抑制JAK/STAT信号通路对缺血再灌注大鼠心肌的影响

目的探讨抑制JAK/STAT信号通路对缺血再灌注大鼠心肌的影响。方法以穿线法结扎左冠状动脉制备心肌缺血再灌注模型。健康Wistar大鼠24只随机分为4组,假手术组(C)、缺血再灌注组(I/R)、AG490组(I/R+AG490)、RMP组(I/R+RMP),每组6只。以Western印迹法检测大鼠心肌JAK2、STAT1、STAT3的表达。以原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞的凋亡。结果缺血再灌注后p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3的表达明显增加,且p-STAT1的表达较p-STAT3多,凋亡心肌细胞数增多,应用抑制剂AG490后p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3的表达减少,凋亡的心肌细胞数也明显减少,应用雷帕霉素后p-JAK2、p-STAT1的表达无改变,p-STAT3的表达减少,凋亡细胞数较再灌注组略有增多,但无统计学意义。结论 JAK/STAT信号通路参与了心肌缺血再灌注损伤,应用AG490可减轻心肌细胞损伤,减少心肌细胞凋亡。     

雷公藤多苷通过JAK2/STAT3信号通路减轻溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞凋亡及炎症的实验研究

目的研究雷公藤多苷(TG)通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜细胞凋亡及炎症的调节作用。方法将SD大鼠分为对照组、UC组、TG组、AG490组,UC组、TG组、AG490组采用三硝基苯磺酸/乙醇灌肠的方式建立UC模型,TG组给予TG灌胃干预,AG490组给予JAK2/STAT3抑制剂AG490干预。检测肠黏膜细胞凋亡率、凋亡基因及JAK2/STAT3表达、炎症细胞因子含量。结果 UC大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显高于对照组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显低于对照组(P 0. 05); TG组大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显低于UC组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显高于UC组(P 0. 05)。AG490组大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9及Caspase-3的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显低于UC组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显高于UC组(P 0. 05)。结论 TG能够通过JAK2/STAT3信号通路减轻UC大鼠肠黏膜细胞的凋亡及炎症。     

川芎嗪对刀豆蛋白A诱导的小鼠肝纤维化JAK2/STAT3信号通路的影响

目的为探究JAK2/STAT3信号通路与炎性因子白细胞介素6、1β、10(interleukin-6、1β、10)的关系,IL-6、IL-1β、IL-10是否参与刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠肝纤维化过程以及川芎嗪对其的影响。方法 BALB/C小鼠随机分为5组,正常对照组(A组)10只;ConA模型(B组)15只;川芎嗪低剂量(100 mg/kg)组(C组)15只;川芎嗪中剂量(200 mg/kg)组(D组)15只,川芎嗪高剂量(800 mg/kg)组(E组)15只。通过实时荧光定量PCR检测IL-6mRNA、IL-1βmRNA和IL-10mRNA的表达水平;Western-blot检测JAK2、STAT3和p-JAK2、p-STAT3的表达情况。结果与模型组相比,小鼠经不同剂量川芎嗪干预8周后,IL-6mRNA和IL-1βmRNA表达水平均降低,且与给药剂量呈相关性;IL-10mRNA表达水平升高,且与给药剂量呈相关性;p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均降低,且下降程度与给药呈剂量相关性;JAK2和STAT3蛋白表达变化不明显。结论川芎嗪可能通过JAK2/STAT3信号通路及炎性因子IL-6、IL-1β、IL-10对ConA诱导的小鼠肝纤维化产生保护作用。     

IL-27调控JAK/STAT通路在博来霉素诱导肺纤维化中的作用

目的探讨白细胞介素(IL)-27是否通过酪氨酸激酶(JAK)/信号转导与转录激活子(STAT)信号通路抑制肺纤维化。方法将40只雄性C57/BL6小鼠随机分为空白对照组(A组)、博来霉素(BLM)组(B组)、BLM+IL-27组(C组)和BLM+IL-27抗体组(D组),每组10只。于造模后第7、28天每组各处死5只小鼠,取右肺组织用Western印迹方法检测JAK2、STAT1、STAT3、STAT5及SOCS3蛋白的表达。结果 BLM诱导肺纤维化模型中,7、28 d肺组织均有p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5表达量升高,IL-27治疗后降低SOCS3的表达;D组p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5表达量在造模后7、28 d均最高,C组在造模后7 d表达量少于B组。结论外源性IL-27可能通过抑制JAK/STAT通路相关蛋白的磷酸化减轻肺纤维化。     

马钱子碱对人结肠癌细胞HT-29增殖与凋亡的影响及相关机制

目的探讨马钱子碱对人结肠癌细胞HT-29增殖与凋亡的影响及其分子机制。方法以人结肠癌细胞HT-29为研究对象,将其按不同处理方式分为空白对照组,马钱子碱(1μmol/L)处理组、白细胞介素(IL)-6(100μg/L)处理组、马钱子碱联合IL-6处理组。CCK8法检测细胞增殖情况;Annexin-V-PI双染法检测细胞凋亡情况;细胞免疫荧光染色检测p-STAT3蛋白表达的位置和强度,Western印迹法检测凋亡相关蛋白表达量。结果马钱子碱处理组、马钱子碱联合IL-6处理组均可明显抑制细胞增殖且马钱子碱处理组细胞抑制率明显高于马钱子碱联合IL-6处理组(P<0.05)。马钱子碱处理组、马钱子碱联合IL-6处理组细胞凋亡率明显高于空白对照组且马钱子碱处理组细胞凋亡率明显高于马钱子碱联合IL-6处理组(P<0.05);IL-6处理组细胞凋亡率与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。马钱子碱处理组p-STAT3比值明显低于空白对照组(P<0.05);同时马钱子碱浓度越高p-STAT3蛋白表达量越低。马钱子碱处理组p-STAT3和抗凋亡BCL-2蛋白表达量明显低于空白对照组,促凋亡蛋白Bax、执行凋亡的DNA修复酶Parp表达量明显高于空白对照组(P<0.05);IL-6处理组的p-STAT3蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05);马钱子碱联合IL-6处理组BCL-2蛋白表达量明显高于马钱子碱处理组,而Bax和DNA修复酶Parp表达量明显减少(P<0.05)。结论马钱子碱可有效抑制结肠癌细胞HT-29增殖并促进凋亡,其主要通过调节IL-6/STAT3信号通路,抑制细胞中STAT3磷酸化来实现。     

胆瘀方药液对大鼠主动脉内皮细胞脂质泡沫化的抑制作用及其机制

目的 探讨胆瘀方药液对氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）诱导大鼠主动脉内皮细胞（RAECs）脂质泡沫化的抑制作用及其可能的机制。方法 将RAECs随机分为对照组、模型组、胆瘀方低剂量组、胆瘀方中剂量组、胆瘀方高剂量组及阿托伐他汀组，除对照组外，其余五组均灌胃给予200μg/mL的Ox-LDL作用72 h，胆瘀方低、中、高剂量组及阿托伐他汀组分别灌胃给予50、100、200μg/L胆瘀方药液及阿托伐他汀300μg/L。各组分组处理后24、48、72 h，采用CCK-8法检测细胞增殖能力；取分组处理72 h的各组细胞，油红O染色观察细胞脂质泡沫化情况，ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)蛋白及细胞上清液丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）表达，二羟甲基荧光素氧化荧光反应检测细胞活性氧（ROS）含量，实时荧光定量PCR法检测细胞蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)mRNA相对表达量，Westen blotting法检测细胞JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量，并计算p-JAK2/JAK2、...     

JAK-STAT信号通路阻断剂AG490对肺癌细胞凋亡的影响

目的探讨酪氨酸激酶(JAK)-信号转导及转录激活因子(STAT)信号转导通路阻断剂α-氰基-(3,4-羟基)N-苄苯乙烯胺(AG490)对肺癌Lewis细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法不同浓度AG490(0、20、40、80、160μmol/L)作用于肺癌Lewis细胞24、48 h,噻唑蓝(MTT)实验观察各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测0、40、80μmol/L组细胞凋亡率,Western印迹检测0、80μmol/L组细胞STAT3、STAT5、Survivin蛋白表达。结果 AG490作用24和48 h,与0μmol/L组相比,20、40、80、160μmol/L组细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.05);与20μmol/L组相比,40、80和160μmol/L组显著增高(P<0.05),40μmol/L组与80、160μmol/L组差异显著(P<0.05)。20、40μmol/L组在24 h时细胞增殖抑制率显著低于48 h(P<0.05),80和160μmol/L组在24 h时与48 h时无统计学差异(P>0.05)。作用24和48 h时,40、80μmol/L组细胞凋亡率显著高于0μmol/L组(P<0.05),80μmol/L组显著高于40μmol/L组;40、80μmol/L组作用24 h的细胞凋亡率显著低于48 h(P<0.05)。80μmol/L组细胞中STAT3、STAT5、Survivin的表达量均显著低于0μmol/L组(P<0.05)。结论一定浓度和时间范围内,AG490可显著抑制细胞的增殖,促进其凋亡,阻断JAK-STAT通路中STAT3、STAT5蛋白的表达水平,进而降低其下游凋亡抑制蛋白Survivin的表达可能是其作用机制之一。     

苦参碱调控JAK2/STAT3通路影响肝癌细胞迁移、侵袭和EMT的作用研究

目的 探究苦参碱通过介导Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路对肝癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 将体外培养人肝癌细胞MHCC97-H分为：对照组(不做处理),苦参碱组(0.125、0.25、0.5、1和2 mg/mL苦参碱),AG490组(10μmol/L JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490),抑制剂组(0.5 mg/mL苦参碱和10μmol/L AG490),干预24 h。MHCC97-H细胞活力采用细胞计数试剂盒法测定;细胞迁移和侵袭能力采用Transwell小室法测定;EMT相关因子mRNA表达采用RT-qPCR法测定;蛋白水平采用蛋白免疫印迹法测定。结果 与对照组相比,0.125、0.25和0.5 mg/mL苦参碱组细胞活力无显著影响(P>0.05),1和2 mg/mL苦参碱组和AG490组细胞活力显著降低(P<0.05),其中0.5 mg/mL苦参碱组MHCC97-H细胞迁移数、侵袭数和p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、N-钙粘蛋白、波形蛋白及纤连蛋白表达水平显著降低(P<...     

尼古丁通过抑制JAK/STAT通路对HUVECs增殖和凋亡的影响研究

目的探究尼古丁通过抑制JAK/STAT通路促进人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和凋亡的作用机制。方法将HUVECs分为4组,即对照组、尼古丁1组、尼古丁2组、尼古丁3组,分别在培养基中加入终浓度为0、10-8、10-7、10-6 mol/L的尼古丁培养24 h。显微镜观察细胞形态。CCK-8和流式细胞术分别用于检测细胞活力和凋亡。Western blot和PCR分别用于检测蛋白和mRNA的表达水平。结果显微镜观察尼古丁会使HUVECs呈现萎缩状态。尼古丁可剂量依赖性的抑制HUVECs活力,并且剂量依赖性的促进HUVECs凋亡。尼古丁可显著的抑制p-JAK/t-JAK和p-STAT/t-STAT的水平。尼古丁可显著的提高Caspase-3和Bax mRNA的水平,抑制Bcl-2 mRNA的水平。结论尼古丁可能通过下调JAK/STAT通路调节凋亡相关蛋白的表达,抑制HUVECs活力并促进其凋亡。     

姜黄素对大鼠脑缺血后Janus蛋白酪氨酸激酶2信号转导和转录激活子3信号通路的影响

目的探讨姜黄素对大鼠脑缺血损伤后Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路的影响。方法将68只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血组、姜黄素组(尾静脉注射姜黄素40mg/kg)和对照组(注射等量生理盐水),每组17只,后3组建立大鼠局灶性脑缺血模型,观察各组大鼠神经行为学变化,ELISA检测大鼠脑组织TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达,Western blot检测大鼠脑组织JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达。结果与脑缺血组比较,姜黄素组大鼠神经行为学评分减低[(1.53±0.62)分vs(2.94±0.87)分,P0.05];与脑缺血组比较,对照组TNF-α、IL-1β和IL-6无明显变化(P0.05),姜黄素组大鼠TNF-α[(57.63±10.27)ng/L vs(99.35±8.97)ng/L]、IL-1β[(33.67±9.10)ng/L vs(58.43±7.22)ng/L]和IL-6[(31.97±6.91)ng/L vs(49.23±6.28)ng/L]表达降低(P0.01),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3相对含量及HMGB1表达降低(P0.05,P0.01)。结论姜黄素可保护大鼠缺血后脑损伤,其机制可能是通过抑制JAK2/STAT3信号通路,减少HMGB1表达,减轻炎性反应。     

褪黑素基于JAK-STAT通路对MPP~+诱导的PC12细胞炎性损伤的影响

目的研究褪黑素(MT)通过调节Janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK-STAT)通路对神经毒素1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶脱氢物(MPP~+)诱导的PC12细胞炎性损伤的影响。方法将嗜铬细胞瘤(PC12)分为四组:对照组、模型组(MPP~+ 200μmol/L)、治疗组(MPP~+ 200μmol/L+MT 800μmol/L)、MT组(MT 800μmol/L)。观察不同时间点细胞生长、形态变化,CCK-8法检测细胞活力,免疫细胞化学染色法或Western印迹检测白细胞介素(IL)-17A、IL-1β、IL-6、p-STAT1、p-STAT3、STAT1和STAT3的表达。结果对照组细胞为梭形,给予MPP~+,细胞呈椭圆形,细胞聚集且胞体内出现空泡,部分细胞折光性增强,且细胞数量显著减少;而治疗组细胞状态有所好转。模型组细胞活力显著低于对照组(P0.05),而MT可明显缓解MPP~+损伤所致的细胞活力下降(P0.05)。给予MPP~+,细胞内IL-17A、IL-1β、IL-6、p-STAT1和p-STAT3表达明显升高(P0.05),MT干预后上述指标表达显著降低(P0.05),各组间STAT1、STAT3表达差异无显著性。MT组与对照组相比,各项检测无显著性差异。结论 MT可明显抑制MPP~+所致PC12的IL-1β、IL-6、IL-17A的上升,其机制可能与通过抑制JAK-STATs信号通路中p-STAT1和p-STAT3的激活有关。     

紫杉醇及多西他赛对肺癌细胞增殖抑制的效果及JAK/STAT相关机制

目的分析紫杉醇及多西他赛对肺癌细胞增殖抑制的效果及相关机制。方法肺癌细胞H1299随机分为对照组、紫杉醇组(10μmol/L)、多西他赛组(10μmol/L)及紫杉醇+多西他赛组(10μmol/L+10μmol/L),各组细胞经相应药物处理后,MTT法检测药物对细胞的增殖抑制率、荧光定量PCR法及免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白及JAK-STAT通路蛋白JAK1、JAK3、STAT1和STAT3的表达变化。结果与对照组相比,紫杉醇组、多西他赛组及紫杉醇+多西他赛组细胞的增殖受到明显抑制,紫杉醇+多西他赛组细胞增殖抑制率最高,且与其他两组比较差异显著(P0.01);同时,紫杉醇、多西他赛和二者合用均能够有效增强细胞凋亡蛋白Bax、Caspase3和Caspase9及JAK1、JAK3、STAT1和STAT3表达,抑制Bcl2蛋白表达,且二者联用的作用效果明显优于二者单独使用的作用效果(P0.01)。结论紫杉醇和多西他赛联用能有效抑制肺癌细胞增殖、促进其凋亡,可能与其激活细胞内JAK/STAT信号转导通路相关。     

毛钩藤碱调控IL-6/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞增殖、迁移及诱导细胞凋亡的体外实验

目的探讨毛钩藤碱对结肠癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法用终浓度为150μmol/L、300μmol/L、600μmol/L的毛钩藤碱处理结肠癌细胞SW480,未经任何处理的SW480细胞作空白对照(NC)组,DMSO处理SW480细胞作为DMSO组,5 mg/L紫杉醇处理SW480细胞作为TAX 5 mg/L组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测白细胞介素(IL)-6、信号转录和转录活化因子(STAT)3和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达水平;Western印迹检测蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6的含量。结果不同浓度的毛钩藤碱可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡;抑制细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)2蛋白的表达,促进半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白的表达;抑制IL-6、STAT3和VEGF的表达。结论毛钩藤碱可抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能是与IL-6/STAT3相关,将为结肠癌的治疗提供新思路和新靶点。     

微小RNA-101对胰腺癌PANC1细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其作用机制

目的探讨微小RNA-101(miR-101)对胰腺癌PANC1细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其可能的作用机制。方法取对数生长期PANC1细胞分为5组, 除对照组外, 分别为转染miRNA模拟体的阴性对照(mimic-NC)组、转染miRNA-101模拟体(miR-101 mimic)组、转染miRNA抑制剂的阴性对照(inhibitor-NC)组、转染miRNA-101抑制剂(miR-101 inhibitor)组。采用qRT-PCR检测miR-101相对表达水平, MTT法检测细胞增殖率, 流式细胞仪检测细胞凋亡率, Transwell实验检测细胞侵袭能力, qRT-PCR和蛋白质免疫印迹法检测IL-6、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3 mRNA蛋白的相对表达水平, 双荧光素酶报告基因法检测miR-101与IL-6的靶向关系。结果转染48 h后, 对照组、mimic-NC组、miR-101 mimic组、inhibitor-NC组、miR-101 inhibitor组PANC1细胞miR101表达水平分别为1.98±0.12、2.01±0.18、6.73±0.23、2...     

STAT3加重TGF-β1诱导的肝癌细胞上皮-间质转化的发生

目的探讨IL-6/JAK/STAT3和Smad3/TGF-β1信号通路在肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)发生过程中的作用。方法分别予TGF-β1、IL-6、AG490刺激人肝癌细胞株(HepG2、Bel7402、MHCC97H、HCCLM3)后,qPCR检测Snail、STAT3的mRNA表达水平,蛋白质免疫检测p-STAT3/STAT3、p-Smad3/Smad3、TGF-β1以及EMT相关分子标志物Snail、E-Cadherin、Vimentin的蛋白表达水平。结果 TGF-β1可以诱导HepG2细胞EMT的发生,下调E-Cadherin的表达,上调Vimentin、Snai的表达。IL-6在肝癌细胞中通过刺激STAT3,激活Smad3/TGF-β1通路,进而上调EMT相关分子标志物Snail、Vimentin的表达。AG490(一种JAK2的特异性抑制剂)抑制p-STAT3/STAT3、p-Smad3及EMT相关分子标志物Snail的表达。结论STAT3在TGF-β1诱导的肝癌细胞EMT发生过程中作为一个正向调控因子,IL6/JAK/STAT3和Snail/Smad3/TGF-β1信号通路协同促进肝癌细胞EMT的发生。     

AG490对胃癌细胞株SGC-7901细胞周期、凋亡和STAT3表达的影响

背景：JAK2酪氨酸激酶特异性抑制剂AG490可抑制胃癌细胞生长,但目前对其作用机制还知之甚少。目的：探讨AG490对胃癌细胞株SGC-7901细胞周期、凋亡和STAT3 mRNA表达的影响。方法：以不同浓度AG490处理胃癌细胞株SGC-7901,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,RT-PCR法检测STAT3 mRNA表达。结果：胃癌细胞株SGC-7901经AG490作用48 h后,100μmol/L组的S期、G2/M期细胞比例显著增加（P〈0.01）,1μmol/L组和10μmol/L组仅G2/M期细胞比例显著下降（P〈0.05）。AG490作用48h后,各浓度组的细胞凋亡率均显著增加（P〈0.01）。AG490作用24 h和48 h后,各浓度组的STAT3 mRNA表达均无明显变化（P〉0.05）。结论：AG490可影响胃癌细胞株SGC-7901的细胞周期并诱导细胞凋亡,但不影响STAT3 mRNA的表达。     

结直肠癌细胞周期的研究

目的探讨转录活化因子3(STAT3)信号通路在纳米硒对结直肠癌细胞的作用。方法用1、3、6、12μmol/L纳米硒的细胞生长液作用于结直肠癌细胞HT29,SW620,SW480,作用6、12、24、48、72、96 h后MTT检测细胞增殖情况。流式细胞仪检测结直肠癌细胞SW480经4μmol/L纳米硒作用48 h后细胞凋亡和细胞周期。Western blot检测结直肠癌细胞SW480经4μmol/L纳米硒作用48 h后细胞中STAT3、p-STAT3、Cyclin A1的表达水平。结果纳米硒对结直肠癌细胞增殖均有抑制作用,且随作用时间和浓度增加而增加。结直肠癌细胞HT29,SW620,SW480经纳米硒作用48 h后的半数抑制浓度分别为:(6.8±0.6)、(10.4±1.1)、(4.2±0.4)μmol/L。4μmol/L纳米硒作用后的SW480细胞凋亡率明显高于0μmol/L(P0.01)。纳米硒作用后的结直肠癌细胞中Bax表达增多,Bcl-2表达降低,G0/G1期细胞百分比与0μmol/L组相比明显降低(P0.01),S期、G2/M期细胞百分比明显增高(P0.01)。4μmol/L纳米硒作用后的结直肠癌细胞中p-STAT3、Cyclin A1水平与0μmol/L相比显著下降(P0.01),而STAT3表达水平无变化。结论纳米硒可以阻断STAT3信号通路抑制结直肠癌细胞增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期。     

JAK/STAT信号途径在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的观察JAK/STAT信号途径对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),分别给予高糖和JAK抑制剂AG490干预,Western印迹检测α-SMA、E-Cadherin及STAT1、STAT3、p-STAT1和p-STAT3的表达;ELISA法测定上清液中TGF-β1、I型胶原的分泌,RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达。结果与低糖组比较,高糖培养的HKC中α-SMA、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达明显上调;E-Cadherin表达明显下调;TGF-β1mRNA表达增加;上清液中TGF-β1、Ⅰ型胶原增加。AG490明显抑制α-SMA表达升高,减轻E-Cadherin表达;降低TGF-β1mRNA表达及TGF-β1、Ⅰ型胶原的分泌。结论JAK/STAT信号途径可能参与高糖诱导HKC转分化。     

脑损伤后大鼠NPAS4与JAK2/STAT3信号通路的关系

目的 探讨神经元PAS结构域蛋白(NPAS)4与Janus激酶(JAK)2/信号传导与转录激活因子(STAT)3通路在大鼠颅脑损伤后的相关联系。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI+AG490组,建立损伤模型,利用免疫组化染色、Western印迹及实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测JAK2、STAT3、磷酸化(p)-JAK2、p-STAT3及NPAS4蛋白。结果 损伤后NPAS4蛋白可见表达升高,并在12 h时达到最高,并持续至少7 d,与p-JAK2、p-STAT3蛋白时序性表达趋势一致,相邻两时间点比较差异显著(P<0.05);且TBI+AG490组p-JAK2、p-STAT3及NPAS4蛋白表达量较TBI组均显著下降(P<0.05)。结论 NPAS4可在大鼠颅脑损伤后迅速升高并发挥神经保护作用,且其相关作用可能受到JAK2/STAT3通路的调节。