维生素D受体在乳腺癌进展过程中mRNA及蛋白表达情况及其意义

目的：通过测定维生素D受体( VDR)在乳腺疾病进展过程中的mRNA及蛋白表达情况,以探讨VDR在乳腺疾病演变过程中的表达变化及其意义。方法成组设计,分为四组(非特殊类型浸润性癌、正常乳腺、腺病、导管原位癌),采用逆转录实时荧光PCR( Real-time RT-PCR)方法检测乳腺标本的VDRmRNA的表达情况,采用免疫组织化学染色方法检测VDR的蛋白水平表达情况。结果在浸润性乳腺癌组织中,VDRmRNA表达水平显著降低,与正常乳腺组织相比差异有统计学意义(P<0．05),同时蛋白表达水平降低;正常乳腺组、腺病组与导管原位癌组VDRmRNA表达水平及蛋白水平依次降低,但差异无统计学意义(P>0．05)。结论浸润性乳腺癌组织中VDR表达下调,在本实验中显示VDR的表达与乳腺病变的进展呈负相关,进一步佐证VDR的表达对于乳腺有一定保护作用。     

维生素D受体mRNA在白血病患者外周血细胞中的表达

目的 :检测白血病患者外周血维生素D受体 (VDR)mRNA表达 ,探讨 1,2 5 (OH) 2 D3 诱导分化的分子学机制。方法 :以RT_PCR技术检测白血病患者外周血细胞中VDRmRNA表达。结果 :白血病患者外周血细胞中均有VDRmRNA表达。结论 :白血病患者外周血细胞是维生素D3(VD3)作用的靶细胞 ,1,2 5 (OH) 2 D3 的作用可能是通过VD3 核受体 (VDR)而介导 ,提示VD3 能用于各种类型白血病的诱导分化治疗     

Graves病患者甲状腺组织雄激素受体表达的研究

目的:考察Graves病患者血浆睾酮(testosterone,T)浓度以及其外周血白细胞和甲状腺组织中雄激素受体(androgen receptor,AR)水平,以探讨雄激素及其受体与Graves病的关系.方法:以8例女性Graves病患者、8例甲状腺腺瘤患者及8例配对的健康对照者为研究对象,采用酶联免疫分析法测定血浆T浓度,放射配体结合法检测患者外周血白细胞3H雄激素(T)特异结合位点,RT-PCR检测外周血白细胞AR的mRNA表达,免疫组织化学法检测甲状腺组织AR水平.结果:Graves病组和对照组血浆T浓度分别为(660±80) ng/L及(620±100) ng/L,组间无明显差异(P＞0.05);两组外周血白细胞 3H-T特异结合位点分别为(381±105)位点/细胞、(572 ±141)位点/细胞,组间差异显著(P＜0.05);Graves病患者外周血白细胞AR的mRNA表达量显著高于对照组(P＜0.05);免疫组化检测显示,Graves病患者甲状腺组织AR水平显著高于正常甲状腺组织(P＜0.01).结论:Graves病患者血浆T浓度较正常对照组无明显变化,但外周血白细胞AR的mRNA表达和甲状腺组织中AR水平均增高,考虑是机体保护性反应的调节.此外,也可能与病理情况下性激素结合能力下降、AR不能良好发挥生理效应相关.外周血白细胞中蛋白结合活性检测结果降低,推测是甲亢患者AR分解加速所致.     

Graves病患者外周血淋巴细胞功能的临床实验研究

作者以~3H-TdR掺入淋巴细胞转化法为观察指标,研究了正常人和Graves病(GD)患者外周血淋巴细胞对不同致有丝分裂原的反应性,并使用非特异性酯酶染色法对GD患者外周血T淋巴细胞(Tc)进行了检测。结果表明:正常人、GD患者Tc对PHA的反应性显著大于ConA;GD患者对PHA、ConA的反应性与正常人无明显差异;GD患者外周血Tc数目也未见有异常;GD患者初发组B淋巴细胞(Bc)对SPA菌体的反应能力明显高于正常对照组,且与GD临庆转归具有一定规律性。本研究提示:Graves病患者外周血Bc功能存在免疫学异常,而Tc从功能、数量上均未见有明显异常改变。     

PDGF-BB在Graves病患者外周血中的表达及意义

目的:检测PDGF-BB在Graves病患者外周血中的表达,探讨PDGF在Graves病进展中的作用和机制。方法:收集Graves病患者外周血样本41例以及健康人群外周血样本41例。ELISA法检测PDGF-BB、HIF-1α的浓度;流式细胞术检测两组外周血样本中单核巨噬细胞CCR2的表达。结果:PDGF-BB、HIF-1α在Graves病患者和健康人群外周血中均有表达。与健康对照组相比,PDGF-BB、HIF-1α在Graves病患者血清中的浓度增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。进一步流式细胞术检测显示,Graves病患者外周血中CCR2阳性巨噬细胞的比例高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Graves病患者体内CCR2巨噬细胞可能通过HIF-1α途径促进PDGF-BB的表达,而PDGF-BB的高表达则可能是引起Graves病进展的重要参与因素。     

维生素D受体斑秃皮损处毛囊的异常表达

目的 观察维生素D受体(VDR)在斑秃病人及正常人毛囊中的表达情况。 方法 分别通过荧光定量PCR及免疫组化法检测24例斑片型斑秃病人及12例正常人头皮毛囊中维生素D受体的mRNA及蛋白表达水平,并比较斑秃患者不同脱发面积、发病年龄、病程与维生素D受体表达水平高低之间关系。结果 斑秃患者毛囊VDR的mRNA及蛋白表达水平显著低于于正常人,但斑秃患者之间的VDR水平在不同发病年龄、脱发面积、病程无差异。结论 维生素D受体在斑秃患者毛囊的表达低于正常人,可能在斑秃发病中起作用。     

反转录聚合酶链反应检测自身免疫疾病和正常人外周血淋巴细胞C-myc癌基因的表达

目的：探讨癌基因Ｃ－ｍｙｃ在自身免疫病患者和正常人外周血淋巴细胞上的表达情况。方法：分离正常人及系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）患者外周血淋巴细胞，采用异硫氰酸胍一步法提取ＲＮＡ，利用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，比较正常人及自身免疫病患者外周血淋巴细胞Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达程度。结果：ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达较正常人和ＲＡ患者高，ＲＡ和正常人之间没有差异。ＨＬ－６０细胞系Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达最强，ＧＢＣ胃癌细胞株较正常人为高。结论：提示Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ在肿瘤细胞株及ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞上有较高的表达，认为自身免疫病原癌基因的表达在其发病机理中具有重要的作用。     

毒性弥漫性甲状腺肿中α干扰素及其诱导蛋白IFIT1的作用

目的 探讨α干扰素(IFN-α)及其诱导蛋白IFIT1在毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)发病中可能起到的作用.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Graves病患者(GD组)和健康者(对照组)外周血单个核细胞(PBMC)中IFIT1 mRNA表达情况.根据IFIT1表达量分为高表达亚组(表达增高≥2倍,33例)、低表达亚组(表达增高＜2倍,21例),比较两组间相关临床指标.结果 GD组PBMC中IFIT1 mRNA的表达显著高于对照组(P＜0.05).GD组中,高表达亚组的血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平显著高于低表达亚组(P＜0.05).两亚组间其他临床指标的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).结论 IFN-α可能通过IFIT1影响TRAb的生成,在Graves病发病中发挥作用.     

肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎患者腹腔白细胞维生素D受体及LL-37表达

目的评价腹腔白细胞维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)及LL-37是否参与了自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis,SBP)的发病机制。方法应用Real-ti me PCR方法检测19例肝硬化合并SBP患者及28例单纯腹水患者的腹腔白细胞VDR及LL-37 mRNA表达水平。评价它们与SBP的相关性,并分析肝硬化合并SBP患者的VDR及LL-37 mRNA水平的相关性。结果肝硬化合并SBP患者腹腔白细胞VDRmRNA表达水平为6.79×10-3±7.60×10-4,肝硬化单纯腹水患者为4.13×10-3±4.43×10-4,肝硬化合并SBP患者腹腔白细胞VDR水平显著高于单纯腹水患者,差异有统计学意义(P<0.01)。肝硬化合并SBP患者腹腔白细胞LL-37 mRNA表达水平为6.81×10-5±1.47×10-5,单纯腹水患者为1.74×10-5±2.42×10-6,前者显著高于后者,差异有统计学意义(P<0.01)。肝硬化合并SBP患者腹腔白细胞LL-37 mRNA表达水平与VDRmRNA表达水平呈正相关(r=0.700,P<0.01...     

Graves病患者外周血分泌TRAb前体细胞的存在及意义

目的：探讨分泌TRAb的前体细胞在Graves病（GD）患者外周血中的存在及意义。方法：利用EB病毒体外激活外周血淋巴细胞，测定GD患者外周血中潜在的TRAb分泌细胞。结果：Graves病患者的分泌TRAb的转化B细胞阳性孔占免疫球蛋白阳性孔的百分率远高于正常对照。正常对照中也可以检出较低频率的TRAb前体细胞，EBV转化的TRAb前体细胞以分泌IgM型抗体为主。结论：在Graves病患者体内，有较高频率的潜在分泌TRAb前体细胞存在。推测这可能是药物治疗的患者易复发的原因。     

弥漫性甲状腺肿伴甲状腺功能亢进患者外周血白细胞雄激素受体基因表达的探讨

弥漫性甲状腺肿伴甲状腺功能亢进(Graves病)为病因不明的自身免疫性疾病,女性与男性发病之比约为 5:1,提示Graves病与性激素有一定联系。雄激素对免疫系统有重要的调节作用。本研究采用放射配体结合法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法检测Graves病患者外周血白细胞雄激素受体(AR)蛋白结合活性及 mRNA表达。探讨其在Graves病的作用机制及意义。     

Graves病患者治疗前后外周血辅助性T细胞表面CCR5和CD30的表达

目的 观察Graves病患者外周血辅助性T细胞(Th细胞)表面CCR5和CD30的表达,探讨Th1/Th2细胞失衡在Graves病患者发病中的作用.方法 选择89例Graves病患者,将其分为Graves病未治疗组(Graves病组,31例)、Graves病甲巯咪唑治疗组(甲巯咪唑组,30例)和Graves病131Ⅰ治疗组(131Ⅰ组,28例),另选择35例健康者作为对照组.采用流式细胞技术检测4组血清甲状腺相关指标及外周血淋巴细胞中CCR5及CD30的表达量,以此作为反映Th1/Th2免疫应答强度的指标.结果 Graves病组患者CD30表达量高于对照组,CCR5/CD30低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);甲巯咪唑组和131Ⅰ组患者CCR5/CD30高于Graves病组,差异有统计学意义(P＜0.05),但与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).相关分析显示,CD30表达量与促甲状腺素受体抗体(TRAb)水平呈正相关(r=0.38,P＜0.01),CCR5/CD30与TRAb水平呈负相关(r=-0.33,P＜0.01),CCR5水平与TRAb水平无相关性(r=-0.14,P＞0.05).结论 Graves病患者Th细胞表面CD30表达明显增加,CCR5/CD30比值降低,提示Th1/Th2细胞失衡参与了Graves病的免疫调节过程;而甲巯咪唑和131Ⅰ治疗能缓解Graves病患者Th1/Th2细胞失衡.     

反转录聚合酶链反应检测自身免疫疾病和正常人外周血淋巴 …

目的：探讨癌基因Ｃ－ｍｙｃ在自身免疫病患者和正常人外周血淋巴细胞上的表达情况。方法；分离正常人及系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）患者外周血淋巴细胞，采用异硫氰酸胍一步法提取ＲＮＡ，利用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，比较正常人及自身免疫病患者外周血淋巴细胞Ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达程度。结果：ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞Ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达较正常人和ＲＡ患者高，ＲＡ和正常人之     

Graves病患者外周血sIL-2R和TRAb水平的临床研究

目的：观察Graves病患者治疗前后sIL-2R和TRAb水平的变化，指导临床用药及监测病清。方法：分别应用酶联法检测Graves病患者治疗前后及对照组外周血sIL-2R和TRAb，用放射免疫法测定T4、T3，并比较其变化。结果：Graves病患者治疗前血sIL-2R和TRAb水平明显高于治疗后及正常对照组，并且二者均与T4、T3水平呈正相关。结论：监测外周血sIL-2R和TRAb水平对于Graves病患者的治疗及预后分析有着重要意义。     

精神分裂症患者外周血淋巴细胞免疫指标与表面C-fos蛋白表达

目的：探讨精神分裂症(Sch)患者治疗前、后外周血淋巴细胞表面标志(CD3^ 、CD4^ 、CD8^ )和淋巴细胞转化率及核Fos蛋白表达的变化。方法：应用Sch患者外周血测定淋巴细胞的表面标志及淋巴细胞转化试验，检测正常人淋巴细胞在Sch患者血清作用下核FOS蛋白的表达状况。结果：Sch患者外周血淋巴细胞转化率明显降低，初发组C-fos蛋白表达异常。结论：C-fos蛋白的异常表达可能与Sch患者外周血的细胞免疫异常有关。     

维生素 D 受体基因启动子甲基 化异常与婴儿尿路感染相关性 研究

目的研究维生素D受体（VDR）基因启动子甲基化异常与婴儿尿路感染的关系。方法选择急性尿路感染患儿32例（尿路感染组）和同期健康体检婴儿30例（健康对照组）。采用荧光定量PCR法检测VDR、DNA甲基化转移酶（DNMTs）mRNA表达水平,重亚硫酸氢钠测序技术检测VDR基因启动子的甲基化水平。结果尿路感染组患儿VDRmRNA表达水平高于健康对照组婴儿,DNMT1mRNA表达水平低于健康对照组婴儿,两组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。两组DNMT3a、DNMT3bmRNA表达水平比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。尿路感染组患儿VDR基因启动子甲基化水平显著低于健康对照组婴儿,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论尿路感染患儿VDRmRNA表达水平升高,VDR基因启动子的甲基化水平降低,VDR基因甲基化异常与婴儿尿路感染相关。     

地塞米松及补肾方药对大鼠骨维生素D受体表达的影响

目的：探讨地塞米松诱导大鼠骨质疏松症的机理及补肾方药预防其发生的机制,方法通过肌肉注射地塞米松造成骨质疏松模型,观察补肾中药灌胃对骨密度的影响。从骨骼中提取mRNA,采用RT－PCR方法对维生素D受体（vitamin Dreceptor,VDR)mRNA进行半量,结果地塞米松组大鼠的骨密度明显降低,而骨骼中VDRmRNA的表达却明显升高（P＜0．05）与地塞米松组相经, 肾方药组的骨密度升高,VDRmRNA的表达降低（P＜0．05）。结论地塞米松使VDRmRNA在骨骼的表达增强,这可能是其诱导骨质疏松症的机制之一,补肾方药可通过拮抗地塞米松的这种作用而防止骨质疏松症的发生。     

Graves病患者外周血中CD5+B淋巴细胞的变化

为观察Graves病患者外周血中CD5 B淋巴细胞在治疗过程中的变化,我们应用流式细胞术检测Graves病患者药物治疗前后外周血CD5 B淋巴细胞,以探讨CD5 B淋巴细胞与Graves病病情活动的相关性.     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX 补充雌激素组、OVX 补充孕激素组和OVX 补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX 补充雌激素组和OVX 补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX+补充雌激素组、OVX+补充孕激素组和OVX+补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX+补充雌激素组和OVX+补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.