大鼠缺氧习服后骨骼肌葡萄糖摄取的特点

目的　探讨机体习服于缺氧环境后组织葡萄糖摄取的变化特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0m低压舱内 3 0d后 ,取动脉血 ,测定血气、血糖、血常规等 ,取双后肢骨骼肌测定组织葡萄糖水平、葡萄糖摄取率 ,并分离细胞内、外膜进行葡萄糖结合实验测定葡萄糖结合位点数及其亲和力 ,各指标以平原大鼠进行对照。结果　缺氧组大鼠血糖显著高于对照组 (P <0 0 5 )。骨骼肌中葡萄糖水平、葡萄糖摄取率、内外膜葡萄糖结合位点数均非常显著地高于对照组 (P <0 0 1)。结论　细胞对葡萄糖的摄取能力增强是机体习服于缺氧环境后优先利用葡萄糖的重要机制之一。     

慢性缺氧对大鼠骨骼肌胰岛素受体的影响及其在增强葡萄糖摄取能力中的作用

目的从组织胰岛素受体变化及其对组织葡萄糖摄取能力的影响方面探讨缺氧习服的机制.方法将大鼠置模拟海拔5 000 m低压舱内,30 d后取动脉血,测定血气、血浆胰岛素、血糖等,取双后肢骨骼肌测定在有或无胰岛素刺激下的葡萄糖摄取率,通过Scatchard分析胰岛素受体结合位点密度数及其亲和力.以平原大鼠为对照.结果缺氧组大鼠血糖、血胰岛素以及骨骼肌中胰岛素受体高、低亲和力两种结合位点的密度,均显著高于对照组(P＜0.05).有或无胰岛素刺激时的葡萄糖摄取率及其增量值,在缺氧组均非常显著地高于对照组(P＜0.01).胰岛素受体的解离常数在缺氧与对照组之间没有显著性差异.结论经30 d低压缺氧后,大鼠骨骼肌胰岛素受体密度显著增加,对胰岛素反应能力增强,是组织葡萄糖摄取方面对胰岛素信号反应能力增强的机制之一.     

严重烫伤肌肉葡萄糖摄取障碍机理的研究

观察３０％体表皮肤全层烫伤大鼠骨骼肌细胞膜萄糖转运体位点的动态变化以阐明严重烫伤后肌肉葡萄糖摄取障碍的原因。结果显示，严重烫伤后肌肉总葡萄糖转运体结合位点变化不明显，但细胞内膜葡萄糖转运体位点向质膜转移的胰岛素刺激效应比对照组明显降低。     

缺氧习服大鼠骨骼肌葡萄糖代谢特点研究

目的　探讨缺氧习服后组织物质代谢特点。方法　将大鼠置模拟海拔 5 0 0 0米低压舱内 ,30天后取动脉血 ,测定血气、血糖等值 ,取双后肢骨骼肌用3H -脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率 ,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量 ,用酶法测定ATP、磷酸肌酸、乳酸水平 ,并以平原动物作为对照组进行对比分析。结果　与对照组相比 ,缺氧组血糖、骨骼肌葡萄糖摄取率、葡萄糖含量显著增加 ,而糖原显著降低 ,骨骼肌ATP、磷酸肌酸、乳酸在缺氧组与对照组之间没有显著性差异。结论　经过缺氧习服之后 ,组织能量代谢能达到平衡状态 ,葡萄糖利用能力加强     

缺氧习服过程中大鼠骨骼肌能量代谢特点研究

目的探讨缺氧习服过程中组织物质代谢特点.方法将大鼠置模拟海拔5 000m低压舱内,分别于5、15、30d后取动脉血,测定血气、血糖等,取双后肢骨骼肌用3H-脱氧葡萄糖测定葡萄糖摄取率,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖、糖原含量,用酶法测定ATP、磷酸肌酸、乳酸水平,并以平原动物作为对照组进行对比分析.结果 ATP含量平原组与缺氧组之间以及各缺氧组之间没有统计学差异(P>0.05).磷酸肌酸含量缺氧5d组显著低于平原对照组,缺氧15、30d组骨骼肌组织磷酸肌酸含量回复至平原水平.缺氧5d组糖原含量降低(P<0.01),缺氧15、30d组回升,但仍低于平原对照组(P<0.01).缺氧5d组骨骼肌葡萄糖没有显著降低(P>0.05),缺氧15、30d组葡萄糖含量高于平原对照组、缺氧5d组(P<0.01),缺氧30d组较缺氧15d组进一步增加(P<0.05).缺氧5d组血糖降低(P<0.01),缺氧15、30d组增高并高于平原对照组(P<0.05).骨骼肌乳酸的含量先增加后回降,其在缺氧15d组骨骼肌中的含量显著低于缺氧5d组(P<0.01),缺氧30d组显著低于缺氧5d组(P<0.01).结论在缺氧习服之后,骨骼肌组织能量产生维持在稳定的水平,但是组织物质代谢发生调整,对葡萄糖利用能力增强.     

脂联素对L6大鼠骨骼肌细胞葡萄糖摄取的影响

目的观察脂联素对L6大鼠骨骼肌细胞基础及胰岛素诱导的葡萄糖摄取的影响。方法1. 将L6细胞分为脂联素处理组（脂联素刺激30?min）、胰岛素处理组（10?nmol/L胰岛素刺激20?mi n）和对照组。处理后分别测定各组细胞的葡萄糖摄取率。2. 将稳定表达葡萄糖转运子4（Gluosetransporter 4, GLUT4）的L6细胞(L6 GLUT4细胞)分为6组：① 对照组; ② 脂联素处理组：脂联素刺激30?min;③ 低浓度胰岛素处理组：0.1?nmol/L胰岛素刺激20?min; ④ 高浓度胰岛素组：10?nmol/L胰岛素刺激20?min; ⑤ 脂联素预处理+低浓度胰岛素组：脂联素预处理30?min,0.1?nmol/L胰岛素刺激20?min; ⑥ 脂联素预处理+高浓度胰岛素组：脂联素预处理30?min,10?nmol/L胰岛素处理20?min。处理后分别测定各组细胞的葡萄糖摄取率及GLUT4细胞膜含量。结果L6细胞：脂联素处理组葡萄糖摄取率与对照组差异无统计学意义(P＞0.05) 。L6 GLUT4细胞：① 脂联素处理组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率与对照组差异均无统计学意义(P均＞0.05);②　低浓度胰岛素处理组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率均显著高于对照组（P均＜0.01）;脂联素预处理+低浓度胰岛素组细胞膜GLUT4含量、葡萄糖摄取率均显著高于脂联素处理组（P均＜0.01）以及低浓度胰岛素处理组（P均＜0.01）;③　高浓度胰岛素处理组葡萄糖摄取率、细胞膜GLUT4含量均显著高于低浓度胰岛素处理组（P＜0.05,P＜0.01）;脂联素预处理+高浓度胰岛素组与脂联素预处理+低浓度胰岛素组比较,葡萄糖摄取率显著升高（P＜0.05）,而GLUT4细胞膜含量升高不显著（P＞0.05）;脂联素预处理+高浓度胰岛素组葡萄糖摄取率显著高于单纯高浓度胰岛素组（P＜0.01）,而GLUT4细胞膜含量差异无统计学意义（P＞0.05）。结论① 脂联素对骨骼肌细胞的葡萄糖基础摄取无明显影响;② 脂联素本身不足以诱导骨骼肌细胞的GLUT4细胞膜转位及葡萄糖摄取;③ 脂联素可增加胰岛素诱导的骨骼肌细胞的葡萄糖摄取,其机制可能与加强胰岛素诱导的GLUT4细胞膜转位以及增加细胞膜GLUT4对葡萄糖的转运效率有关。     

宫内生长受限大鼠骨骼肌蛋白激酶B和葡萄糖转运蛋白4的表达和活性变化

目的 研究宫内营养不良造成的宫内生长受限(IUGR)子鼠骨骼肌中蛋白激酶B(PKB)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达和胰岛素诱导活性变化,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制.方法 通过妊娠期全程低蛋白饮食法建立大鼠IUGR模型,采用Western blot方法检测雄性子鼠(8周)基础状态下骨骼肌PKB的表达和胰岛素刺激后磷酸化水平的变化,同时测定GLUT4的表达和胰岛素刺激后向细胞膜的转位.结果 胰岛素刺激前后,IUGR鼠骨骼肌中PKB和磷酸化的PKBSer473表达水平都明显低于对照鼠(P<0.01),胰岛素刺激使对照组的PKBSer473磷酸化水平明显增加(P<0.01),IUGR组仅轻度增加.两组子鼠骨骼肌中总GLUT4的蛋白表达没有差别,胰岛素刺激后,对照组细胞膜中GLUT4蛋白浓度显著升高(P<0.01),IUGR组增高的幅度明显低于对照组(P<0.01).结论 宫内蛋白营养不良造成的IUGR鼠骨骼肌中PKB的表达和活性降低,导致胰岛素介导的GLUT4转位受阻,可能引起葡萄糖摄取和利用障碍,促进糖尿病发生.     

葡萄糖转运蛋白4在宫内发育迟缓大鼠骨骼肌中的表达和转位

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠骨骼肌胰岛素刺激下葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达和转位的变化,探讨IUGR个体发生胰岛素抵抗的分子机制。方法采用孕期全程低蛋白饮食法建立大鼠IUGR模型,检测18月龄IUGR子鼠骨骼肌胰岛素刺激下的2-D-3H葡萄糖的摄取,同时采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot方法检测胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物1(IRS-1)及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的m RNA和蛋白表达;用Western blot方法分别检测胰岛素刺激前后骨骼肌总/膜GLUT4的蛋白表达变化。结果 1与对照组相比,18月龄IUGR组大鼠骨骼肌胰岛素刺激后葡萄糖摄取率显著降低(P=0.035);2IR和IRS-1 m RNA和蛋白表达在两组大鼠骨骼肌中差异无统计学意义(P>0.05),但GLUT4 m RNA表达在IUGR组大鼠骨骼肌中显著下降(P=0.031);3基础状态时,两组大鼠骨骼肌GLUT4总蛋白表达无明显差异(P=0.967);IUGR组GLUT4膜蛋白表达略降低,但未及统计学意义(P=0.072);经胰岛素刺激后,两组大鼠骨骼肌与各自基础状态相比,GLUT4总蛋白变化不明显,GLUT4膜蛋白表达均较各自的基础状态显著增加,但IUGR大鼠骨骼肌GLUT4膜蛋白的上升程度显著低于对照组(P=0.001)。结论 IUGR老龄大鼠骨骼肌中GLUT4 m RNA表达降低以及胰岛素刺激下的GLUT4转位下降,可能降低对胰岛素的反应性,从而减少葡萄糖摄取,促进胰岛素抵抗发生。     

DJB手术对 2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗改善作用的研究

目的 建立DJB手术动物模型,观察术后GK大鼠胰岛素抵抗情况的变化, 研究DJB手术治疗2型糖尿病的机理。方法 雄性Wistar大鼠为空白对照组;雄性GK大鼠分为模型对照组和DJB手术组。分别于手术后3、6和9周每组随机抽取6只动物进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验;钳夹实验结束后1周,检测肝脏GcK、G6P以及PEPCK mRNA表达情况以及骨骼肌细胞膜GLUT4含量变化。结果 术后3周和6周,DJB手术组动物的葡萄糖输注率（GIR）较模型对照组无明显差异（P>0.05）,肝脏GcK、G6P以及PEPCK mRNA表达量较模型对照组也无明显差异（P>0.05）;术后9周,DJB手术组动物的葡萄糖输注率（GIR）显著高于模型对照组（P<0.05）,肝脏GcK表达量DJB手术组显著高于模型对照组（P<0.05）,而G6P以及PEPCK mRNA表达量显著低于模型对照组（P<0.05）;DJB手术后3、6和9周,DJB手术组骨骼肌细胞膜GLUT4的含量较模型对照组无明显差异（P>0.05）。结论 DJB手术改善血糖的水平是通过改善体内肝脏组织的胰岛素抵抗,通过调节糖代谢酶的表达,进而提高肝脏葡萄糖摄取并抑制肝脏糖异生作用。在实验周期内,DJB手术对于骨骼肌组织的胰岛素抵抗未发现有明显改善,提示DJB手术治疗2型糖尿病的效果与时间有一定关系。     

钒酸钠治疗增加实验性糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4表达的研究

目的探讨钒酸钠类胰岛素作用及骨骼肌GLUT4(葡萄糖转运蛋白4)在其作用中机制.方法 Wistar大鼠40只,体质量180～250 g,随机分为2组,一组应用链脲佐菌素(55 mg/kg)腹腔内注射,5 d后血糖大于13.5 mmol/L定为糖尿病大鼠,另一组为正常对照鼠,然后将正常对照组与糖尿病组大鼠各随机分为2组.加钒组隔日管饲0.4%钒酸钠水稀释液,对照组饮用0.9%生理盐水,观察基本指标变化,持续2周后在麻醉情况下迅速分离提取骨骼肌及血液标本,应用Western blot 和RT-PCR技术测定GLUT4的蛋白和基因表达.结果钒酸钠治疗糖尿病大鼠PG、TG、INS降低,糖尿病大鼠GLUT4蛋白和GLUT4mRNA表达与正常对照组比较降低明显,钒酸钠治疗糖尿病大鼠GLUT4蛋白和GLUT4mRNA表达增加接近正常对照组水平.结论钒酸钠治疗糖尿病大鼠在不增加胰岛素释放的情况下具有明显改善糖脂代谢的效果,使降低GLUT4水平恢复接近正常,说明钒酸钠增加糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4表达使周围组织葡萄糖摄取利用紊乱增加可能是降低血糖机制之一.     

Characteristics of fat metabolism in skeletal muscle of rats after hypobaric hypoxic acclimation

Objective：To investigate the characteristics of fat metabolism in rat skeletal muscle after hypobaric hypoxia acclimation. Methods： Sprague-Dawley rats were divided into 3 groups randomly： control group （H0）, hypoxic 5-day group （HS）, and hypoxic 15-day group （H15）. Animals of H5 and 15 groups were exposed to hypobaric hypoxia chamber simulating 5 000 m high altitude for 5 d or 15 d respectively, 23 h per day. H0 group stayed outside of chamber The level of fatty acid oxidation and uptake, and glucose oxidation were examined, and the level of non-esterified fatty acids （NEFA）, ATP and phosphocreatine （PCr） were also assayed in rat skeletal muscles. Results： The contents of ATP and PCr in H5 group were lower than those in H0 and H15 groups （P〈0.05）, while there was no significant difference between H0 and H15. Compared with H0, the blood NEFA level in all hypoxia groups was increased significantly （P〈0.05）. The muscle NEFA level in H15 group was greatly higher than that in H0 and H5 groups. The rates of fatty acid oxidation and uptake in H15 group were significantly higher than those in H0 and H5 groups （P〈0.05）, and the rate of glucose oxidation in all hypoxia groups was significantly decreased than that in H0 group （P〈0.05）. Conclusion： It is concluded that the enhanced fat oxidation may be one of the mechanisms in the maintenance of energy homeostasis after hypobaric hypoxic acclimation.     

肥胖Wistar大鼠骨骼肌细胞GLUT-4转位变化的研究

目的:探讨肥胖大鼠骨骼肌细胞的葡萄糖转运因子4(GLUT-4)转位变化.方法:10周龄雄性Wistar大鼠46只,随机平均分成对照组和肥胖组.6周肥胖模型建立后,用超速蔗糖梯度离心方法分离骨骼肌细胞内膜和外膜的匀浆,用Westem blot方法检测两组大鼠骨骼肌细胞内、外膜GLUT-4的蛋白水平.同时分别检测其空腹血糖、空腹胰岛素和血脂浓度.结果:肥胖组大鼠的胰岛素敏感指数明显下降(P＜0.01),肥胖组的内、外膜GLUT-4蛋白含量均较对照组下降,而且外膜GLUT-4下降比内膜更明显(分别为57.0%、12.2%,P＜0.01).结论:肥胖下调骨骼肌细胞GLUT-4总量,抑制细胞内膜GLUT-4向细胞外膜的转位,提示肥胖大鼠的骨骼肌存在由于GLUT-4下降调节所致的胰岛素抵抗.     

牛磺酸对高原低氧大鼠血清葡萄糖水平及小肠组织GLUT2、GLUT5 mRNA表达的影响

目的 观察牛磺酸对高原低氧大鼠血清葡萄糖水平及小肠组织GLUT2、GLUT5 mRNA表达的影响.方法 动物经基础饲料或添加牛磺酸饲料喂养7 d后,利用低压舱分别模拟4 500、5 500 m海拔高度高原低氧,分别在高原低氧处理后第2、6、12、24、48、72小时处死动物,同时设平原对照组,测定血清葡萄糖水平,并剪取小肠组织,RT-PCR检测 GLUT2、GLUT5 mRNA表达.结果 低氧条件下大鼠血清葡萄糖水平明显下降,小肠组织中GLUT2、GLUT5的表达显著降低,但添加牛磺酸组血清葡萄糖水平及小肠组织中GLUT2、GLUT5的表达均明显高于相应对照组.结论 牛磺酸能够显著提高高原低氧大鼠血清葡萄糖水平及小肠组织中GLUT2、GLUT5的表达.     

运动增加糖尿病大鼠葡萄糖运载体蛋白含量及基因表达的研究

研究运动对链脲佐菌素所致的糖尿病大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体,葡萄糖运载体４（ｇｌｕｃｏｓｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ,ＧＬＵＴ４）基因表达和蛋白含量的作用,探讨运动训练改善糖尿病大鼠糖代谢的可能作用机理。方法实验大鼠分３组：糖尿病非运动组,糖尿病运动组、正常对照组。糖尿病运动组大鼠进行６周游泳运动。用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测大鼠骨骼肌细胞ＧＬＵＴ４蛋白含量,用斑点印迹杂交法检测骨骼肌细胞内ＧＬＵＴｍＲ     

心肌细胞缺氧通过激活AMPK促进GLUT4移位和葡萄糖摄取

目的：探讨心肌缺氧时ＡＭＰ激活的蛋白激酶（ＡＭＰＫ）激活对葡萄糖转运子４（ＧＬＵＴ４）移位和葡萄糖摄取的作用。方法：大鼠心室肌经５００μｍｏｌ／Ｌ腺嘌呤－９－β－Ｄ－阿糖呋喃腺苷（ａｒａＡ）处理后,分别与胰岛素、氰化钾、５－氨基咪唑－４－氨基甲酰－１－β－Ｄ核糖呋喃腺苷（ＡＩＣＡＲ）孵育,用放射性核素分析技术测定其葡萄糖摄取量和ＡＭＰＫ活力,应用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析心肌细胞ＧＬＵＴ４含量。结果：ＡＭＰＫ特异性激活剂ＡＩＣＡＲ和氰化钾可使心肌葡萄糖摄取增加（１倍和１．５倍）,但均受ａｒａＡ抑制。ＡＩＣＡＲ增加心肌ＡＭＰＫ活力和葡萄糖摄取,而ａｒａＡ则有抑制作用。心肌细胞质膜ＧＬＵＴ４分布明显增加而细胞器膜ＧＬＵＴ４分布相应减少。结论：氰化钾所致的心肌缺氧与ＡＩＣＡＲ一样可通过ＡＭＰＫ激活途径,促进ＧＬＵＴ４移