CXCL12和CXCR4在肾透明细胞癌转移淋巴结中的表达及意义

目的探讨趋化因子CXCL12和CXCR4在肾透明细胞癌和其转移淋巴结中的表达及其在淋巴结转移过程中的作用和可能机制。方法应用免疫组织化学SP法检测53例肾透明细胞癌原发灶及26例转移淋巴结中CXCL12和CXCR4表达的情况,并进行相关性分析。结果肾透明细胞癌转移淋巴结中的CXCL12的表达显著高于肾透明细胞癌原发灶,分别为76.9%(20/26)和35.8%(19/53),P<0.05。肾透明细胞癌转移淋巴结中的CXCR4的表达也高于肾透明细胞癌原发灶,分别为69.2%(18/26)和62.2%(33/53),但P>0.05。相关性分析发现CXCL12和CXCR4在肾透明细胞癌转移淋巴结组织中表达具有正相关性。结论 CXCL12和CXCR4在肾透明细胞癌转移淋巴结中高表达,两者在肾透明细胞癌的器官特异性转移中可能起协同作用,共同促进肾透明细胞癌的淋巴转移。     

基质金属蛋白酶-2和趋化因子受体4在肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的  探讨基质金属蛋白酶-2 （MMP-2）和趋化因子受体4（CXCR4）在肾透明细胞癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。 方法  应用免疫组化PV6000法检测79例肾透明细胞癌（RCCC）组织和43例正常肾组织中MMP-2和CXCR4的表达。结果  79例RCCC中MMP-2和CXCR4的阳性表达率为73.4%、77.2%,高于在正常肾组织中的阳性表达率（16.3%,14.0%）,差异有统计学意义（χ2=36.520、45.009,P<0.01）,其表达与RCCC的临床分期和淋巴结转移有关（χ2=3.978~5.657, P<0.05）。MMP-2和CXCR4的表达呈正相关（r=0.561, P<0.01）。结论   MMP-2和CXCR4在肾透明细胞癌组织中呈高表达,其与肿瘤的发生、发展、转移及临床病理参数之间有相关性,可能在肿瘤的进展过程中扮演重要角色。     

肾透明细胞癌中SDF鄄1/CXCR4表达及临床意义的探讨

 目的探讨基质细胞衍化生长因子1（SDF-1）和趋化因子受体4（CXCR4）在肾透明细胞癌组织中的表达及其与临床病
理因素的关系。方法应用免疫组化PV6000法检测79 例肾透明细胞癌组织和43 例正常肾组织中SDF-1 和CXCR4 的表达
情况。结果CXCR4 在79 例肾透明细胞癌组织中的阳性表达率（77.2%）高于43 例正常肾组织（14.0%）（x² =45.009, P< 0.05）。
SDF-1 在79 例肾透明细胞癌组织中和43 例正常肾组织中的阳性表达率分别为13.9%、16.3%,差异无统计学意义（x² =0.123,
> 0.05）;其表达与肾透明细胞癌组织的临床分期和淋巴结转移有关（x² =4.408~11.935, P< 0.05）;SDF-1 的表达与CXCR4 的表
达呈负相关关系（ r=-0.305, P< 0.05）。结论SDF-1 和CXCR4 在肾透明细胞癌组织中的表达提示其在肿瘤的发生、发展、浸
润转移之间有密切的关系,可能在肿瘤的发展过程中扮演重要的角色。     

BNIP3在肾透明细胞癌中的表达及其与HIF-1α、VEGF的相关性研究

目的探讨促凋亡蛋白BNIP3在原发性肾透明细胞癌中的表达及其与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性。方法联合应用组织芯片技术和Envision二步免疫组化技术检测104例肾透明细胞癌及48例癌旁正常肾组织中BNIP3、HIF-1α、VEGF的蛋白表达水平,并分析肾癌中BNIP3表达与HIF-1α、VEGF的相关性。结果 BNIP3、HIF-1α及VEGF在肾透明细胞癌中的阳性表达率分别为36.5%、61.5%和69.2%,在癌旁正常肾组织中的阳性表达率分别为12.5%、8.3%和12.5%。在BNIP3阳性和阴性表达组中,HIF-1α、VEGF的阳性率之间差异无统计学意义(P>0.05),VEGF阳性组与阴性组中HIF-1α的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),且两者之间的表达有相关性。结论 BNIP3在透明细胞癌中有所表达,但多数为低表达,且与HIF-1α和VEGF的表达无相关性。     

肾透明细胞癌尿液中锌指蛋白转录因子4的表达及临床意义

目的：探讨肾透明细胞癌尿液脱落细胞中锌指蛋白转录因子4（Krüppel-like factor 4,KLF4）的表达及临床意义。方法：分别收集58例术后病检证实为肾透明细胞癌的肾癌患者及40例健康志愿者尿液。采用RT-PCR技术检测KLF4 mRNA的表达率,Western blot检测KLF4蛋白的表达率;分析KLF4因子的表达与肾透明细胞癌患者临床病理参数的关系。结果：肾透明细胞癌患者尿液脱落细胞KLF4表达明显下调,肾透明细胞癌组KLF4表达阴性率为87.9%（51/58）,表达阳性率仅12.1%;而对照组KLF4表达阴性率为7.50%（3/40）,表达阳性率为92.5%,2组表达阴性率比较有统计学差异（P<0.05）。肾癌患者中KLF4表达下调与患者年龄（ χ2=0.369,P=0.544）、性别（ χ2=0.705,P=0.401）、肿瘤大小（ χ2=3.481,P=0.062）、肾透明细胞癌患者的临床分期（ χ2=0.762,P=0.859）、组织分化程度（ χ2=0.064,P=0.996）、淋巴结转移（ χ2=0.301,P=0.583）均无关。结论：检测尿液KLF4因子可能有助于肾透明细胞癌的诊断及术后监测。RT-PCR为临床可行的检测方法。     

膀胱移行细胞癌组织B7-H1和CXCR4表达及其意义

目的探讨共刺激因子B7-H1与CXC趋化因子受体4(CXCR4)在膀胱移行细胞癌组织表达及意义。方法应用免疫组化SP法,检测60例膀胱移行细胞癌及12例正常膀胱组织中B7-H1及CXCR4的表达,并分析其与膀胱移行细胞癌临床病理参数的关系及两者表达之间的相关性。结果 B7-H1与CXCR4在正常膀胱组织中不表达,在膀胱移行细胞癌组织中表达阳性率分别为71.7%(43/60)和65.0%(39/60),与正常膀胱组织比较差异有显著性(χ2=21.352、17.018,P<0.05)。膀胱移行细胞癌组织中B7-H1、CXCR4表达与肿瘤的临床病理分级、临床分期及复发有关(χ2=4.250～5.240,P<0.05);且B7-H1与CXCR4的表达呈明显正相关(r=0.469,P<0.01)。结论膀胱移行细胞癌组织B7-H1与CXCR4表达与肿瘤临床进展过程中的免疫逃逸现象密切相关。     

MN/CAⅨ在肾细胞癌诊断中的价值

目的探讨MN/CAⅨ在肾细胞癌组织和血液中的表达情况和诊断价值。方法采用RT-PCR技术检测62例肾细胞癌患者肿瘤组织和外周血液中MN/CA IX mRNA的表达,以32例正常肾组织和非肾癌患者外周血作为对照。采用免疫组化技术检测36例肾透明细胞癌,17例其它肾肿瘤,16例正常肾组织标本。结果 RT-PCR结果显示62例肾细胞癌患者MN/CAⅨmRNA阳性率在癌组织中为82.3%(51/62),在外周血中为54.8%(34/62),显著高于对照组(P<0.05),在肾透明细胞癌患者癌组织和外周血中MN/CAⅨmRNA阳性率分别为98%(49/50)和66%(33/50),显著高于其它类型肾癌结果(P<0.05)。免疫组化结果显示MN/CAⅨ在肾透明细胞癌中表达阳性率为97.2%(35/36),明显高于其它类型肾肿瘤和正常肾组织(P<0.05)。结论 MN/CAⅨ在肾细胞癌尤其是透明细胞癌中有特异性的高表达,可以用于肾癌的诊断,尤其在预后和个体化治疗判断上有潜在价值。     

缺氧诱导因子-1与血管内皮生成因子在肾癌中的表达及其相关性研究

目的:探讨缺氧诱导因子(HIF-1)在肾透明细胞癌中的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法:应用免疫组化技术检测30例肾透明细胞癌标本中HIF-1,VEGF的表达,并分析与肾透明细胞癌的病理分级,临床分期及浸润、转移的关系。结果:肾透明细胞癌中HIF-1与VEGF阳性表达率分别为72.4%,66.2%,对照组肾组织阳性表达率分别为17.8%,14.4%,两组相比具有显著性差异(P<0.05);HIF-1与VEGF的高表达与肾透明细胞癌的临床分期显著相关,PT3~4期明显高于PT1~2期(P<0.05),与病理分级无显著性差异。结论:HIF-1与VEGF在肾透明细胞癌中高表达,并且两者呈显著正相关。     

PTEN和LIVIN在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究双特异磷酸酶活性的磷酸脂酶基因(PTEN)和黑色素瘤凋亡抑制蛋白或肾凋亡抑制蛋白(LIVIN)在肾透明细胞癌中的表达及其相关性。探讨与肾透明细胞癌临床分期及病理分级关系。方法:应用免疫组化SP法检测50例肾脏透明细胞癌、25例癌旁组织(距肿瘤边缘>1 cm)及10例正常肾组织中PTEN及LIVIN的表达。结果:PTEN在肾透明细胞癌中的阳性率明显低于癌旁及正常肾组织,差异有统计学意义(P<0.01);LIVIN在正常肾组织及癌旁组织无表达,而在肾透明细胞癌中高表达,差异有统计学意义(P<0.01)。在不同临床分期的肾透明细胞癌组织中PTEN和LIVIN的表达有显著差异性(P<0.01);并且两因子的表达呈显著负相关(r=-0.547,P<0.01)。结论:PTEN和LIVIN呈负相关性,在肾透明细胞癌的发生发展中起重要的作用,两个因子联合检测可作为判定肾透明细胞癌恶性程度的重要指标。     

MN/CAⅨ在肾细胞癌诊断中的价值

摘要：目的探讨MN/CAⅨ在肾细胞癌组织和血液中的表达情况和诊断价值。方法采用RT-PCR技术检测62例肾细胞癌患
者肿瘤组织和外周血液中MN/CA IX mRNA的表达,以32例正常肾组织和非肾癌患者外周血作为对照。采用免疫组化技术检
测36例肾透明细胞癌,17例其它肾肿瘤,16例正常肾组织标本。结果RT-PCR结果显示62例肾细胞癌患者MN/CAⅨ mRNA
阳性率在癌组织中为82.3%（51/62）,在外周血中为54.8%（34/62）,显著高于对照组（P<0.05）,在肾透明细胞癌患者癌组织和外
周血中MN/CAⅨ mRNA阳性率分别为98%（49/50）和66%（33/50）,显著高于其它类型肾癌结果（P<0.05）。免疫组化结果显示
MN/CAⅨ在肾透明细胞癌中表达阳性率为97.2%（35/36）,明显高于其它类型肾肿瘤和正常肾组织（P<0.05）。结论MN/CAⅨ
在肾细胞癌尤其是透明细胞癌中有特异性的高表达,可以用于肾癌的诊断,尤其在预后和个体化治疗判断上有潜在价值。
     

Livin在肾癌组织中的表达及意义

【目的】研究凋亡抑制蛋白Livin在肾癌组织中的表达及其与肿瘤病理分级、临床分期之间的关系。【方法】采用免疫组织化学SP法,检测75例肾癌和10例正常肾组织中Livin的表达情况,并探讨其与肿瘤病理分级、临床分期之间的关系。【结果】Livin在10例正常肾组织中均不表达,而在肾癌组织中的表达率为52%。Livin的表达与肾癌的病理分级无明显相关,而与临床分期显著相关。【结论】凋亡抑制因子Livin和肾癌的发生、进展有关,可以用来作为判断肾癌预后的一项重要指标,并为肾癌的基因治疗提供新的靶点。     

PCNA、CXCR4在结直肠癌组织芯片中的表达及意义

目的探讨PCNA和CXCR4蛋白在结直肠癌组织芯片中的表达及其意义。方法在结直肠癌组织芯片上,应用免疫组化EnVision法检测PCNA和CXCR4表达水平,分析PCNA和CXCR4在结直肠癌的表达与患者淋巴结转移状态、肿瘤分化程度的关系及其相互关系。结果 PCNA在结直肠癌组织中的表达率为44.5%(57/128);CXCR4的表达率为43.8%(56/128),PCNA和CXCR4与患者淋巴结转移状态、肿瘤分化程度相关(P<0.05)、二者之间呈正相关(P<0.05)。结论同时检测结直肠癌组织中的PCNA和CXCR4蛋白的表达对判断肿瘤的恶性程度和估计预后有一定意义。     

云芝多糖-B对人食管癌细胞Eca109转移的影响

【目的】 应用新型云芝多糖-B(CVPs-B)作用食管鳞癌Eca109细胞,探讨其对Eca109细胞转移特性的作用?【方法】 Western blot检测CVPS-B作用后,食管鳞癌Eca109细胞CXCL12蛋白表达的变化,Transwell侵袭实验评估食管癌细胞侵袭能力的变化,MTT法观察食管癌细胞与Matrigel胶黏附能力的变化,划痕法检测食管癌细胞迁移能力的变化?【结果】 实验组Eca109细胞CXCL12蛋白表达水平较对照组显著降低(P < 0.05)?CVPs-B孵育后,食管癌Eca109细胞黏附?侵袭及迁移能力下降?【结论】CVPs-B降低食管癌细胞CXCL12蛋白表达,有效抑制食管癌Eca109细胞的转移潜能,提示CVPs-B可能可以通过CXCL12/CXCR4通路抑制食管鳞癌细胞转移特性?     

慢病毒介导的Clusterin基因沉默抑制肾癌786-O细胞增殖并促进细胞凋亡

【目的】 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,检测clusterin(CLU)基因沉默在人肾癌786-O细胞的干扰效果及其对人肾癌786-O细胞增殖?迁移和凋亡的影响?【方法】 构建靶向CLU基因的慢病毒干扰载体,利用包装细胞293T获得重组慢病毒,感染人肾癌786-O细胞株?实验分5组:CLU-RNAi-LV1(KD1)?CLU-RNAi-LV2(KD2)?CLU-RNAi-LV3(KD3)为加入靶向CLU基因的慢病毒感染的肾癌细胞组,未处理的慢病毒感染的肾癌细胞组(NC组),肾癌786-O细胞为空白对照组(CON组)?应用Real time-PCR及Western blot检测不同组别干扰前后CLU mRNA及蛋白表达的变化?用细胞划痕实验?MST-1?流式细胞仪等方法检测CLU沉默后肾癌786-O细胞在增殖?迁移?凋亡等生物学行为的改变?【结果】 成功构建CLU shRNA慢病毒载体clu-RNAi-LV并获得相应慢病毒?Real time-PCR显示不同感染复数CLU-RNAi-LV处理的KD1?KD2?KD3组CLU mRNA表达水平与对照组相比分别下调69.4%~96.5%和0?Western blot结果显示KD1?KD2?KD3组CLU蛋白表达水平与CON组相比分别下降35.24%?46.26%和58.91%,KD3能显著抑制786-O细胞中CLU基因的表达?划痕实验显示24 h时 KD3(si-CLU)组细胞迁移相对距离(408.43 ± 25.92)小于NC组(101.35 ± 6.05)和CON组(68.13 ± 6.64,P < 0.05)?WST-1法检测转染后72 h KD3(si-CLU)组细胞生长速度较NC组及CON组明显下降(P < 0.05),各组间差异(P < 0.05),均有统计学意义?流式细胞仪检测KD3(si-CLU)组与NC组?CON组细胞凋亡率分别为(6.23 ± 2.51)%?(1.05 ± 0.30)%和(1.17 ± 0.29)%,KD3(si-CLU)组与NC组?CON组相比凋亡率增加(P < 0.05),差异有统计学意义?肾癌786-O细胞的增殖?迁移受到抑制,而凋亡率增加?【结论】 筛选出能稳定干扰CLU基因表达的siRNA序列和肾癌786-O细胞株?CLU慢病毒干扰载体可有效沉默肾癌786-O细胞的内源性CLU基因,抑制肾癌786-O细胞的增殖?迁移并促进细胞凋亡?     

趋化性细胞因子受体CXCR4在肾透明细胞癌中的分布探讨

目的 研究肾透明细胞癌中趋化性细胞因子受体CXCR4的分布。方法 用免疫组织化学的方法对患者癌组织CXCR4的分布进行探讨，结合手术、病理及临床资料，统计学分析CXCR4表达与淋巴结浸润的关系。结果 所有患者CXCR4呈阳性分布，按照免疫组织化学染色模式将肿瘤分为局灶型及弥散型，其中弥散型又分为强阳性和弱阳性。结合临床资料，发现弥散型和局灶型之间以及强阳性和弱阳性之间在局部淋巴转移方面有显著性差异。结论 CXCR4的表达可能与肾透明细胞癌的转移及预后密切相关。     

保留肾单位手术与根治性肾切除术治疗局限性肾癌的临床比较分析

目的探讨保留肾单位手术（NSS）治疗局限性肾癌的可行性和有效性。方法回顾性分析辽宁医学院附属第一医院接受手术治疗的局限性肾癌病例74例,其中36例行NSS治疗（NSS组）,38例行根治性肾切除术（RN）治疗（RN组）。分别统计比较两组的术中出血量、手术时间、术后住院时间、并发症、复发率及生存率。结果两组手术均顺利完成。NSS组平均术中出血量、手术时间、并发症发生率大于RN组（P〈0.05）;但两组间术后住院时间、肿瘤复发率及长期存活率方面未见明显差异（P〉0.05）。结论保留肾单位手术是局限性肾癌的有效治疗方法,NSS最大限度保留了功能肾单位,较RN更能够提高肾癌患者的生活质量。     

沉默CXCR4基因对食管鳞癌EC9706细胞中VEGF基因表达的影响

目的探讨沉默CXCR 4基因对食管鳞癌EC9706细胞中VEGF基因表达的影响,初步阐明CX-CR 4在食管鳞癌细胞系EC9706浸润转移中的作用机制。方法利用R T-PCR检测转染有两对CXCR 4siR NA的食管鳞癌EC9706细胞中VEGF基因mR NA的表达,Western Blot和免疫细胞化学技术检测转染有两对CXCR4 siRNA的食管鳞癌EC9706细胞中VEGF基因蛋白的表达,同时以未转染细胞和转染阴性siR-NA细胞作为空白对照和阴性对照。结果转染两对CXCR 4 siR NA后48 h,R T-PCR结果显示,转染组VEGF mR NA的表达较未转染空白对照组和转染阴性对照siR NA组相比明显下降,差异具有显著性(P<0.05);Western Blot结果显示CXCR 4 siR NA转染后48 h,CXCR 4 siR NA不仅能抑制VEGF mR NA的表达,对VEGF蛋白的表达同样有明显的抑制作用,差异具有显著性(P<0.05);免疫细胞化学技术检测结果进一步证实,与未转染空白对照组和转染阴性对照siRNA组相比,CXCR siRNA对VEGF蛋白表达具有显著抑制作用,差异有显著性(P<0.05)。结论特异性阻断CXCR4基因的表达可以抑制VEGF基因的表达,说明CX-CR 4基因有可能通过调控VEGF的表达参与食管鳞癌的浸润转移,CXCR 4有望成为肿瘤基因治疗的新靶点。     

两种CXCR4稳定表达的肾癌A498细胞株的构建

目的将表达CXCR4及增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)-CXCR4质粒转入肾癌细胞A498中,并建立稳定转染细胞株。方法针对CXCR4基因构建稳定表达CXCR4质粒,应用脂质体转染技术将稳定表达CXCR4及EGFP-CXCR4质粒转入肾癌A498细胞中,经过G418抗性筛选细胞株。通过共聚焦显微镜观察转染EGFP-CXCR4质粒的A498细胞的表达情况。通过共聚焦显微镜观察EGFP-CXCR4融合蛋白在A498经SDF-1刺激前后的变换。通过蛋白质印迹法检测转染后CXCR4蛋白表达水平的变化,应用MTT法检测转染后的A498细胞增殖能力水平,并通过Transwell实验观察稳定表达CXCR4的肾癌A498细胞株侵袭能力的改变。结果稳定表达CXCR4及EGFP-CXCR4的质粒构建后测序结果与CXCR4DNA序列完全吻合。质粒转入A498细胞后进行G418抗性筛选挑选出合适的细胞株。共聚焦显微镜观察发现,转染EGFP-CXCR4质粒的A498细胞中胞膜及胞质中均有绿色荧光表达,经SDF-1刺激后EGFP-CXCR4向细胞内转移。蛋白质印迹法发现稳定转染CXCR4质粒的A498细胞的CXCR4表达水平高于正常A498细胞。第3天以后,转染pcDNA-CXCR4及pEGFP-CXCR4质粒组的A498细胞增殖水平率高于正常A498细胞(P<0.01)。Transwell实验证实稳定表达CXCR4的肾癌A498细胞株侵袭能力与正常A498细胞株相比增强(P<0.01)。结论成功地构建了CXCR4稳定表达的肾癌A498细胞株,转染后A498细胞的增殖能力增强,侵袭能力增强,为后续实验奠定了基础。