人食管鳞癌细胞及癌旁细胞流式细胞光度术分析

本研究应用流式细胞光度对１４例人食管鳞癌手术切除标本的癌、癌旁组织和正常食管上皮细胞进行细胞动力学和细胞ＤＮＡ含量分析，结果表明：处于Ｓ期癌细胞的数量明显高于癌旁细胞和正常食管上皮细胞；癌细胞ＤＩ值明显高于癌旁细胞。因此，应用流式细胞光度术作癌和癌六细胞核的ＤＮＡ分析，对于食管鳞癌的临床诊断有一定的帮助。     

食管鳞癌患者外周血及癌组织中浸润性NK细胞表面受体的表达

目的 分析食管鳞癌患者外周血及组织中NK细胞的比例及其表面受体的表达。方法 流式细胞仪检测食管鳞癌患者外周血及组织中NK细胞的比例及其表面受体的表达。结果 食管鳞癌组织中NK细胞比例明显高于癌旁5 cm以远的非肿瘤正常组织。CD16在食管鳞癌患者外周血中的表达与健康者外周血并无明显差异，但在鳞癌组织中的表达则明显低于正常组织；癌组织中NKp30、NKG2D的表达均明显低于正常组织；NKp44的表达明显高于正常组织。在同一患者体内，与外周血相比，癌组织中的CD16、NKp30、NKG2D的表达更低；而NKp44、NKG2A的表达更高。外周血与癌组织中浸润的NK细胞数量与肿瘤进展呈负相关。结论 食管鳞癌组织中NK细胞表面受体表达失衡可介导食管鳞癌细胞发生免疫逃逸。     

大肠癌旁粘膜上皮核DNA分析

 采用显微分光光度计对20例大肠癌及癌旁粘膜上皮细胞核DNA含量测定，结果表明，正常大肠粘膜和静止小淋巴细胞为近2C，癌细胞核DNA含量明显高于正常和癌旁粘膜；癌旁粘膜上皮细胞核DNA明显增高，与正常粘膜相此较，2C细胞较少，4C和超过4C细胞增多，说明癌旁粘膜上皮细胞代谢旺盛，增殖活跃，提示可能是一种癌前状态。     

脾酪氨酸激酶与食管鳞状细胞癌的关系

目的：探讨脾酪氨酸激酶（spleen tyrosine kinase,Syk）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测30例食管鳞癌组织、27例食管鳞癌癌旁组织及30例相对正常食管黏膜组织中Syk mRNA的表达;应用免疫组化技术检测39例食管鳞癌组织、27例食管鳞癌癌旁组织及38例相对正常食管黏膜组织中Syk蛋白的表达并分析其与临床病理学指标间的关系。结果：食管鳞癌组织中Syk mRNA表达高于癌旁组织和正常食管黏膜组织,但差异无统计学意义（P〉0.05）。Syk蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率（34/39,87.2%）明显高于食管鳞癌癌旁组织（18/27,66.7%）和正常食管黏膜组织（26/38,68.4%）（P〈0.05）。Syk蛋白表达与食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤大小、临床分期均无明显相关关系（P均〉0.05）。结论：Syk mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中表达增高,但Syk蛋白表达与临床病理学指标无相关关系。     

长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其对食管鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌患者临床病理参数之间的关系,分析HAGLROS对食管鳞癌细胞增殖及转移的影响.方法 运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HAGLROS在42对食管鳞癌组织与癌旁食管正常组织及食管上皮细胞Het1A及食管鳞癌细胞EC109和KYSE30...     

直肠癌远端切除2cm是安全的吗？：（41例直肠癌流式细胞DNA分析…

用流式细胞技术分别对４１例直肠癌新鲜标本的癌灶，癌远端移行区及近切缘正常组织细胞动力学研究。结果：癌灶ＳＰＦ和ＰＩ极显著高于癌远端２ｃｍ移行区及近切端正常组织；。癌远端２ｃｍＳＰＦ显著高于近切端组织，说明癌旁２ｃｍ组织的ＤＮＡ合成期细胞已呈增殖活跃状态，尽管普通光镜下此区尚无癌细胞。     

RNA干扰PLCE1基因表达对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响

目的：通过siRNA干扰PLCE1基因表达,检测PLCE1对食管鳞癌细胞增殖周期和凋亡的影响,以探讨PLCE1的致癌机制。方法：采用免疫组织化学方法检测食管鳞癌组织和癌旁正常组织中PLCE1蛋白的表达水平;PLCE1特异性siRNA转染食管鳞癌细胞,荧光显微镜观察转染效率;半定量RT-PCR法检测转染后PLCE1沉默效果;流式细胞术检测干扰后细胞周期变化及凋亡情况。结果：PLCE1在食管鳞癌组织的表达高于正常组织（P=0.000）;siRNA转染后PLCE1表达明显减少（P=0.000）;与对照组相比,PLCE1干扰后可致G0/G1期细胞阻滞（P=0.001）,细胞凋亡增多（P=0.000）。结论：PLCE1在食管鳞癌组织中有较高表达;沉默PLCE1后可抑制癌细胞的增殖,促进其凋亡。     

AEG -1和 PI3K 在食管鳞癌组织中的表达及与临床病理学特征和预后的关系

目的：观察 AEG -1和 PI3K 在食管鳞癌组织及癌旁组织中的表达差异，了解其与食管鳞癌患者临床病理学特征及相互之间的关系。方法：免疫组化法检测80例食管鳞癌患者手术标本和62例癌旁食管组织中 AEG -1和 PI3K 的表达，分析其与临床病理学特征及生存率的关系。结果：AEG -1和 PI3K 在食管鳞癌组织中的表达显著高于癌旁食管组织；与癌组织浸润深度、TNM 分期、患者的预后有显著相关性。结论：AEG -1可能是食管鳞癌的癌基因之一，有可能是通过活化食管鳞癌组织中的 PI3K/ Akt 通路从而增强癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力。     

敲降Ras相关结合蛋白23表达对食管鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移的影响及机制

目的探讨Ras相关结合蛋白23(RAB23)在食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)细胞侵袭和迁移中的作用和机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测16例配对食管鳞癌及癌旁正常组织中RAB23 mRNA的表达。比较基因表达综合(GEO)数据库的GSE20347数据集中食管鳞癌和配对癌旁正常组织RAB23 mRNA的表达水平。免疫组织化学检测106例配对食管鳞癌和癌旁正常组织、33例淋巴结阳性与10例淋巴结阴性患者原发灶与淋巴结组织中RAB23蛋白含量。在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中瞬时敲降RAB23表达(转染si-RAB23-1和si-RAB23-9)或者稳定敲降RAB23表达(转染sh-RAB23), 采用Western blot法验证RAB23敲降效率, 采用细胞计数试剂盒8法和裸鼠皮下成瘤实验检测食管鳞癌细胞的增殖能力, 采用Transwell实验和裸鼠尾静脉-肺转移实验检测食管鳞癌细胞的侵袭和迁移能力, 采用细胞黏附实验检测食管鳞癌细胞的黏附能力, 采用转录组测序技术分析RAB23敲降后对细胞转录谱的影响, 并通过Western blot检测验证相关信号通路。结果 16...     

食管鳞癌DNA含量与预后关系

探讨食管癌ＤＮＡ含量与临床特点及预后之间关系。方法应用流式细胞分析术和图像细胞分析术对４１例食管鳞癌石蜡标本进行ＤＮＡ含量测定,回顾性分析其预后指标。     

肝癌旁组织的流式细胞DNA含量分析

本文用流式细胞术对４１例原发性肝癌患者癌灶和癌旁２、４、６、１０ｃｍ肝组织的１０８个样品进行了ＤＮＡ含量及其分布测定。结果表明，肝癌癌灶的ＦＣＭ阳性检出率为７５．６％，癌旁组织为５８．２％。癌旁不同距离的肝组织ＦＣＭ阳性率之间无明显统计学差异。在ＦＣＭ阳性检例中，异倍体肿瘤细胞向周围组织侵袭能力最强，近二倍体肿瘤细胞最弱，其余类型介于二者之间。癌灶细胞ＤＮＡ指数大部分集中在３～４倍体附近，癌旁组织则集中在二倍体附近。癌旁各点的ＤＮＡ指数和高二倍体细胞百分率均与离癌灶的距离呈明显的负相关（ｒ分别为０．８１和０．９２）。     

胃癌患者血清以及癌组织中LDH的表达及其与患者预后的相关性

目的 探讨乳酸脱氢酶(LDH)在胃癌患者血清、癌组织中的表达以及与患者预后的相关性.方法 选取80例术中经病理确诊为胃癌的患者作为本次研究的对象,另选取同期进行体检的健康人80例作为对照组.采用全自动生化分析仪检测2组对象血清中LDH水平.术中取胃癌组织、癌旁正常组织及癌旁淋巴结组织,采用免疫组织化学法对3处组织中的LDH表达情况进行分析.采用Spearman秩相关分析LDH在胃癌患者血清及癌组织中的表达情况及其与临床病理特征及预后的相关性.结果 胃癌患者、正常人血清中LDH水平分别为(349.41±97.23)IU/ml、(185.40±52.24) IU/ml,胃癌患者血清中LDH含量明显多于对照组正常人(P ＜0.05).胃癌组织中LDH含量最高,明显高于癌旁正常组织、癌旁淋巴组织中LDH的含量.Spearman秩相关分析显示,胃癌患者血清中LDH含量与淋巴结转移、TNM分期、侵袭情况、分化程度等因素相关(P＜0.05),癌组织中LDH阳性表达与年龄、淋巴结转移、侵袭情况、分化程度等密切相关(P＜0.05).结论 LDH在胃癌患者血清及癌组织中的表达显著高于正常人及癌旁正常组织,且血清LDH及癌组织中LDH的表达均与淋巴结转移、侵袭情况、分化程度等因素密切相关,可作为评估胃癌患者预后的辅助指标.     

长链非编码RNA ZNF667-AS1在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其DNA甲基化状态的研究

 目的 检测长链非编码RNA ZNF667-AS1在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）中的表达及甲基化状态。方法 应用qPCR和MSP法检测DNA甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC处理前后食管癌细胞系（Kyse170、Eca109、TE1和TE13）、ESCC及相应癌旁正常组织中ZNF667-AS1基因的表达,及其CpG岛三个区域的甲基化状态。结果 在5-Aza-dC处理后的四株细胞系中,ZNF667-AS1基因的表达均增高,且其CpG岛三个区域甲基化程度均降低。ZNF667-AS1基因在ESCC组织中的表达显著低于相应癌旁正常组织,且该基因CpG岛远端启动子区及第一外显子区甲基化率在ESCC与相应癌旁正常组织中的差异均具有统计学意义（均P<0.05）。ESCC组织中CpG岛近端启动子区甲基化率显著高于相应癌旁正常组织,并与组织分化程度、TNM分期密切相关,ZNF667-AS1基因CpG岛近端启动子区发生甲基化的ESCC组织中,低表达例数高于高表达例数,差异具有统计学意义。结论 ZNF667-AS1基因在食管癌细胞系和ESCC组织中的低表达与ESCC的发生发展密切相关,且其近端启动子区的高甲基化状态可能是导 致其表达沉默的机制之一。     

Epidermal Growth Factor Receptors in Cancer Tissues of Esophagus, Lung, Pancreas, Colorectum, Breast and Stomach

The levels of epidermal growth factor (EGF) receptors were investigated in surgically resected tumors of various origins including esophagus (n = 33), lung (n = 14), pancreas (n = 9), colorectum (n = 10), breast (n = 23) and stomach (n = 8). The ¹²⁵I-EGF binding capacities of squamous cell carcinomas of esophagus and lung were exceptionally higher than those of the other cancer tissues. Immunohistochemical staining with an anti-EGF receptor monoclonal antibody detected EGF receptors in the basal cells and parabasal cells of normal esophageal epithelium and in all the cancer cells of squamous cell carcinoma tissues of esophagus and lung. DNA replicating cells were examined by the bromodeoxyuridine staining method and it was found that the basal cells and parabasal cells of normal epithelium and peripheral cells of cancer pearls are proliferating. Contrary to this, a tumor antigen TA-4, known as a specific marker for squamous carcinoma, was detected in the differentiated cancer cells and in middle-layer squamous cells. These results strongly suggest that the increase in EGF receptor levels may be associated with the development of human squamous cell cancers of esophagus and lung. Thus, measurement of EGF receptor expression in tumor tissues has diagnostic value and should prove useful for the development of new therapies.     

胃癌、食管癌患者血浆及粘膜组织中ET-1浓度的测定

 目的　探讨内皮素在上消化道肿瘤中的作用。方法　本文测定了19例胃癌及10例食管癌患者血浆及组织内ET-1的浓度。结果　胃癌及食管癌组织中ET-1的含量显著增高(57.41±29.94)。与对照组(8.57±3.32)比较P<0.01。血浆ET-1的浓度亦增高，分别为27.01±5.95及27.45±6.24，与对照组比较P<0.01。但各细胞学类型之间血浆ET-1的含量无差异。结论　ET-1可能参与了肿瘤的发生及发展，这为进一步研究内皮素对消化道肿瘤的作用提供了一线索。     

大肠癌中心灶、癌旁和淋巴结转移灶细胞DNA倍体的流式细胞计量术分析

用流式细胞仪对５１例大肠癌患者的癌中心灶、癌旁组织和淋巴结转移灶２６３份样品细胞进行ＤＮＡ含量测定。结果表明，各组均出现了ＤＮＡ异倍体病例，癌中心灶、癌旁组织和淋巴结检出率分别为７２．６％、２５．２％和２２．２％。在１４例二倍体肿瘤中有５例癌旁组织中出现了异倍体细胞。淋巴结转移灶ＤＩ值与癌中心灶有良好的一致性，而癌旁组织与癌中心灶的一致性较差。在癌中心灶不同倍体类型中，异倍体肿瘤的浸润及转移能力明显高于其它倍体肿瘤。     

Alpha B-crystallin基因在结肠癌组织中的表达及其意义

 目的 探讨alpha B-crystallin 基因在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理的相关性。 方法 采用RT-PCR方法检测64例结肠癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin 基因的表达,计算其阳性率;并用Western blot方法检测结肠癌组织及其癌旁正常组织中alpha B-crystallin蛋白的表达变化。 结果 alpha B-crystallin mRNA在结肠癌组织中表达的阳性率明显高于癌旁正常组织(P<0.01),在发生浆膜外转移者的表达阳性率明显高于浆膜内者(P<0.05),在较大肿瘤者中的表达阳性率明显高于较小肿瘤者,在有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度无关(P>0.05)。alpha B-crystallin蛋白在结肠癌组织中表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01)。 结论 alpha B-crystallin基因的高表达可能与结肠癌的发生及侵袭转移有关。     

人乳头状瘤病毒18型DNA在乳腺癌组织中的表达

目的：探讨人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１８型感染与人乳腺癌病因学之间的关系。方法：采用生物素标记的分子原位杂效技术检测柳州地区女性乳腺癌、导管内乳头状瘤和正常乳腺组织中ＨＰＶ １８ ＤＮＡ。结果：乳腺癌、导管内乳头状瘤和正常乳腺组织中ＨＰＶ １８ ＤＮＡ的阳性率分别为４８．０％、３０．０％和１６．７％。多种组织学类型的乳腺癌组织中有ＨＰＶ １８ ＤＮＡ的存在且以整合型感染为主。癌组中淋巴结转移组ＨＰＶ     

EGFR对胃癌细胞SGC7901化疗敏感性及细胞中STAT3磷酸化水平的影响

目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)对胃癌细胞SGC7901化疗敏感性及细胞中信号转导和转录因子3(STAT3)磷酸化水平的影响.方法:收集胃癌组织及对应的癌旁组织,体外培养胃癌细胞MKM28、SGC7901、BGC823和胃黏膜上皮细胞GES-1,Western blot检测胃癌组织、癌旁组织及胃癌细胞MKM28、SGC7901、BGC823和胃黏膜上皮细胞GES-1中EGFR的表达水平.细胞转染小干扰RNA对照序列(siRNA control组)和EGFR小干扰RNA(EGFR siRNA组),同时设置对照组(只加入转染试剂)、化疗组(细胞培养液中加入8 μmol/L 5-氟尿嘧啶)、联合组(转染EGFR siRNA后的细胞,细胞培养液中加入8 μmol/L 5-氟尿嘧啶),培养48 h后,Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、信号转导和转录因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、EGFR表达水平,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果:EGFR在胃癌组织中表达水平明显高于癌旁组织,在胃癌细胞中的表达水平明显高于胃黏膜上皮细胞.EGFR siRNA组细胞中EGFR水平明显降低.EGFR siRNA组、化疗组、联合组细胞存活率及p-STAT3表达水平明显低于对照组,而凋亡率及细胞中Cleaved Caspase-3水平明显高于对照组。联合组细胞存活率及p-STAT3表达水平明显低于化疗组,而凋亡率及细胞中Cleaved Caspase-3水平明显高于化疗组。结论:EGFR在胃癌中过表达.抑制EGFR表达后,胃癌细胞增殖受到抑制,凋亡增多,化疗敏感性增加,作用机制可能与STAT3磷酸化水平有关.