胃癌组织中基质分解素-1基因表达的研究

目的 了解基质分解素-1(MMP_3)基因在胃癌组织的表达水平。方法 43例胃癌患者胃镜下取癌组织及正常胃粘膜,提取组织总RNA,用逆转录共扩增定量PCR方法测定MMP_3基因表达水平。结果 胃癌组织MMP_3,基因表达水平(2.02±0.34)明显高于正常胃粘膜组织(0.63±0.10,P<0.01),局部淋巴结受累者MMP_3基因表达水平(2.46±0.39)明显高于局部淋巴结未受累者(1.60±0.30,P<0.01)。结论 基质分解素-1在胃癌的浸润、转移中可能起重要作用。     

基质分解素—1基因表达增强对原发性肝癌的诊断价值

目的了解基质降解在原发性肝癌中的作用。方法33例原发性肝细胞癌患者术中取癌组织及癌旁组织;提取组织总RNA;用逆转录共扩增定量PCR方法测定基质分解素—1(MMP_3)基因表达水平。结果肝癌组织基质分解素—1基因表达水平明显高于癌旁的肝硬化组织及正常肝组织。肝癌患者MMP_3基因表达水平与血清AFP浓度、肿瘤大小无关。结论基质分解素—1在原发性肝癌的进展中可能起重要作用。     

药物转运蛋白ABCC1在食管癌组织中的表达及其意义

目的:探讨食管癌组织中药物转运蛋白ABCC1基因表达的意义。方法:采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测了29例食管癌患者的癌组织标本及其癌旁正常食管黏膜组织中ABCC1的表达,并分析其与临床病理学特征之间的关系。结果:29例食管癌组织中ABCC1的表达水平高于癌旁正常组织(P<0.001),在中低分化食管癌和肿瘤浸润深肌层或纤维层组中,ABCC1的表达水平高于高分化和癌组织浸润浅基层以内组(P<0.05)。结论:食管癌组织中ABCC1表达增高,可能与食管癌患者耐化疗药物有关。     

实时荧光定量PCR法检测食管癌组织中细胞周期蛋白CyclinD1和CyclinA基因的表达

目的检测食管癌组织中细胞周期蛋白CyclinD1和CyclinAmRNA的表达水平，探讨相关基因表达与食管癌发生、发展的相关性。方法应用SYBRGreen染料法进行相对实时荧光定量PCR检测CyclinD1和CyclinA在48例食管癌组织及其癌旁正常食管组织中的表达情况。结果CyclinD1和CyclinA在食管癌组织中的表达水平均明显高于正常食管黏膜组织，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论人食管癌组织中CyclinD1和CyclinA的高表达可能与食管癌的发生发展密切相关，有望作为食管癌发生发展的评估指标。     

系统性红斑狼疮患者外周血基质金属蛋白酶-3检测及其临床意义

目的 :研究基质金属蛋白酶_3(MMP_3)在系统性红斑狼疮 (SLE)中的作用和意义。方法 :采用ELISA方法检测正常人、系统性红斑狼疮活动期与非活动期患者血浆中MMP_3的水平。结果 :系统性红斑狼疮活动期患者血浆中 ,MMP_3水平显著高于非活动期和正常对照组 (P<0.05) ;系统性红斑狼疮活动期患者中 ,出现临床肾损害和神经精神症状的患者血浆MMP_3水平分别明显高于无上述临床症状者 (P<0.01) ;而出现颊部红斑和 (或 )光敏感以及多发性关节炎的患者 ,与无上述症状的患者血浆中MMP_3水平比较均无显著性差异 (P>0.05) ;抗dsDNA抗体阳性、低补体C3血症、低白蛋白血症、高IgG血症以及血肌酐升高的患者血浆中MMP_3水平分别显著高于无上述症状者 (P<0.05)。结论 :在系统性红斑狼疮患者外周血中MMP_3呈高水平表达 ,与疾病活动性密切相关 ,在系统性红斑狼疮全身性系统性病变中起十分重要的作用     

基于TCGA分析HAVCR2基因在食管癌中表达及其与免疫微环境的关系

目的 利用TCGA数据库中转录组数据分析HAVCR2基因在食管癌中的表达及其与临床特征、免疫微环境的关系,为改进食管癌的治疗方法提供一定的理论依据。方法 从TCGA公共数据库中获取食管癌组织及正常食管黏膜组织的RNA测序数据和食管癌组织所对应的临床数据。通过非参数检验分析HAVCR2在食管癌组织和正常食管组织的表达差异。根据TCGA-ESCA数据库中总生存期数据绘制HAVCR2高低表达组的Kaplan-Meier生存曲线,并进行Log-rank检验。通过单因素Cox回归分析初步找出影响食管癌患者生存状态的主要因素。最后评估HAVCR2表达与肿瘤免疫微环境之间的关系。结果 HAVCR2基因在食管癌组织中表达上调,但HAVCR2基因表达与食管癌患者的总生存期无关,不能够作为食管癌的预后因子。单因素Cox回归分析显示,有淋巴结转移的食管癌患者预后较差。在肿瘤微环境的分析中,HAVCR2高表达的食管癌中免疫成分和基质成分更高,但肿瘤纯度较低。HAVCR2高表达时,肿瘤微环境中免疫细胞种类及数量增多,免疫功能可能处于激活状态。高低表达组之间免疫细胞差异和免疫检查点基因表达差异显著。富集分析显示差...     

复方中药对肝星状细胞胶原合成与降解的影响

目的观察中药复方丹参对肝星状细胞胶原合成与降解的影响.方法选择肝星状细胞系作为体外研究对象,MTT法观察药物对细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清液Ⅰ、Ⅲ、V型胶原含量,RNA-cDNA分子杂交检测细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平.逆转录多聚酶链反应检测间质胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平.结果中药复方丹参明显抑制肝星状细胞增殖且呈剂量依赖趋势,与对照组比较,中药组细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原含量明显降低,细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平明显降低,间质胶原酶基因表达水平明显增强,金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显受到抑制(P＜0.01).结论中药复方丹参可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制胶原的异常合成,促进异常沉积胶原的降解,从而起到抗肝纤维化的作用.     

PD-L1在胃间质瘤的表达及其与临床病理的关系

目的探讨程序性死亡配体1(PD-L1)在胃间质瘤患者中的表达及其与临床病理的关系。方法收集33例胃间质瘤患者的手术标本,分别采用Western blot(10例)和免疫组化(23例)检测PD-L1蛋白在肿瘤组织与瘤旁正常组织中的表达,分析其与临床病理的关系。结果肿瘤组织中PD-L1蛋白的表达高于瘤旁正常组织;PD-L1蛋白的表达与核分裂象和突变基因型密切相关(P<0.05),而与其他病理指标如酪氨酸激酶生长因子受体蛋白、干细胞抗原和肿瘤大小等无明显相关(P>0.05)。结论胃间质瘤患者肿瘤组织的PD-L1蛋白表达高于瘤旁正常组织。PD-L1蛋白在胃间质瘤组织的表达增加可能通过基因突变及其下游途径参与胃间质瘤的发生、发展、侵袭和转移。     

柴胡对肝星形细胞胶原降解作用的体外研究

目的：观察柴胡对肝星形细胞有关胶原降解基因表达的影响。方法：体外培养肝星状细胞，采用MTT法选择药物的实验浓度，逆转录多聚酶链反应检测间质性胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子－1基因表达水平，结果：与对照组比较，柴胡组金属蛋白酶组织抑制因子－1基因表达水平明显降低（P＜0．01），而间质性胶原酶基因表达水平无明显差异（P＞0．05），结论：柴胡的抗肝纤维化作用可能部分是通过抑制金属蛋白酶组织抑制因子－1基因表达而完成的。     

食管癌survivin基因与细胞核增殖基因Ki-67相关性研究

目的　探讨食管癌survivin基因和Ki- 6 7增殖基因之间的关系 ,证实此两种基因可作为食管癌早期诊断的指标基因。方法　应用免疫组化 (S -P法 )检测了 6 1例食管癌组织、12例癌旁组织和 12例正常食管组织中Survivin、Ki- 6 7的表达率 ,分析Survivin和Ki- 6 7在食管癌与癌旁组织及正常组织之间有何差异 ,探讨两种基因在不同组织中表达的相关性。结果　食管癌患者survivin基因和Ki - 6 7的阳性表达水平分别为79.2 6 % (4 8/ 6 1)和 6 9.6 4 % (4 3/ 6 1) ,明显高于对照组 (食管正常组织 ) (P <0 .0 1)。两者间表达成显著正相关 (r=0 .4 2 ,P <0 .0 1)。结论　不同性质食管组织中survivin和Ki- 6 7的表达水平不同 ,两者之间表达明显相关 ,可以作为食管癌临床诊断的可靠指标     

FEN1在食管癌中表达研究

目的:研究FEN1基因在人食管癌中的mRNA和蛋白表达及其与肿瘤发生的关系。方法:采用SYBRGreen实时定量PCR技术检测32例食管癌组织及癌旁组织中的FEN1基因的mRNA水平;同时采用免疫组化技术检测上述32例组织中FEN1的蛋白水平及分布。结果:与癌旁组织相比,FEN1基因在食管癌组织中mRNA水平较癌旁组织显著上调,约为癌旁组织的3.46倍。免疫组化的结果也表明FEN1基因在食管癌组织中表达要高于癌旁组织。结论:FEN1基因在人食管癌中较癌旁组织表达显著上调。FEN1基因的表达与食管癌的发生密切相关。     

食管癌细胞TACSTD1基因的表达及药物干预分析

目的探讨肿瘤相关钙信号转导蛋白1（TACSTD1）基因在食管癌组织表达情况及甲基转移酶抑制剂对其表达的影响。方法应用免疫组织化学、适时荧光定量PCR对食管癌组织和细胞株中的TACSTD1基因进行分析。结果 TACSTD1基因编码的上皮细胞黏附分子在食管癌和细胞株的胞膜上高表达与正常食管黏膜比较差异有统计学意义（P〈0.01）;甲基转移酶抑制剂5-杂氮-2-脱氧胞苷可明显抑制食管癌细胞株TACSTD1mRNA的表达（P〈0.05）。结论 TACSTD1基因在食管癌组织高表达,并为去甲基药物所抑制。     

BCL-2凋亡基因多态性与潮汕食管鳞癌的关联研究

目的：初步探究B细胞淋巴瘤因子2基因-938(C/A)位点的多态性和潮汕食管鳞癌患者临床表型、易感性、淋巴结转移风险的关系。方法本研究收集了110例潮汕食管鳞癌患者(2012年1月至2014年12月)的癌组织标本以及相关临床资料和110例健康人群的正常食管黏膜标本。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,分析两组中BCL-2基因-938(C/A)位点多态性;采用流式细胞术及细胞免疫荧光技术,分析食管鳞癌细胞周期和凋亡情况,对BCL-2蛋白的表达进行定量分析。采用χ2检验比较不同基因组BCL-2基因-938(C/A)多态性位点基因型的分布频数与食管鳞癌临床分期及淋巴结转移的关联,BCL-2蛋白表达与食管癌蛋白肿瘤病理特征的关系。结果将食管鳞癌的一些临床表型进行关联分析,对照组AA基因型频率显著高于试验组(P<0.05)。将试验组按不同临床特征分层后的基因型频率分布提示,TNM分期为I期+II期者,其AA基因型频率明显高于TNM分期为Ⅲ期+Ⅳ期者,差异具有统计学意义(P<0.05),表明含AA基因型的患者病情轻于不含此基因型的患者。结论 BCL-2的表达高低与食管癌患者的病情严重程度呈现正相关,且BCL-2的高表达与食管癌患者的不良预后有关。     

食管癌患者外周血CEA—mRNA、CK20-mRNA的表达及意义

目的以CEA-mRNA、CK20-mRNA为靶基因,应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）的方法,检测食管癌患者肿瘤组织以及食管癌患者外周血微转移,探寻靶基因作为食管癌微转移检测的分子标志物的可行性。方法应用RT-PCR技术检测53例食管癌组织中CEA—mRNA、CK20-mRNA的表达;检测53例食管癌患者外周血中靶基因的表达,并以10例良性食管疾病患者和20名健康人外周血作为对照。结果53例食管癌患者病理组织中CEA—mRNA、CK20-mRNA的表达率为96．23％（51／53）、100％（53／53）,外周血中CEA．mRNA、CK20-mRNA表达阳性率为52．83％（28／53）、49．06％（26／53）;对照组中,10例食管良性病变患者和20名健康人外周血中均有1例CEA-mRNA表达、无CK20-mRNA表达。结论CEA—mRNA、CK20-mRNA是检测食管癌组织及食管癌外周血微转移良好的分子标志物,两者表达与食管癌TNM分期关系密切。     

sFRP、WIF-1、CD133、CD44在食管癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨sFRP、WIF-1、CD133、CD44在食管癌中的表达与临床病理特征之间的关系,为食管癌的研究提供新思路。方法选取2013年1月-2013年8月经手术切除的食管癌标本40例,术后病理均证实为食管癌患者,采用RT-PCR方法分析sFRP（分泌型卷曲相关蛋白）、WIF-1（Wnt抑制因子-1）、CD133（白细胞分化抗原分化群第133号）、CD44（白细胞分化抗原分化群第44号）的表达情况,应用SPSS 14.0统计软件进行数据分析,采用χ2检验统计方法。结果 sFRP、WIF-1、CD44、CD133基因在食管癌组织阳性表达率为32.50%,42.50%,60.00%,72.50%,在癌旁组织阳性表达率为65.00%,70.00%,37.50%,47.50%。 CD44、CD133基因在食管癌组织中表达水平高于癌旁组织（P〈0.05）,sFRP、WIF-1基因则在食管癌组织中表达水平低于癌旁组织（P〈0.05）,差异有统计学意义。结论sFRP、WIF-1在食管癌组织中表达低于癌旁组织,CD44、CD133在食管癌组织中表达高于癌旁组织。 sFRP、WIF-1基因低表达及CD44、CD133基因高表达可能与食管癌的发生、发展有关。     

内质网蛋白29在食管癌中的表达及其临床意义

目的:探讨食管癌组织中ERP29的表达情况及其与食管癌临床病理特征以及预后等之间的关系。方法:食管癌切除手术标本60例,通过免疫组化检测ERP29在食管癌组织及癌旁食管正常组织中的表达情况。结果:ERP29在食管癌旁组织中的阳性表达率为85%,而在食管癌组织中的阳性表达率为43.3%,两者相比具有统计学差异(χ2=22.652,P<0.001)。食管癌组织ERP29的表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、癌组织学类型及局部浸润深度等无明显相关性,但与肿瘤TNM分期及淋巴结转移呈负相关。患者食管癌组织ERP29表达阳性组1、2及3年生存率分别为92.3%、80.8%、65.4%,高于食管癌组织ERP29表达阴性组79.4%、55.9%、35.3%。根据Kaplan-Meier生存分析和log-rank检验,ERP29表达阳性与阴性患者相比,有统计学差异。结论:食管癌组织ERP29的表达与食管癌旁组织相比明显下降,并且食管癌组织ERP29的表达与肿瘤分期、淋巴结转移呈负相关,提示ERP29是一个潜在抑癌基因。ERP29表达与食管癌的预后相关,可作为预测食管癌预后的一个潜在指标。     

食管鳞癌组织及癌细胞株EC9706中COX-2与15-PGDH的表达及临床意义

【摘要】目的 研究食管鳞癌组织及癌细胞株中环氧合酶（COX）-2及15-羟基前列腺素脱氢酶（15-PGDH）的表达及临床意义。方法 采用免疫组化（PV-9000）法检测正常食管黏膜（对照组,n=35)、食管鳞癌组织(n=35)及食管癌细胞株EC9706中COX-2和15-PGDH蛋白表达,RT-PCR法检测食管鳞癌组织及对照组15-PGDH mRNA表达。结果 与对照组比较,食管鳞癌组织COX-2蛋白表达较高,15-PGDH蛋白及15-PGDH mRNA表达减低（均P <0.05）。COX-2、15-PGDH在不同浸润深度、有无淋巴结转移食管鳞癌中比较差异有统计学意义（P < 0.05）,在不同性别、年龄及肿瘤分化程度组织中比较差异无统计学意义。食管癌细胞株中COX-2阳性表达,15-PGDH阴性表达。结论 食管鳞癌组织及癌细胞株中COX-2表达增高,15-PGDH表达减少,两者可能参与食管癌的发生、发展。     

脑胶质瘤中Hint1基因甲基化状态与表达的研究

目的探讨脑胶质瘤中Hint1基因启动子区的甲基化与表达情况。方法采用MSP和Western-blit法检测Hint1基因在脑胶质瘤和正常脑组织中甲基化状况及对应表达情况。实时荧光定量PCR的方法检测Hint1 mRNA的表达情况。结果经检测正常脑组织和胶质瘤Hint1基因启动子区域呈非甲基化状态,在83例胶质瘤患者脑组织中Hint1 mRNA的平均表达量为0.5190±0.0280,高于在30例正常脑组织中的平均表达量0.2236±0.0300。Hint1 mRNA的表达量与患者年龄、性别等临床特征无明显相关性而与患者的临床分期密切相关（P〈0.01）。结论脑胶质瘤中Hint1基因启动子区域呈非甲基化状态,其表达程度与患者的临床分期密切相关。     

多药耐药相关蛋白基因表达与食管及贲门癌的关系

目的 探讨食管癌及贲门癌组织中多药耐药相关蛋白(MRP)基因的表达与其病理特征的关系。方法 应用逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,检测了83例食管癌和贲门癌组织及28例患者45枚淋巴结中MRP基因的表达,并与相应癌旁组织进行对照分析。结果 35例食管癌和48例贲门癌组织中MRP阳性率(31.4％和16.7％)与其对应癌旁组织阳性率(5.7％和2％)比较具有显著性差异(P<0.01)。26枚转移淋巴结中,MRP阳性6例(23.1％);19枚非转移淋巴结组织未见MRP。在食管癌和贲门癌侵犯深肌层或纤维层及TNM Ⅲ,Ⅳ期的MRP阳性率(26.6％和28.8％)高于肿瘤侵犯浅肌层以下和TNM Ⅰ,Ⅱ期(10.5％和12.9％),均分布于低分化肿瘤中。对48例术后1～2年的患者随访发现,MRP阳性的肿瘤复发、转移的发生率高于MRP阴性者(P<0.05)。结论 食管、贲门癌组织中MRP基因表达增高,与转移淋巴结组织的MRP基因表达具有一致性,MRP的阳性表达除表现肿瘤的多药耐药外,还提示肿瘤预后不良。