HPV16E6mRNA、P21ras和c-myc蛋白在子宫颈鳞癌中表达的意义

目的:研究宫颈癌的分子发病机制,进一步阐明相关致癌因素和癌基因在子宫颈鳞癌发病中的作用,为治疗和预防提供依据.方法:采用PCR、ISH和IHC方法研究了51例子宫颈鳞癌组织的HPV16感染、HPV16E6mRNA、P21ras和c-myc蛋白表达的分布.进而阐明HPV16感染和P21ras、c-myc蛋白表达对反映子宫颈鳞癌发病中的意义.结果:51例标本中HPV16感染38例,HPV16E6mRNA阳性表达者35例,P21ras和c-myc蛋白阳性表达率分别为60.8%和76.5%.结论:HPV16感染与P21ras、c-myc蛋白积累无关,而P21ras与c-myc蛋白表达则显著相关.提示癌基因活化或HPV16感染等因素协同作用在子宫颈癌的发生发展中有重要意义.     

宫颈鳞癌组织HPV16／18感染与多个癌基因产物表达的研究

目的：探讨HPV16、18的感染以及多个癌基因的激活在宫颈鳞癌发生发展中的作用。方法：采用SP免疫组化方法对19例慢性宫颈炎、40例宫颈上皮内瘤变（CIN）及70例浸润性宫颈鳞癌进行HPV16/18E6蛋白、PCNA、P53、p^21ras和C-myc检测。结果：浸润性宫颈鳞癌组E6阳性率明显高于慢性宫颈炎组,CINⅢ和浸润性宫颈鳞癌组PCNA、P53、p^21ras阳性率明显高于慢性宫颈炎、CINⅠ和CINⅡ,而浸润性宫颈鳞癌组C-myc阳性率则明显低于其它几组。结论：HPV16、18的感染以及PCNA、P53、p^21ras、C-myc的异常表达与宫颈鳞癌的发生发展密切相关。     

P21 ras、骨桥蛋白及CD44v6与肺鳞癌和腺癌关系的研究

目的 研究P21 ras、CD44v6、骨桥蛋白(OPN)在肺鳞癌和腺癌中的表达及其与肺鳞癌和腺癌预后的相互关系.方法 应用免疫组化方法对96例非小细胞肺癌患者分别检测P21ras蛋白、CD44v6、OPN的表达,分析P21ras蛋白、CIM4v6、OPN与肺癌组织学类型、分化程度、TNM分期等的关系,并通过34例随访病例了解以上指标与肺癌预后的关系.结果 (1)中OPN及CD44v6在鳞癌中表达率高于腺癌,而P21ras蛋白则在鳞癌及腺癌间表达差异无统计学意义,但P21ras蛋白、CD44v6、OPN三者共同表达在鳞癌则高于腺癌;(2)晚期肺癌P21ras蛋白、CD44v6、OPN的阳性表达率均显著高于早期患者,而CD44v6及OPN则在淋巴结已有转移者阳性表达率显著高于无淋巴结转移者;(3)P21ras蛋白、CD44v6、OPN阳性组累积生存率低于阴性组.结论 P21ras蛋白、CD44v6、OPN在鳞癌三者共同高表达,三者共同作用可能与肺鳞癌的发生、发展密切相关,P21ras蛋白、CD44v6、OPN的阳性表达预示着非小细胞肺癌不良预后.     

大肠癌组织中HPV16、18E6,ras癌基因蛋白表达的研究

为探讨人乳头瘤病毒 16、18型感染与 p2 1ras癌基因协同在大肠癌发生机理中的作用 ,采用SP免疫组化技术 ,检测30例大肠腺瘤、10例腺瘤恶变、5 3例大肠腺癌和 30例正常大肠粘膜组织中HPV16、18E6 ,p2 1ras蛋白并分析其相互关系。结果显示 :腺瘤、腺瘤恶变和腺癌组中E6 ,p2 1ras的阳性表达分别为 36 .7% (11/ 30 )、40 .0 % (12 / 30 ) ,6 0 .0 % (6 / 10 )、70 .0 % (7/ 10 )和 5 4.7% (2 9/ 5 3)、71.7% (38/ 5 3) ,而正常组均呈阴性表达。在腺瘤组中 ,随着上皮不典型性增生程度的加重 ,E6、p2 1ras的阳性表达呈逐渐上升的趋势。腺瘤伴不典型性增生Ⅱ～Ⅲ级组中E6、p2 1ras阳性表达显著高于腺瘤伴不典型性增生Ⅰ级 (P <0 .0 5 )。此外 ,腺瘤、腺瘤恶变及腺癌组中E6与 p2 1ras的双阳性表达差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。在有淋巴结转移组中 ,E6的阳性表达和E6与p2 1ras的双阳性表达均显著高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。提示高危HPV16、18感染并在活化的ras癌基因的协同参与下 ,与本地区大肠癌的发生、发展过程密切相关 ,在腺瘤中同时检测E6、p2 1ras蛋白有可能成为大肠癌早期诊断的免疫学指标之一。     

HPV16、HSV-2感染在子宫颈病变中的病理学意义

目的：探讨人乳头状瘤病毒（HPV16）、单纯疱疹Ⅱ型病毒（HSV-2）与子宫颈病变性质的病因发病学关系。方法：应用免疫组化LSAB法对24例子宫颈湿疣、24例子宫颈上皮内瘤（CIN）和53例子宫颈浸润性鳞癌（SCC）组织进行HPV16、HSV-2检测。结果：在子宫颈湿疣、CIN、SCC中HPVl6检出率分别为62．5％、25．0％、66．0％；HSV2检出率分别为83．3％、41．6％、56．6％；HPV16、HSV-2同时检出阳性率分别为54．1％、16．6％及43．3％。HPVl6检出率随CIN、SCC病理分级增高而增加，不同民族的HPV16检出率差异无统计学意义。结论：HPV16感染是子宫颈癌发病的重要因素,且HSV-2在子宫颈鳞癌的发病中具有协同作用。     

喉癌组织中eIF-4E、p53、ras和c-myc的表达及意义

[目的]探讨eIF-4E、p53、ras和c-myc在喉癌原发灶的表达及意义.[方法]对42例临床分期为Ⅱ、Ⅲ期的喉癌患者行手术治疗,采用免疫组化方法检测其喉癌原发灶标本eIF-4E、p53、ras和c-myc表达.[结果]所有标本中,eIF-4E全部表达阳性,p53阳性24例,ras阳性17例,c-myc阳性14例.原发灶eIF-4E、c-myc、ras和p53的表达与患者年龄、性别、临床分期、病变部位和病理分级、肿瘤复发、吸烟史和术后放疗史等临床特征无统计学意义;c-myc或ras阳性组喉癌标本eIF-4E呈高表达.[结论]喉癌原发灶eIF-4E、c-myc、ras和p53的表达与各临床特征无关.eIF-4E的表达与c-myc和ras有关,后者可能是其上游基因,调控前者的表达.     

宫颈病变HPV16感染及其与c—myc、P53表达的关系

目的：探讨HPV16在宫颈癌发生发展中的作用及其与c-myc、P53表达产物之间的关系。方法：采用原位杂交和免疫组化方法检测了18例慢性宫颈炎、28例CIN、4例宫颈浸润性腺鳞癌和55例宫颈浸润性鳞癌HPV16 E6 DNA及其蛋白和c-myc、P53蛋白的表达情况。结果：浸润性宫颈癌HPV16 E6 DNA及其蛋白、P53蛋白阳性率明显高于慢性宫颈炎组，而c-myc蛋白阳性率则明显低于慢性宫颈炎组，P53蛋白阳性率与HPV16 E6 DNA的检出率之间并无负相关关系。结论：HPV16 E6 DNA的检出及c-myc蛋白的低表达和P53蛋白的高表达与宫颈癌的发生发展密切相关。     

甲状腺肿瘤ras—p21及EBV LMP—1的表达及意义

目的：研究ras癌基因及EBV感染在甲状癌中的意义。方法：应用SABC免疫组化法对88例甲状腺肿瘤（乳头状癌34例,滤泡性癌17例,髓样癌5例,未分化癌8例,腺瘤24例）进行研究,观察ras癌基因蛋白产物p21及EBVLMP－1的表达情况。结果：甲状腺癌p21的表达与甲状腺肿瘤良恶性有关,甲状腺癌p21阳性率（６２．５％）明显高于甲状腺腺瘤（３３．３％）（Ｐ＜０．０５）。甲状腺癌p21组织学分型无关。ＬＭＰ－２在甲状腺癌中的表达率为１５．６％,癌周组织无表达。结论：ras癌基因突变为甲状腺癌发生中的早期事件,p21检测可作为甲状腺泡性肿良恶性鉴别的辅助指标,提示ＥＢＶ感染与甲状腺癌的发生有关。     

p16和bcl-2基因与结核分枝杆菌L型感染在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨p^16抑癌基因和bcl-2凋亡抑制基因及结核分枝杆菌L型感染与前列腺癌的生物学行为。方法采用抗酸染色、免疫组化和核酸原位杂交等方法检测了58例前列腺癌患者中的结核分枝杆菌L型的检出率及p^16和bcl-2基因的表达。结果58例前列腺癌中结核分枝杆菌L型检出率为37．9％（22／58），结核分枝杆菌抗原阳性表达为39．7％（23／58）；p^16蛋白表达阳性率51．7％（30／58），失表达率48．3％（28／58），其中Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级的p^16蛋白失表达率各为21．1％、56．3％、85．7％（P〈0．05），p^16 mRNA失表达率分别为20％、40％、80％（P〈0．05），而bcl-2蛋白表达阳性率60．3％（35／58），Ⅰ级、Ⅱ及、Ⅲ及分别为31、6％、68．8％、100％，bcl-2mRNA阳性表达率各为20％、60％、100％（P〈0．05）。结论细菌L型感染可能和bcl-2、p^16基因协同在前列腺癌发生和发展中起重要作用。p^16基因的缺失、突变和高甲基化，bcl-2基因的异常表达在前列腺癌的发生和发展中起重要的作用。     

HPV16／18 E6蛋白及P53蛋白在宫颈癌中的状态

目的：探讨HPV16／18E6蛋白和P53蛋白在宜昌地区宫颈鳞癌组织中的表达及相关关系。方法：用免疫组化SP法对36例宫颈鳞癌及28例慢性宫颈炎中的HPV16／18E6蛋白和P53蛋白进行检测。结果：宫颈鳞癌中E6和P53阳性率均明显高于慢性宫颈炎组，并且E6阳性的宫颈鳞癌与慢性宫颈炎P53阳性率明显高于E6阴性组。结论：HPV16／18感染与宜昌地区宫颈鳞癌的发生密切相关，至于HPV16／18E6蛋白与P53蛋白之间的内在联系尚有待于进一步研究。     

c-myc基因蛋白在外阴白斑和外阴鳞癌中的表达及临床意义

目的：研究c-myc基因蛋白在外阴白斑和外阴鳞癌中的表达。方法：采用SABC免疫组化法,对71例外阴白斑和21例外阴鳞癌标本进行c-myc基因蛋白检测。结果：c-myc基因蛋白在正常组织中主要分布在细胞核,外阴白斑各型和鳞癌组织中主要分布在细胞浆。外阴白斑各型与鳞癌组相比较,经X^2检验,正常组（X^2＝11．072,P＜0．05）,增生组（X^2＝5．692,P＜0．05）、硬化萎缩组（X^2＝16．488,P＜0．05）、混合组（X^2＝6．497,P＜0．05）和不典型增生组（X^2＝1．072,P＞0．05）。21例鳞癌标本,I级,Ⅱ级,Ⅲ级中c-myc蛋白的阳性率 分别为100．0％（9／9）,85．7％（6／7）,60．0％（3／5）。结论：c-myc基因蛋白 表达和分布与外阴白斑分型有关,外阴鳞癌和不典型增生组织中表达阳性率明显高于外阴白斑各型,c-myc基因蛋白的过度表达可能与外阴鳞癌的发生有一定的关系。     

HPV16L1E7的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的：研究人乳头瘤病毒(HPV)的主要衣壳蛋白L1和主要的转化蛋白E7的融合基因在原核细胞中的表达，为研制HPVl6L1E7疫苗和诊断试剂盒提供依据。方法：采用聚合酶链反应(PCR)以重组质粒pUCl9UE7为模板扩增HPVl6L1E7基因片段，克隆至载体pMDl8-T中，并用限制性内切酶将HPVl6L1E7基因切下，克隆至原核表达质粒pQE30中，经IPTG诱导表达，再使用SDS-PAGE和蛋白印迹检测其抗原性和表达水平。结果：HPVl6L1E7融合蛋白能被抗HPVl6L1抗体识别，分子量为66KD，经IPTG诱导4h后，表达的HPVl6L1E7融合蛋白占菌体总蛋白量的25％以上。结论：成功构建的表达载体pOE30-L1E7可在原核表达细胞中高效表达，且表达出的HPVl6L1E7融合蛋白具有反应活性，可与HPVl6抗体发生反应。     

甲状腺肿瘤ras-p21及EBV LMP-1的表达及意义

目的研究ras癌基因及EBV感染在甲状腺癌中的意义。方法应用SABC免疫组化法对88例甲状腺肿瘤(乳头状癌34例,滤泡性癌17例,髓样癌5例,未分化癌8例,腺瘤24例)进行研究,观察ras癌基因蛋白产物p21及EBvLMP-1的表达情况。结果甲状腺癌p21的表达与甲状腺肿瘤良恶性有关,甲状腺癌p21阳性率(62.5％)明显高于甲状腺腺瘤(33.3％)(P<0.05)。甲状腺癌p21与组织学分型无关。LMI-1在甲状腺癌中的表达率为15.6％,癌周组织无表达。结论ras癌基因突变为甲状腺癌发生中的早期事件,p21检测可作为甲状腺滤泡性肿瘤良恶性鉴别的辅助指标,提示EBV感染与甲状腺癌的发生有关。     

p53和c-myc在口腔鳞癌中基因扩增和mRNA表达

目的：探讨p53和c-myc基因扩增和mRNA表达在口腔鳞癌(OSCC)形成和发展中的作用。方法：用原位杂交与图像分析相结合的方法，对30例口腔鳞癌和5例正常口腔粘膜中p53和c-myc的基因扩增和mRNA表达状况进行了定性、定位、定量研究。结果：OSCC中p53和c-myc的扩增阳性率分别为40％和63．3％，其mRNA表达率分别是80％和83．3％。p53和c-myc基因扩增量之间具有显著性相关。结论：这两种基因的扩增和mRNA表达在OSCC发生发展中都具有重要作用；在OSCC中导致p53和c-myc扩增的某些因素可能是相同的。     

EBV与癌基因P53、P21、Pl6在食道癌中表达与意义

目的探讨EBV感染与癌基因P53、P21、P16；在食道癌中的表达与意义。方法对60例食道癌病例，用原位杂交法检测EBV的表达．用免疫组化法检测P53、P21、P16的表达。结果EBV阳性表达率为72％，P53阳性表达率为83%，P2l阳性表达率为65%,Pl6阳性表达率为30%.在EBV阳性病例中P53、P21、P16的阳性病例分别为27、28、5例。结论EBV感染对食道癌的发生有一定的作用；P2l、P16的表达与EBV感染有关；P53、P2Q、P16的表达程度与肿瘤的预后有关。     

HPV16E6的表达与宫颈鳞癌发病的相关性研究

目的研究人乳头瘤病毒16E6(HPV16E6)蛋白在宫颈鳞癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法观察40例宫颈鳞癌、30例宫颈上皮内瘤样病变(C IN)和30例正常宫颈组织中HPV16 E6的表达。结果 HPV16E6在正常宫颈组织、C IN和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为:13.3%、53.3%、82.5%,各组间表达率比较,差异有统计学意义(P<0.01)。HPV16E6蛋白阳性表达在宫颈鳞癌病理分级、临床分期中的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HPV16E6在宫颈鳞癌的发生发展中起重要作用,可能是宫颈鳞癌发病机制之一。对HPV16E6蛋白的致病机制进一步研究,有助于揭示宫颈癌的发病机制,可能用于临床宫颈癌诊断、预防和基因治疗。     

C—myc蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV16／18E6蛋白表达的关系

目的：C－myc蛋白在宫颈鳞癌中的表达状态,并探讨C－myc蛋白表达与HPV16／18E6蛋白表达之间的关系。方法：采用免疫组化SP法对21例慢性宫颈炎、40例宫颈上皮内瘤变和71例浸润性宫颈鳞癌进行C－myc蛋白和HPV16／18E6蛋白的检测。结果：慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级C－myc蛋白阳性率均很高,而浸润性宫颈鳞癌C－myc蛋白阳性率下降（P＜0．05）;HPV16／18E6阳性组和HPV16／18E6阴性组之间C－myc蛋白阳性率无差异。结论：浸润性宫颈鳞癌C－myc蛋白表达明显下降,并且C－myc蛋白表达与HPV16／18E6蛋白表达之间未见明显相关。     

喉癌及癌旁不同距离组织中ras、c—myc、p53蛋白的复合表达

目的：研究癌基因（ras,c-myc)及抗癌基因（p53)蛋白在喉癌及癌旁不同距离处的复合表达及意义。方法：应用LSAB微波免疫组织化学法,检测了ras、c-myc及p53在30例喉癌组织、边缘区、癌旁0．5cm,1.0cm,1.5cm,2.0cm处粘膜组织和4例正常喉粘膜组织中的复合表达情况。结果：①2种以上基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织中为28例（93．3％）,其中ras c-myc p53为17例（56．7％）,癌旁组织中也存在着不同程度的复合表达,而正常喉粘膜组织中无一例复合表达;②复合表达阳性率依正常粘膜组织→癌旁2．0cm→1.5cm→1.0cm→0.5cm→边缘区→癌组织递增,且癌旁1．0cm处与0．5cm范围内的表达存在显著差异（P＜0．05）;③种癌基因产物的复合表达与喉癌的部位,分化程度, 临床分期无关（P＞0．05）。结论：喉癌及癌旁组织中存在着3种癌基因的复合表达,其在喉癌的发生中的协同作用;距离0．5cm以内的癌旁组织应视为危险性病变。     

0HPV16,18E6,c-erbB-2及p21ras基因蛋白的表达与肛癌的关系

目的 :研究人乳头状瘤病毒 (humanpapillomavirus,HPV) 16和 18型E6蛋白及c-erbB - 2及 p2 1ras基因蛋白的表达与肛癌的关系。方法 :应用免疫组化Envision(二步法 )对肛癌 32例、腺癌 10例及正常肛门粘膜30例HPV16 ,18E6 ,c -erbB - 2及p2 1ras染色。结果 :HPV16、18E6阳性率分别为 78.1% (2 6 /32 ) ,2 0 .0 %(2 /10 ) ,10 .0 % (3/30 ) ,其中鳞癌明显高于正常肛组织的表达 (P <0 .0 1) ,腺癌与正常肛组织表达无明显差异(P >0 .0 5 )。c -erbB - 2及 p2 1ras阳性率分别为 5 9.4% (19/32 ) ,6 0 .0 % (6 /10 ) ,10 .0 % (3/30 )和 5 6 .3% (18/32 ) ,5 0 .0 % (5 /10 )和 3.3% (1/30 ) ,其中鳞癌和腺癌明显高于正常肛组织的表达 (P <0 .0 1)。在鳞癌中 ,E6与c-erbB - 2同时表达 19例 ,占 5 9.4% (19/32 ) ,E6与 p2 1ras同时表达 18例 ,占 5 6 .3% (18/32 ) ,与腺癌及正常肛粘膜组织中二者同时表达的病例相比有明显差异 (P <0 .0 1)。结论 :HPV16 ,18E6 ,c -erbB - 2及p2 1ras与肛鳞癌的发生发展有一定相关性。c -erbB - 2及p2 1ras与肛鳞癌、腺癌的发生发展均有相关性。HPV16 ,18E6 ,c-erbB - 2及p2 1ras共同作用可能是肛癌发生发展的重要因素