我院2010年临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的 总结分析2010年分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药情况,为临床用药提供依据.方法 API系统鉴定细菌.K-B法进行药敏试验.结果 大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌为临床常见菌,检出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶产生率为52.7％和45.9％.对多种抗菌药物具有高度耐药性,对亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦保持较低耐药率.结论 我院分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性较强,出现多种耐药菌株,应加强抗菌药物的合理使用.     

产ESBL的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药性分析

超广谱β-内酰胺酶（ESBL）主要由肠杆菌科细菌产生，尤以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为代表。产ESBL菌不仅对第三代头孢菌素和氨曲南耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类交叉耐药。ESBL可以通过接合、转化和转导等形式使耐药基因在细菌间扩散。为了解本地区儿科ESBL菌的发生率和耐药特点．以控制ESBL菌的传播和流行，我们对122株肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌做了ESBL检测，并分析其对10种抗生索的耐药性，现将结果报告如下。     

基层医院超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

为了解肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的产生情况，指导临床医生合理地使用抗生素，防止医院感染及EBSL的暴发流行，我们检测了2002-06～2005-06分离到的168株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBL的产生情况，并对产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的体外抗生素耐药性作了初步研究，现报告如下。     

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药性监测

超广谱β内酰胺酶（ESBLs）主要由肠杆菌科细菌产生，以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为代表。产ESBLs菌对三代头孢菌素和氨曲南耐药，而且对喹诺酮类、磺胺类等非β内酰胺类抗生素耐药,给临床治疗产ESBLs菌引起的感染造成极大的困难。为了解我院超广谱β内酰胺酶的耐药特点，指导临床医生合理地使用抗生素，我们汇总了2002—01～2005—01分离到的269株肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌ESBLs的产生情况，分析了其对10种抗生素的耐药性，结果如下。     

大肠埃希氏菌耐药性临床观察

我院2004-05～2005-04对分离确认的92例大肠埃希氏菌的药敏试验进行分析,现将结果报告如下.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法细菌药敏试验采用琼脂纸片扩散法(K-B法)、双纸片协同试验及纸片扩散确诊试验检测ESBLs。结果大肠埃希菌中产ESBLs占25.0%,肺炎克雷伯菌中占28.8%;产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗菌药物大多耐药,而对亚胺培南敏感,产ESBLs菌株对抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs菌株。结论ESBLs是细菌对青霉素类和头孢类抗菌药物耐药的重要机制,及时监测产ESBLs菌的发生率及耐药趋势,对指导临床用药至关重要。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性监测

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的院内分布及耐药性状况,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:用VITEK-60鉴定细菌,药敏用K-B法,用双纸片法检测ESBLs。结果:2002-2004年3年间共分离出1183株大肠埃希菌,产酶株占27%;肺炎克雷伯菌661株,产酶株占25.4%。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对美罗培南和亚胺培南的敏感率最高,敏感率均在97%以上。产ESBLs大肠埃希菌对阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率较高分别为81.1%和71.2%,而产ESBLs肺炎克雷伯菌对其余抗生素的敏感率均不佳。结论:产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药严重,应控制三代头孢抗生素的使用以遏止ESBLS菌株不断上升的势头。     

大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药性分析

革兰阴性杆菌产生各种β-内酰胺酶是其对β-内酰胺类药物耐药的主要机制,以质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是其中重要的一种。ESBLs在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最常见。本研究对河北大学附属医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行了药敏试验、ESBLs的初筛和确证试     

大肠埃希菌338株耐药性分析

我们对本院临床分离的338株大肠埃希菌的耐药性进行了检测分析,现报道如下。 1临床资料 1．1一般资料所有菌株均分离自2004-01-2008-12我院患者的血液、尿液、脓液、痰等标本。     

腹腔感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性监测

目的监测2008—2010年我国不同地区6所教学医院腹腔感染患者中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的体外药物敏感性。方法收集2008—2010年全国6所教学医院腹腔感染患者分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。采用微量肉汤稀释法测定多种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。数据采用WHONET 5.6软件进行耐药性分析。结果 2008—2010年共收集到腹腔感染大肠埃希菌789株和肺炎克雷伯菌263株。对于大肠埃希菌,碳青霉烯类抗生素物具有高度体外抗菌活性(细菌对其敏感率96.7%～99.3%),哌拉西林-他唑巴坦(87.1%～93.2%)和阿米卡星(86.7%～89.8%)次之。细菌对头孢他啶的敏感率较高(48.5%～59.2%),2010年头孢曲松、头孢噻肟和头孢吡肟的敏感率仅为24.5%～32.8%。细菌对2种氟喹诺酮类药物的敏感率逐年降低,对氨苄西林-舒巴坦的敏感率最低,为12.4%～20.6%。大肠埃希菌中ESBLs的检出率逐年上升,从2008年的59.7%升至2010年的73.5%。厄他培南(90.4%～94.1%)、亚胺培南(95.1%～97.1%)、阿米卡星(79.2%～92.6%)和哌拉西林-他唑巴坦(80.2%～85.3%)对肺炎克雷伯菌保持了较高的抗菌活性。细菌对头孢他啶(66.3%～72.1%)和头孢吡肟(67.3%～79.1%)的敏感率略高于头孢噻肟(59.4%～61.8%)和头孢曲松(60.3%～60.6%)。细菌对2种氟喹诺酮类药物的敏感率从2008年的58.4%～60.4%到2010年的64.7%～72.1%。肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率略有下降,从2008年的37.6%至2010年的28.1%。产ESBLs菌株对厄他培南和亚胺培南保持了高的敏感率(88.5%～99.4%)。结论腹腔感染患者中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星保持了较高的体外敏感性。大肠埃希菌对第三代、第四代头孢菌素和氟喹诺酮类抗菌药物敏感性较低,提示临床上应谨慎使用。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒介导的喹喏酮类耐药研究

目的:研究国内11家医院分离大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)中质粒介导的喹喏酮类耐药。方法:收集北京大学第三医院无重复临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)的ECO和KPN共84株,另10家医院相应菌株共155株,北京协和医院对头孢西丁不敏感的ECO和KPN共25株。采用琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度M IC;接合实验判断该基因位置和移动性;聚和酶链反应(PCR)及其产物测序确定基因型。结果:北医三院84株菌中1株KPN(编号24)阳性,ECO的发生率是0;余10家医院155株产ESBL s菌株中没有阳性结果;协和医院25个临床株中3株KPN(编号P 3、P 6、P 10)阳性。这4株菌只有P 6接合试验阳性,相应接合子qnr-PCR阳性。环丙沙星C IP对该菌的M IC是0.5μg/m l,对该接合子的M IC是1μg/m l,而对受体菌EC 600的M IC是0.125μg/m l。对24号标本和P 6标本及其接合子进行测序证实:二者的qnr↑序列和AY 878718(qnrA)100%同源,并且qnr基因的上游都有ORF 513存在。结论:北医三院和北京协和医院分类株中存在质粒介导的喹喏酮类耐药基因qnr,其他医院分离株本次研究中未发现该基因。     

2010年CMSS对革兰阴性杆菌耐药性监测报告

目的 监测2010年中国革兰阴性杆菌的耐药性.方法 收集2010年9-12月全国13家教学医院的1 259株非重复的革兰阴性杆菌.菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定美罗培南等广谱抗菌药物的MIC.药敏结果判断采用CLSI 2011年M100-S21标准.结果 14种抗菌药物对845株肠杆菌科细菌的抗菌活性,敏感性依次为美罗培南829株(98.1％)、阿米卡星794株(94.0％)、亚胺培南761株(90.0％)、哌拉西林/他唑巴坦739株(87.5％)、头孢吡肟701株(83.0％)、厄他培南696株(82.4％)、头孢哌酮/舒巴坦678株(80.3％)、黏菌素637株(75.4％)、头孢他啶591株(70.0％)、环丙沙星499株(59.1％)、头孢西丁463株(54.8％)、头孢曲松452株(53.5％)、头孢噻肟442株(52.3％)、米诺环素435株(51.5％).大肠埃希菌中ESBL的发生率为61.3％ (106/173),高于肺炎克雷伯菌[41.2％ (70/170)].大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦保持较好的敏感性,而对环丙沙星、头孢曲松和头孢噻肟的耐药率较高.肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星和黏菌素的敏感率均保持在90％以上,而对头孢曲松和头孢噻肟的耐药率较高.阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗劳地柠檬酸菌,对美罗培南、阿米卡星、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南的敏感率都保持在80.0％以上.对于铜绿假单胞菌敏感性较高的药物为黏菌素(98.4％,182株)、阿米卡星(85.9％,159株)、哌拉西林/他唑巴坦(80.0％,148株)、头孢他啶(79.5％,147株)、美罗培南(74.1％,137株)、环丙沙星(74.1％,137株)、头孢吡肟(73.5％,136株)、亚胺培南(71.9％,132株)和头孢哌酮/舒巴坦(70.8％,131株).鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的敏感率小于37.0％,对米诺环素敏感率为47.8％.97.8％(176株)的鲍曼不动杆菌对黏菌素敏感,泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌发生率分别为60.1％(108株)和18.9％(35株).结论 碳青霉烯类对肠杆菌科仍保持高活性,但鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的耐药性增加,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药性显著增加.     

整合子介导大肠埃希菌和克雷伯菌多重耐药机制的研究

目的 研究整合子参与大肠埃希菌和克雷伯菌多重耐药的分子机制。方法 纸片扩散法测定61株临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌的药物敏感性；整合酶基因扩增法检测Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子；整合子可变区扩增并测序。结果 73．8％（45／61）的菌株Ⅰ类整合子阳性，2株大肠埃希菌Ⅱ类整合子阳性，未检测到Ⅲ类整合子；88．9％（40／45）的Ⅰ类整合子阳性菌株可变区扩增阳性，扩增片段大小从150—2800bp不等，有1株Ⅱ类整合子阳性菌株可变区扩增阳性，大小为2200bp；整合子可变区含有编码对氨基糖苷类抗生素耐药的基因（aadA1、aadA2、aadA5、aadB、aacA4、aae6’-Ib）、编码对磺胺类抗生素耐药的基因（dfrA1、dfr2d、dfrⅤ、dfrⅦ、dfr17）、编码对氯霉素耐药的基因（cat、catB8、cmlA1-variant）、编码对β-内酰胺类抗生素耐药的基因（blaoxa10）和编码对链丝菌素耐药的基因（sat1）。结论 整合子在大肠埃希菌和克雷伯菌中广泛存在，参与了这两种菌多重耐药的形成。     

广州地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的研究

目的 研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.方法 收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌,通过PCR检测ESBLs分子表型;通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境,肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性.结果 67.3%(243/361)的ESBLs产生株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M-9群各占46.9%(114/243)和53.1%(129/243),未发现其他CTX-M亚群.CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX-M-27.采用ERIC-PER分析CTX-M-15产生株的同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型.67.6%(25/37)和32.4%(12/37)bla_(CTX-M-15)分别位于65 000 bp和90 000 bp的可接合质粒上,65 000 bp质粒除bla_(CTX-M-15)阳性外,未检到bla_(TEM-1)、qnrB、bla_(DHA-1)、bla_(OXA-1),aac(6′)-I6-cr等耐药基因.1株接合菌90 000 bp质粒还存在bla_(OXA-1)和bla_(TEM-1)耐药基因,其余7个90 000 bp质粒所携耐药基因同65 000 bp质粒.所有bla_(CTX-M-15)都位于ISEcp1-like插入序列下游,ISEep1-like末端与blaCTX-M-15间距均为48 bp.结论 广州地区ESBLs主要分子表型为CTX-M型主要流行为CTX-M-14型.以CTX-M-15为代表能水解头孢他啶的CTX-M型ESBLs在本地区检出增多值得关注.     

头孢米诺等抗菌药物对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及拟杆菌属的体外抗菌活性

目的 比较头孢米诺等抗菌药物对临床分离大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、拟杆菌属的体外抗菌活性.方法 琼脂稀释法测定16种抗菌药物对来自全国15家教学医院的945株大肠埃希菌和588株肺炎克雷伯菌的MIC值以及4种抗菌药物对50株拟杆菌属的MIC值.WHONET 5.4软件进行药敏数据统计分析.结果 1 533株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,不产超广谱β内酰胺酶(extended spectrum beta lactamases,ESBLs)和AmpC 628株,837株仅产ESBLs,68株产AmpC.头孢米诺对不产ESBLs或单产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌敏感率均高于90%,其MIC_(50)较头孢美唑低2～4倍,较头孢西丁低8～16倍;MIC90较头孢美唑低2～8倍,较头孢西丁低8～16倍.对单产ESBLs的菌株,头孢米诺体外抗菌活性优于第三、四代头孢菌素、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南、左氧氟沙星和阿米卡星,劣于碳青霉烯类药物,活性与哌拉丙林/三唑巴坦相仿.但对产AmpC的菌株,头孢米诺的敏感率低于20%.头孢米诺对拟杆菌属的敏感率为90%,高于头孢美唑(50%～70%)和青霉素(0%),活性与甲硝唑相仿.结论 头孢米诺对产ESBLs及非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌以及拟杆菌属有良好的体外抗菌活性,提示头孢米诺可为临床治疗此类菌株感染提供一种选择.     

2004-2005年住院患者细菌耐药监测研究

目的 监测和探讨我国不同地区的8所医院感染患者中分离细菌的耐药情况.方法 按照设计方案对7所医院从2004年9月1日至2005年8月31 日内分离的1 111株致病菌采用国际标准琼脂稀释法进行体外敏感试验,按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)2007年的标准测定MIC,以MIC50和MIC90表示抗菌药物的抗菌活性,并计算出耐药率(R%)、中介率(I%)和敏感率(S%).结果 检测到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)分别为39.3%和74.0%.未发现MRSA或MRSE对万古霉素耐药菌株.耐青霉素肺炎链球菌的总耐药率为33.3%(R%5.6%,1%27.7%).肠球菌91株,耐青霉素粪肠球菌40.8%,而耐青霉素屎肠球菌为100%.尚未发现对万古霉素耐药的肠球菌.分离到644株革兰阴性菌.最常见的细菌依次为;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌.在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,产超广谱酶菌各占38.6%和26.7%.碳青霉烯类美罗培南、亚胺培南是所测定抗菌药物中对肠杆菌科细菌作用最强的抗牛素.多数革兰阴性杆菌对头孢哌酮/舒巴坦和头孢吡肟有很高敏感率.三代头孢中的头孢他啶对多数革兰阴性杆菌仍有很高敏感率.新喹诺酮类的莫西沙星、左氧沙星对革兰阳性和阴性菌均有很强的广谱抗菌作用.结论 本次监测(2004-2005年)与2002-2003年度监测结果显示,在致病菌的耐药类型和某些菌耐药增长趋势方面基本相似.     

重症监护病房患者大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多重耐药性分析

目的 探讨重症监护病房（ICU）患者大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多重耐药性,为临床提供治疗依据.方法 回顾分析ICU病房患者标本中分离的280株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性.结果 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多数来自痰标本,其中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）136株（48.6%）,产AmpC β-内酰胺酶10株（3.6%）,同时产两种酶2株（1.1%）.抗生素耐药显示：携带产 ESBLs和AmpC酶菌株都有较高耐药性;产 ESBLs菌株对亚胺培南较为敏感（94.8%）,其次是哌拉西林/他唑巴坦（36.1%）;而AmpC酶菌株对亚胺培南的敏感率仅为48.4%.结论 ICU病房大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均有较高的耐药性,因此必须合理应用抗生素.     

2000-2009年同济医院肺炎链球菌的耐药性分析

目的 了解肺炎链球菌的耐药情况及变化趋势.方法 收集同济医院2000年1月1日至2009年12月31日分离的753株肺炎链球菌,主要分离自呼吸道标本,其次为血液和脑脊髓液标本.采用E-test法检测分离株对青霉素及头孢曲松的MIC,其余采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验.结果 10年来总的非脑膜炎来源PNSSP占23.8%(93/392),儿童PNSSP占26.4%(47/178),成人PNSSP占16.8%(36/214),差异具有统计学意义(χ2=7.642,P＜0.01).10株脑膜炎标本来源肺炎链球菌均为PRSP.莫西沙星、左氧氟沙星对肺炎链球菌仍然保持着良好的敏感性,敏感率分别为96.9%(720/743)和90.5%(672/743),未发现万古霉素和美罗培南耐药菌株.肺炎链球菌对大多数抗菌药物的耐药性均有不同程度升高,尤其是青霉素、红霉素及克林霉素敏感性下降尤为明显.2006年PNSSP仅19%(19/99),2009年上升为30%(35/114);2000年红霉素敏感性为22%(28/125),至2009年仅为3%(3/114);2004年克林霉素的敏感性为40%(13/32),至2009年仅为4%(5/114).结论 2000-2009年同济医院分离的肺炎链球菌对青霉素、红霉素及克林霉素的耐药性呈上升趋势,尤其是儿童对此3种抗菌药物的耐药性明显高于成人分离株.临床应结合药敏试验结果合理选择抗菌药物.

Abstract：

Objective To investigate antibiotic resistance and resistant trend of Streptococcus pneumonia. Methods To investigate 753 Streptococcus pneumoniae isolated from Tongji Hospital in recent 10 years from January 1st 2000 to December 31st 2009, most of them were from respiratory tract specimens,followed by blood and cerebrospinal fluid. The MIC to penicillin & cefatriaxone were determined by E-test,and other antimicrobial susceptibility were tested by Kirby-Bauer method. Results For non-cerebrospinal fluid specimen, the total rate of PNSSP was 23.8%( 93/392 ), it was significant different between the rate of PNSSP from children ( 26. 4%, 47/178 ) and adults ( 16. 8%, 36/214, χ2 = 7. 642, P ＜ 0. 01 ). All of 10 strains isolated from cerebrospinal fluid were PRSP. Most isolates were high-susceptive to moxifloxacin and levofloxacin, and the rate of susceptibility were 96. 9% ( 720/743 ) and 90. 5% ( 672/743 )respectively. None of Streptococcus pneumonia was resistant to vancomycin and meropenam. The resistant rate of most tested antibiotics increased in different degree year by year, especially penicillin, erythromycin and clindamycin. The rate of PNSSP was only 19%( 19/99 )in 2006 ,but in 2009 the rate increased to 30%( 35/114 ). The susceptibility rate of erythromycin was 22% ( 28/125 )in 2000, but only 3% ( 3/114 )in 2009 ;and the susceptibility rate of clindamycin decreased from 40% ( 13/32 ) in 2004 to 4% (5/114) in 2009. Conclusions From 2000 to 2009, Streptococcus pneunoniae was more likely resistant to penicillin,erythromycin and clindamycin year by year, especially those isolates recovered from children. It was suggested that antibiotics should be chosen to use according to antimicrobial susceptibility test results.     

对头孢吡肟敏感的疑似产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的分子生物学特征

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药.     

肺炎克雷伯菌药敏分析及其超广谱β内酰胺酶基因分型研究

目的 对北京大学人民医院分离的肺炎克雷伯菌进行药敏分析及ESBL型别测定,为控制院内肺炎克雷伯菌感染提供依据.方法 收集北京大学人民医院2001-2007年分离的1 205株肺炎克雷伯菌,采用Vitek-2全自动药敏鉴定分析仪对菌株进行鉴定及药敏试验,采用WHONET 5.3软件进行药敏结果分析,PCR法检测ESBL基因型别,比较分析各种药物敏感率和基因型比率特征和差异.结果 2001-2007年肺炎克雷伯菌中产ESBL比例逐年增加:2001年为15.8% (40/253),2002年为20.9% (53/253),2003年为32.8% (42/128),2004年为32.8% (45/137),2005年为36.6% (60/164),2006年为45.3% (68/150),2007年为45.6% (73/160).ESBL阳性菌株中SHV基因检出比例最大,2007年为83.6%(61/73).ESBL阳性菌株中CTX-M基因检出率逐年增加,2007年为54.8%(40/73).携带单一SHV基因菌株与同时携带SHV、CTX-M基因菌株对头孢他啶、头孢曲松及头孢噻肟的耐药率差异有统计学意义(χ2值分别为20.26、32.03、29.65,P均＜0.05);携带单一SHV基因菌株与同时携带SHV、TEM基因菌株对头孢他啶、头孢曲松及头孢噻肟的耐药率差异有统计学意义 (χ2值分别为7.01、9.93、11.01,P均＜0.05);携带单一SHV基因菌株与同时携带SHV、OXA基因菌株对头孢他啶、头孢曲松及头孢噻肟的耐药率有统计学差异 (χ2值分别为14.11、17.58、11.54,P均＜0.05);携带CTX-M基因菌株与同时携带SHV、CTX-M基因菌株对头孢他啶耐药率差异有统计学意义(χ2=23.61,P＜0.05);携带TEM基因菌株与同时携带SHV、TEM基因菌株对头孢他啶耐药率差异有统计学意义(P=0.01).结论 肺炎克雷伯菌产ESBL逐年增加,以SHV型为主,携带CTX-M型ESBL基因菌株逐年增多.

Abstract：

Objective To analyze the antibiotic susceptibility, ESBL genotype of clinical Klebsiella pneumoniae strains isolated from People′s hospital and facilitate the control of resistance spread. Methods Identification and antibiotic susceptibility tests of 1 205 strains from 2001 to 2007 were done by VITEK-2 system.The antibiotic susceptibility results were analyzed by whonet5.3.The ESBL gene was detected by PCR and the Chi-square test was used for statistical analysis.Results The rate of ESBL-producing strains in klebsiella pneumoniae has increased from 2001 to 2007[18.8% (40/213) in 2001, 20.9% (53/253) in 2002, 32.8% (42/128) in 2003, 33.6% (45/137) in 2004, 36.6% (60/164) in 2005, 45.3% (68/150) in 2006 and 45.6% (73/160) in 2007].The SHV gene was the most dominant in ESBL genotypes.There were 83.3% (50/60) ESBL strains in 2005 with SHV gene, 82.3%(56/68) in 2006 and 83.6%(61/73) in 2007.The rated of strains with CTX-M gene were increasing.There were 26.7%(16/60) ESBL strains with CTX-M gene in 2005, 36.7%(25/68) in 2006 and 54.8%(40/73) in 2007.The isolates with more than one type of ESBL gene were increasing.There were 45%(27/60) ESBL strains in 2005 with two types of ESBL gene, and no one had more than two types of ESBL gene in that year.There were 47.9%(35/73) ESBL strains in 2007 with two types of ESBL gene.In 2007 there were 9.6%(7/73) and 2.7%(2/73) ESBL strains with three types and four types of ESBL gene respectively.There was a statistical difference between the antibiotic resistance rates of cefotaxime, ceftriaxone and ceftazidime in SHV-gene-phore strains (χ2=13.22, P＜0.01).The strains with SHV gene were more resistant to cefotaxime than ceftriaxone and ceftazidime.There also was a statistical difference of the antibiotic resistance rate of cefotaxime, ceftriaxone and ceftazidime between strains with TEM gene (χ2=9.91, P＜0.01) and CTX-M gene (χ2=34.84, P＜0.01) respectively.None of the strains with CTX-M gene was sensitive to cefotaxime, and they were more resistant to ceftriaxone than ceftazidime.The strains with TEM gene were more resistant to cefotaxime than ceftriaxone and ceftazidime.There were statistical differences of the antibiotic resistance rate to cefotaxime (χ2=29.65, P＜0.01), ceftriaxone (χ2=20.26, P＜0.01) and ceftazidime (χ2=20.26, P＜0.01) between the strains with SHV gene only and strains with SHV and CTX-M gene concurrently.There were also statistical differences of the antibiotic resistance rates to cefotaxime (χ2=11.01, P＜0.01), ceftriaxone (χ2=9.93, P＜0.01) and ceftazidime (χ2=7.01, P＜0.01) between the strains with SHV gene only and strains with SHV and TEM gene concurrently.The antibiotic resistance rates to cefotaxime (χ2=11.54, P＜0.01), ceftriaxone (χ2=17.58, P＜0.01) and ceftazidime (χ2=14.11, P＜0.01) were statistically different between the strains with SHV gene only and strains with SHV and OXA gene concurrently.The antibiotic resistance rates to ceftazidime (χ2=23.61, P＜0.01) were statistically different between the strains with CTX-M gene only and strains with SHV and CTX-M gene concurrently. There was no statistical difference in antibiotic resistance rates to cefotaxime (χ2=3.55, P＜0.01) and ceftriaxone (χ2=3.35, P＜0.01) between the strains with CTX-M gene only and strains with SHV and CTX-M gene concurrently. The antibiotic resistance rates to ceftazidime (P=0.01) were statistically different between the strains with only TEM gene and strains with SHV and TEM gene concurrently, and there was no statistical difference of the antibiotic resistance rates to cefotaxime (P=0.29) and ceftriaxone (P=0.26) between the strains with TEM gene only and strains with SHV and TEM gene concurrently. ConclusionsThe producing rate of ESBL is increasing year after year and the SHV type of ESBL is the dominant one.Strains with more than one type of ESBL gene are increasing.The antibiotic resistance rates to cefotaxime, ceftriaxone and ceftazidime are statistically different between strains with same ESBL genotype.