症患儿T淋巴细胞亚群NK细胞及B细胞变化的探讨

目的研究ITP儿童T淋巴细胞亚群、NK细胞及B细胞的变化及意义。方法采用流式细胞技术检测35例ITP患儿和24例正常儿童外周静脉血T淋巴细胞亚群、NK细胞和B细胞变化。结果 ITP组CD4+T淋巴细胞百分比明显低于正常对照组(P0.01),CD8+T淋巴细胞百分比较对照组明显增高(P0.05),CD4+/CD8+比值较对照组明显降低(P0.05),NK细胞和B细胞与对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论急性ITP患儿存在明显的T淋巴细胞亚群比例的异常,未发现NK细胞和B细胞的异常变化。     

急性髓系白血病患者外周血中Tfh和Tfr细胞及相关因子变化特点的初步研究

目的 探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh)和滤泡调节性T细胞(Tfr)在急性髓系白血病(AML)患者外周血中的表达及意义。方法 选取60例初诊AML患者及40例健康体检者,流式细胞仪检测Tfh和Tfr细胞比例,ELISA检测血清细胞因子白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及白介素-21(IL-21)表达水平;WB检测Tfh和Tfr细胞转录因子B细胞淋巴瘤6(BCL-6)和B淋巴细胞诱导的成熟蛋白1(Blimp-1)的表达水平;比较两组细胞比例、转录因子及相关细胞因子的表达差异;分析AML患者Tfr、Tfh/Tfr比值和细胞因子IL-10、TGF-β1水平与AML患者不良预后之间的关联。结果 与对照组相比,AML组Tfr细胞比例、血清IL-10和TGF-β1水平增高,Tfh/Tfr比值和Blimp-1水平降低(P均<0.05),而Tfh细胞比例、BCL-6和血清IL-21水平略增高,无明显统计学差异(P>0.05)。与预后中等组和预后良好组相比,预后不良组Tfr细胞比例、IL-10和TGF-β1明显增高,Tfh/Tfr比值明显降低(P均<0.05);...     

性激素水平与冠心病发病关系探讨

应用放射免疫法测定30例非心梗型冠心病(CHD)血清性激素水平,其中男性20例,女性10例(绝经期后妇女),并设对照组对比.结果显示:男性CHD组E_2即雌二醇比对照组明显升高(P<0.01),T略低无统计学意义,E_2/T比值CHD组显著高于对照组(P<0.01).女性CHD组E_2高于对照组(P<0.05)T略低,E_2/T比值比对照组升高,但无统计学意义.本文认为高雌激素血症与性激素内环境紊乱,E_2/T比值升高为CHD患者的共性,并以E_2升高为主,T降低不明显.     

T淋巴细胞亚群在小儿非恶性血液病中的分布特点

应用OKT系列单克隆抗体间接免疫荧光技术对多种小儿血液病患者的T细胞亚群进行了检测,发现再生障碍性贫血(AA)患儿总T和Ts细胞增多,Th/Ts比值降低;特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿Th增高和Ts降低同存,且以后者明显,比值Th/Ts明显增高;自身免疫性溶血性贫血(AIHI)患儿总T和Th细胞无异常,而Ts降低,Th/Ts比值也增高;缺铁性贫血(IDA)患儿T细胞亚群无异常。结果表明,除IDA外,AA,ITP和AHA均存在T细胞亚群异常,且各有特点。提示检测T细胞亚群对探讨上述疾病的发病机制等具有非常重要的价值。     

老年男性冠心病患者性激素失衡及睾酮制剂的调节作用

采用随机、交叉试验法,给62例老年男性冠心病(CHD)患者口服新一代睾酮制剂 andriol.结果表明,老年男性 CHD 患者存在血清性激素(SH)失衡,即血清睾酮(T)水平较健康组降低,雌二醇(E_2)水平及 E_2/T 比值较健康组升高(P 均<0.001);andriol 可使患者的 SH 失衡得以改善,即血清 T 水平明显上升(P<0.001),E_2水平无显著变化(P>0.05),E_2/T 比值下降(P<0.05).而对照组无此作用.服用andriol 未见明显副作用.     

女性胆结石患者垂体—性腺轴激素变化的研究

本文采用放射免疫法测定了62例女性胆囊结石和15例女性肝胆管结石患者血清 FSH、LH和血浆 E_2、P、T 的含量.并与42例正常妇女对照分析。实验结果表明育龄女性胆囊结石患者 E_2含量明显升高(P<0.01),T 含量显著减少(P<0.05),绝经后胆囊结石患者 T 含量明显减少(P<0.01),P 含量显著升高(P<0.01),育龄女性和绝经后胆囊结石患者 E_2/T 比值与对照组相比均有显著性差异(P<0.01),育龄女性肝胆管结石患者卵泡期 E_2、T 及 E_2/T 比值有显著性差异。提示女性胆结石患者存在明显的垂体一性腺轴激素合成或代谢的异常。     

Fas／FasL 在原发免疫性血小板减少症发病机制中的作用研究

目的：探讨Fas及FasL系统在成年原发免疫性血小板减少症（IT P）发病机制中的作用。方法收集成年初诊IT P患者及健康成年人外周抗凝静脉血。采用流式细胞术检测ITP患者Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas及FasL的表达率、血小板表面Fas及FasL的表达率。结果与健康对照组相比,ITP组Th、Th1、Th2、Tc、Tc1、Tc2细胞表面Fas及FasL的表达率均明显升高（P＜0．05）;同时ITP组血小板表面 Fas的表达率明显升高（P＜0．05）,而血小板表面 FasL 的表达无明显变化（P＞0．05）。结论 ITP患者T细胞亚群及血小板表面Fas及FasL表达的异常,可能与ITP发病机制密切相关。     

辅助型T细胞相关细胞因子在特发性血小板减少性紫癜模型小鼠中的变化和意义

目的探讨外周血辅助型T细胞分泌的细胞因子在特发性血小板减少性紫癜(ITP)模型小鼠的变化及意义;方法采用CBA方法分别检测14只正常小鼠,14只未治疗ITP模型小鼠及14只泼尼松治疗后ITP模型小鼠外周血血清中的IL-2、INF-γ(Th1)、IL-4、IL-10(Th2)、TGF-β1(Th3)和IL-17(Th17)细胞因子水平的变化;结果与正常组比较,模型组中的IFN-γ、IL-2(Th1)、IL-17(Th17)水平明显升高,IL-10、IL-4(Th2)、TGF-β1(Th3)水平明显降低,Th1/Th2比值增高(P均0.05),泼尼松组与正常组比较,Th1、Th2、Th17和Th3型细胞因子水平及Th1/Th2比值无明显差异(P均0.05);结论在ITP模型小鼠中存在细胞亚群平衡的偏移,表现为Th1、Th17型细胞相关细胞因子分泌亢进,Th2、Th3型细胞相关细胞因子分泌减低,提示辅助型T细胞相关细胞因子参与了ITP的发病机制。     

特发性血小板减少性紫癜患者T细胞周期和促凋亡蛋白Caspase-3表达的变化

目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血T细胞的细胞周期及其促凋亡蛋白Caspase-3的表达在发病机制中的作用。方法:用流式细胞仪检测38例ITP患者和20例正常人的T细胞的细胞周期的分布比例及30例ITP患者和20例正常人的T细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达水平。结果:ITP患者外周血S期和S+G2/M期的T淋巴细胞比例显著高于对照组(P<0.05);Go/G1的T淋巴细胞比例显著低于对照组(P<0.05);T淋巴细胞Caspase-3的表达率明显低于对照组(P<0.05)。结论:在ITP患者中存在T淋巴细胞过度增殖,细胞以S,G2期为主,同时T淋巴细胞存在凋亡减少,这可能与ITP的发病有关。     

外周血Th17/Treg及相关细胞因子表达在喘息婴幼儿发病中的作用及意义

目的:探讨外周血Th17/Treg及相关细胞因子表达在喘息婴幼儿发病中的作用及意义.方法:选取急性发作期喘息婴幼儿60例(喘息组)及下呼吸道感染但不伴喘息发作的婴幼儿50例(非喘息组),同时选取同期体检健康婴幼儿50名(对照组),并根据患儿既往喘息发作次数,将喘息组分为A1组(首次喘息组,34例)及A2组(反复喘息组,喘息发作≥2次,26例);根据有无合并哮喘高危因素分为B1组(合并高危因素组,25例)和B2组(未合并高危因素组,35例),分别采用流式细胞仪检测各组婴幼儿Th17细胞、Treg细胞在外周血中的比例,酶联免疫吸附法测定各组婴幼儿血清中的白细胞介素-17(IL-17)、IL-10的表达.结果:3组外周血单个核细胞Th17、Treg细胞百分数及Treg/Th17比较差异均有统计学意义(P<0.01);其中喘息组、非喘息组的Treg细胞及Treg/Th17百分数均显著低于对照组(P<0.01),而Th17细胞百分数显著高于对照组(P<0.01);且喘息组Treg细胞及Treg/Th17百分数显著低于非喘息组(P<0.01),Th17细胞百分数显著高于非喘息组(P<0.01).3组血清中IL-17、IL-10水平比较差异均有统计学意义(P<0.01),其中喘息组、非喘息组的IL-17显著高于对照组(P<0.01),IL-10水平显著低于对照组(P<0.01),喘息组的IL-17显著高于非喘息组(P<0.01),IL-10水平显著低于非喘息组(P<0.01).A1组外周血Th17百分数高于A2组(P<0.05),Treg细胞及Treg/Th17百分数显著低于A2组(P<0.01);A1组IL-17显著高于A2组(P<0.01),IL-10显著低于A2组(P<0.01).B1组外周血Th17百分数显著高于B2组(P<0.01),Treg细胞Treg/Th17百分数显著低于B2组(P<0.01);B1组IL-17显著高于B2组(P<0.01),IL-10显著低于B2组(P<0.01).结论:早期监测外周血Th17/Treg及相关细胞因子表达可为有支气管哮喘发展倾向的患儿提供早期诊断及早期干预的依据.     

流行性出血热患者自发性抑制性T细胞功能的动态观察

观察了20例EHF患者的自发性抑制性T细胞(ST_s)功能,发现在病之极期ST_s活性显著低于正常(-49.07％vs.22.51％,P<0.001),多尿期和恢复期逐渐回升并趋向正常。轻症组患者极期的ST_s活性较重症组下降更为明显(-85.42％vs,-12.7％,P<0.05)。初步认为T_s功能低下是EHF体液免疫亢进的基本原因。T_s功能下降,使T_h和T_c功能相对增强,有利于清除病毒,终止感染,这可能是机体的一种保护性免疫反应。本文还提出关于EHF免疫调节过程的假设。     

育龄期功能失调性子宫出血的T淋巴细胞亚群变化

为探讨功能失调性子宫出血的病理基础、内分泌改变与免疫功能变化之间的关系，用放射免疫测定了66例成人功血患者（分有排卵组30例和无排卵组36例）的血浆FSH、LH、PRL、E2、T，同时用间接免疫荧光法检测其外周血淋巴细胞的CD3、CD4、CD8、CD20。结果与正常对照组比较显示：有排卵组FSH和E2水平较低（P＜0．05），PRL水平较高（P＜0．01），CD4和CD4／CD8降低（P＜0．01），CD8升高（P＜0．01）；无排卵组LH、PRL、E2、T均较对照组高（P＜0．01），CD3、CD4、及CD4／CD8均较低，CD20则呈现升高（P＜0．05）。提示：成人功血的病理过程与免疫功能变化的关系密切。     

儿童特发性血小板减少性紫癜淋巴细胞亚群变化

目的:儿童分析特发性血小板减少性紫癜(ITP)外周血淋巴细胞亚群的变化。方法:应用流式细胞术, 分别检测85例ITP患儿(ITP组)和32名健康体检儿童(对照组)淋巴细胞亚群。结果:与对照组相比, ITP组患儿外周血CD3+和CD4+细胞数量减少, CD4+／CD8+比值下降(P<0.01);CD8+细胞与对照组差异无意义(P>0.05)。CD19+细胞较对照组明显增多, CD16+CD56+细胞较对照组减少(P<0.01)。结论:ITP患儿淋巴细胞亚群与正常儿童存在差异, 淋巴细胞亚群紊乱是儿童ITP发生的免疫机制之一。     

慢性乙肝携带者HBV DNA载量与细胞免疫功能间关系研究

目的:探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者的HBV-DNA载量与细胞免疫功能的关系。方法:选择本院诊治的HBV携带者为观察组(90例),根据荧光定量PCR法测定HBV-DNA含量分为阴性组(14例)、低拷贝组(49例)、高拷贝组(27例),同期体检合格的健康人群为对照组(90例),观察各组受试者外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分比和CD4+/CD8+值,外周血B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)、活化T细胞比例,及CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞表面的PD-1阳性率和PD-1平均荧光强度。结果:观察组患者CD3+、CD4+百分比、CD4+/CD8+值、NK细胞比例均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),CD8+百分比、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞表面的PD-1阳性率和PD-1平均荧光强度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。随着HBV-DNA病毒拷贝数的增加,CD3+、CD4+百分比、CD4+/CD8+值、NK细胞比例降低(P<0.05或P<0.01),CD8+百分比、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞表面的PD-1阳性率及PD-1平均荧光强度上升(P<0.05或P<0.01)。结论:慢性乙型肝炎病毒携带者的HBV-DNA病毒载量与外周紊乱的T淋巴细胞之间存在密切联系,临床可动态监测HBV-DNA病毒载量与T淋巴细胞的变化,以指导临床治疗。     

C57 BL/6小鼠动脉粥样硬化中CD4+ CD25+ Treg和TGF-β的表达及其意义

目的通过建立C57BL/6小鼠动脉粥样硬化模型探讨CD4+CD25+调节性T细胞( Treg)在动脉粥样硬化发病及治疗过程中的作用。方法24只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组：正常对照组、动脉粥样硬化组、阿托伐他汀组。正常对照组给予基础饲料,其余组给予高脂饲料。高脂饲养4周后,阿托伐他汀组继续高脂饲养并加用阿托伐他汀干预,3组共观察16周。苏木精染色观察血管病变情况,流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Treg的表达情况, ELISA法检测外周血TGF-β浓度。结果①动脉粥样硬化组的动脉血管的内膜显著增生,CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例显著低于正常对照组,差异有统计学意义( P<0．01)。阿托伐他汀组的动脉血管较动脉粥样硬化组病变明显减轻。阿托伐他汀组的CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例较动脉粥样硬化组有显著提升(P<0．01),与正常对照组差异无统计学意义。②动脉粥样硬化组TGF-β浓度较正常对照组明显降低( P<0．01)。阿托伐他汀组的 TGF-β的浓度显著高于动
　　脉粥样硬化组( P<0．01);较正常对照组略低,差异无统计学意义。结论 CD4+CD25+Treg及其分泌的TGF-β具有抑制动脉粥样硬化发展的作用,有望成为治疗动脉粥样硬化的新靶点。     

多种方法联合检查特发性儿童血小板减少性紫癜的临床研究

目的 研究儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)网织红细胞及淋巴细胞亚群数值变化的临床意义。 方法 2014年2月—2015年10月在徐州市儿童医院选取ITP患儿110例,根据治疗效果,将110例ITP患儿分为治愈组、有效组、无效组,同时设立对照组(25例)。应用FACS Canto II流式细胞技术仪和Sysmex-XT4000i全自动血细胞分析仪检测各组淋巴细胞亚群的表达及不同荧光强度的网织红细胞(RET)百分比的变化。 结果 ①治愈组、无效组和有效组中T淋巴细胞CD3+、辅助T淋巴细胞Th (CD3+CD4+)显著降低,抑制T淋巴细胞Ts (CD3+CD8+)及B淋巴细胞(CD3+CD19+)显著增高,患者治愈组、无效组和有效组中CD3+、Th、Ts及B淋巴细胞的表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),但各组NK细胞(CD3-CD56+/CD16+)在治疗前后无明显变化,患者组与对照组NK细胞水平的差异无统计学意义(P＞0.05);②儿童ITP患者低荧光网织红细胞比率(LFR%)明显降低,而网织红细胞百分比(RET％)、高荧光网织红细胞比率(HFR％)、中荧光网织红细胞比率(MFR％)以及未成熟网织红细胞指数(IRF%)均显著升高,与对照组检测结果比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。 结论 检测网织红细胞相关参数和T淋巴细胞亚群水平对儿童ITP疾病的诊断及预后判断均具有重要临床价值。