造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病中监测BCR/ABL融合基因的应用

目的　研究应用筑巢式逆转录多聚合酶链反应法 (nested RT PCR)监测bcr/abl融合基因mRNA在异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病 (CML)效果监测方面的价值。方法　应用RT PCR方法定期检测异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病患者前后bcr/abl融合基因表达情况。结果　异基因造血干细胞移植治疗组完全血液学缓解率为 10 0 % ,分子生物学缓解率分别为87.5 %。结论　bcr/abl融合基因监测可以作为CML评价疗效的指标 ,适用于微小残留病变的监测。     

Ph染色体与bcr/abl融合基因的检测在CML中的临床意义

目的：观察Ph染色体、bcr/apl融合基因与慢性粒细胞白血病（CML）诊断、疗效、预后的关系。方法：用姬姆萨G带显带法和反转录筑巢式聚合酶链反应（RT－nest-PCR)对41例初、复治CML患者的骨髓标本进行了分析。将Ph染色体及bcr/abl融合基因 阳性的慢性期患者随机分成二组,分别以干扰素－α（IFN－α）、羟基脲（HU）及乌苯美司（Bestatin、BS）、HU治疗,6月后复查核型及bcr/abl融合基因。结果：41例病例中36例Ph染色体及bcr/abl融合基因均为阳性,Ph^-、bcr/abl^ 5例,其中b3a2转录本29例,b2a2转录本12例;在可评价的20例病例中,两个治疗组各10例,IFN－α治疗组全部达CHR,2例获得部分细胞遗传学反应（PGR）,5例获微小细胞遗传学反应（MiGR);3例无细胞遗传学反应;BS治疗组全部达CHR,6例达MiGR;全部病例均未获分子生物学反应;二组治疗均使CML获Ph染色体量的下降（P＜0．01）,二组病例下降程度无差异（P＞0．05）。结论：Ph染色体及bcr/abl融合基因均为CML重要的诊断指标,二者相结合意义更大;Ph染色体的量及其变化可判断疗效及预后;干扰素及乌苯美司治疗组均取得较好疗效,均能使患者获细胞遗传学反应,其细胞遗传学疗效无明显差别。     

异基因造血干细胞移植在急变期慢性粒细胞白血病治疗中的应用

 目前,急变期慢性粒细胞白血病的治疗仍然是一个较大的挑战,酪氨酸激酶抑制剂虽有一定的疗效,却并不持久,异基因造血干细胞移植是唯一可以根治该病并使患者长期生存的治疗方式。文章将对急变期慢性粒细胞白血病异基因造血干细胞移植前的治疗、预处理方案、供者、造血干细胞来源的选择、移植后微小残留病的监测、移植后复发的预防进行介绍。     

造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病中监测BCR／ABL融合基因的应用

目的 研究应用筑巢式逆转录多聚合酶链反应法(nested．RT-PCR)监测bcr／abl融合基因mRNA在异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病(CML)效果监测方面的价值。方法 应用RT-PCR方法定期检测异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病患者前后bcr／abl融合基因表达情况。结果 异基因造血干细胞移植治疗组完全血液学缓解率为100％，分子生物学缓解率分别为87．5％。结论 bcr／abl融合基因监测可以作为CML评价疗效的指标，适用于微小残留病变的监测。     

双色双融合荧光原位杂交检测bcr/abl融合基因的临床意义

目的 检测bcr/abl融合基因在慢性粒细胞白血病（CML）,急性淋巴细胞白血病（ALL）和真性红细胞增多症（PV）中的表达,以了解其临床意义。方法 采用双标记双融合bcr/abl探针进行荧光原位杂交（D-FISH）。检测了7例患者骨髓中期和（或）间期细胞。结果 38例CML患者中bcl/abl阳性为34例,占89.5%,其中1例患者发病时,细胞遗传学显示典型的t(9;22),应用干扰素治疗38个月后,bcr/abl基因转为阴性;1例异基因外周血造血干细胞移植术后60d的患者,细胞形态学及细胞遗传学均显示完全缓解,但FISH检测仍有3.0%的细胞为bcr/abl基因因阳性,24例ALL患者中,6例bcr/abl阳性,占25.0%,2例PV患者bcr/abl阴性,3例CML待排的患者bcr/abl均阴性,其中1例确诊为原发性血小板增多症;1例进一步检测ETO/AML1基因后诊断为M2a;1例仍未能明显诊断,3例bcr/abl阴性的CML中,难治性白血病2例;6例bcr/abl阳性的ALL中,难治性白血病5例,结论 用双色双融合bcr/abl探针进行FISH杂交,可准确地检测出bcr/abl融合基因,是临床诊断,判定预后及微小残留病的有效监测指标。     

STR-PCR结合RT-PCR检测慢性粒细胞白血病造血干细胞移植后复发时嵌合体和融合基因

 目的　探讨利用短串联重复序列聚合酶链反应（STR-PCR）结合反转录聚合酶链反应（RT-PCR）定量和定性检测异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后患者嵌合体和融合基因的表达,分析其植入和微小残留病变情况,评价其对复发的预测价值。方法　嵌合体供体细胞嵌合率采用STR-PCR结合毛细管电泳进行定量检测,对融合基因转录本bcr-abl mRNA采用RT-PCR方法检测。结果　5例患者在移植后+28天均为100 %供者型嵌合,融合基因bcr-abl mRNA均为阴性。但在以后的随访过程中发现5例患者在不同时间出现不稳定混合嵌合（MC）状态[供体细胞嵌合（DC）率为0～80.4 %],融合基因bcr-abl mRNA阳性。其中1例复发后一直处于MC,最后死亡。另外4例在临床干预治疗后又转变为完全嵌合（CC）,目前处于分子生物学缓解状态。上述5例复发患者均在出现临床症状前发生DC下降;融合基因表达阳性。结论　STR-PCR在敏感范围内,其结果与RT-PCR的结果符合率高,两种技术结合对检测allo-HSCT后供体是否植入、疾病复发以及移植物抗宿主病（GVHD）均有预警作用,对实施临床干预治疗有重要指导价值,可检出allo-HSCT后发生分子生物学或细胞遗传学复发的高危患者。     

PCR方法检测慢性粒细胞白血病 bcr/abl mRNA

应用筑巢式递转录／聚合酶链反应方法对３２例慢性粒细胞白血病患者的ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ进行检测，发现３１例有融合ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ表达。其中１９例表达为ｂ３ａ２型，９例表达为ｂ２ａ２型，３例同时表达为ｂ３ａ２、ｂ２ａ２型。慢性粒细胞白血病临床分期与ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ表达类型有关，加速期和急变期，同时表达两种类型居多，即易发生选择性拼接，该法灵敏度高达１０－６水平。     

异基因造血干细胞移植在慢性粒细胞白血病治疗中仍有一定地位

慢性粒细胞白血病（CML）是成年人常见的白血病,我国CML的年发病率稍低于西方国家。对CML的治疗而言,酪氨酸激酶抑制剂（TKI）——伊马替尼（imatinib mesylate,IM）的问世是继白消安（myleran,busulfan）、     

染色体核型分析在异基因造血干细胞移植中的应用

目的：研究常规细胞遗传学在白血病造血干细胞移植方面的价值。方法：应用常规细胞遗传学方法定期检测白血病患者异基因造血干细胞移植前后常染色体、性染色体情况。结果：4例移植成功患者其中异性别3例性染色体表现为供者性染色体,原有异常消失;术后复发患者原有异常重现。结论：染色体可以作为异基因造血干细胞移植成功与否的标志和评价疗效的指标。     

多源耐药基因表达水平的检测在儿童白血病中的临床意义

应用逆转录ＰＣＲ结合同位素定量分析，对３２例儿童白血病患者的多源耐药基因表达水平进行了研究。结果显示，初发病人的表达均较低，复发病人表达较高，缓解期病人表达程度介于两者之间，为探讨多源耐药基因表达水平与临床化疗之间的相关性及逆转克服多源耐药性药物的应用，提供了一定的理论依据。     

干扰素联合反义寡核苷酸体外净化慢粒白血病骨髓

目的 :探讨干扰素 α2 a、bcr/ abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法 :采用体外克隆形成培养技术 ,分别用于干扰素 α2 a、bcr/ abl反义寡核苷酸不同的组合方案 ,进行体外净化 5例慢性粒细胞白血病 (CML )骨髓。结果 :联用 IFN-α2 a(1× 10 6U / L )、bcr/ abl AS- ODN(4 0 mg/ L )方案 ,对白血病细胞克隆形成单位 (L - CFU )抑制作用有显著差异 (P<0 .0 1) ,而相同条件下 ,GM- CFU及 L - CFU的集落存活率分别为 30 .0 6 %和 8.9% (P<0 .0 1)。结论 :联用 IFN -α2 a(1× 10 6U / L )、bcr/ abl AS- ODN(4 0 mg/ L )方案 ,选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好 ,可用于临床净化 CML骨髓     

急性髓系白血病的bcl-2基因表达及其临床意义

目的：探讨bcl—2基因在急性髓系白血病(AML)中的表达与预后的关系。方法：应用链亲和素-胶体金原位杂交(ISH—SAG)法检测57例AML患者单个核细胞的bcl—2基因表达水平。结果：57例AML患者不同程度表达bcl—2基因，范围从0—98％，其中初治组的阳性率为46．2％(24／52)，缓解组的阳性率为40．7％(11／27)，难治复发组的阳性率为100％(15／15)；难治复发组与初治组及缓解组之间差异均具有显著性(P＜0．01)，AML各亚型之间表达无显著性差异(P＞0．05)；疗效分析发现bcl-2基因表达与临床缓解密切相关，阴性组缓解率(76．2％)显著高于阳性组(42．1％)(P＜0．05)。结论：bcl—2基因过度表达对AML的预后有重要关系，可作为判断预后和合理制定治疗方案的重要依据。     

bcr3／abl2反义寡核苷酸诱导慢性髓细胞白血病凋亡作用的研究

目的 探讨癌基因bcr_3/abl_2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASO)对慢性髓细胞白血病(CML)的作用及其作用机理.方法 通过形态学观察、流式细胞仪(FCM)检测和片断DNA含量测定等技术研究ASO对15例初发CML的作用.结果 bcr_3/abl_2 ASO(ASO-ba)可诱导CML细胞凋亡.结论 ASO技术可为CML治疗提供一项新手段.     

RT－PCR检测MDR1基因在白血病患者中的表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ方法建立了定量检测ＭＤＲ１表达水平的方法，并对１６５例２０５份血液及骨髓细胞标本进行了检测，结果表明了ＲＴ－ＰＣＲ方法是一项敏感、特异及适于临床应用的检测手段     

外周血双色荧光原位杂交方法监测慢性粒细胞性白血病患者干扰素治疗前后bcr／abl融合基因的变化

目的：研究外周血双色荧光原住杂交(D-FISH)在慢性粒细胞性白血病(CML)患者干扰素治疗效果监测方面的应用价值。方法：用D-FISH方法对18例CML患者干扰素治疗前后的外周血36份样本进行bcr／abl融合基因检测，并且与骨髓D-FISH方法检测的结果进行比较。结果：治疗后外周血间期核细胞中bcr／abl融合基因的检出率较治疗前有所下降，并且外周血中的检出率比同一患者骨髓中的检出率要低。结论：D-FISH方法可以简便、灵敏、可靠地对CML患者干扰素治疗前后的外周血进行疗效监测，使得从取材上更加方便。