三氧化二砷抗裸鼠肺癌移植瘤药效学研究

目的:探讨三氧化二砷(A s_2O_3)对裸鼠肺癌移植瘤的抗肿瘤作用。方法:建立肺癌移植瘤模型。随机分为5组,每组6只,A s2O33组分别给予A s2O310、5、2m g/kg体重,腹腔注射;生理盐水(N S)组给予等体积的生理盐水,用法同A s_2O_3组;顺铂组(D D P)组按1m g/kg体重给药。用药2周后,观察用药前后肿瘤生长情况、裸鼠体重变化,测量肿瘤大小,流式细胞仪检测瘤细胞凋亡,取瘤组织行病理学检查和瘤细胞超微结构观察。结果:A s_2O_3组肿瘤大小均较N S组明显缩小(P<0.01);大、中剂量的A s_2O_3瘤组织细胞凋亡增多,病理可见以中度坏死为主,小剂量以轻度坏死为主。电镜下大、中剂量A s_2O_3组可见肿瘤细胞凋亡征象。结论:A s_2O_3对裸鼠肺癌移植瘤有显著的抗肿瘤作用,诱导肿瘤细胞凋亡可能是A s_2O_3三氧化二砷的抗肿瘤机制之一。     

三氧化二砷对人食管癌细胞裸鼠移植瘤的抑制

目的:观察三氧化二砷对人食管癌细胞株Eca-109细胞裸鼠体内移植瘤生长的影响。方法:实验于2005-07/2006-07在解放军第四五八医院肿瘤中心实验室完成。①实验材料及方法:将体外培养的人食管癌细胞系Eca-109接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型。将20只裸鼠按随机数字表法分为4组(n=5),即生理盐水对照组、1μmol/L三氧化二砷组、4μmol/L三氧化二砷组和8μmol/L三氧化二砷组。各组均于瘤块移植后48h取不同剂量的药物0.2mL腹腔注射,给药5周。②实验评估:检测各组实体肿瘤生长情况并行常规病理观察。结果:20只Eca-109细胞移植裸鼠全部进入结果分析,无脱失。①裸鼠移植瘤生长情况:8μmol/L三氧化二砷组裸鼠对Eca-109细胞移植瘤的抑制率明显高于1μmol/L,4μmol/L三氧化二砷组和生理盐水对照组(P<0.05),其他各用药组之间移植瘤体积差异无显著性意义(P>0.05)。移植后4周和5周时,8μmol/L三氧化二砷组裸鼠Eca-109细胞移植瘤的抑制率分别为68.5%和80.7%,抑制作用呈剂量依赖性。②移植瘤组织病理学变化:生理盐水对照组细胞呈多角形,核圆形,核浆比例大,核分裂多见,可见异常核分裂。用药组瘤细胞孤立,核分裂少见,可见核染色质固缩,核边聚,核碎裂等凋亡现象。结论:三氧化二砷对人食管癌裸鼠移植瘤具有明显的抑制作用,并且呈一定的剂量依赖性。     

人胰腺鳞腺癌裸小鼠胰腺内原位移植瘤模型的超微结构研究

我们继人胰腺导管腺癌、鳞状细胞癌裸小鼠胰腺内原位移植模型的建立,又于1991年6月27日将1例人胰腺鳞腺癌手术样本移植到裸小鼠胰腺内,肿瘤异体移植和连续传代获得成功。移植瘤的生物学特性稳定。命名为PTNMP—3,本文报告对其超微结构系统观察结果。     

小鼠结肠癌移植瘤模型的建立及其多鼠MRI研究

目的 建立小鼠结肠癌CT-26皮下移植瘤模型,探讨用高场强MR对其行多鼠MR研究的价值.方法 于小鼠腋部皮下注射CT-26细胞悬液,3周后行多鼠MR检查(一次4只荷瘤小鼠),观察肿瘤的大小及特征,并取肿瘤标本做病理切片检查.结果 建立了小鼠结肠癌皮下移植瘤模型,并成功尝试了采用1.5TMR行多鼠MR检查,获得的MR图像可较为清晰的显示肿瘤的位置、大小、形态、内部信号及其向周围生长情况等.MR测量所得的肿瘤体积与病理测量结果密切相关(r=0.993,P＜0.01),较大体测量与病理所测结果间的相关性更高(r=0.928,P＜0.01).结论 1.5TMR行多鼠MR检查能无创性、清晰地显示小鼠结肠癌移植瘤模型皮下瘤灶的生长情况.     

人参皂甙Rg3与三氧化二砷联合应用对裸鼠肝癌移植瘤模型的协同效应

目的：观察人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对裸鼠肝癌移植瘤模型的作用。方法：实验于2005-04／12在广州医学院动物实验室进行。取24只雄性裸鼠（BALB／C-nu／nu），将体外培养人肝癌Bel-7402细胞株种植于左前上肢腋窝皮下，然后单纯随机分为4组（n=6）：①人参皂甙Rg3组：自接种肝癌细胞株第3天起，灌胃给予10m/kg人参皂甙Rg3，隔日1次，灌胃20次。②三氧化二砷组：自接种肝癌细胞株第3天起。腹腔内注射三氧化二砷40μg／d，1次／d，连续28d。⑧联合用药组：同时用人参皂甙Rg3灌胃和三氧化二砷腹腔注射，用药量和时间同上2组。④对照组：等量生理盐水灌胃，方法同人参皂甙Rg3组。停药1周后分别观察裸鼠的生存质量（包括精神状态、活动状况、对刺激的反应、体质量下降幅度、食欲和尿、便6项指标），测定瘤质量，计算肿瘤抑制率，计数肿瘤内微血管密度。结果：①治疗方案结束时，联合用药组6只裸鼠均存活，人参皂甙R船组和三氧化二砷组有5只存活，对照组只有4只存活。人参皂甙Rg3组和联合用药组荷瘤裸鼠生存质量较高。②人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组平均瘤质量明显轻于对照组[（0．83&;#177;0．22），（0．68&;#177;0．16），（0．56&;#177;0．11），（1．52&;#177;0．60）g，P〈0．05]，但前3组之间差异不显著（P〉0．05）。③人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤抑制率分别为45．1％，55.3％，63．1％，3组比较差异不显著。④人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤内微血管密度明显低于对照组[（12．71&;#177;2．75），（18．00&;#177;2．24），（10．00&;#177;2．92），（27．00&;#177;2．94）个／200倍视野，P〈0．05]，人参皂甙Rg3组和联合用药组微血管密度值低于三氧化二砷组（P〈0．05），但2组间比较差异不显著（P〉0．05）。结论：人参皂甙R船能明显抑制肿瘤新生血管形成，与三氧化二砷联合应用具有协同作用，能明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长，改善荷瘤裸鼠生存质量。     

三氧化二砷对小鼠C26结肠癌细胞生长的影响

目的 研究三氧化二砷(As2O3)体外抑制小鼠C26 结肠癌细胞生长的作用及其机制.方法 将不同浓度As2O3(1,2,4,6,8 μmol /L)加入体外培养的C26 结肠癌细胞,MTT 法检测体外细胞增殖率,采用细胞形态学观察及流式细胞术方法 检测As2O3 对体外培养小鼠C26 结肠癌细胞凋亡和细胞周期的影响情况.结果 MTT 法及细胞形态学观察均发现:与模型组相比,As2O3 低、中、高浓度治疗组C26 细胞增殖率存在着剂量依赖性的下降.同时,流式细胞术发现:与模型组相比,As2O3 低、中、高浓度治疗组凋亡率明显增加.而细胞周期检测发现:As2O3 可将C26 细胞阻滞在G0 /G1 期.结论 As2O3具有体外抑制小鼠C26 结肠癌细胞生长的作用,其作用机制可能与其诱导C26 细胞凋亡有关.     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:20只皮下接种移植瘤大小相似的BALB/c裸鼠,随机分为0.9%氯化钠液(NS)组(n=10)和As2O3组(n=10)。尾静脉注射NS0.2ml.只-1(NS组)或As2O310mg·kg-1(As2O3组),每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的重量和体积。结果:NS组瘤重0.992±0.401g、体积(1.50±0.57)mm3,As2O3组瘤重(0.526±0.269)g、体积(0.83±0.39)mm3,瘤重和体积明显下降(P<0.01)。结论:As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长。     

人参皂甙Rg3与三氧化二砷联合应用对裸鼠肝癌移植瘤模型的协同效应

目的:观察人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对裸鼠肝癌移植瘤模型的作用。方法:实验于2005-04/12在广州医学院动物实验室进行。取24只雄性裸鼠(BALB/C-nu/nu),将体外培养人肝癌Bel-7402细胞株种植于左前上肢腋窝皮下,然后单纯随机分为4组(n=6):①人参皂甙Rg3组:自接种肝癌细胞株第3天起,灌胃给予10mg/kg人参皂甙Rg3,隔日1次,灌胃20次。②三氧化二砷组:自接种肝癌细胞株第3天起,腹腔内注射三氧化二砷40μg/d,1次/d,连续28d。③联合用药组:同时用人参皂甙Rg3灌胃和三氧化二砷腹腔注射,用药量和时间同上2组。④对照组:等量生理盐水灌胃,方法同人参皂甙Rg3组。停药1周后分别观察裸鼠的生存质量(包括精神状态、活动状况、对刺激的反应、体质量下降幅度、食欲和尿、便6项指标),测定瘤质量,计算肿瘤抑制率,计数肿瘤内微血管密度。结果:①治疗方案结束时,联合用药组6只裸鼠均存活,人参皂甙Rg3组和三氧化二砷组有5只存活,对照组只有4只存活。人参皂甙Rg3组和联合用药组荷瘤裸鼠生存质量较高。②人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组平均瘤质量明显轻于对照组[(0.83±0.22),(0.68±0.16),(0.56±0.11),(1.52±0.60)g,P<0.05],但前3组之间差异不显著(P>0.05)。③人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤抑制率分别为45.1%,55.3%,63.1%,3组比较差异不显著。④人参皂甙Rg3组、三氧化二砷组和联合用药组肿瘤内微血管密度明显低于对照组[(12.71±2.75),(18.00±2.24),(10.00±2.92),(27.00±2.94)个/200倍视野,P<0.05],人参皂甙Rg3组和联合用药组微血管密度值低于三氧化二砷组(P<0.05),但2组间比较差异不显著(P>0.05)。结论:人参皂甙Rg3能明显抑制肿瘤新生血管形成,与三氧化二砷联合应用具有协同作用,能明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长,改善荷瘤裸鼠生存质量。     

三氧化二砷对小鼠肾组织RNA的损伤

目的:通过检测活性氮族引起的核酸损伤标志物8-硝基鸟嘌呤在砷暴露小鼠肾脏组织中的表达情况,分析三氧化二砷对肾组织RNA损伤的作用途径。方法:实验于2005-11/2006-01在大连医科大学毒理学实验室完成。选用昆明种健康小鼠40只,按体质量随机分为4组,即正常对照组、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L三氧化二砷染毒组,每组10只。各染砷组小鼠通过饮用含不同剂量三氧化二砷自来水的方式使小鼠暴露砷,连续染砷60d。正常对照组每天摄入相同剂量的生理盐水。染砷60d后处死各组小鼠,立即取肾脏皮质,应用苏木精-伊红染色法进行肾皮质组织病理学观察;应用免疫组织化学及图像分析的方法检测肾组织内8-硝基鸟嘌呤的表达,根据8-硝基鸟嘌呤表达的吸光度值进行定量分析。结果:40只小鼠全部进入结果分析,无脱失。①各染砷组小鼠肾脏皮质区肾小管细胞出现肿胀,胞质内有空泡变性,核固缩、溶解等明显的病理学变化;而正常对照组小鼠的肾脏细胞未见上述病理变化。②5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L三氧化二砷染毒组小鼠肾组织细胞的抗8-硝基鸟嘌呤免疫染色平均吸光度显著大于正常对照组(0.027±0.014,0.039±0.015,0.043±0.014,0.004±0.002,P<0.05),20μmol/L三氧化二砷染毒组与5μmol/L三氧化二砷染毒组相比,吸光度明显增加(P<0.05)。结论:活性氮族可能参与了砷对肾脏细胞核酸的损伤作用,8-硝基鸟嘌呤可能是砷致肾损伤的标志物。     

重组人可溶性凋亡配体相关蛋白联合顺铂抑制肺癌裸鼠移植瘤的生长

目的:探讨重组人可溶性凋亡配体相关蛋白(rhTRAIL)和顺铂联用对抑制人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤的生长有无协同增效作用。方法:将24只荷人A549肺腺癌BALB/CA-nu裸鼠随机分成4组,(1)阴性对照组;(2)rhTRAIL组(1μg/mL,隔日1次×8次);(3)顺铂组(1.5mg/kg,每周2次×4次);(4)联合用药组(rhTRAIL1μg/mL,隔日1次×8次 顺铂1.5mg/kg,每周2次×4次)。分别测量瘤重、瘤体积,计算肿瘤生长指数和抑瘤率,并观察各组移植瘤组织的毒副作用和病理形态结构。结果:阴性对照组肿瘤生长指数为7.63±2.01,而rhTRAIL组和顺铂组分别为4.15±1.04和4.37±0.93,联合用药组则减低至1.69±0.37。rhTRAIL组、顺铂组的抑瘤率分别为36.8%和30.3%,联合用药组则增高达69.5%。rhTRAIL组、顺铂组和阴性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05);联合用药组和其他3组比较差异均有显著性(P<0.01)。各组裸鼠的毒副作用轻微,治疗前后体重无明显变化。结论:rhTRAIL、顺铂均可抑制A549裸鼠移植瘤的生长,rhTRAIL和顺铂联用具有协同增效作用。rhTRAIL有望成为一种重要的生物制剂应用于肺癌的多学科综合治疗。     

裸鼠颅内小细胞肺癌移植瘤模型的建立

目的：建立裸鼠颅内小细胞肺癌（SCLC）移植瘤模型,为今后开展SCLC相关实验研究提供动物模型。方法培养LTEP/P人SCLC细胞株,传代3～4代,收集细胞,并制成1×108/ml 的细胞悬液共1 ml。14只裸鼠麻醉后,用牙科钻在裸鼠颅脑钻一小孔,然后用10μl微量注射器抽取3μl肿瘤细胞悬液,利用立体定位仪缓慢接种于BALB/C SPF裸鼠颅内,放置入SPF环境内继续饲养,观察7 d后脱颈处死,取完整脑组织,行病理检测。结果所有裸鼠在术后1h内逐渐苏醒并恢复活动和饮食,第5天出现活动、饮食减少,第7天出现神软、萎靡、反应迟钝等症状,并死亡1只。病理检测证实所有裸鼠脑组织内可见SCLC细胞。结论通过立体定位仪向裸鼠颅内接种SCLC细胞能建立稳定可靠的裸鼠颅内SCLC移植瘤模型。     

三氧化二砷对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的：观察三氧化二砷（As2O3）对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法：20只体质量相似的BALB/c裸鼠,皮下接种胆囊癌移植瘤随机分为0.9%氯化钠液（NS）组（n=10）和As2O3组（n=10）。尾静脉注射NS0.2mL（NS组）或As2O310mg.kg-1（As2O3组）,每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的质量和体积,同时分别用免疫组织化学法和Western blot法检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达。结果：NS组瘤质量0.992±0.401g、体积1.50±0.57mm3,As2O3组瘤质量0.526±0.269g、体积0.83±0.39mm3,两组间均有显著差异（P〈0.01）;免疫组织化学和West-ern blot检测结果显示As2O3组肿瘤组织Cyclin D1的表达明显下降。结论：As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长,可能通过下调Cyclin D1的表达来实现抑瘤生长。     

131Ⅰ-血管抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤的干预效应

目的观察131Ⅰ标记的血管抑素在荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠体内的放射受体显像,评价血管抑素及131Ⅰ-血管抑素和单纯131Ⅰ对小鼠Lewis肺癌移植瘤的治疗效果,探讨131Ⅰ-血管抑素治疗实体瘤的临床应用前景.方法①2001-02/05在第四军医大学唐都医院核医学实验室进行显像实验用氯胺-T法进行131Ⅰ标记,将标记产物131Ⅰ-血管抑素从尾静脉注入荷Lewis肺癌的C57BL/6小鼠体内,用131Ⅰ标记的白蛋白作为对照,分别于24,48,96,144 h后进行ECT扫描.②2002-07/2003-02在该实验室进行治疗实验28只荷Lewis肺癌的C57BL/6小鼠(右前肢皮下移植瘤直径约1cm)随机分成4组,分别腹腔注射131Ⅰ-血管抑素(含131 I 11.1 MBq,血管抑素12.5 mg/kg),血管抑素(12.5 mg/kg),131Ⅰ(11.1 MBq)和生理盐水各0.3 mL,1次/周,治疗2次,观察14 d内肿瘤体积的变化.结果131Ⅰ-血管抑素尾静脉注射后,48 h内γ显像以全身分布为主,96 h后肿瘤部位显像,并呈高度特异性浓集.131Ⅰ-血管抑素,131Ⅰ,血管抑素和生理盐水治疗两周后,各组小鼠Lewis肺癌移植瘤的平均体积分别为(1963±126),(5219±351),(3943±236),(7353±350)mm3,其抑瘤率分别为73.3%,29.0%,46.4%,与生理盐水组比较,差异有显著性意义(P=0.000 3).结论131Ⅰ-血管抑素可以高度特异性浓集于小鼠Lewis肺癌移植瘤部位,并使肿瘤组织显像;131Ⅰ-血管抑素能明显抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长,其抑制作用强于单纯的等浓度的血管抑素和131Ⅰ,131Ⅰ-血管抑素在实体瘤的干预性治疗中有潜在的应用前景.     

^131Ⅰ-血管抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤的干预效应

目的:观察^131Ⅰ标记的血管抑素在荷Lewis肺癌C57BL/6小鼠体内的放射受体显像,评价血管抑素及^131Ⅰ-血管抑素和单纯^131Ⅰ对小鼠Lewis肺癌移植瘤的治疗效果,探讨^131Ⅰ-血管抑素治疗实体瘤的临床应用前景.方法:①2001-02/05在第四军医大学唐都医院核医学实验室进行显像实验:用氯胺-T法进行^131Ⅰ标记,将标记产物^131Ⅰ-血管抑素从尾静脉注入荷Lewis肺癌的C57BL/6小鼠体内,用^131Ⅰ标记的白蛋白作为对照,分别于24,48,96,144 h后进行ECT扫描.②2002-07/2003-02在该实验室进行治疗实验:28只荷Lewis肺癌的C57BL/6小鼠(右前肢皮下移植瘤直径约1cm)随机分成4组,分别腹腔注射^131Ⅰ-血管抑素(含^131 I 11.1 MBq,血管抑素12.5 mg/kg),血管抑素(12.5 mg/kg),^131Ⅰ(11.1 MBq)和生理盐水各0.3 mL,1次/周,治疗2次,观察14 d内肿瘤体积的变化.结果:^131Ⅰ-血管抑素尾静脉注射后,48 h内γ显像以全身分布为主,96 h后肿瘤部位显像,并呈高度特异性浓集.^131Ⅰ-血管抑素,^131Ⅰ,血管抑素和生理盐水治疗两周后,各组小鼠Lewis肺癌移植瘤的平均体积分别为(1963&;#177;126),(5219&;#177;351),(3943&;#177;236),(7353&;#177;350)mm^3,其抑瘤率分别为73.3%,29.0%,46.4%,与生理盐水组比较,差异有显著性意义(P=0.000 3).结论:^131Ⅰ-血管抑素可以高度特异性浓集于小鼠Lewis肺癌移植瘤部位,并使肿瘤组织显像;^131Ⅰ-血管抑素能明显抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长,其抑制作用强于单纯的等浓度的血管抑素和^131Ⅰ,^131Ⅰ-血管抑素在实体瘤的干预性治疗中有潜在的应用前景.     

肺癌继发脊椎骨转移瘤2例

肺癌继发脊椎骨转移瘤２例李培忠肺癌早期往往缺乏临床症状，不易发现，多在健康检查或因其他疾病摄Ｘ线胸片时被发现，而肺癌并发脊椎骨转移瘤的临床表现更为复杂，极易被误诊而延误治疗。现将我院近年疗养员中发现的２例肺癌继发脊椎骨转移瘤的病例报告于下，供同道参考...