灯盏花素肺部给药抗大鼠急性肺损伤氧化作用的研究

目的从抗氧化途径研究灯盏花素肺部给药抗大鼠急性肺损伤的作用．方法健康雄性SD大鼠气管内滴入内毒素（LPS）复制肺损伤模型,气管内分别给予灯盏花素50mg、100mg和200mg,肺部给药6h后,观察肺组织病理形态学变化和检测肺组织干湿比值（W／D）、髓过氧化物酶（MPO）和超氧化物歧化酶（SOD）的活力及丙二醛（MDA）含量．结果（1）肺组织病理学显示：急性肺损伤组大鼠肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血,出血,水肿,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变．灯盏花素肺部给药组各剂量能够明显减轻肺损伤程度;（2）与正常对照组相比,急性肺急性肺损伤组W／D、MPO和MDA水平均增高（P〈0．05）,而SOD活力降低（P〈0．05）;灯盏花素肺部给药组各剂量均能降低急性肺急性肺损伤W/D、MPO和MDA水平,提高SOD的活性（P〈0．05）,且呈剂量依赖关系．结论灯盏花肺部给药能够降低肺W／D比值、肺组织髓过氧化物（MPO）活力和脂过氧化物（MDA）含量,提高肺组织内抗氧化酶SOD活力,明显减轻急性肺损伤程度,其作用机制可能与提高肺内抗氧化作用有关．     

慢性饮酒对大鼠急性肺损伤的影响

目的 研究慢性饮酒对大鼠注射油酸．脂多糖致急性肺损伤（ALI）的影响，以及损伤后肺组织氧化／抗氧化平衡的改变。方法 32只SD大鼠随机予以慢性饮酒或饮水；6周后随机注射油酸．脂多糖致ALI（损伤组），或注射生理盐水作为对照（对照组）。共分为4组：饮酒损伤组、饮水损伤组、饮酒对照组和饮水对照组，每组8只动物。检测其PaO2，肺组织中还原型谷胱苷肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平，以及肺组织干质量／湿质量比值（W／D）的变化。结果与相应对照组比较，饮酒损伤组和饮水损伤组PaO2明显下降，W／D值明显增加，GSH水平降低，MDA水平升高（P均〈0．05）。饮酒损伤组与饮水损伤组比较，除W／D值变化无显著差异外，其余指标下降均更显著（P均〈0．05）。结论 慢性饮酒可增加创伤后感染时肺损伤的严重程度，与肺组织氧化／抗氧化失衡有关。     

丙泊酚对LPS诱导的大鼠急性肺损伤状态下SP-B表达的调节作用

目的探讨丙泊酚对LPS诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用和对肺组织肺表面活性蛋白B(SP-B)的调节作用。方法 30只雄性Wistar大鼠(SPF级)随机分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+Propofol组)和模型组(LPS组)每组10只。通过颈静脉注射LPS建立大鼠急性肺损伤(ALI)模型。采用HE染色观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分;采用湿/干比(W/D)值分析肺水肿严重程度;使用RT-PCR和western blotting对肺组织中SP-B的表达进行检测。结果在给予颈静脉注射LPS后,大鼠肺组织出现明显的病理改变和较高的肺损伤评分,W/D值明显升高,同时肺组织中SP-B mRNA和蛋白水平明显降低,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。但与LPS组相比较,LPS+Propofol组大鼠肺组织病理变化较轻,肺损伤评分和W/D值较低,同时肺组织中SP-B mRNA和蛋白的表达水平较高,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。结论镇静药丙泊酚可以有效改善大鼠ALI导致的肺部炎症反应和肺水肿,同时上调肺组织中SP-B的表达水平。但仍需进一步研究揭示丙泊酚对于ALI状态下SP-B的调节作用的分子机制和相关的信号通路。     

内毒素所致肺损伤纤维化时转化生长因子-β1/Smad2信号通路的变化

目的 观察内毒素所致肺损伤早期纤维化大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad2信号通路的变化.方法 24只SD大鼠随机等分为对照组(C组)、内毒素组(LPS组).采用气管内联合腹腔注射内毒素法复制肺损伤早期纤维化模型.实验结束前留取标本测定肺血管通透性(EB值)及肺湿/干重量比(W/D);HE染色观察肺组织病理学改变;Van Gieson染色检测肺组织胶原纤维表达;用免疫组化法和RT-PCR法测定肺组织TGF-β1蛋白及mRNA表达,用免疫印迹法测定肺组织Smad2蛋白的表达.结果 与C组比较,LPS组EB值及W/D值明显升高(P<0.01);LPS组肺组织中胶原纤维及TGF-β1蛋白呈阳性表达,TGF-β1 mRNA和Smad2蛋白表达均较C组明显上调(P<0.01).结论 内毒素所致肺损伤早期纤维化大鼠TGF-β1/Smad2信号被激活,与肺毛细血管通透性、肺损伤纤维化的严重程度密切相关,可能是内毒素所致肺损伤早期纤维化的重要机制之一.     

卡托普利对急性肺损伤血凝素样氧化低密度血浆脂蛋白受体-1蛋白表达的影响

目的研究大鼠急性肺损伤模型及其卡托普利干预下肺组织血凝素样氧化低密度血浆脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized LDL receptor-1,LOX-1)蛋白表达的变化,旨在探讨LOX-1在急性肺损伤中的表现及初步干预措施。方法将30只SD大鼠按随机数字法分成3组:生理盐水对照组、脂多糖组(5mg/kg)和卡托普利治疗组(1.25mg/kg),每组10只。观察各组大鼠动脉血氧分压[p(O2)]、肺湿质量/干质量值(W/D)、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavagefluid,BALF)蛋白含量及肺组织病理变化,利用Westernblot法检测各组大鼠肺组织中LOX-1蛋白的表达。结果脂多糖处理后大鼠的肺部炎症反应显著,以中性粒细胞浸润为主,脂多糖组p(O2)[(6.86±0.75)kPa]较对照组[(12.14±0.60)kPa]下降(P0.05),脂多糖组肺W/D(7.47±0.31)、BALF蛋白含量(0.39±0.07)g/L、LOX-1蛋白的表达(0.91±0.12)较对照组肺W/D(3.82±0.21)、BALF蛋白含量(0.26±0.05)g/L、LOX-1蛋白表达量(0.38±0.05)升高(P0.05)。与脂多糖组p(O2)相比,卡托普利治疗组p(O2)[(9.43±0.89)kPa]和肺组织病理变化明显改善,肺W/D(5.21±0.08)、BALF蛋白含量(0.34±0.05)g/L和LOX-1蛋白表达(0.43±0.08)降低(P0.05)。结论LOX-1蛋白可能参与急性肺损伤过程;卡托普利对急性肺损伤有保护作用,而此作用可能与抑制LOX-1的表达有关。     

灯盏花素脂质体肺部给药对急性肺损伤大鼠血栓调节蛋白表达的影响

目的 探讨灯盏花素脂质体肺部给药对急性肺损伤大鼠血栓调节蛋白表达的影响.方法 随机将雄性SD大鼠48只分为生理盐水组、灯盏花素脂质体组、急性肺损伤组和灯盏花素脂质体干预组.检测肺组织W/D比值、MPO含量和BALF中蛋白含量,应用荧光定量PCR技术SYBR Green Ⅰ荧光染料法,检测肺组织血栓调节蛋白(thrombomodulin, TM) mRNA的表达水平.结果 与急性肺损伤组相比,灯盏花素脂质体干预组大鼠肺组织W/D比值、MPO含量和BALF中蛋白含量明显降低,而肺组织TMmRNA的表达水平明显升高.结论 灯盏花素脂质体肺部给药能够减轻LPS致大鼠急性肺损伤的程度,促进肺组织TM的产生.     

细胞凋亡在呼吸机相关性肺损伤中的作用

目的:观察细胞凋亡在呼吸机相关性肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)中的作用,探讨呼吸机相关性肺损伤的发生机制。方法:将50只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和肺损伤组。对照组插管后不进行机械通气;肺损伤组插管后机械通气,潮气量为20 ml.kg-1,频率为50次.min-1,吸呼比为1∶3,FiO2为21%,通气时间为5 h。观察实验前后动脉氧分压变化,采用Annexin-V/PI双染方法检测肺组织及肺泡灌洗液细胞凋亡率。取各组大鼠左全肺称湿重,置于烘箱内80℃干烤24 h后称干重,并计算肺组织湿/干重(W/D)值;制备肺组织切片进行病理学观察。结果:两组大鼠动脉氧分压差异无统计学意义(P>0.05);肺损伤组肺组织及肺泡灌洗液细胞凋亡明显增加(P<0.01),肺组织W/D值显著高于对照组(P<0.01);肺损伤组肺组织病理切片可见肺组织水肿。结论:机械通气可导致肺损伤,细胞凋亡可能在VILI发生、发展过程中起重要作用。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠脓毒症肺损伤的影响

目的 研究盐酸戊乙奎醚(长托宁)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔复制大鼠脓毒症肺损伤动物模型,30只SD大鼠随机分为假手术组,脓毒症肺损伤组和长托宁(0.45 mg/kg肌肉注射)治疗组,每组10只,检测4 h后各组大鼠肺泡灌洗液白蛋白浓度,肺组织湿干重比(W/D)及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,应用免疫组织化学的方法检测肺组织毛细血管内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 长托宁治疗组大鼠肺泡灌洗液白蛋白浓度、 W/D、肺组织MPO活性与脓毒症肺损伤组有显著差异(P＜0.05),肺组织血管内皮ICAM-1的表达显著低于脓毒症肺损伤组(P＜0.05).结论 长托宁通过抑制肺血管内皮细胞ICAM-1的表达,对大鼠脓毒症肺损伤具有保护作用.     

长期服用辛伐他汀对机械通气肺损伤大鼠肺湿／干重比与蛋白含量的影响

目的对长期服用辛伐他汀大鼠进行机械通气造成急性肺损伤,观察大鼠肺组织病理学变化、湿／干重比（W／D）及蛋白含量的变化,探讨长期服用辛伐他汀对机械通气致急性肺损伤、肺水肿及肺泡通透性的影响。方法32只雄性SD大鼠随机分为4组（n=8）：对照组（A组）不做任何处理;机械通气组（B组）行机械通气,潮气量7ml／kg;辛伐他汀组（C组）进行辛伐他汀（10mg·kg～·d^-1）灌胃处理4周;辛伐他汀＋机械通气组（D组）辛伐他汀灌胃4周后行机械通气,潮气量7ml／kg。B组与D组行机械通气4h后处死大鼠,收集肺组织,苏木精一伊红染色光镜下观察病理学改变,测定肺组织W／D比及蛋白含量。结果与A组相比,B组大鼠肺组织损伤明显,W／D与蛋白含量均明显增高（P〈0．01）;C组各指标无明显变化。与B组相比,D组肺组织病理损伤明显减轻,W／D及蛋白含量明显降低（P〈0．01）。结论长期服用辛伐他汀可以明显降低肺血管与肺泡的通透性,减轻机械通气所致的急性肺损伤、肺水肿。     

茎叶人参皂甙对急性肺损伤大鼠白介素-8表达的影响

目的 探讨茎叶人参皂甙(GS)对内毒素(LPS)诱导的急性肺损伤大鼠模型肺组织中白细胞介素-8(IL-8)表达的影响.方法 SD大鼠30只随机分为正常对照组(n=10)、内毒素损伤组(n=10)、茎叶人参皂甙组(n=10).给药后5 h,观察各组大鼠的一般状况,取动脉血1 mL行动脉血气分析后处死大鼠,肉眼观察肺组织改变,取左肺计算肺湿重、肺干重及湿干重比,取右肺作病理学检查,免疫组化法检测各组肺组织IL-8的表达,病理图像分析系统测定肺组织中的平均灰度值.结 果与正常对照组比较,内毒素损伤组大鼠一般状况较差,肉眼观肺组织水肿出血明显,肺w/D升高,动脉血PaO2显著下降,病理学检查肺组织损伤明显,肺组织IL-8表达显著升高;而茎叶人参皂甙组与内毒素损伤组比较一般状况较好,肉眼观察肺组织水肿出血不明显,肺W/D降低、动脉血PaO2下降不明显,病理学检查肺组织损伤较轻,肺组织IL-8表达轻度升高.结论 茎叶人参皂甙可以通过部分抑制肺组织IL-8的表达,起到减轻肺损伤的作用.     

Impaired upregulation of keratinocyte growth factor in injured lungs induced by Pseudomonas aeruginosa in immunosuppressed rats

Background The number of immunosupressed patients has increased in the past decades. Among them Pseudomonas aeruginosa （P. aeruginosa） is one of the leading bacteria for pneumonia that are associated with poor prognosis. However, the pathogenesis of P. aeruginosa pneumonia in immunosupressed patients is not understood completely. Previous reports showed keratinocyte growth factor （KGF） is associated with lung injury in immunocompetent hosts. In this study, we investigated the different reactions of lung injury, lung pathology and KGF expressions in P aeruginosa pneumonia between immunosuppressed and immunocompetent rats. Methods Immunosuppression of male rats was induced by injecting immunosuppressive subcutaneously. Pneumonia was established by instilling P aeruginous tracheally. The immunocompetent rats were the control group. Survival rate, lung histopathology, pulmonary permeability and oedema, KGF mRNA and protein expressions in lungs of both groups were investigated. Results The survival rate of immunosuppressed group was lower than that of immunocompetent group （33.3% vs 83.3%）. After exposure to bacteria, pulmonary permeability and wet/dry ratio in immunosuppressed group were higher than those in immunocompetent group. Pulmonary congestion and haemorrhage were more intensive in immunosuppressed group compared to immunocompetent group. Apoptosis and necrosis were also observed in infected lungs of immunosuppressed rats. Although we detected KGF expressions in lungs of both groups after infection, the expressions of KGF protein and mRNA gene in immunosuppressed group were much lower than in immunocompetent group. Conclusions Compared with immunocompetent group, there was more intensive lung injury in immunosuppressed group. Severe lung injury may contribute to the poor prognosis of pneumonia. KGF expressions of pneumonia in immunosuppressed rats were less than those in immunocompetent ones.     

氧自由基在大鼠肠缺血再灌流致肺损伤中的作用

目的 探讨大鼠肠缺血再灌流致肺损伤与氧自由基的关系。方法 成年雄性SD大鼠，随机分为假手术，肠缺血2h，肠缺血2h再灌流1h三组，分别测各组肺毛细血管通透性及血浆和肺组织丙二醛（MDA）含量，过氧化物歧化酶（SOD）活性。结果 肠缺血再灌流组各指标均显著不同于缺血组及假手术组，MDA与肺毛细血管通透性呈正相关关系。结论 肠缺血再灌流时机体MDA含量增加，SOD活力减弱。氧自由基参与了肺损伤的病理过程。     

中性粒细胞在大鼠肠缺血再灌流导致肺损伤中的作用

目的 探讨肠缺血再灌流引起肺损伤的细胞机制。方法 成年雄性SD大鼠，随机分为假手术、肠缺血、肠缺血再灌流三组，分别测定各组大鼠肺毛细血管通透性及肺组织髓过氧化酶(是中性粒细胞的特征酶)活性、丙二醛含量、过氧化物歧化酶活性。结果 缺血再灌流组肺髓过氧化酶活性、丙二醛含量及毛细血管通透性均高于缺血组及假手术组。结论 中性粒细胞在大鼠肠缺血再灌流致肺损伤中起了重要作用，介导着肺损伤的发生。     

超氧化物歧化酶对大鼠肾上腺素性肺水肿的影响

采用静脉注射肾上腺素造成大鼠急性肺水肿.与对照组比较,超氧化物歧化酶预处理可减轻大鼠肺毛细血管通透性和肺泡通透性(P<0.05).超氧化物歧化酶组和对照组间肺系数、肺湿/干比接近。提示,除O~-外,其它活性氧代谢产物(特别是OH·和H_2O_2)对大鼠肾上腺素性肺水肿的发生可能起更重要的作用。     

人参总皂甙对大鼠烟雾吸入性肺损伤的疗效与其抗氧化作用的关系

本实验采用大鼠烟雾吸入性肺损伤模型,观察了致伤后立即腹腔注射人参总皂甙(GS)对该损伤的作用。发现GS可明显减轻烟雾吸入所致PMVP增加,减少BALF中WBC计数和蛋白含量,使肺内WBC浸润,肺水肿,肺充血、出血等病变减轻。GS还可抑制致伤大鼠肺和血清MDA的升高,使已降低了的肺SOD活性恢复至正常水平以上。体外实验也发现,GS可有效地抑制肺匀浆过氧化脂质生成和清除O_2~-·、OH·。提示GS的治疗效果与其抗氧化作用有关。     

大剂量百草枯中毒对大鼠肺损伤的病理观察

目的探讨大剂量百草枯中毒对SD大鼠死亡率及肺损伤的影响。方法 20只SD大鼠,随机分为对照组及实验组,对照组用生理盐水灌胃,实验组用百草枯溶液灌胃,剂量为125mg/ml,观察大鼠的行为、死亡率,及死亡和存活大鼠的肺的病理改变。结果实验组大鼠30d死亡率为70%,死亡集中出现在给药后7d,7d后大鼠没有新的死亡,死亡大鼠的肺充血坏死,肺/体重是正常对照的2倍,存活30d大鼠的肺组织有局部小叶的纤维化。结论百草枯中毒对肺的损伤是很严重的,使肺完全丧失通气功能,但存活30d大鼠的肺纤维化似乎并不严重,不会影响大鼠的生存。     

地塞米松对脂多糖致大鼠急性肺损伤的治疗作用

目的:探讨急性肺损伤(Acate lung injury,ALI)发生早期给予地塞米松的治疗作用.方法:大鼠尾静脉注射5mg/kg脂多糖(Lipopolysacharide,LPS),造成ALI模型.于注射LPS 1 h后,腹腔注射地塞米松(10 mg/kg),1 h后采集标本,分别测定血清蛋白含量、肺泡灌洗液(Broncho alveolar lavage fluid,BALF)中蛋白、TNF-α、IL-8、ICAM-1的含量,计算肺通透指数(Lung alveolar permeability index,LPI)、肺湿/干重比,检查肺组织病理学变化情况.实验平行设置生理盐水对照组和LPS损伤组.结果:肺组织病理切片检查表明,LPS组肺间质水肿、出血,大量炎性细胞浸润,而地塞米松组肺组织损伤显著轻于LPS组.地塞米松组肺湿/干重比、BALF中PMN比、LPI均显著低于LPS组(P<0.05),与正常对照组相比没有显著差异.LPS组BALF中TNF-α、IL-8、ICAM-1浓度高于正常对照组(P<0.05),而地塞米松组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05 ).结论:在ALI发生早期给予大剂量地塞米松,可以减轻肺组织损伤,减少肺组织液渗出和中性粒细胞聚集.     

Actions of NO and INOS on Endotoxin Induced rat Acute Lung Injury and Effect of Rhubarb on Them

This study is to explore the actions of nitric oxide (NO) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) on endotoxin (lipopolysaccharide, LPS) induced rat acute lung injury (ALI) and effect of Rhubarb on them. LPS was injected into the sublingual vein of male Wistar rats to prepare ALI animal models. The rats were divided into 4 groups: LPS, control, Rhubarb, and dexamethasone. Macroscopic and histopathological examinations of the lung specimens were performed and the biological indexes of lung, including wet weight/dry weight, the rate of neutrophils and protein content in the pulmonary alveolar lavage fluid, pulmonary vascular permeability and pulmonary alveolar permeability were observed. In the mean time, the contents of serum NO and the activities of lung tissue homogenate iNOS were measured. The results showed that in the LPS group, the injury and celluar infiltration in the pulmonary stroma and alveoli were more prominent than that in the control group. Lung wet weight/dry weight, the rate of neutrophils, protein content, pulmonary alveolar permeability, pulmonary vascular permeability were significantly increased (P < 0.01); NO and iNOS were also markedly elevated (P < 0.01). In the groups of dexamethasone and Rhubarb, the histopathological changes were significantly milder, and all the above biological indexes of lung injury and the contents of NO and the activities of iNOS were correspondingly decreased (P < 0.05). The above data demonstrate that NO and iNOS play an important role in the onset of ALI; dexamethasone and Rhubarb interfering treatment can ameliorate lung injury and decrease the concentrations of NO and the activities of iNOS, showing that through inhibiting the levels of NO and the activities of iNOS, these 2 agents exert protective effect on ALI induced LPS.     

亚低温对ARDS大鼠肺组织过氧化及肺通透性的影响

目的探讨亚低温对大鼠内毒素性急性呼吸窘迫综合征（ARDS）肺组织过氧化反应及肺通透性的影响。方法采用大鼠腹腔注射脂多糖（LPS,1mg／kg）,16h后再气管内滴注LPS（3mg／kg）建立ARDS模型。72只雄性SD大鼠被随机分为3组：对照组（C组）、ARDS组（A组）、亚低温组（M组）。分别于ARDS时及ARDS后2、4、6h处死动物,检测肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、髓过氧化物酶（MPO）活性以及肺通透指数。结果与C组大鼠比较,A组大鼠在上述时间点SOD活性明显降低,MDA含量、MPO活性及肺通透指数明显升高（P〈0．01）。与A组比较,M组大鼠SOD活性明显升高,MDA含量、MPO活性及肺通透指数明显降低（P〈0．01）。结论亚低温可减轻内毒素性ARDS大鼠肺组织过氧化反应,降低肺通透性,有利于ARDs治疗。     

脂质过氧化物与大鼠烫伤后急性肺损伤的关系

本文从体内氧自由基引发的链产物——LPO为主要指标,观察大鼠烫伤后LPO变化与血清CH_(50),PMN,以及肺血管通透性间的关系。结果表明:烫伤后急性肺损伤的发生与补体活化、激活PMN,使其在肺内聚集释放氧自由基,引发血管内皮细胞膜脂过氧化反应有关。