基于重组优势多表位抗原的梅毒间接酶联免疫吸附试验与梅毒螺旋体血凝试验和甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体抗体的比较研究

目的：建立操作简便、特异性好、敏感性高的血清梅毒抗体的间接酶联免疫吸附试验（ELISA）。方法：通过计算机分析选择梅毒螺旋体优势抗原表位，构建了梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)表达载体，转化宿主菌HB101进行表达，纯化获得高纯度融合抗原。在此基础上，以纯化抗原包被酶联板，建立检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法。利用该方法与梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）和甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）同时检测了126例梅毒可疑血清样本，对检测结果进行了比较研究。结果：梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原（rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)在大肠杆菌中获得了高效表达，并成功建立了检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法及试剂。对126例梅毒可疑血清样本的检测结果，ELISA、TRUST、TPHA的检出阳性率分别为75．40％（95／126）、72．22％（91／126）、70．63％（89／126）， 其中TRUST有29例，TPHA有6例为可疑阳性。TPHA检测的6例可疑阳性中，有5例ELISA、TURST均为阳性；而TRUST测出的29例可疑样品中，仅7例ELISA、TPHA阳性。结论：多表位嵌合抗原ELISA试剂在特异性、敏感性与TPHA法相近，但明显优于TRUST法。     

两种检测梅毒螺旋体抗体方法的比较

近年来 ,我院以酶联免疫吸附试验 (EL ISA)法及甲苯胺红卡片试验 (TRU ST)分别检测了 34例临床梅毒患者、6例质控梅毒阳性及 6 10 9例术前验血患者血清 ,旨在比较二者梅毒螺旋体的敏感性及特异性 ,现将结果报告如下。一般资料 :检测血清共包括三种 :38份血清为我院 1998～2 0 0 3年 6 10 9例患者输血前检查梅毒螺旋体抗体的阳性标本 ,均经两种以上检测方法验证 ;34份为临床确诊梅毒患者的阳性标本 ;6份为临检部提供的质控阳性血清。方法 :TRUST采用甲苯胺红不加热血清凝集法 ;EL ISA法在包被抗原的微孔中加入 5 0 μl待测血清和 5 0…     

酶联免疫吸附实验检测麻疹IgM抗体实验室工作体会

目的探讨麻疹IgM抗体检测过程中的影响因素,在消灭麻疹病毒方面进行有效积极的监测工作,对疑似、确诊的麻疹病例开展准确、及时的疾病监测。方法对疑似、确诊的麻疹病例进行血液采集,分离血清,使用酶联免疫吸附法进行麻疹IgM抗体检测。结果酶联免疫吸附实验中,从试剂盒的选择开始直至最后的结果观察,都存在主观或客观的影响。结论定期使用质控血清,进行实验室内部质量控制,通过制作质控图以及不断地进行人员培训,能有效地避免一些客观因素的影响。     

潜在血源传播梅毒患者血清抗体检测方法的筛选

目的 筛选潜在血源传播梅毒患者血清抗体检测方法。方法 采用回顾性研究,以市售ELISA试剂盒和rTpN15-17-47-ELISA对24 580例潜在的血源传播患者作梅毒筛选,再对上述任一试验结果阳性者血清行ELISA、rTpN15-17-47-ELISA双孔重复试验与TPPA确诊检测,确定ELISA法和rTpN15-17-47-ELISA法的灵敏度;同时以ELISA法和rTpN15-17-47-ELISA法检测类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)等免疫系统疾病患者和健康人血清标本,以判别上述方法的特异性。结果 市售ELISA试剂盒和rTpN15-17-47-ELISA阳性检出率分别为5.9%(1 453/ 24 580)和6.1%(1 501/24 580),ELISA试剂盒和rTpN15-17-47-ELISA的灵敏度分别为97.2%(1 439/1 480)和99.3%(1 470/1 480)。结论 对潜在血源传播的梅毒患者以rTpN15-17-47-ELISA具有高灵敏度的特异性且成本低廉,有推广价值。     

基于重组优势多表位抗原的梅毒间接酶联免疫吸附试验与梅毒螺旋体血凝试验和甲苯胺红不加热血清试验检测梅毒螺旋体抗体的比较研究

目的 建立操作简便、特异性好、敏感性高的血清梅毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法 通过计算机分析选择梅毒螺旋体优势抗原表位,构建了梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)表达载体,转化宿主菌HB101进行表达,纯化获得高纯度融合抗原。在此基础上,以纯化抗原包被酶联板,建立检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法。利用该方法与梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)同时检测了126例梅毒可疑血清样本,对检测结果进行了比较研究。结果 梅毒螺旋体多表位优势嵌合抗原(rTpN15-TpN17-TpN42-TpN47)在大肠杆菌中获得了高效表达,并成功建立了检测血清中梅毒抗体的间接ELISA法及试剂。对126例梅毒可疑血清样本的检测结果,ELISA、TRUST、TPHA的检出阳性率分别为75.40％(95/126)、72.22％(91/126)、70.63％(89/126),其中TRUST有29例,TPHA有6例为可疑阳性。TPHA检测的6例可疑阳性中,有5例ELISA、TRUST均为阳性;而TRUST测出的29例可疑样品中,仅7例ELISA、TPHA阳性。结论 多表位嵌合抗原ELISA试剂在特异性、敏感性与TPHA法相近,但明显优于TRUST法。     

电化学发光免疫测定与酶联免疫吸附试验检测抗环瓜氨酸多肽抗体比较

目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)和电化学发光免疫测定(ECLIA)检测抗环瓜氨酸多肽抗体(抗CCP抗体)的结果,并评价两种方法检测结果的一致性。方法应用ELISA和ECLIA同时检测145例类风湿关节炎(RA)患者(含25例早期RA患者)、155例其他风湿免疫性疾病患者(包括50例骨性关节炎、35例强直性脊柱炎、30例干燥综合征、20例系统性红斑狼疮、10例原发性胆汁性肝硬化和10例系统性硬化症)、50例其他疾病患者和50例健康对照者共400例血清样本的抗CCP抗体含量。用SPSS13.0统计软件对结果进行一致性、敏感性及特异性分析,并分别对3例ECLIA检测高浓度抗CCP抗体血清样本做1∶20、1∶30、1∶40、1∶80和1∶160稀释后进行线性分析。结果 ELISA和ECLIA检测400例血清样本抗CCP抗体的一致性极好;两种方法检测RA患者抗CCP抗体的敏感性和特异性近似,ECLIA分别为77.24%和98.00%,ELISA分别为76.55%和98.00%。3例ECLIA检测高浓度抗CCP抗体血清样本线性回归分析结果显示,样本浓度稀释至1∶160,线性R2值均>0.9。结论 ECLIA和ELISA检测抗CCP抗体具有较好的一致性,且ECLIA线性范围较宽,ECLIA检测抗CCP抗体具有良好的应用前景。     

从业人员健康体检血清中梅毒抗体检测结果分析

人感染梅毒后，体内能产生两种抗体，一类是针对梅毒螺旋体产生的特异性抗体，即抗梅毒螺旋体抗体（IgG和IgM），另一类是具有抗体性质的反应素。为了解健康人群的感染情况，就健康从业人员的血清进行梅毒的初筛（快速血浆反应素试验，RPR）和确证实验（梅毒螺旋体明胶凝集试验，TPPA），并对初筛阳性血清滴度与确证实验结果的关系进行分析和探讨。     

梅毒螺旋体IgM抗体检测在梅毒诊断中的意义

目的 探讨检测血清梅毒螺旋体IgM抗体在梅毒诊断中的临床意义.方法 北京佑安医院性病门诊就诊者中已确诊为不同临床分期梅毒患者207例,治疗前采用免疫印迹法(TP-IgM-WB)检测血清中的IgM抗体同时进行快速血浆反应素环状卡片试验(RPR).患者规范治疗后,每3个月复查1次,1年后每半年复查1次,随访两年.首次RPR...     

母婴配对血清轮状病毒IgM抗体研究

了解孕妇ＲＶ感染情况及对胎儿的影响。方法以间接ＥＬＩＳＡ方法随机检测２００例孕妇血清及配对新生儿脐血的ＲＶ ＩｇＭ抗体。结果孕妇血清ＲＶ ＩｇＭ阳性率为１２．５％;新生儿脐血ＲＶ ＩｇＭ阳性率为１．５％,结论孕妇易感ＲＶ,存在ＲＶ宫内感染。     

几种弓形虫IgM酶联免疫吸附试验的建立及评估

目的　建立和评估几种弓形虫ELISA -IgM的检测方法。 方法　应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)的原理 ,建立四种检测方法 ,并进行比较。结果　检测 373例孕妇及正常献血员血清标本 ,方法Ⅰ、方法Ⅱ、方法Ⅲ、方法Ⅳ的阳性率分别为3 8%、3 2 %、2 9%、2 4 %。结论　利用抗人IgM、弓形虫抗原和抗体建立的捕获法具有快速、敏感、特异的特点 ,适合于育龄妇女的筛查和早期诊断。     

流行性出血热患者唾液中特异性IgM抗体检测

本文报道应用IgM—抗体捕捉ELISA法检测流行性出血热患者唾液中特异性IgM抗体的结果。该法特异、敏感。检测出EHF患者发病第一天的唾液IgM抗体,阳性率92.86％(26/28)。其中21例在第15～20病日同时采集血清和唾液标本,检测结果唾液IgM阳性率80.95％(17/21)、将血清唾液IgM抗体均阳性的标本5例经2—ME试验,加热试验证明了其特异性。唾液标本较血清取材更方便、简单、成本低。     

间接ELISA法检测血清隐孢子虫抗体IgG及IgM的实验研究

目的　间接ELISA法检测小鼠隐孢子虫抗体诊断隐孢子虫病的敏感性和实用性。方法　经过方阵滴定检测确定最佳的酶标抗体的工作浓度和最佳的抗原包被量 ,进一步测定血清隐孢子虫抗体的光密度 ,并设立阴性对照组比较。结果　 10、5 0、10 0、5 0 0个卵囊剂量组和阴性对照组比较均具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;将剂量对数与OD490 值作相关分析 ,IgG的相关系数r=0 .990 ,P <0 .0 5 ;IgM的相关系数r=0 .95 4 ,P <0 .0 5 ;各组剂量对数与OD490 作回归分析 ,呈线性关系 ,P <0 .0 5。结论　间接ELISA法检测血清隐孢子虫抗体具有较高的敏感性和特异性 ,适合常规的流行病学调查     

应用捕获ELISA检测肾综合征出血热患者尿液中特异性IgM抗体

目的 检测紧综合征出血热患者尿液中特异性IgM抗体,研究早期诊断方法。方法：用MacELISA法检测不同病日HFRS病人尿液中特异性IgM抗体。结果：HFRS病人尿夜中特异性IgM抗体总阳性率为76.47%,第3病日即可出现阳性,7－9病日阳性率可达83.87%,与同期HFRS病人血清抗体检测对比无显著性差异（P＞0.05）。结论：用MacELISA检测HFRS尿液中特异性IgM抗体敏感性高,特异性强,适合早期诊断。     

2005～2012年甘肃陇南市麻疹疑似病例IgM抗体检测结果分析

目的检测麻疹疑似病例血清中麻疹IgM抗体,为麻疹的预防和控制提供科学依据。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）对2005～2012年甘肃陇南市839例麻疹疑似病例的血清标本进行IgM抗体检测,数据用Spss19．0软件进行统计学分析。结果共检出麻疹IgM抗体阳性534份,阳性率63．6％;每年都有病例报告,其中2008年阳性率最高,为82．6％;各区（县）均检出阳性病例,不同地区阳性检出率差异有统计学意义（χ2=86．917,P〈0．05）;发病人群集中在8月龄。25岁年龄段,占阳性病例总数的74．5％;麻疹每月均有发病,但高峰在3～7月。结论检测麻疹IgM抗体对病例的早发现、早诊断、早治疗、及时采取控制措施起到关键作用,各级医疗机构要重视疑似病例的血清采集工作,同时应大力加强麻疹基础免疫和重点人群的强化免疫工作;高度重视查漏补种工作,消除免疫空白点,提高免疫接种的覆盖率和及时率;加强健康教育工作,提高麻疹预防知识的知晓率。     

High sensitivity of a novel ELISA for anti-M2 in primary biliary cirrhosis

The use of an ELISA for the detection of anti-M2, a specific autoantibody in primary biliary cirrhosis (PBC), has been common in Japan. However, there are some problems in the sensitivity of this ELISA, especially in PBC patients showing antimitochondrial antibody (AMA)-negative sera or low AMA titers by immunofluorescence. Recently, a new ELISA for anti-M2 was developed, using porcine heart mitochondrial protein as the antigen. We report here comparative studies of the new and the former anti-M2 ELISAs. Porcine heart mitochondrial protein was prepared and used as the antigen for the new ELISA for anti-M2. Sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) of this protein showed three major M2 antigen proteins. As the second antibody, peroxidase-conjugated anti-human mouse monoclonal IgM, in addition to monoclonal IgG, was included. The sera of 171 PBC patients were examined. As controls, we examined the sera of 167 non-PBC patients and the sera of 115 normal controls. The cut-off index was set at 10 U/ml, based on the results for the normal controls. No sera from the non-PBC patients or the normal controls were positive for anti-M2 by either the new or the former ELISA. However, the positivity rate for anti-M2 in PBC patients with the new ELISA was 78%; in contrast, that with the former ELISA was only 54%; this difference was significant (P = 0.00001). In particular, in 65 patients showing AMA titers of 1 : 20 or less, the positivity rate with the new ELISA was 51%; in contrast, that with the former ELISA was only 17%. As the sensitivity of the new ELISA is significantly higher than that of the former ELISA, especially for sera from patients showing AMA-negativity or low titers of AMA, the new ELISA is considered to be more effective than the former ELISA for use in anti-M2 screening assays in patients with PBC. Received: May 17, 2000 / Accepted: September 1, 2000     

ELISA法检测尿液中HIV-1抗体的研究分析

目的 探讨艾滋病病毒(HIV)感染者晨尿、非晨尿和血液中HIV-1抗体检测结果的一致性，引进尿液HIV-1抗体检测方法。方法 平行采集吸毒人员血液和尿液标本，分别用血液和尿液酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HIV抗体，阳性血清标本送云南省疾病预防控制中心确认。结果 检测483人，血检阳性91人，晨尿检测阳性96人，两种方法一致性98．96％。对应晨尿阳性者采集非晨尿和阴性对照尿液标本各91份(其中血液标本检测HIV抗体阳性者86份)，检出阳性86份，阴性5份，非晨尿标本与血液标本检测结果一致。以血液标本检测结果为准，晨尿标本检测HIV-1抗体的灵敏度100％，特异度98．72％；非晨尿标本检测HIV-1抗体的灵敏度和特异度均为100％。结论 尿液ELISA法检测HIV-1抗体结果可靠，非晨尿可代替晨尿作HIV-1抗体筛查。     

快速酶联免疫吸附试验检测TORCH-IgM抗体的研究

目的建立快速检测TORCH-IgM抗体的方法。方法利用聚乙二醇（PEG）能加速抗原、抗体反应的特点,在常规间接ELISA法检测TORCH—IgM抗体基础上,在样本稀释液、酶标记物稀释液中各加入3％PEG,以缩短反应时间。结果温育时间缩短到15min（37℃）的快速ELISA法对检测人TORCH—IgM抗体强阳性、弱阳性、阴性标本具有稳定性好,精密性、特异性强的特点;稀释液中不加PEG的常规15min法,采用37℃、15min试验条件,可能会造成弱阳性标本漏检情况。结论快速ELISA法的建立为TORCH病原体感染的快速检测和流行病学调查提供了新的手段。