140例健康人高铁血红蛋白的测定

根据中国医学科学院血液病研究所提供的高铁血红蛋白测定方法,通过实践,我们稍作改进,专人对上海地区140例城市健康成人采指血作了测定。现将测定方法、结果和体会分述如下。 测定方法 1.试剂 (1)pH6.6M/60p.B.液; (2)5％铁氰化钠(或钾)液; (3)6％氰化钠或氰化钾液。 2.操作步骤 取一试管,加入pH6.6M/60p.B.液10ml,加入新鲜全血0.1ml,充分混匀后经过离心10分钟(3000转/分。)用吸管吸取离心后的上清液5ml移入A管,另5ml移入B管。     

未培养的羊水细胞荧光原位杂交和标准核型分析的前瞻性对比研究

1996年11月～1997年12月,因超声发现异常,血清筛选异常或高龄孕妇到妇科遗传科进行侵入性产前诊断遗传咨询。904例羊膜穿刺后未培养的羊水细胞进行快速荧光原位杂交(FISH)和标准的核型分析。取2～5 ml清亮羊水于1000转/min,离心5 min进行FISH分析。去上清液后细胞团悬浮于0.56％ KCL 3 ml中,在37℃水浴中20min,加2 ml甲醇/冰醋酸(3:1)。轻轻旋转样本,在1 000转/min下离心悬液5 min。细胞团悬浮在0.5 ml的上述固定液中,此固定标本可在-20℃长期保存或离心调整容量后直接放在载玻片上,制成细胞悬浮液滴     

肤阴洁杀菌性能的实验观察

洗必泰是一种低毒消毒剂,现广泛用于日常皮肤粘膜消毒和卫生保健,肤阴洁是以洗必泰配以中草药组成,我们在实验室对其杀菌效果进行了观察,现将结果报告如下. 1 方法 1.1 菌悬液制备试验前,分别将大肠杆菌(8099),金黄色葡萄球菌(ATCC6538),白色念珠菌(10231), 第3～14代划线接种于斜面培养基上,培养18～24h后取出,用磷酸盐缓冲液(pH 7.2～7. 4,简称PBS)洗下,制成菌悬液,置4℃冰箱中备用. 1.2 中和剂选择试验试验分6组.1组:消毒剂+菌悬液 ;2组:(消毒剂+菌悬液)+中和剂;3组:中和剂+菌悬液; 4组:中和产物+菌悬液;5组:菌悬液对照;6组:未接种培养基对照.结果以第1组不长菌或有远少于第2组菌数生长,第2组有菌生长,且菌数≥100 cfu*ml-1,第3、4、5组菌数相似且组间误差率≤10%,第6组无菌生长,可判为中和剂适宜. 1.3 杀菌试验试验为悬液定量杀菌法,试验时取5 ml消毒剂加0.1 ml菌悬液,混匀,作用至预定时间后取 0 .5 ml加入0.45 ml中和剂中,作用10 min后,取0.5 ml终样液于平皿中一式两份,倾注培养基后置恒温箱中培养48h后观察结果,计算杀灭率. 1.4 稳定性试验将消毒剂连同原包装置54℃恒温箱中14 d 后取出,于存放前后分别测定该消毒剂对大肠杆菌的杀灭效果.     

强化戊二醛杀菌性能实验研究

强化戊二醛是由内蒙古金星卫生保健品厂生产的液体消毒剂。为了对其杀菌作用做出科学评价,我们对强化戊二醛进行有关实验室的杀菌试验及对金属腐蚀性的研究。1　方　法1.1　定量杀菌试验1.1.1　菌悬液的制备　试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC6538),大肠杆菌(8099),枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC9372)。将细菌培养物及芽胞悬液用磷酸盐缓冲液(PBS0.03mol/LpH7.2)制备成含菌量为106～107cfu/ml的菌悬液备用。1.1.2　定量杀菌试验　在20±2℃水浴环境条件下进行悬液定量杀菌试验。取0.1ml菌悬液加入5.0ml消毒液中混匀、计时,作用至预定时间。取…     

检测污泥中肠道病毒的尿素-赖氨酸方法

本文叙述尿素-赖氨酸方法实验性回收和检测污泥中的肠道病毒。取200～1,000 ml污泥(加入或不加入病毒),离心(3,500×g)5分钟,分离上清液和污泥,然后分别处理。(1)上清液中加入最终浓度为0.003 M的氯化铝,用1 M碳酸钠调到pH 7,混匀5分钟,形成的絮凝物离心(4,000×g,5分钟)。弃去上清液,按每克絮凝物(湿重)与5ml 0.1M EDTA3%牛肉浸液(pH9)混合,离心(15,000×g,10分钟)去除小量不溶解的絮凝物。将上清液在4℃下对磷酸盐缓冲液(pH 7.2)透析过夜,     

优安净洗涤消毒剂能量试验效果观察

为了确定优安净洗涤消毒剂对多次消毒污秽物品的实用浓度 ,我们进行了能量试验 ,结果报告如下 :1　试验方法1 1　菌悬液制备试验菌为大肠杆菌 (80 99)。吸取大肠杆菌新鲜营养肉汤 2 4h培养物 6 0ml,加于含 4 0ml酵母液试管中 ,混匀 ,使菌悬液含菌量在 10 6～ 10 7cfu/ml之间。1 2　操作步骤将待测消毒剂用硬水稀释成A (90 0mg/L)、B(6 0 0mg/L)、C (30 0mg/L) 3个浓度的药液 ,各取3 0ml分装于无菌试管内。第 1次 ,取试验菌悬液 1 0ml加入到第 1管A浓度消毒剂溶液内 ,立即混匀。在A管加菌悬液后8min ,分别吸取A管内混合液 2 0 μl移种…     

快速X染色质涂片检查法在优生咨询方面的应用

近年来,随着优生学的不断发展,脱落细胞X染色质检查方法的应用也越来越广泛。我们在实践中将旧法加以改进,使其制片的时间大大缩短,X染色质出现率及临床诊断率与旧法比较无明显差异,临床应用简单可靠,有利于推广。方法:一、快速羊水细胞X染色质涂片制备:(一)抽取羊水:同利凡诺中期引产术。(二)取羊水100ml,离心1500转/分,10分钟。(三)去上清液,加新配制的3:1甲醇冰醋酸固定液10ml。打匀细胞。(四)离心1000转/分,10分钟。     

腹泻者粪便中肠毒素的检测法

迄今,已知可产生腹泻原性毒素的细菌有:霍乱弧菌、产毒性大肠杆菌、难辨梭状芽胞杆菌、非 O1群霍乱弧菌、副溶血性弧菌、河弧菌、沙门氏菌、耶尔森氏菌、克雷白氏菌、产气单胞菌、产气梭状芽胞杆菌、葡萄球菌和空肠弯曲菌等。作者推荐用反向被动血凝试验法(RP-HA)检测产毒性大肠杆菌的不耐热肠毒素(LT)。其具体操作步骤是:挑取1白金耳的病人粪便接种在 CAYE 3培养基上,37℃培养过夜,在培养基上加多粘菌素B0.1ml(2万单位/ml),再经37℃培养3小时,加1ml 磷酸盐缓冲液,用手摇混合器搅拌,离心20分钟(每分钟3,000转),取其上清液进行检测。用一般培养法,17个检样中有16个检出产生 LT 的细菌,22个检样中有19个检出产生 LT+ST(耐热性肠毒素)的细     

宫颈粘液对透明带诱导人精子顶体反应的影响

哺乳动物精子在培养液中可诱发自发的顶体反应,与透明带结合后可引起透明带诱导的顶体反应。在人所知尚少,本研究用盐贮存人卵的透明带,探讨透明带诱导的顶体反应,以及宫颈粘液(CM)对其影响。手淫法采精,室温下30分钟液化后,45%Percoll 2.0ml、900×g离心20分钟,所得精子沉积,加mBWW混匀,300×g离心10分钟,去上清液,制成0.5ml高浓度精子悬液,加2.0ml mBWW用上游法选活动良好的精子。用1ml结核菌素注射器分别吸取0.2ml mBWW和0.2ml成年妇女排卵日的CM,二者不混合呈分层状态,CM层下方垂     

口洁液抑菌效果及毒性试验研究

随着物质生活和文化水平的不断提高,人们对口腔保健药品需求也逐渐提高.大连某学院研制合成的口洁液是一种纯天然口腔保健药品,其主要成份L-香芹酮,是留兰香油和薄荷粮油的主要成份,据国外介绍L-香芹酮具有抑菌作用.为此我们在实验室进行了口洁液抑菌效果及毒性试验研究,报告如下:1 材料与方法1.1 材料 口洁液为绿色无沉淀无悬浮物的透明液体.试验菌种选用大肠杆菌(8099),金黄色葡萄球菌(ATCC6538).1.2 定量抑菌试验 用 0.03mol/L的PBS洗下3～14代细菌培养物,制备出鲜菌悬液,使初始菌量为5.0×10~6～5.0×10~7cfu/ml.取4.5ml口洁液原液及对倍稀释液,分别加上述菌液0.5ml,作用10分钟后,吸取0.5ml倾注培养皿37℃培养48小时,活菌计数并计算抑菌率.试验温度为20℃,相对湿度70%.取3次试验平均值.1.3 稳定性试验 将包装好的药物原液在不同温度下放置不同时间后,按前述方法进行抑菌试验.同时观察原液的颜色变化情况.1.4 急性经口毒性试验 用40只昆明种健康小白鼠,体重为18～22g,按动物体重随机分组,每组10     

简易快速检测人轮状病毒

作者用抗轮状病毒血清致敏含A蛋白的葡萄球菌,与52份腹泻标本的10%粪便悬液作协同凝集,能在1—3分钟内出现清晰的凝集,为了对比同步作ELISA进行考核。一、方法(一)粪便悬液制作:用pH7.4PBS—吐温20将粪便稀释成10%的悬液,用力振摇30分钟后离心3000rpm30分。取上清-20℃贮存备用。(二)SPA诊断液制作:按常规法制作。     

微波提取——一种新方法取代传统的索氏提取法

本文介绍了用简单的微波技术代替传统的索氏提取法提取各种植物中的抗营养物质如嘧啶-葡萄糖苷和柿子酚。新方法的提取率较旧方法高,并能减少欲测物质的损失。方法:取0.5～1.0g样品,混合于2～3ml溶剂中(50%甲醇水溶液),于微波炉中照射30秒,(U=220 V,p=1140 W,f_1=2450MHz),取出冷却数分钟后,再放入炉中提取,如此重复三次。照射提取后,离心11000 g 10分钟。取上清液1.9 ml加内标准贮备液0.1ml(含0.1g磺胺胍/100 ml水)。取此试样液     

碳酸镍引起大鼠肾DNA-蛋白交联和DNA断裂

作者用大鼠进行了碳酸镍(NiCO_3)对肾DNA影响的研究。实验用体重150～175 g的Sprague-Dawley种雄性大鼠,将碳酸镍混悬于0.5 ml香油中,分别按每公斤体重10,15,20 mg的剂量腹腔注入,对照组仅注射0.5 ml香油。注射后20小时断头处死,于4℃下暗室中操作,用碳酸盐/EDTA缓冲液从右肾皮质制备细胞核。按照K0hn的方法从PVC滤器中用碱洗脱DNA。滤器和洗出部分用2 mg/ml的小牛血清白蛋白液200ml处理,经沉淀、离心和真空干燥后,于60℃培养30分钟,以滤器为标准样品,在荧     

用高压液相色谱测定鱼肝中的α-生育酚

本文叙述了一个用高压液相色谱测定鱼肝脏中维生素E的简便方法。此方法不需要皂化和薄层层析,这样就避免了在样品处理过程中α-生育酚受到破坏。从3～4条鱼的肝脏中每个取样约0.5 g,称重。样品在15 ml二(口恶)烷-异辛烷(20+80)混合液中匀浆1分钟。匀浆在每分钟10,000转的转速下离心5分钟。吸5 ml上清液于250 ml园底烧瓶中。弃去剩余上清液,沉淀物再用15 ml混合液匀浆,离心,取5 ml     

病人精液变异与宫腔内授精结局的关系

本研究分析了精液质量的稳定与宫腔内授精(IUI)结局的关系。61对夫妇进行了IUI,不孕规在3.5年以上,经腹腔镜或子宫输卵管造影证实至少有一侧输卵管通畅。45例自然排卵,8例用橼枸酸克罗米芬,8例自然与刺激周期联合排卵,不包括黄体功能不足病人。未孕妇女至少行了2次IUI治疗周期,并至少有一个精子浓度≥20×10~6/ml的精液标本。手淫获取精液,每份0.5ml等分分开,保留0.05～0.1ml分析,等分的精子用1.0ml和1.5ml培养液洗涤2次,每次离心10分钟(300×g),第二次洗涤后在每一小球上缓慢加0.5ml培养液成层,在37℃5%CO_2孵育45分钟,使活动精子游向培养液中,将所有试管上精液合并并离心,最后的小丸悬浮在0.5ml     

非酒精性饮料中糖精的分光光度测定法

本文报道的方法系根据糖精与吩噻嗪和醋酸铜反应,产生红色,可用有机溶剂提取与标准比色定量。方法简单、精确,反应专一,颜色稳定。可用于非酒精性饮料中糖精的常规测定。将饮料以反复振摇和从一个烧杯倒入另一个烧杯的办法除去二氧化碳后,称取50g放入300ml分液漏斗中,加30ml水和5ml10%硫酸,摇匀。用100ml乙醚提取2次,每次振摇3分钟,弃去水层。乙醚层用25ml1%碳酸氢钠提取2次,弃去乙醚层。水层用10ml10%盐酸酸化,再用30ml乙醚提取2次。将乙醚提取液用10ml蒸馏水洗涤后,移入100ml烧杯中,于40℃蒸发至少量,用5ml50%乙醇洗入试管(约17.5×1.7cm)中,同时取一定量的糖精标准溶液(1mg/ml50%乙醇溶液),相当糖精0.1～2mg,分别置于试管中,加50%乙醇至总体积为5ml。以50%乙醇5ml为空白。样品管、标准管和空白管各加醋酸铜溶液(0.5g醋酸铜溶于100ml 0.5%醋酸中)和吩噻嗪溶液(1g吩噻嗪溶于100ml 99.5%乙醇中。当天新配)各1ml,再加乙醇3ml,将试管置65～70℃水浴中,保持50分钟,并不时加以振摇。取出,冷却至室温后,将溶液倾入50ml分液漏斗中,用2ml99.5%乙醇洗试管,洗液併入分液漏斗中,加5ml     

人轮状病毒感染的诊断:电泳法、改良的补结试验与电镜法检出轮状病毒的比较

用补体结合试验和醋酸纤维膜对流免疫电泳检查了95份临床标本,并与电镜法相比较。其中,75份为急性胃肠炎病人粪标本,20份为非急性病毒感染儿童的粪标本。以PBS将粪便标本制成10%(w/v)悬液,先以3,000转/分在4℃下离心15分钟除去大颗粒,其上清液再以9,000转/分离心60分钟除去颗粒和细菌,最后以55,000转/分离心60分钟。将沉淀小团悬浮于0.2毫升水中,在显微载玻片上进行单纯补结试验。再将以     

毛细管柱气相色谱法测定酒精饮料中氨基甲酸乙酯及GC-MS鉴定

本文介绍了用毛细管柱气相色谱测定酒精饮料中每公斤微克水平的氨基甲酸乙酯即脲烷。将50 g样品放入250 ml离心瓶中,加30 gNaCl旋转1～2分钟形成盐饱和溶液,再加入75 ml二氯甲烷剧烈振荡约1分钟,离心,转     

郑州市医院1990年婴幼儿轮状病毒腹泻分子流行病学分析

<正> 1990年9月—12月、郑州市婴幼儿急性腹泻流行,我们用聚丙烯酰胺电泳(PAGE)法进行了软状病毒分子流行病学调查,现报告如下。材料与方法 1、标本来源:1990年9月—12月30日,从本市儿童医院、四院、河南医学院第一附属医院收集0—4岁婴幼儿急性腹泻粪便标本117份,放-20℃保存备用。 2、标本处理:取粪便0.1g或粪液0.1ml于小塑料管中,加0.4ml醋酸钠(含1％SDS)和酚、氯仿提取,充分混匀后,1000转/分离心5分钟,取上清液再用酚、氯仿提取一次,含双链RNA的上层液     

尿中微量铬测定方法的改进(摘要)

<正> 我们在参照有关资料的分析方法基础上减少尿样加入量(由原50ml 减至20ml)、缩短消化时间、节省试剂用量、并在前处理等方面进行一些改进,仍得到了较满意的结果。分析法简述如下:取尿样20ml 加混合酸(硝酸与硫酸按5∶1混合)5ml,加热消化至刚炭化,放冷后加2滴高氯酸,加热至液体无色透明,再继续加热20分钟,冷却后加水20ml、0.1％甲基橙液一滴,用氨水调至刚变黄、再用1∶3硫酸调至刚变红,加20％磷酸0.3ml、3％高锰酸钾液一滴,置电热板上煮沸5分钟,若溶液紫色褪,补加高锰酸钾液一滴,使保淡紫