糖尿病视网膜病变患者玻璃体中肝细胞生长因子的含量检测

目的 定量研究肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)患者玻璃体中的水平，探讨HGF在增生性糖尿病视网膜病变 (proliferative diabetic retinopathy, PDR)等新生血管形成病理过程中的作用。 方法 采用双夹心酶联免疫吸附测定法检测对照组10只眼玻璃体以及单纯型DR组7只眼、PDR组33只眼和其它与新生血管生成有关的视网膜疾病组8只眼玻璃体切割手术中所取玻璃体内HGF的含量。PDR组中无虹膜新生血管者24只眼，伴虹膜新生血管者9只眼。 结果 玻璃体中HGF的含量对照组为（3.34±1.9）μg/L；单纯型DR组为（4.8±2.5）μg/L；PDR组中不伴虹膜新生血管生成者为（13.0±5.2）μg/L；PDR伴有虹膜新生血管生成者为（18.6±7.2）μg/L，其它与新生血管生成有关的视网膜疾病组为（12.1±8.9）μg/L。PDR组和其它与新生血管生成有关的视网膜疾病组玻璃体中HGF的含量比对照组显著升高(t=6.49, 5.70, 3.01, P<0.01)；PDR组中伴有虹膜新生血管生成者较PDR不伴虹膜新生血管生成者以及单纯型DR组玻璃体中HGF的含量均高，其差异有显著性意义(t=2.47, P<0.05或t=4.84, P<0.01)。 结论 在PDR和与新生血管生成有关的视网膜疾病患眼玻璃体内HGF的含量升高，提示HGF可能在视网膜新生血管生成的病理过程中起一定作用。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 131-13)     

增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体中血管内皮细胞生长因子含量…

检测增殖性糖尿病视网膜病变患者玻璃体中血管内皮细胞生长因子的含量并与正常人进行对比研究，探讨了ＶＥＧＦ在ＰＤＲ病理过程中的作用。应用酶联免疫吸附测定法对７例正常人及１９例ＰＤＲ患者玻璃体中的ＶＥＧＦ进行定量分析研究。结果７例正常人玻璃体中，ＶＥＧＦ的含量为０．１８－０．６０ｎｇ／ｍｌ，平均值为０．３５ｎｇ／ｍｌ。     

增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体血管内皮生长因子的表达

我们以裂孔源性视网膜脱离的增殖性玻璃体视网膜病变 (ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｖｉｔｒｅｏｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ ,ＰＶＲ)、眼外伤ＰＶＲ为研究对象 ,对其玻璃体血管内皮生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ＶＥＧＦ)进行定量测定 ,研究ＶＥＧＦ在ＰＶＲ中的表达情况 ,分析ＶＥＧＦ在ＰＶＲ中的作用。一、研究对象1 患者组 :选择孔源性视网膜脱离、眼外伤合并ＰＶＲ并行玻璃体切除术治疗的患者 37例。其中孔源性视网膜脱离ＰＶＲ 2 2例 ,男 16例 ,女 6例 ;年龄 2 1～ 5 2岁 ,平均 (36 14±…     

血管内皮细胞生长因子在糖尿病性视网膜病变进展中的作用

糖尿病性视网膜病变是糖尿病微血管病变常见而严重的并发症,在很大程度上导致不可逆的视功能损害或完全失明.VEGF在DR发生、发展,尤其在视网膜新生血管形成过程中发挥重要作用,本文就血管内皮生长因子与糖尿病性视网膜病变的关系进行综述。     

增生性糖尿病视网膜病变玻璃体中结缔组织生长因子的定量分析

目的 定量测定结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在增生性糖尿病视网膜病变(proliferative di-abetic retinopathy,PDR)患者玻璃体中的浓度,探讨其在PDR发病机制中的作用.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法定量检测27眼PDR、5眼非增生性糖尿病视网膜病变及5眼正常对照组玻璃体中CTGF的浓度.结果 PDR组玻璃体中CTGF浓度(567.09±181.15)ng·L-1明显大于对照组(128.06±57.28)ng·L-1及非增生性糖尿病视网膜病变组(150.70±52.39)ng·L-1(P均<0.01).PDR组中Ⅵ期患者玻璃体中CTGF浓度(706.17±88.78)ng·L-1大于Ⅳ期(349.20±110.60)ng·L-1及Ⅴ期(526.70±122.50)ng·L-1(P均<0.01).结论 PDR患者玻璃体中CTGF浓度升高可能与视网膜新生血管纤维膜的形成有关,CTGF在PDR发展过程中起着一定作用.     

增殖性糖尿病性视网膜病变玻璃体手术后角膜内皮细胞动态…

对３０例（３０眼）增殖性糖尿病性视网膜病变，行睫状体平坦部分闭合式玻璃体手术，术前及术后１，２月观察角膜内皮细胞的变异系数（ＣＶ），密度，六角形细胞出现率，结果术前术后无显著性差异，说明未切除晶体及术后眼压正常情况下，闭合式玻璃体手术对角膜内皮无影响。     

增殖性糖尿病性视网膜病变玻璃体手术后角膜内皮细胞动态观察

对３０例（３０眼）增殖性糖尿病性视网膜病变，行睫状体平坦部闭合式玻璃体手术。术前及术后１、２月观察角膜内皮细胞的变异系数（ＣＶ）、密度、六角形细胞出现率。结果术前术后无显著性差异，说明未切除晶体及术后眼压正常情况下，闭合式玻璃体手术对角膜内皮无影响。     

增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体血管内皮生长因子表达的研究

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)在增殖性玻璃体视网膜病变 (PVR)玻璃体中的表达 ,分析VEGF在 PVR中的作用。方法　增殖性玻璃体视网膜病变 37例 ,其中视网膜脱离 PVR2 2例 2 2眼 ,外伤性 PVR15例。以 12例猝死无眼疾的成年人作为正常对照。检测病例组、对照组玻璃体 VEGF水平。VEGF的测定采用对抗夹心法 (EL ISA)。结果　 37例增殖性玻璃体视网膜病变玻璃体 VEGF平均 2 2 0 .5 2± 10 1.97pg/ m l,其中 2 2例网脱PVR玻璃体 VEGF2 38.90± 6 1.2 4pg/ ml,外伤性 PVR玻璃体 VEGF193.5 8± 5 8.17pg/ ml。正常对照组玻璃体VEGF89.90± 36 .36 pg/ ml。PVR玻璃体 VEGF水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 )。VEGF在 PVRA级、B级水平较高 ,且随 PVR程度增加而降低。有危险因素 PVR,VEGF水平高于无危险因素 PVR(P <0 .0 5 )。结论　作为细胞间的传导信号 ,VEGF参与 PVR的发生发展。VEGF在 PVR中呈上调性表达。VEGF不仅在缺血性眼部疾病中呈高表达 ,而且在某些非缺血性眼部疾病中表达升高。 VEGF主要在 PVR早期发挥作用 ,PVR危险因素可以刺激玻璃体 VEGF上行性表达。     

增生性玻璃体视网膜病变患者血清和眼内液HGF水平检测

目的　检测视网膜脱离 (RD)和 /或伴有增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)患者血清和玻璃体液、视网膜下液(SRF)中肝细胞生长因子 (HGF)的含量 ,并探讨其相互关系。方法　同时收集 3 5例RD患者血清和玻璃体液、SRF标本 ,酶联免疫吸附分析 (ELISA)方法检测HGF质量浓度 ,其中 9例不伴有PVR的单纯黄斑孔 (MH)患者作为对照组。结果　各组患者血清HGF质量浓度无明显差异 (P >0 0 5) ,明显低于同组眼内液的质量浓度 (P <0 0 1) ,且二者无相关性 (P >0 0 5)。PVR玻璃体内HGF质量浓度 (10 91± 3 87)ng/ml,均比对照组 (3 42± 0 85)ng/ml高 (P <0 0 1) ,但PVRC级和D级之间差异不明显 :(7 88± 3 83 )ng/ml,(10 2 4± 4 0 7)ng/ml,P >0 0 5。SRF外引流 (14 68± 1 16)ng/ml或内引流 (10 3 5± 6 94)ng/ml的HGF质量浓度均高于玻璃体内水平 (P <0 0 5)。结论　PVR眼内HGF高质量浓度不是通过血 -视网膜屏障弥散 ,可能来自眼组织细胞的分泌 ;玻璃体内HGF随着PVR的发展而增高 ,可能参与了PVR的病理过程     

增生型糖尿病视网膜病变眼内液中血管内皮生长因子定量测定

目的：检测增生型糖尿病视网膜病变（PDR）患者房水和玻璃体中血管内皮生长因子（VEGF）水平。方法：应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）。结果：房水VEGF含量,PDR患者（4例）较正常人升高,差异有显著性（P＜0.05）。玻璃体VEGF的含量,PDR患者（11例）较正常人（10例）升高,差异有显著性（P＜0.05）。结论：PDR患者房水和玻璃体中VEGF的含量升高,在PDR的病理过程中起一定的作用。     

增生性糖尿病视网膜病变患者玻璃体内血管内皮生长因子的表达

目的 探讨增生性糖尿病视网膜病变(PDR)患者玻璃体内血管内皮生长因子(VEGF)的表达及相关影响因素.方法 病例对照研究.对50例(50只眼)接受玻璃体切除治疗的PDR患者进行分析.术中获取玻璃体标本,并用双抗体夹心酶联免疫吸附试验ELISA法对术中获取的玻璃体标本进行VEGF含量的定量检测,并分析增生性糖尿病视网膜病变患者玻璃体内VEGF的表达情况.平均随访9个月(6～26个月).用成组t检验比较PDR组和正常对照组玻璃体VEGF含量差异,以及硅油填充组与非硅油填充组VEGF含量差异.用方差分析方法比较PDR进展组、稳定组和好转组玻璃体VEGF含量有无差异.用单因素方差分析方法分析玻璃体VEGF含量对PDR术后疗效的影响.结果 PDR组玻璃体VEGF含量平均(592.4801±587.4267)ng/L,正常对照组玻璃体VEGF含量平均(131.3022±26.9192)ng/L.PDR组玻璃体VEGF含量高于对照组(t=3.2315,P＜0.05).术后PDR进展有10只眼(20%),稳定10只眼(20%),好转30只眼(60%).PDR进展组玻璃体VEGF含量显著高于PDR稳定和好转组(q=-3.3187,-4.0843;P＜0.05).术前未接受视网膜光凝组玻璃体VEGF含量显著高于接受全视网膜光凝或局部视网膜光凝组(q=-4.2187,-3.9672;P＜0.05).结论玻璃体VEGF表达与PDR严重程度有一定关系.术后PDR稳定或好转者玻璃体VEGF水平呈相对低表达.(中华眼科杂志,2009,45:206-209)     

VEGF在PDR中的表达及作用的研究

目的:研究增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)患者血液、房水、玻璃体中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)含量的变化,探讨VEGF与PDR的关系,为抗VEGF药物治疗的给药途径及剂量等提供理论依据。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法定量检测无糖尿病视网膜病变(NDR)组,单纯性糖尿病视网膜病变(BDR)组,增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)组患者和正常对照组血浆中VEGF含量,还检测PDR患者房水、玻璃体中和正常对照组房水、玻璃体中VEGF含量,并进行综合分析。试剂盒购自美国R&D公司,其质量和灵敏度相对较高。结果:PDR组房水中VEGF含量有增高趋势,但与正常对照组比较,无统计学差异(P>0.05)。PDR患者玻璃体中VEGF含量明显增高,与正常对照组比较差异非常显著(P<0.01)。PDR组自身血浆、房水、玻璃体中VEGF含量比较有逐渐增高趋势,三者之间有显著性差异(P<0.01)。正常对照组血浆、房水、玻璃体中VEGF含量三者之间无显著性差异(P>0.05)。血浆VEGF含量在正常对照组中最高,而玻璃体中VEGF含量在PDR患者中最高。结论:PDR患者眼内尤其是玻璃体中VEGF含量大幅度增高,可能对促进DR发展恶化起了关键性的作用。在正常人,VEGF更多地存在于血浆中发挥其生物学效应。在严重DR患者中,玻璃体中异常地出现大量VEGF,推测来自缺血缺氧的视网膜,并可能有向眼前段扩散的趋势。     

血管内皮生长抑制因子在糖尿病视网膜病变大鼠中的表达

目的 观察血管内皮生长抑制因子（VEGI）及其相关因子在糖尿病（DM）大鼠外周血、玻璃体液及视网膜组织中的表达,探讨VEGI在糖尿病视网膜病变（DR）发病机制中的作用。方法 70只6周龄雄性Wistar大鼠,随机分为空白对照组（10只）,DM 1、3、6个月组（各20只）。DM大鼠模型建立后,分别于1、3、6个月时取大鼠外周血、玻璃体液、全眼球。酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子样配体1/血管内皮生长抑制因子251（TL1A/VEGI 251）、血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）在血清及玻璃体液浓度,石蜡切片免疫组织化学法检测各因子在视网膜组织中的表达,苏木素 伊红（HE）染色评价各组大鼠DR进程。比较空白对照组和DM实验组间大鼠血清、玻璃体液及视网膜组织中TL1A、VEGF、TNF-α、IL-1β的表达差异。结果 分析采用单因素方差分析、独立样本t检验和最小显著差法检验。结果 空白对照组、DM 1、3、6个月组大鼠血清TL1A浓度分别为（92.09±2.05）、（118.36±8.30）、（85.90±7.51）、（78.90±4.88） ng/L,组间血清TL1A浓度比较,差异有统计学意义（F=77.405,P＜0.05）。从空白对照组到DM 1、3、6个月组,大鼠血清TNF-α、IL-1β浓度均呈升高趋势,4组间血清TNF-α、IL-1β浓度比较,差异有统计学意义（F=3.508、15.416,P＜0.05）。VEGF浓度在DM 1个月时升高,DM 3个月时下降,DM 6个月时再次升高,但4组间VEGF浓度比较,差异无统计学意义（F=1.242,P＞0.05）。各组大鼠玻璃体液TL1A浓度分别为（91.50±8.18）、（67.03±6.74）、（47.44±4.92）、（46.01±4.62） ng/L,组间TL1A浓度比较,差异有统计学意义（F=114.777,P＜0.05）。从空白对照组到DM 1、3、6个月组,大鼠玻璃体液VEGF、TNF-α、IL-1β浓度均呈升高趋势,4组间VEGF、TNF-α、IL-1β比较,差异有统计学意义（F=8.816、4.392、3.635,P＜0.05）。免疫组织化学检测结果显示,DM 1、3个月组大鼠视网膜TL1A表达吸光度［A,旧称光密度（OD）］值均较空白对照组降低（t=6.851、6.066,P＜0.05）,但DM 6个月组与空白对照组的TL1A表达A值比较,差异无统计学意义（t=1.401,P＞0.05）;DM各组大鼠视网膜VEGF和TNF-α表达A值均较空白对照组显著升高（t_VEGF=-4.709、-16.406、-9.228,P＜0.05;t _TNF-α=-4.703、-6.583、-17.762,P＜0.05）;DM 1、6个月组大鼠视网膜IL-1β表达A值均较空白对照组显著升高（t=-4.108、-3.495,P＜0.05）,但DM 3个月组与空白对照组IL-1β表达A值比较,差异无统计学意义（t=-0.997,P＞0.05）。HE染色结果显示,空白对照组与DM 1个月组大鼠视网膜组织结构基本正常;DM 3个月组大鼠视网膜组织水肿,细胞排列紊乱;DM 6个月组大鼠视网膜组织明显水肿,神经节细胞核染色加深,内丛状层可见大量新生血管,内核层细胞排列紊乱、水肿,可见大量脂肪空泡,视网膜各层结构不清晰。结论 VEGI可能通过与VEGF、TNF-α、IL-1β等因子的相互作用参与DR的发生发展过程。     

An association between vascular endothelial growth factor gene promoter polymorphisms and diabetic retinopathy

Background Diabetic retinopathy is a highly prevalent cause of visual loss in Western countries. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a potent angiogenic factor implicated in the development of the proliferative stage of this disease. Reports have suggested that polymorphisms at positions-460 and -634 of the 5′ untranslated region of the VEGF gene increase its basal promoter activity. Methods To investigate whether polymorphisms are associated with diabetic retinopathy, 215 patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) were enrolled. Among them, 82 subjects had proliferative diabetic retinopathy (PDR), 72 had non-proliferative diabetic retinopathy (NPDR), and 61 individuals without retinopathy served as controls. Two polymorphisms of the VEGF gene, a G→C transversion at-634 (the G/C polymorphism) and a C→T transition at-460 (the C/T polymorphism), were investigated by restriction fragment length polymorphism PCR and allele-specific PCR respectively. Results We did not find any association between the C/T polymorphism and diabetic retinopathy. However, the G/C polymorphism genotype distribution and the frequency of the C allele were significantly higher in the NPDR group than in control patients (OR = 1.69, 95% CI = 1.03–2.79). Analysis of the distribution of combined genotypes of the VEGF gene revealed the prevalence of the C/C-C/C genotype in NPDR patients (OR = 8.26, 95% CI = 1.79–37.99) and C/G-CC in PDR patients (OR = 3.36, 95% CI = 1.39–8.12). Conclusions Occurrence of the -634C allele appears to be associated with increased VEGF gene promoter activity, and the G/C polymorphism might serve as a predictive factor for the development of diabetic retinopathy. The authors have no financial or other interest in any products used or described in this study. This work was supported by a statutory grant of the Medical University of Warsaw, Warsaw, Poland, and grant 505/363 from the University of Lodz (JB).     

Increased levels of vascular endothelial growth factor in the aqueous humor of patients with diabetic retinopathy

Purpose:

This study aims to investigate the levels of aqueous vascular endothelial growth factor (VEGF) in diabetic patient groups in comparison to normal subjects, and to correlate elevated VEGF with the severity of diabetic retinopathy (DR).

Materials and Methods:

Aqueous samples were obtained from 78 eyes of 74 patients undergoing intraocular surgery and they were examined by the enzyme-linked immunosorbent assay. Color photographs, optical coherence tomography scans, and fluorescein angiography were used to evaluate patients preoperatively.

Results:

A strong statistical correlation was found to exist between the level of aqueous VEGF and the severity of DR (P < 0.001), whereas, the VEGF levels in a control group and a diabetic group without DR were not significantly different (P = 0.985). Aqueous VEGF levels were significantly elevated in patients with proliferative DR (PDR) as compared to the control group (P < 0.001), to diabetic patients without retinopathy (NDR) (P < 0.001), and to diabetic patients with nonproliferative DR (NPDR) (P < 0.001). The aqueous VEGF levels were significantly higher in patients with active PDR than in those with quiescent PDR (P = 0.001). On the other hand, a statistically insignificant (P = 0.065) correlation was found between elevated aqueous VEGF and the presence of macular edema in the NPDR group.

Conclusions:

VEGF was elevated in the aqueous humor of patients with DR compared to that in normal eyes. The aqueous VEGF level had a strong correlation with the severity of retinopathy along with a statistically insignificant difference in macular edema.     

玻璃体腔注射贝伐单抗Avastin后糖尿病视网膜患者血清中VEGF含量的变化研究

目的研究玻璃体腔注射贝伐单抗Avastin后增生性糖尿病视网膜病变（PDR）患者血清中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的变化。方法收集玻璃体腔注射Avastin后PDR患者血清样本（注射前当天,注射后1 d,注射后7 d,注射后28 d）,并以注射前当天的血清样本为基准值作为对照,用ELISA方法测定血清中VEGF的含量。结果玻璃体腔注射Avastin术后,所有样本血清中VEGF含量都降低,降低幅度在术后7 d达到最大峰值,术后28 d VEGF有所上升,但仍未达到术前水平。结论一次玻璃体腔注射Avastin术后,血清中VEGF含量降低并且维持相当时间,说明Avastin进入到血液循环中,因此有必要密切关注Avastin玻璃体腔注射后的系统性影响和对未注射眼的影响。     

浅谈在糖尿病性视网膜病变中调节血管内皮生长因子产生的信号通路

糖尿病性视网膜病变(DR)作为糖尿病(DM)在眼部最严重的微血管并发症,已成为全球工作年龄人群首位的致盲性眼病。血管内皮生长因子(VEGF)已被证实在DR新生血管的形成中起着重要作用,VEGF的表达增加可导致新生血管形成、血管内皮细胞通透性增加、促凋亡蛋白抑制作用减弱以及各种其它炎症介质的激活等病理改变的发生。因此,探索各种调节VEGF产生的信号通路有助于更深层次的了解这些病理改变发展的关系。本文中笔者就DR中各种调节VEGF产生的信号通路以及其与DR的相关性进行综述。