内毒素对体外培养肝细胞脂质过氧化损伤的作用

本研究通过体外实验,探讨了内毒素对肝细胞脂质过氧化损伤的作用以及SOD的保护效应。用分离的大鼠肝细胞与内毒素(500ng/ml)共同孵育,6h肝细胞MDA、LDH和SOD水平均显著上升(P<0.05～0.01),而且LDH和SOD升高早于MDA;预先将PMN经内毒素处理后,再与肝细胞共孵,激活的PMN能显著损伤肝细胞,引起肝细胞MDA升高和LDH释放增加(P<0.01),SOD活性下降(P<0.05)。给予SOD治疗能部分抑制PMN对肝细胞的损伤作用。上述结果提示,内毒素对PMN引起肝细胞的损伤具有增强作用,内毒素亦可直接诱导肝细胞脂质过氧化损伤,但其机制尚待进一步阐明。     

参脉康片对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其机制

①目的观察参脉康片(SMKT)抗心肌缺血作用,分析其作用机制.②方法采用连续注射异丙肾上腺素(IPA)法制作大鼠急性心肌缺血模型,通过观察体表心电图(EKG)、病理组织学检查以及对血浆总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)含量测定,探讨SMKT抗心肌缺血的作用及其机制.③结果 SMKT(生药)每天以1,2,4 g/kg体质量腹腔注射,可明显降低缺血性EKG中ST段异常抬高或降低的幅度,与模型组比较差异有极显著性(F=4.34～6.84,q=5.02～6.79,P<0.01).SMKT预先用药可使大鼠心肌缺血程度减轻,血浆MDA含量降低(F=4.31,q=4.96,5.04,P<0.01).④结论 SMKT对IPA引起的实验性心肌缺血有保护作用,其机制可能与抑制心肌脂质过氧化损伤有关.     

槲皮素对H2O2所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用

目的 观察槲皮素(QUE)对H2O2所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用.方法 原代培养的新生Wistar乳鼠,随机分为正常对照组、H2O2损伤组和3种剂量QUE保护组.用比色法观察乳鼠心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶(LDH)、脂质过氧化产物-丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,并用电镜观察心肌细胞形态学改变.结果 H2O2损伤组乳鼠心肌细胞培养液中LDH和MDA含量显著增高,SOD活性降低(与对照组相比,P＜0.01),心脏超微结构损伤严重;QUE保护组与H2O2损伤组相比,LDH和MDA明显降低,SOD活性升高,心肌形态学变化减轻.结论 槲皮素对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化损伤有关.     

中药复方心脉通胶囊的抗心肌缺血疗效与机制

【目的】探讨中药复方心脉通胶囊对缺血性心脏病的治疗作用及其作用机制。【方法】60例冠心病心肌缺血患者随机分为心脉通胶囊组(30例,常规西药加心脉通胶囊治疗)与对照组(30例,单用常规西药治疗),观察治疗前后临床症状计分、心肌缺血总负荷(TIB)、血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO)和血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化。【结果】治疗后两组临床症状计分、TIB、MDA均显著下降(P<0.05),而心脉通胶囊组下降幅度明显大于对照组(P<0.01),心脉通组ET显著下降(P<0.01),但对照组下降不明显(P>0.05);两组治疗后NO、SOD明显上升(P<0.05),而心脉通组上升幅度显著高于对照组(P<0.01)。【结论】心脉通胶囊有良好抗心肌缺血作用,其作用机制与血管内皮保护效应及抗脂质过氧化损伤密切相关,加用心脉通胶囊治疗缺血性心脏病比单用西药效果好。     

蝎毒抗癌多肽对H22带瘤小鼠放疗后脂质过氧化的影响

目的观察蝎毒抗癌多肽(APBMV)与放疗(RT)合用对H22带瘤小鼠脂质过氧化的影响.方法取H22带瘤小鼠100只,观察不同剂量APBMV与放疗合用后肿瘤生长抑制率(IR)、血清SOD活力和LPO含量的变化.结果放疗后第6d和第9d,RT与APBMV合用后瘤重明显降低,IR最高达78.28%和70.45%,高于单用RT组和APBMV组(P<0.05或P<0.01);RT组SOD活力最低,LPO含量最高(与对照组比较,P<0.05),RT+APBMV高剂量组SOD活力明显提高,LPO含量显著降低(与RT组比较,P<0.01),接近空白对照水平.结论APBMV与放疗合用对H22的抑制作用比单纯放疗和单用APBMV增强,APBMV可减轻辐射所致的脂质过氧化损伤.     

茶多酚对甲醛致人内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的 探讨茶多酚对甲醛致人内皮细胞氧化损伤的保护作用.方法 采用体外常规培养内皮细胞,取对数生长期的细胞进行实验.实验设对照组、甲醛损伤组和低、中、高剂量茶多酚保护组,其中茶多酚先与细胞预孵12h后加入0.1 mmol/L甲醛,置CO2培养箱培养4h,检测细胞培养液中SOD活力及LDH、MDA、NO的含量,SP法检测NF-kB.结果 茶多酚各保护组与甲醛损伤组比较SOD活力明显升高,LDH、MDA 含量均降低(P＜0.05);茶多酚各保护组内皮细胞NO释放量减少、NF-kB表达明显下降与甲醛损伤组比较均有显著性(P＜0.05).结论 茶多酚可提高内皮细胞抗氧化酶的活性,减轻甲醛所致的氧化损伤;茶多酚通过抑制NF-kB的表达,减少NO的产生从而减轻细胞内脂质过氧化是其保护作用的重要机制.     

非酒精性脂肪肝炎脂质过氧化对前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达的影响

目的探讨大鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)形成过程中脂质过氧化对前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达的影响.方法通过高脂饮食制备大鼠高脂血症性脂肪肝模型,并在第20、22周分批处死,采用半定量RT-PCR检测肝组织前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA的表达,测定血清和肝组织丙二酰二醛(MDA)含量,并行肝组织学改变的观察.结果模型组肝组织出现明显脂肪变性和炎症坏死并伴有程度不同的纤维化,在第22周肝组织前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达模型组明显高于正常对照组(P<0.05).血清和肝脏MDA含量,模型组也显著高于正常对照组(P<0.05).在第22周血清和肝脏中MDA含量与肝组织前胶原ⅠmRNA表达呈正相关(r=0.68,P<0.01;r=0.66,P<0.01),与前胶原Ⅲ mRNA无相关性.结论NASH肝纤维化程度与前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达增强相一致;脂质过氧化反应可能对前胶原Ⅰ表达起重要作用.     

镁离子对培养乳鼠心肌细胞羟自由基损伤的保护作用

目的　观察镁离子对培养乳鼠心肌细胞羟自由基损伤的保护作用。方法　本实验利用FeSO4/ H2O2 自由基产生体系,观察羟自由基作用于培养乳鼠心肌细胞,其上清液中乳酸脱氢酶(LDH) 和丙二醛( MDA) 含量的变化,以及镁离子对这种作用的影响。结果　(1) 羟自由基作用于培养乳鼠心肌细胞,其上清液中LDH 和MDA 的含量增加。(2) 镁离子能减少羟自由基引起的LDH 和MDA 含量的增加,且呈一定浓度、时间依赖关系。结论　羟自由基使培养乳鼠心肌细胞LDH 漏出增加及脂质过氧化终产物MDA 含量增加,镁离子对这一损伤有保护作用     

淫羊藿苷预适应对乳鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨淫羊藿苷预适应对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤和氧化损伤的作用及其机制。方法:体外培养原代乳鼠心肌细胞,淫羊藿苷预适应24h后,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤和过氧化氢(H2O2)诱导氧化损伤模型,测定细胞存活率(MTT法)、细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:在缺氧/复氧损伤模型和氧化损伤模型中,淫羊藿苷预适应明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量。结论:淫羊藿苷预适应对缺氧/复氧损伤以及氧化损伤心肌细胞都具有明显的保护作用,可能与其抑制脂质过氧化作用有关。     

"一对一"陪伴分娩对产程影响的观察

目的观察"一对一"陪伴分娩对产程进展的影响.方法对300例"一对一"陪伴分娩和300例无陪伴分娩的产妇在产程时间、难产率及新生儿窒息率进行比较.结果前者的产程时间(4.85±1.12)明显短于后者(6.43±1.06),(P<0.01);前者的难产率(24.33%)明显低于后者(35.67%),(P<0.05);前者的新生儿窒息率(1.00%)明显低于后者(3.67%)(P<0.05).结论"一对一"陪伴分娩可缩短产程和降低难产率及新生儿窒息率.     

微载体黏附培养SD大鼠肝细胞的生物学特性

目的:探讨微载体黏附培养SD大鼠肝细胞的生物学特性. 方法:对胶原酶消化法分离获取的SD大鼠肝细胞行微载体黏附培养,在倒置显微镜及扫描电镜下观察肝细胞形态变化,采用CL-800全自动生化分析仪检测不同时间培养上清中白蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)和尿素的含量. 结果:微载体黏附培养肝细胞的正常形态及白蛋白、尿素合成功能可维持1 wk以上,LDH漏出量、白蛋白及尿素水平1 wk内呈波动性变化,在培养第3日白蛋白及尿素水平最高、LDH漏出量最低. 结论:微载体培养可提供高活性、高密度生长的肝细胞,可望为肝细胞移植、生物型人工肝提供较理想的细胞材料;微载体培养肝细胞在培养第3日功能最佳,可能为应用于肝细胞移植、生物型人工肝的最佳时间.     

红景天甙对乳鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的：探讨红景天甙对活性氧致心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法：在应用低浓度过氧化氢处理原代培养乳鼠心肌细胞，建立心肌细胞氧化损伤模型的基础上，通过检测培养介质中乳酸脱氢酶(LDH)活力和电镜观察细胞超微结构的方法评价红景天甙对心肌细胞的保护作用，并通过测定丙二醛(MDA)含量和Na^ ,K^ -ATPase活力探讨其机制。结果：过氧化氢对心肌细胞有显著的损伤作用。红景天甙可使培养介质中的LDH和MDA水平显著下降，细胞Na^ ，K^ -ATPase活力显著提高，同时细胞超微结构得到显著改善。结论：红景天甙对过氧化氢致心肌细胞损伤有保护作用，机理与其抑制脂质过氧化和提高钠泵活力的作用有关。     

大豆磷脂脂质体对四氯化碳致培养肝细胞损害的保护作用

目的　观察不同浓度大豆磷脂脂质体对四氯化碳(CCl4)导致肝细胞损伤的保护作用。方法　采用终浓度为8mmol/L四氯化碳作用于培养的小鼠肝细胞3h ,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)以及细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果　大豆磷脂脂质体可使由四氯化碳导致损伤的肝细胞培养液中的LDH释放明显减少(P <0 . 0 1) ,肝细胞中SOD含量明显升高(P <0 .0 1) ,MDA含量明显减少(P <0 . 0 1)。结论　大豆磷脂脂质体对四氯化碳致肝细胞损伤具有明显的保护作用。     

重组幽门螺杆菌过氧化氢酶对结肠粘膜上皮细胞氧化应激的影响

OBJECTIVE: To investigate the effects of recombinant Helicobacter pylori catalase (rHpCAT)on oxidative stress in rat colonic mucosal epithelial cells. METHODS: Oxidative stress model was established by hydroxyl generated from Fenton reaction in cultured colonic mucosal epithelial cells isolated from normal rats, in the model of which the effects of rHpCAT were observed. The cells were divided into normal control, model, 5-aminosalicylic acid (5-ASA, 0.1 mmol/L), and rHpCAT (1 x 10(5), 1 x 10(6), and 1 x 10(7) U/kg, respectively) groups. At the end of the experiment, the content of lactic dehydrogenase (LDH), malondialdehyde (MDA), myeloperoxidase (MPO), glutathione peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT) and, superoxide dismutase (SOD) were detected in the culture supernatant. RESULTS: The contents of LDH, MDA and MPO were elevated while those of GSH-Px, CAT and SOD reduced in the model group. rHpCAT at different doses reduced the release of LDH, depressed the contents of MDA and MPO, and increased the contents of GSH-Px, SOD and CAT. CONCLUSION: rHpCAT has protective effects against rat colonic mucosal oxidative damage.     

芍芪多苷对体外化学性肝细胞损伤的保护作用

目的探讨芍芪多苷对CCl4致体外原代肝细胞损伤模型的保护作用及可能机制。方法建立CCl4致化学性体外肝细胞损伤模型,分光光度法检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,MTT法检测肝细胞存活率。结果芍芪多苷可降低原代肝细胞培养上清液中ALT、MDA水平,增加SOD酶活性,提高肝细胞存活率。结论SQDG对CCl4所致肝细胞体外损伤模型具有明显的保护作用。     

急性血糖波动对肝细胞凋亡的影响及可能的机制研究

目的探讨急性血糖波动对肝细胞凋亡的影响及可能的机制。方法选择30只健康雄性Wistar大鼠,将其随机分为3组：对照组、血糖波动组及持续性高血糖组,各10只。以间断和持续静脉滴注50％葡萄糖注射液48h的方法,建立急性血糖波动和持续性高血糖雄性Wistar大鼠动物模型。滴注48h后,采用比色法检测大鼠血清丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性;采用Tunnel方法检测肝细胞凋亡的情况;采用免疫组化方法检测肝细胞内核因子-KB（NF—KB）、Jun氨基末端激酶-1（JNK1）表达。结果血糖波动组大鼠MDA水平、SOD活性及MDA／SOD与对照组、持续性高血糖组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;血糖波动组大鼠肝细胞凋亡率显著高于对照组及持续性高血糖组,差异亦有统计学意义（P〈0．05）。血糖波动组大鼠肝细胞内NF—KB、JNK1表达水平及JNK1／NF—KB值亦显著高于对照组及持续性高血糖组（P〈0．05）。结论血糖波动能诱导氧化应激增强,进而使JNK1、NF—KB细胞信号转导途径激活,这可能是导致肝细胞凋亡的主要原因。     

复方丹参注射液对内皮前体细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:观察复方丹参注射液对体外培养猪内皮前体细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:建立猪内皮前体细胞体外培养模型,在培养液中加入100μm o l/L过氧化氢及不同浓度(1、2、5m g/L)复方丹参注射液,测定细胞增殖活力(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量及细胞凋亡率。结果:过氧化氢使细胞增殖活力下降,使LDH、MDA含量增加,细胞凋亡率上升,复方丹参注射液可使上述结果改变并呈浓度依赖性。结论:复方丹参注射液对内皮前体细胞氧化应激损伤有保护作用。     

大鼠肝细胞分离、原代培养及生物学特性研究

目的 :探讨体外原代培养大鼠肝细胞的分离方法、原代培养肝细胞的生物学特性。　方法 :以SD大鼠作肝细胞供者 ,采用胶原酶消化法分离获取肝细胞 ,并进行原代培养 ;以锥虫蓝染色法测细胞活力 ,在倒置显微镜下观察肝细胞形态变化 ,采用Beckman全自动生化分析仪检测各培养体系不同时间培养上清中Albumin、LDH、Urea的含量。　结果 :胶原酶消化法所获取的肝细胞形态完整、贴壁良好、活性高、功能强。LDH漏出量、白蛋白分泌及尿素合成功能在 1周内出现波动性变化 ,第 3天时LDH漏出量最低 ,白蛋白分泌及尿素合成功能较好。　结论 :胶原酶消化法为一较好的肝细胞分离方法 ,分离的肝细胞在培养第 3天功能最佳     

重组幽门螺杆菌过氧化氢酶对结肠粘膜上皮细胞氧化应激的影响

目的 探讨重组幽门螺杆菌过氧化氢酶(rHpCAT)对大鼠结肠粘膜上皮细胞氧化应激的影响。方法 在分离培养正常大鼠结肠粘膜上皮细胞的基础上,利用FeSO₄+H₂O₂反应产生羟自由基攻击制备结肠粘膜细胞氧化损伤模型,同时预先加入rHpCAT并观察损伤减轻程度。实验设正常对照组、模型对照组、5-氨基水杨酸给药组(0.1 mmol/L)、重组幽门螺杆菌过氧化氢酶给药组(1×10⁵、1×10⁶、1×10⁷ U/kg·b.w.)。培养一定时间后,取上清测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA) 和髓过氧化物酶(MPO)的活性进行测定,并同时测定上述各组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果 模型组大鼠结肠粘膜上皮细胞MDA、LDH和MPO水平增高,CAT、GSH-Px和SOD含量减少。不同单位rHpCAT呈剂量依赖性的减少LDH释放,抑制MDA和MPO的形成,而使CAT、GSH-Px及SOD恢复到正常水平。结论 重组幽门螺杆菌过氧化氢酶对大鼠结肠粘膜氧化损伤具有保护作用。