艾氏腹水癌患鼠血清高分子量DNA结合蛋白的分离与鉴定

肿瘤相关的血清DNA结合蛋白的分离,具有潜在的诊断价值。我实验室最近在动物实验研究中,首先分离、提纯得到了此种血清DNA结合蛋白。 我们利用免疫吸收法及免疫亲和层析法,从艾氏腹水癌小鼠血清脱氧核糖核酸结合蛋白(DBP)中分离得到了一种高分子量蛋白质(HDBP)。它在免疫双扩散反应中可与抗艾氏腹水癌小鼠血清DBP的兔抗血清产生一条沉淀线。但与正常小鼠血清DBP的兔抗血清不产生可见的沉淀线。用免疫电泳法分析,艾氏腹水癌小鼠血清DBP可与抗DBP的兔血清产生9～10条沉淀线,但与HDBP只产生一条沉淀线。经十二烷基硫酸钠、聚丙烯酰胺-凝胶电泳法测定其分子量,以2巯     

抗氧化剂对小鼠腹水型肝癌(H_(22))血清LPO的影响

本文在观测荷癌小鼠过氧化脂质(LPO)水平动态变化的基础上,观察了几种抗氧化剂对该动物血清LPO水平的影响。结果发现,小鼠接种H_(22)腹水癌细胞后,血清LPO逐日增高,至第6天达最高峰。硒(Na_2SeO_3lmg/kg)和维生素E(5mg/kg)对宿主血清LPO均有明显的降低作用。小剂量维生素E(1mg/kg)或较大剂量维生素C(300mg/kg)单独使用时,未见对LPO值有显著影响,后两剂量维生素与小剂量的硒3种抗氧化剂,任何两种合并使用时均能明显降低血清LPO水平;3种合用时,作用最显著。这几种抗氧化剂对小鼠腹水型肝癌细胞的增殖具有明显抑制作用。     

小白鼠患H_(22)型腹水癌时外周血液中白细胞过氧化氢酶活性的变化

1916年Brahn首先从尸检病例中发现;死于恶性肿瘤的患者,肝脏过氧化氢酶活性显著的降低。以后,许多研究者相继测定了啮齿类动物的二十二种移植瘤宿主、化学致癌物诱发肉瘤的大白鼠、和59例癌患者的肝脏过氧化氢酶活性,都证明恶性肿瘤时该酶活性下降是与病情变化相一致的。凡是经采用化疗、放疗、外科切除后,     

特异性转移因子对小鼠H_(22)腹水癌细胞DNA合成的抑制作用

转移因子(TF)作为细胞免疫增强剂,对恶性肿瘤患者的辅助治疗有一定的疗效,但对肿瘤细胞的生长繁殖有无直接抑制或杀灭作用报道甚少。近来报道:特异性TF(S-TF)低浓度时可以抑制癌细胞RNA和蛋白质的合成,增加细胞内cAMP含量,降低cGMP/cAMP比值。S-TF对肿瘤细胞DNA的合成是否有调节作用,迄今尚未见报道。 我们以小鼠H_(22)腹水癌细胞作为免疫     

细胞型DNA特异结合蛋白的快速分离

本文建立了一个改良的凝胶洗脱法,用以分离细胞型DNA特异结合蛋白质。采用小型平板SDS凝胶电泳分离和银染鉴定,用硝酸纤维素滤膜结合法和迁移率改变法检测DNA活性。此法具有快速、经济和保留DNA活性等优点,适用于分离纯化象细胞型DNA特异结合这样含量极微的蛋白质。     

白藜芦醇对小鼠肝癌细胞H_(22)的抑制作用

目的 :研究白藜芦醇对体外培养的小鼠肝癌细胞 H2 2 生长的影响。方法 :应用MTT法、流式细胞仪来分析白藜芦醇对 H2 2 细胞生长的影响及细胞周期的变化。结果 :白藜芦醇对 H2 2 细胞的增殖具有抑制作用 ,IC5 0为 6.1 2 mg/L ,流式细胞术证实 ,白藜芦醇能引起 H2 2 细胞 S期阻滞。结论 :白藜芦醇通过改变 H2 2 细胞的细胞周期分布来抑制其生长。     

血卟啉衍生物光辐照小鼠H_(22)肝癌病理形态及DNA定量观察

电镱观察发现,HPD光辐照后,小鼠H_(22)肝癌细胞的线粒体首先出现明显改变,继之胞核受损。光镜下瘤区呈广泛性不规则坏死,且逐渐液化,小血管明显损伤。图象分析系统肿瘤DNA定量测定显示,HPD光辐照后DNA含量逐渐减少。     

瘤苗主动免疫对小鼠腹水型肝癌(H_(22))免疫预防和治疗效应的实验研究

本文应用小鼠腹水型肝癌淋巴道转移模型(H_(22)/F23),初步探讨了瘤苗主动免疫对H_(22)/F23的免疫预防效应以及对肿瘤生长和淋巴道转移的治疗作用。CFW系小鼠经β-榄香烯和丝裂霉素C处理的H_(22)/F23瘤细胞腹腔免疫三次,末次免疫后两周分别用H_(22)/F23和H_(22)交叉进行攻击。结果表明:β-榄香烯及MMC瘤苗均能诱导不同程度的免疫保护效应,后者效果更为显著。两种方法处理的H_(22)/F23瘤苗免疫对H_(22)/F23攻击的保护效应显著低于对H_(22)的保护效应,提示高淋巴道转移株H_(22)/F23细胞的免疫原性较低,推测这可能与其转移能力的增高有一定关系。用MMC处理的瘤苗细胞和非特异性免疫制剂(CP)对带瘤小鼠进行免疫治疗的结果证示:免疫治疗不仅明显抑制肿瘤生长,并可显著降低肿瘤淋巴道转移的发生率。     

PHA对小鼠H_(22)腹水癌细胞DNA和RNA合成以及体外生长的影响

PHA对小鼠H_(22)腹水癌细胞DNA和RNA合成以及体外生长均有显著的抑制效应,且具有时间和剂量相关性。在任一时间和剂量下,PHA对癌细胞的抑制均强于正常细胞。PHA对癌细胞的凝集作用比正常细胞强32倍。     

两株转移能力不同的小鼠腹水型肝癌(H_(22))某些生物学特性的比较研究

本实验从肿瘤移植成活率、淋巴道转移率、细胞形态学、染色体组成、细胞电泳率等方面在两种不同品系的小鼠之间观察并比较了小鼠腹水型肝癌H_(22)和H_(22)/F_(20)的上述生物学特性及差别。光镜和透射电镜的观察结果提示,H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞是来源于上皮组织、分化较低的恶性肿瘤。肿瘤移植成活率和淋巴道转移率的比较观察表明,H_(22)/F_(20)瘤细胞的移植成活率和淋巴道转移率均高于H_(22)瘤细胞。染色体的分析显示H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞不仅干系细胞的众数不同(H_(22)为44,H_(22)/F_(20)为43),而且二者的标记染色体的数目及形态也有差别。细胞电泳率的测定结果表明,H_(22)/F_(20)瘤细胞的电泳率显著低于H_(22)细胞。本文讨论了H_(22)和H_(22)/F_(20)瘤细胞的上述表型差别与淋巴道转移率增高之间的可能关系,以及宿主和环境的选择作用对H_(22)瘤细胞的影响。     

特异性转移因子对小鼠H_(22)腹水癌细胞RNA合成的影响

通过小鼠H_(22)腹水癌细胞体外实验,观察到特异性转移因子(Sp-TF)及其组份Ⅱa、Ⅱb对肿瘤细胞以[~3H]-UR参入为指标的RNA合成有抑制作用,非特异的转移因子无此作用。利用mRNA、蛋白质合成抑制剂和RNA琼脂糖聚丙烯酰胺凝胶电泳及其放射性测定、尿苷激酶活性测定进一步探讨了上述抑制效应的作用机制。     

患和未患子宫内膜异位症妇女腹水中甘露糖结合凝集素(MBL)的表达

甘露糖结合凝集素(M BL)调节炎症反应,通常增强凋亡细胞的清除。观察到,在患子宫内膜异位症和未患子宫内膜异位症病例之间,腹水中M BL的浓度和总量并没有区别。患和未患子宫内膜异位症妇女腹水中甘露糖结合凝集素(MBL)的表达@Kavoussi S.K.$Department of Obstetrics and Gynec     

正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤LD_5的纯化及其性质研究

以正常C_(57)鼠肝、H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤,经一系列离子交换层析及亲和层析,获得了高纯度的LD_5。对三种组织的LD_5的部分酶动力学参数、亚基分子量及等电点的比较研究表明:H_(22)肝癌及S_(180)肉瘤的LD_5对丙酮酸的K_m值较正常C_(57)鼠肝LD_5显著降低,而LD_5含量(mg/g组织)、LD_5占LDH总活性的百分率均较正常高;三种组织的兔抗鼠LD_5间呈现交叉免疫反应。本研究所获的三种兔抗鼠LD_5抗体为进一步研究癌变时LD_5活性升高的分子机理奠定了基础。     

转移因子对~3H-Leu参入H_(22)腹水癌细胞的抑制效应

转移因子(TF)1955年问世以来,人们主要研究了它的物质组成、理化性质和免疫学方面的生物活性。在临床上,TF已用于多种类型恶性肿瘤的辅助治疗,获得一定疗效。但对其作用机理,看法不一。按Burnet肿瘤免疫治疗的近代观点,大多数人认为TF刺激癌症病人特异的细胞免疫反应。但是,体外实验表明TF并不能单独活化淋巴细胞。若将TF注入肿瘤组织局部可使肿块消退,     

不同单位保存的小鼠肝癌H_(22)细胞特性比较研究

目的　对不同单位保存的小鼠肝癌H2 2 细胞株的细胞特性进行比较研究。方法　从三个单位引进小鼠肝癌H2 2 瘤株 ,KM小鼠腹腔传代 ,然后进行染色体、DNA含量、细胞大小比较分析。结果　中国医学科学院药物研究所(北京H2 2 )、山东省医学科学院药物研究所 (山东H2 2 )和武汉大学典型培养物保藏中心 (武汉H2 2 )三个单位H2 2 瘤株的染色体均数分别为 (30 3± 8 9)条、 (33 0± 8 9)条、 (35 6± 10 1)条 ,方差分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 (P <0 0 1) ;直方图分析显示主流染色体范围分别为 2 7～ 2 9、 30～ 32、 33～ 35。武汉H2 2 瘤株细胞面积、长径、短径与北京H2 2 、山东H2 2 比较差异均有显著性。流式细胞术DNA含量分析表明北京H2 2 DNA含量最少 ,武汉H2 2 DNA含量最多 ,统计学分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 ;DNA指数结果表明武汉H2 2 为非整倍体肿瘤 ,北京H2 2 、山东H2 2 为近二倍体肿瘤。结论　不同单位保种和使用的H2 2 瘤株的细胞特性已存在显著差异。     

小鼠脾转移因子对小鼠H_(22)腹水癌细胞内环核苷酸水平的影响

从H_(22)腹水癌细胞免疫小鼠脾脏提取的转移因子,在体外可抑制H_(22)癌胞内的cAMP—PDE(cAMP-磷酸二酯酶)活性,增加细胞内cAMP含量,降低cGMP/cAMP比值。其作用活性成分主要存在于Sephadex G-25柱层析后的Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb组分中。     

转移因子中肽类复合物对H_(22)腹水癌细胞无细胞系统蛋白质合成的影响

从免疫小鼠脾转移因子(iTF)中制备出肽类复合物(P-ASP),能抑制~3H-Leu参入H_(22)腹水癌细胞(简称H_(22)细胞),这种抑制效应可能与蛋白质合成的调节有关。~3H-Leu参入试验仅代表活细胞内总蛋白质代谢速率,而不能代表活细胞内不同的蛋白质合成状况。为此,本实验进一步探讨了iTF中肽类复合物对H_(22)细胞无细胞系统蛋白质合成的影     

H_(22)小鼠肝癌细胞接种数与实验性肺转移的相关性

目的:探讨H22小鼠肝癌细胞接种数与实验性肺转移的相关性。方法:昆明种小鼠尾静脉注射不同数量(1×107、7.5×106、5×106、2.5×106、1×106)H22细胞制作实验性肺转移模型,肉眼及镜下观察肺内肿瘤的有无、大小、转移程度及分布情况,血清ICAM-1、IL-2蛋白的表达情况。结果:接种1×107细胞浓度组小鼠肺转移率、恶化程度及血清中ICAM-1蛋白表达的量均高于其他接种组(P0.01),IL-2蛋白表达低于其他接种组(P0.01),其中部分小鼠有脑转移。结论:小鼠实验性肺转移的发生率、转移程度及血清中ICAM-1、IL-2蛋白的表达量与细胞接种数变化密切相关。     

青蒿琥酯对H_(22)小鼠肝癌的体内抑瘤作用

目的:探讨青蒿琥酯对H22小鼠肝癌的体内抑瘤作用。方法:取雌性KM小鼠40只,将H22小鼠肝癌细胞接种于小鼠右前肢腋皮下,随机分为模型对照组(Control)、环磷酰胺组(CTX)及青蒿琥酯(ASUN)30、90、150mg/kg低、中、高三个剂量组,共5组,每组8只。连续腹腔注射给药8天后,剥取瘤块和脾脏,称重,计算抑瘤率。结果:青蒿琥酯30、90、150mg/kg剂量组的抑瘤率分别为38.9%、31.1%和21.5%,抑瘤率随剂量增大而降低,其中青蒿琥酯30mg/kg剂量组与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);荷瘤小鼠脾质量随青蒿琥酯剂量增加而增大。结论:青蒿琥酯对H22小鼠肝癌具有体内抑瘤作用。     

小鼠肝癌H_(22)细胞与正常肝细胞低密度脂蛋白受体的分析研究

为观察小鼠肝癌Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的结合，并对这两种细胞内移及降解人ＬＤＬ的功能进行分析比较，用１２５Ｉ标记ＬＤＬ，对上述细胞ＬＤＬＲ进行受体饱和分析和单点分析。结果表明：（１）Ｈ２２细胞及正常肝细胞可通过其ＬＤＬＲ结合、内移、降解人ＬＤＬ；（２）Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的亲和性和特异性相同，但Ｈ２２细胞Ｂｍａｘ明显增多；（３）两种细胞对人ＬＤＬ的非特异性结合差异不明显，内移及降解人ＬＤＬ的能力亦相同。提示小鼠肝癌Ｈ２２细胞ＬＤＬＲ数目增多，亲和性及特异性未变，对ＬＤＬ的内移和降解功能亦未改变。