癌-睾丸抗原GAGE基因mRNA在肝细胞癌的表达及临床意义

GAGE基因是Van den Eynde等应用细胞毒性T淋巴细胞（CTL）筛选法，从一黑色素瘤细胞株cDNA文库中筛选出的肿瘤抗原基因，它能在多种来源不同的肿瘤组织表达，而在正常组织的表达仅限于睾丸组织，因此属于癌-睾丸抗原（CT抗原）。本研究中采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测肝细胞癌（HCC）组织及相应癌旁组织中GAGE基因mRNA4的表达情况，     

MAGE-A1、MAGE-C2及SSX-1在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的 检测肿瘤-睾丸抗原(CT抗原)MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达情况.方法 采用RT-PCR方法检测MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在55例HCC患者癌及癌旁组织中的表达,对产物进行测序,并对检测结果与临床指标进行分析.结果 55例HCC患者的癌组织中,MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA的表达率分别为60.0%、14.5%和40.0%;癌旁组织无表达.结论 CT抗原MAGE-A1、MAGE-C2和SSX-1 mRNA在HCC中呈高表达,是HCC免疫治疗的理想靶位.     

蛋白酶活化受体-4在结肠癌组织中的表达及意义

目的探讨蛋白酶活化受体-4（PAR-4）在结肠癌发生、发展中的作用。方法采用Real-time RNA法检测28份结肠癌组织及其相应癌旁组织中PAR-4表达,并采用2-ΔΔCt方法进行比较。结果 PAR-4在结肠癌组织中表达量明显增高,平均高出癌旁组织4.03倍;两者ΔCt比较,P〈0.05;低分化结肠癌组织PAR-4表达量明显高于高分化及中分化组织（P〈0.05）;高分化与中分化组织PAR-4表达无显著差异。结论 PAR-4在结肠癌组织中尤其是低分化组织中呈高表达;PAR-4可促进结肠癌的发生及发展。     

肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因mRNA在肝细胞癌中的表达及HLA-A2限制性CTL表位的预测

目的:检测肿瘤-睾丸抗原SPANX-C基因在肝细胞癌(HCC)中的表达,预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.为HCC的免疫治疗寻找新的靶位.方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对HCC患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(肝硬化和正常肝组织)中的SPANX-C基因mRNA进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行序列测定;用超基序法和量化基序法联合预测SPANX-C/HLA-A2限制性CTL表位.结果:在所检测的115例HCC组织中有70例(60.9%)表达SPANX-C基因mRNA,癌旁组织和20例对照肝组织均不表达.SPANX-C基因的表达与肿瘤分期、肿瘤分化程度、血清甲胎蛋白(AFP)水平等临床指标无相关性(P>0.05).用基序预测法筛选出5个HLA-A2限制性CTL表位(9肽),其中SPANX-C51-59(LVVRYRRNV)与HLA-A2分子具有较高结合力.结论:SPANX-C基因mRNA在HCC组织中呈高频率特异性表达,并存在HLA-A2限制性CTL表位,有望用于HCC的免疫治疗.     

大鼠过氧化体增殖物激活型受体α在衰老过程中表达差异及与脂质代谢的关系

观察过氧化体增殖物激活型受体α在衰老过程中表达差异，在分子水平上探讨衰老过程中出现脂质代谢异常的可能机制。选用SD年轻大鼠(6-8周龄)和老年大鼠(24月龄)，测定血清甘油三酯和总胆固醇水平，采用逆转录-聚合酶链反应检测大鼠肝脏过氧化体增殖物激活型受体α及其目标基因mRNA水平，用Westem印迹法检测过氧化体增殖物激活型受体蛋白的表达。结果发现，与年轻鼠组比较，老年鼠组血清甘油三酯和总胆固醇水平升高，过氧化体增殖物激活型受体αmRNA及蛋白表达随年龄增长而减少，目标基因的表达也受年龄的影响。结果提示，衰老过程中过氧化体增殖物激活型受体α表达减少可能与老年脂质代谢异常有关。     

骨髓红系细胞凋亡、增殖及促红细胞生成素受体表达在恶性淋巴瘤贫血中的意义

目的　探讨骨髓红系凋亡、增殖状态及促红细胞生成素受体 (EPOR)表达在恶性淋巴瘤贫血发病机理中的意义。方法　以转铁蛋白受体 (CD71)和血型糖蛋白A(GPA)作为红系标志 ,采用流式细胞术检测骨髓红系细胞的凋亡率、增殖率及EPOR的表达。结果　恶性淋巴瘤骨髓红系CD+ 71细胞和GPA+ 细胞凋亡率明显高于正常对照组 ,差异具有非常显著意义 (4 4 .2 8± 2 4.5 2对 11.0 7± 7.16,P <0 .0 0 1和 47.79± 2 8.3 7对 11.3 5± 5 .98,P <0 .0 0 1) ;增殖率也明显高于正常对照组 (4 9.63± 3 1.68对 2 8.47± 13 .63 ,P <0 .0 5和 5 0 .63± 2 8.74对 2 9.5 9± 9.81,P <0 .0 5 ) ;EPOR表达的平均荧光强度 (MFI)低于正常对照组 ,但差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。CD+ 71细胞和GPA+ 细胞凋亡率与血红蛋白 (Hb)水平呈一定的负相关 (r =-0 .60 0 9,P <0 .0 5和r =-0 .612 2 ,P <0 .0 5 ) ;EPOR表达与Hb水平无明显相关。结论　红系细胞凋亡率增高可能同恶性淋巴瘤贫血的发病机制有关 ,红系的明显增殖可能是对凋亡的反馈调节。EPOR表达水平降低可能不是恶性淋巴瘤贫血发病的普遍机制。     

肝X受体激动剂对人THP-1细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体α、β亚型表达的影响

目的研究肝X受体激动剂3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯和进口肝X受体激动剂激动剂T-0901317对THP-1细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1、肝X受体激动剂a和肝X受体激动剂β亚型mRNA表达的影响.方法应用逆转录-聚合酶链反应检测3β-羟基-5α,6a-环氧胆烷酸甲酯和T-0901317作用前后THP-1细胞源性巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体Al、肝X受体激动剂α和肝X受体激动剂β的mRNA表达,免疫组织化学检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白水平的表达.结果3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯和T-0901317均能显著上调THP-1细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体Al和肝X受体激动剂α的mRNA表达(P＜0.01),并呈时间和剂量依赖性;在对肝X受体激动剂β表达的影响方面,低浓度的T-0901317能明显上调肝X受体激动剂β的表达,而3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯只有在较高浓度时(10μmol/L)才表现出上调肝X受体激动剂β表达的作用(P＜0.05).结论3β-羟基-5α,6α-环氧胆烷酸甲酯以激动肝X受体激动剂α为主,并与T-0901317一样,可上调THP-1细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1和肝X受体激动剂α的表达.     

Toll样受体-9在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的明确Toll样受体-9（Toll likereceptor-9，TLR-9）在喉鳞状细胞癌及癌旁正常组织的表达及分布，并探讨其在喉癌发病机制中的作用及临床意义。方法采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR），免疫印迹（Western blot）及免疫组织化学技术检测TLR-9在喉癌组织和癌旁正常组织中的表达和分布。结果RT-PCR检测表明，TLR-9 mRNA在喉癌及喉正常组织内均有表达，TLR-9在喉癌组织中的表达较癌旁正常组织表达明显增多（t=2．743，P=0．017），并且在喉癌组织Ⅰ期＋Ⅱ期与Ⅲ期＋Ⅳ期表达之间差异具有统计学意义（t=1．787，P=0．040）。蛋白质免疫印迹检测发现，癌旁正常组织无TLR-9表达，在喉癌组织Ⅰ期＋Ⅱ期与Ⅲ期＋Ⅳ期表达之间差异具有统计学意义（t=1．701，P=0．015），TLR-9的表达位置在180kDa。免疫组化染色发现：TLR-9阳性表达为黄色，主要分布在肿瘤细胞胞浆内。结论TLR-9可能通过免疫机制参与喉癌的发展过程。     

ID-1、Ki-67及Bcl-2在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨食管鳞状细胞癌中DNA结合抑制蛋白-1（inhibitors of DNA binding1，ID-1）与Ki-67及Bcl-2表达的关系及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测118例食管鳞状细胞癌手术切除标本及20例癌旁正常组织中ID-1、Ki-67及Bcl-2的表达情况。结果食管鳞状细胞癌中ID-1、Ki-67及Bcl-2表达上调，阳性比例分别为86．44％、81．36％和59．32％；ID-1及Bcl-2表达程度与肿瘤组织分化程度正相关（分别为r=0．289，P=0．002；及r=0．319，P=0．001）；Ki-67表达程度与肿瘤组织分化程度负相关（r=-0．320，P〈0．001）；ID-1与Bcl-2表达正相关而与Ki-67表达无关；ID-1、Ki-67及Bcl-2表达与患者的年龄、性别及是否伴淋巴结转移均无关。结论细胞凋亡抑制可能是ID-1参与食管鳞状细胞癌发生发展的主要机制，ID-1不适用于评价食管鳞状细胞癌的淋巴结转移。     

整合素连接激酶、醌氧化还原酶-1和增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的表达及意义

目的检测肝细胞癌术后组织中整合素连接激酶(ILK)、NADPH:醌氧化还原酶(NQO)-1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,关注三者的关系及临床意义。方法 79例肝细胞癌术后组织及临床资料作为观察组,55例正常肝组织作为对照组,采用免疫组化方法检测两组中ILK、NQO-1和PCNA的表达。结果肝细胞癌中ILK、NQO-1和PCNA表达阳性率明显高于对照组,观察组中ILK、NQO-1和PCNA的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、肿瘤最大径及Ki67的表达密切相关。相关性分析显示ILK和PCNA、NQO-1和PCNA的表达均具有正相关性。观察组中ILK、NQO-1和PCNA高表达患者生存时间明显短于低表达患者。结论肝细胞癌中ILK、NQO-1和PCNA高表达,对病变的进展有重要影响,术后联合检测ILK、NQO-1和PCNA的表达可能对判断生物学行为和生存时间有一定价值。ILK、NQO-1对PCNA表达的增殖有直接关系,这可能是两种蛋白的作用机制。     

程序性死亡受体1和程序性死亡配体1在结肠癌组织中的表达及与患者临床病理特征、预后的相关性

[目的]观察程序性死亡受体1(PD1)和程序性死亡配体1(PD-L1)在结肠癌患者组织中的表达,并分析两者表达水平与患者临床病理特征及预后的相关性关系。[方法]采用免疫组织化学法检测112例结肠癌患者结肠癌组织及癌旁组织中PD-1、PD-L1蛋白表达水平,分析结肠癌组织PD-1、PD-L1蛋白表达水平与患者临床病理特征、预后的相关性,同时分析影响结肠癌患者生存期的多元因素。[结果]结肠癌组织PD-1、PD-L1蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05);结肠癌组织PD-1、PD-L1蛋白表达水平与TNM分期、分化程度、浸润深度、脉管侵犯及淋巴结转移等临床病理特征存在明显的相关性(P<0.05);PD-1高表达组(n=67)3年累计生存率(67.2%)及中位生存时间(20.2个月)均明显低于PD-1低表达组(88.9%)及中位生存时间(31.6个月)(P<0.05)。PD-L1高表达组3年累计生存率(71.0%)及中位生存时间(21.5个月)均明显低于PD-L1低表达组(92.0%)及中位生存时间(32.2个月)(P<0.05);TNM分期晚、分化程度低、浸润深度深、脉管浸润、淋巴结转移、PD-1蛋白和PD-L1蛋白表达阳性均为影响结肠癌患者预后生存期的独立危险因素(P<0.05)。[结论]结肠癌组织PD-1、PD-L1蛋白表达水平与TNM分期、分化程度、浸润深度、脉管侵犯及淋巴结转移等临床病理特征存在明显的相关性,可作为预测结肠癌患者预后的重要指标。