人肝刺激因子对实验性急性肝损伤的保护作用及其机制的研究

从健康孕妇水囊引产4～6月龄的胎儿取肝,按 LaBrecque 法提取人肝刺激因子(hHSS)。将 hHSS 注入切除34%肝的 SD 大鼠腹腔,用~3H—胸腺嘧啶掺入肝 DNA 法,证实所提取 hHSS 具有生物学活性。用半乳糖胺(D—Gal)给昆明种小鼠造成急性肝损害。观察 hHSS 对这种急性肝损伤动物的保护作用及其机制。结果如下:(1)hHSS 明显降低 D—Gal 中毒小鼠的死亡率。(2)hHSS 显著降低 D—Gal 引起的血清 CPT 和 GOT 升高的幅度。(3)预先给 hHSS,则 D—Gal 引起的肝组织形态变化均减弱或不出现。(4)电子显微镜检查,hHSS 处理后由 D—Gal 引起的一些细胞器的变化均减轻或不出现。(5)hHSS 明显降低 D—Gal 所引起肝组织丙二醛的含量,说明 hHSS 有抗脂质过氧化作用。(6)hHSS 能保证膜流动性正常和脆性正常。根据上述实验资料,肯定了人肝刺激因子的存在,hHSS 具有保肝作用,其保肝机制为 hHSS 可抗膜脂质过氧化,保护肝细胞质膜、线粒体膜和微粒体膜的流动性和正常脆性。人胎肝产生 hHSS,hHSS 又可以保护肝细胞,这一肝细胞自我保护物质及其机制的阐明,对肝炎的防治可能具有应用价值。     

白细胞减少症及其它血液病患者骨髓掺入氚标记物放射自显影试验的比较观察

放射性同位素氚标记物自显影具有分辨力高、定位准确故为研究细胞功能代谢奠定了技术基础。氚～胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)、氚—尿嘧啶核苷(~3H—UR)和氚—亮氨酸(~3H—Leu),分别是DNA、RNA和蛋白质合成时的前身物质,用自显影法测定     

胰高糖素—胰岛素等治疗急性肝坏死—动物实验初步观察

本文报道了用D-氨基半乳糖诱发的急性肝坏死动物模型,早期应用胰高糖素、胰岛素、14氨基酸800注射液及东莨菪碱联合治疗。通过肝脏病理观察及~3H-胸腺嘧啶核苷体内掺入量的测定结果表明,胰高糖素-胰岛素等疗法,可抑制肝损害,并能促进肝细胞再生与修复。     

先锋霉素Ⅱ对培养的癌细胞DNA合成的影响

<正> 研究化学物质对癌细胞 DNA 或 RNA 作用形式来探讨癌发生的本质及治疗癌症的途径是十分有意义的。细胞的生物合成,如DNA 分子合成过程,可用放射性同位素标记的前体分子以放射自显影或液体闪烁计数技术示踪观察。胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA 分子的特殊前体,测定氘标记的胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入到 DNA 分子中的放射性,能客观、灵敏地反映 DNA 合成的情况。本文通过测定掺入到小鼠腹水型肉瘤 S_(180)细胞的~3H—TdR 放射性,初步探讨先锋霉素Ⅱ对培养的癌细胞 DNA 合成的影响。     

地冬鳖甲煎剂对小鼠甲亢模型肝组织~3H—亮氨酸及~3H—胸腺嘧啶核苷摄入的影响

本实验采用常用的养阴药物生地、麦冬、鳖甲治疗小鼠甲亢模型。观察其对肝组织~3H—亮氨酸和~3H—胸腺嘧啶核苷摄入的影响。实验发现,甲亢组肝组织~3H—亮氨酸摄入率低于正常组,差别有高度显著性(P<0.01)。甲亢加中药治疗组摄入率提高,与正常组比较差别无显著性(P>0.05)。另方面,甲亢组~3H—胸腺嘧啶摄入率高于正常组,差别有高度显著性(P<0.01)。甲亢加中药治疗组摄入率下降至正常,与正常组比较差别无显著性(P>0.05)。结果提示,养阴药物生地、麦冬、鳖甲有调节蛋白质和DNA代谢的作用。     

肝刺激因子对实验性急性肝损伤小鼠的保护作用

大鼠肝刺激因子(HSS)是否有保肝作用?这一问题的阐明不仅有理论意义还有潜在的临床意义。本工作采取初断乳大鼠的肝提取HSS,用CCl_4和半乳糖胺损伤小鼠肝脏,结果观察到:(1)HSS明显降低CCl_4和半乳糖胺所致小鼠血清GPT和GOT升高的幅度;(2)HSS的保肝作用具有量效关系;(3)HSS抗CCl_4损伤肝的时程在72h以上;(4)肝组织切片检查表明,HSS可减轻CCl_4和丰乳糖胺损伤肝的程度。上述生化学和组织形态学的指标表明,HSS对实验性急性肝损伤小鼠确有保护作用。     

用放射性示踪技术研究血内两类淋巴细胞的增殖动态及放射敏感性

我们利用放射性同位素~6H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)作示踪剂,液闪测定~3H摻入淋巴细胞内DNA的放射性计数(cpm),以分别观察血内两种淋巴细胞的增殖动态,及比较其辐射敏感性的差异。     

用氚化胸腺嘧啶核苷滤膜法测定淋巴细胞转化的研究

氚化胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入法测定淋巴细胞转化是常用的试验方法。体外培养淋巴细胞经非特异性刺激原植物血凝素(PHA)作用,T淋巴细胞能转化为淋巴母细胞,这种转化细胞的蛋白质、RNA和DNA合成显著增加。因此,能大量摄取胸腺嘧啶核苷以复制DNA,所以测定血液中淋巴     

神经生长因子对体外培养的大鼠颈上节神经突起生长及RNA和DNA合成的作用的放射自显影研究

神经生长因子(NGF)可促进靶神经节神经突起生长晕的生长。本文应用~3H-尿嘧啶核苷和~3H-腺胸嘧啶核苷放射自显影术进一步探讨此作用与神经元合成RNA和DNA的关系。实验材料用新生大鼠颈上节。按Maximow双盖片法进行培养。培养物分NGF组(培养液内添加NGF粗制剂)和对照组(不用CNGF),培养终止前分别转入含放射性同位素的培养液中孵育,然后取出固定、连续切片、制作自显影标本进行观察。实验结果指出:NGF组培养物被~3H-尿嘧啶核苷标记的神经元百分率及标记颗粒水平均高于对照组,而且每当培养物神经突起生长晕生长速度出现高峰的前夕,神经元~3H-尿嘧啶核苷标记颗粒水平都是明显地增高。这说明NGF可促进颈上节神经元的RNA合成,后者与神经突起的迅速生长有一定的相互关系。在~3H-胸腺嘧啶核苷标记培养物神经元的实验中,观察到NGF可促进培养第3天的颈上节少量的神经元合成DNA。     

调肝胶囊对小鼠急性肝损伤模型的保护作用

用四氯化碳及D-氨基半乳糖胶盐酸盐造成小鼠急性肝细胞损伤模型,观察调肝胶囊对肝脏的保护作用。结果表明：调肝胶囊大、中、小剂量组可明显抑制四氯化碳所致小鼠SGPT和SGOT活性升高,调肝胶囊大、中剂量组明显抑制D-氨基半乳糖胺盐酸盐所致小鼠SGPT和SGOT活性升高,凋肝胶囊大、中、小3剂量组间降酶作用呈明显的量效关系。     

人胎肝刺激因子对肝毒剂致小鼠亚细胞器的功能变化的影响

人胎肝刺激因子具有明显的保肝作用。本文采用Ｄ－半乳糖胺及ＣＣｌ４损伤小鼠肝脏，进一步观察人胎肝刺激因子（ｈＨＳＳ）对肝损伤引起的微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和混和功能氧化酶（Ｐ４５０）活性的保护作用，结果发现，肝损伤后，两种酶活性均明显降低，而预先经ｈＨＳＳ处理后，上述两种酶活性均有不同程度的恢复或增加。结果表明，ｈＨＳＳ的保肝作用，可能与保护肝细胞的钙稳定及加强肝细胞代谢酶活性有关。     

Hepatic stimulator substance from human fetal liver for treatment of experimental hepatic failure.

The authors previously reported the successful reversal of lethal D-Gal induced hepatic necrosis in rats by human hepatic stimulator substance (hHSS), a liver specific growth factor partially purified from human fetal liver cells, which promoted hepatocyte proliferation. In this study, they further investigated the mechanism of hHSS in improving survival of experimental acute hepatic failure. Our results demonstrated that the level of alanine transaminase and endotoxin in the plasma and lipid peroxides in the liver of chemically poisoned rats were reduced by hHSS to different extent at different periods of observation compared with the saline control group. The apparent recovery of liver function and the increase of 3H-TdR incorporation into hepatic DNA correlated with the morphologic changes observed under light and electron microscopes, showing that the damages inflicted on the cellular and subcellular structure in the liver of hHSS-treated rats were greatly alleviated and rapidly repaired. Therefore, hHSS, which can prevent liver deterioration and promote hepatocyte regeneration, may be a new hepatic stimulator factor readily available for clinical use.

     

肝细胞生长刺激因子生物学活性研究

应用人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞系和大鼠 肝原代培养细胞，利用［＾３Ｈ］ＴｄＲ掺入的方法观察从人胎肝中提取的肝细胞生长刺激物质对肝源性细胞ＤＮＡ合成的影响。     

人胎肝细胞生长刺激物质与酪氨酸蛋白激酶的关系

利用从人胎肝提取的肝细胞生长刺激物质（ｈＨｓｓ），以小鼠肝细胞质膜蛋白作为受体及内源性底物，以Ｐｏｌｙ（ＧｌｕＮａ，Ｔｙｒ）４：１作为外源性底物，通过磷酸化实验，对ｈＨＳＳ的作用及其与酪氨酸蛋白激酶活性之间的关系进行了研究。利用抗酪氨酸磷酸酯抗体免疫沉淀法，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显形及液体闪烁计数等方法进行测定。结果证明：ｈＨＳＳ可刺激并增强肝细胞膜受体的酪氨酸蛋白激酶的活性，后者可使膜蛋白某些组分及外源性底物磷酸化增强；ｈＨＳＳ的作用与酪氨酸蛋白激酶的活性密切相关。     

人胎肝刺激因子对大鼠实验性肝纤维化影响的研究

本工作从健康孕妇水囊引产４～６个月龄的胎儿取肝，采用ＬａＢｒｅｃｑｕｅ方法提取肝刺激因子，称人肝刺激因子（ｈｕｍａｎＨｅｐａｔｉｃＳｔｉｍｕｌａｔｏｒＳｕｂｓｔａｎｃｅ，ｈＨＳＳ）。将ｈＨＳＳ注入肝部分切除之大白鼠体内，用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入肝ＤＮＡ法测定其生物活性。结果表明，我们提取的ｈＨＳＳ刺激肝细胞ＤＮＡ合成较对照组增加６倍。采用皮下注射６０％ＣＣｌ４豆油溶液和饮用低浓度的乙醇制备慢性肝损伤动物模型，以观察ｋＨＳＳ对大鼠实验性慢性肝纤维化的影响。实验结果表明，（１）ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙醇所致慢性肝损伤时肝组织羟脯氨酸含量的升高，在实验第２８、４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０５，０．０１）。（２）病理组织学观察表明，ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙致慢性肝损伤时肝组织纤维化的程度。在实验的第４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０１）。本工作结果提示，肝再生刺激因子可能是一种有希望应用于临床治疗慢性肝病的生物制剂。     

人胎肝细胞生长刺激物质的分离纯化及活性测定

从人胎肝组织纯化肝细胞生长刺激物质（ｈＨＳＳ），经过匀浆、热处理、乙醇沉淀、ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５凝胶过滤，聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳及ＩＳＣＯＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｒ转移浓缩电泳等步骤，分离出具有ＨＳＳ活性的蛋白质。经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳显示５３ＫＤ与１８ＫＤ两条带。     

Studies on the effect of liver cytosol on experimental acute hepatic failure in the rat

This paper reports that dog regenerating liver cytosol (DRLC) and human fetal liver cytosol were found capable of increasing the survival rate of rats with liver failure induced by D-galactosamine (Ga1N). It was noted that the potential substances for hepatic failure are not species specific. Nevertheless this is a characteristic of the growing liver. The experimental results suggested that the effects of growing liver cytosol on liver regeneration were through three ways: 1. Hepatocytes DNA synthesis was increased. 2. Phagocytosis function of Kupffer cells was elevated which might prevent damage of liver cells by intestinal endotoxin. 3. Insulin secretion and its combination with hepatocytes were increased.