Etest方法与微量肉汤稀释法检测念珠菌属对唑类抗真菌药物的敏感性评价

目的比较分析Etest法检测临床常见念珠菌对氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑敏感性与微量肉汤稀释法的一致率。方法针对220株临床常见的5种念珠菌,分别采用CLSI M27微量肉汤稀释法和Etest法进行药物敏感性检测。分别统计Etest法与微量肉汤稀释法检测三种唑类药物的基本一致率(EA)和分类一致率(CA)。结果 Etest方法和微量肉汤稀释法的EA分别为氟康唑(96.8%)、伏立康唑(97.3%)和伊曲康唑(81.8%)。对于氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑,白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌和克柔念珠菌中两种检测方法的CA分别为96.2%,97.5%和—;92.5%,82.5%和97.5%;92.5%,97.5%和—;97.5%,—和70%;—,100%和90%。结论 Etest法检测念珠菌对唑类药物敏感性与微量肉汤稀释法一致率较高,是念珠菌唑类药物敏感性测定简便并且准确性较高的检测方法,推荐在真菌实验室常规使用。     

纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测念珠菌氟康唑和伏立康唑药物敏感性的比较

目的评价纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑药物敏感性的一致率。方法针对218株侵袭性真菌感染部位分离的念珠菌,分别采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)M44-A2纸片扩散法和CLSI M27微量肉汤稀释法进行药物敏感性检测。依据2018年颁布的CLSI M60新的纸片扩散法判定折点,以微量肉汤稀释法为标准评估纸片扩散法测定结果的分类一致率和错误率。结果 2种方法检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和光滑念珠菌氟康唑药物敏感性的一致率分别为97.6%、95.1%、97.4%和90.5%。2种方法在检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌伏立康唑敏感性的一致率分别为97.6%、90.2%、97.4%和81.2%。结论纸片扩散法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的药物敏感性与微量肉汤稀释法一致率较高,是念珠菌药物敏感性测定简便且准确性较高的检测方法,推荐在真菌实验室常规检测或耐药监测网使用。     

一株临床不常见念珠菌的检验

目的对1株临床不常见念珠菌的检测进行探讨。方法采用4种不同方法(ATB、DADE、Remel和分子生物学方法)对1株不常见念珠菌进行检测。结果ATB、Remel系统检测结果为邹褶念珠菌;DADE系统检测结果为克柔念珠菌;分子生物学检测结果为近邹褶念珠菌。讨论对于临床不常见的念珠菌,仅用生化反应鉴定是不够的,为了正确鉴定到种,必要时还要用分子生物学方法作核酸序列分析。     

PCR-反向点杂交法在外阴阴道念珠菌病诊断及白念珠菌耐药基因突变检测中的应用

目的评价PCR-反向点杂交法用于念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的应用价值。方法收集念珠菌性阴道炎患者及体检健康妇女分泌物各285份和50份。用生物梅里埃酵母菌鉴定卡进行菌种鉴定,用最低抑菌浓度(MIC)法(郑州安图真菌快速培养鉴定药敏试剂)进行药敏试验;采用PCR-反向点杂交法(深圳亚能念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测试剂)进行菌种鉴定和耐药基因突变检测;采用PCR及测序方法进行耐药基因的检测。分别以培养鉴定法、MIC法、核酸序列测定法为对比方法,评价PCR-反向点杂交法念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的敏感性、特异性及准确性。结果与培养鉴定法相比,PCR-反向点杂交法检测6种念珠菌菌种的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为95%、96%、96%、98%、97%以上,2种方法检测6种念珠菌(白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和季也蒙念珠菌)结果的差异无统计学意义(χ~2值分别为0.44、0、0、0、0和0,P均0.05),一致性较好(Kappa均0.9)。与MIC法相比,PCR-反向点杂交法检测白念珠菌耐药的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为98%、88%、98%、88%和96%,2种方法检测结果的差异无统计学意义(χ~2=0.17,P0.05),一致性较好(Kappa0.8)。PCR-反向点杂交法与核酸序列测定法相比,对6种白念珠菌耐药基因突变位点的检测结果完全一致。结论PCR-反向点杂交法在念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测上与培养鉴定法以及核酸序列测定法的一致性高,比传统检测方法更早期更快速,可应用于外阴阴道念珠菌病(VVC)的辅助诊断。     

一株临床不常见念珠菌的检验

目的对1株临床不常见念珠菌的检测进行探讨。方法采用4种不同方法（ATB、DADE、Remel和分子生物学方法）对1株不常见念珠菌进行检测。结果ATB、Remel系统检测结果为邹褶念珠菌;DADE系统检测结果为克柔念珠菌;分子生物学检测结果为近邹褶念珠菌。讨论对于临床不常见的念珠菌,仅用生化反应鉴定是不够的,为了正确鉴定到种,必要时还要用分子生物学方法作核酸序列分析。     

彩色多普勒超声心动图顺序分段法诊断胎儿先天性心脏病的研究

目的　评价彩色多普勒超声心动图 (UCG)顺序分段法诊断胎儿先天性心脏病 (CHD)的准确性和临床价值。方法　 2 0 0 0年 2月至 2 0 0 2年 12月对 92 5例胎儿进行超声心动图检查 ,其中心脏病高危胎儿 2 4 7例 ,分别用顺序分段法和四腔心加两心室流出道切面法 UCG检查。以引产后尸解或生后 U CG作为对照标准。结果　终止妊娠胎儿尸解和生后 UCG检查证实 CHD36例 ,节段畸形 6 5个。 UCG顺序分段法发现 CHD35例 ,敏感性97.2 % ,特异性 10 0 % ,准确性 99.6 % ;节段畸形 6 4个 ,敏感性 98.5 % ,特异性 10 0 % ,准确性 99.9%。四腔心加两心室流出道切面法发现 CHD2 8例 ,敏感性 77.8% ,特异性 10 0 % ,准确性 96 .8% ;节段畸形 5 1个 ,敏感性 78.5 % ,特异性 10 0 % ,准确性98.5 %。两种方法诊断胎儿 CHD和显示节段畸形敏感性有显著的统计学差异 (P<0 .0 1)。结论　U CG胎儿顺序分段法是诊断胎儿 CHD较完善、可靠的方法 ,可明显提高胎儿 CHD诊断的敏感性 ,已成为产前筛选CHD和指导干预的重要方法。     

118株酵母样真菌药敏结果分析

目的分析酵母样真菌对目前常用的5种抗真菌药物的敏感性,为临床合理选用抗真菌药物提供依据。方法对云南省第一人民医院2009年1～6月分离的118株酵母样真菌的药敏试验结果进行回顾性分析。结果酵母样真菌感染以白色念珠菌为主,酵母样真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感率较高,在98%以上,对唑类药物敏感性稍低,为70%～80%。结论酵母样真菌感染以白色念珠菌、热带念珠菌和光滑念珠菌较为常见,而且耐药菌株的检出率呈上升趋势,临床上应慎用抗菌药物,减少耐药菌株的产生。     

ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法检测流感嗜血杆菌药物敏感性的比较

目的 比较ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法检测流感嗜血杆菌药物敏感性的性能.方法 收集临床分离的流感嗜血杆菌共96株,采用ATB嗜血杆菌药敏试验板条和肉汤稀释法药敏试验测定氨苄西林、氨苄西林-克拉维酸、复方磺胺甲(口恶)唑、氯霉素、头孢呋辛和头孢噻肟对96株流感嗜血杆菌的最低抑菌浓度(MIC).结果 2种方法检测结果的符合率分别为:氨苄西林96.9%、头孢噻肟100.0%、氨苄西林-克拉维酸91.7%、复方磺胺甲(口恶)唑92.7%、氯霉素95.8%和头孢呋辛97.9%.结论 ATB嗜血杆菌药敏试验和肉汤稀释法均可用于临床分离的嗜血杆菌药敏试验.     

阴道感染酵母样真菌的鉴定及耐药性分析

目的:了解外阴阴道念珠菌病(VVC)临床分离菌株及其对几种常见抗真菌药物的敏感性。方法:对4所医院2008-01/2008-12 VVC患者阴道分泌物临床分离培养出的216株念珠菌,采用Chrom Agar Candida medi-um显色培养基,API20CAUX进行菌株鉴定;ROSCO纸片扩散法对两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素、克霉唑进行药物敏感性试验。结果:216株宫颈分泌物酵母样真菌分类结果为:白念珠菌206株,占95.37%;热带念珠菌5株,占2.31%;异常汉逊酵母2株,占0.93%;近平滑念珠菌1株,占0.46%;光滑球拟酵母1株,占0.46%;其他念珠菌1株,占0.46%;体外药敏试验共发现5株耐药株,其中3株白念珠菌,1株光滑球拟酵母,1株其他念珠菌。结论:VVC的主要致病菌仍以白念珠菌为主,在5种常用药物中,念珠菌对两性霉素B、制霉菌素的耐药率最低为0%。     

不同方法检测黏液型铜绿假单胞菌药物敏感性结果准确性探讨

目的探讨黏液型铜绿假单胞菌(PA)药物敏感性检测方法准确性,以找出适合临床开展的、准确的药物敏感性检测方法。方法分别用药物敏感性纸片琼脂扩散法(K-B法)、假单胞菌和非发酵菌药物敏感性试剂盒(ATB PSE5)、仪器法(MicroScan WalkAway 96 plus和VITEK 2)和微量肉汤稀释法同时检测66株黏液型PA,以微量肉汤稀释法作为参考方法,其余方法作为测试方法进行对照分析。结果 K-B法与微量肉汤稀释法的完全符合率(CA)为92.63%,严重错误(VME)为0.30%,重大错误(ME)为3.13%,一般错误(MIE)为3.94%;ATB PSE5与与微量肉汤稀释法的CA为88.89%,VME为0.83%,ME为5.83%,MIE为4.44%;MicroScan仪器法与微量肉汤稀释法的CA为89.38%,VME为0.34%,ME为5.19%,MIE为5.07%。VITEK 2因结果缺失严重未进行比较。结论临床常用检测PA药物敏感性的方法中,以K-B法检测黏液型PA最为可靠,但应延长孵育时间至48 h或放至CO2孵箱24 h后读取结果更为直观、准确。     

2014—2020年天津某院真菌血症病原菌分布及耐药性分析

目的分析2014—2020年天津医科大学总医院真菌血症病原菌的分布和耐药性,为真菌血症临床诊断和抗菌药物使用提供依据。方法对2014—2020年天津医科大学总医院真菌血症患者的临床资料进行回顾性分析,应用WHONET 5.6软件对血培养分离的酵母样真菌的分布和药物敏感性试验结果进行统计分析。结果7年间共分离出酵母样真菌401株,分离率较高的为近平滑念珠菌(199株,49.63%)、白念珠菌(62株,15.46%)、热带念珠菌(37株,9.23%)和光滑念珠菌(37株,9.23%)。真菌血症患者以男性(63.34%)居多,≥65岁老年人占56.11%。酵母样真菌对5-氟胞嘧啶和两性霉素B敏感性较高,不同菌种对唑类药物的耐药性不同。结论近平滑念珠菌为天津医科大学总医院真菌血症患者分离率最高的真菌。光滑念珠菌、热带念珠菌、红酵母属对唑类药物的敏感性相对较低。了解医院真菌血症病原菌的分布和耐药情况,对真菌血症患者的诊治和预后评估有重要意义。     

医院内假丝酵母菌感染的菌种构成和耐药性分析

目的 分析医院内感染假丝酵母菌菌种构成和耐药性。 方法 对临床标本分离的酵母样真菌,用VITEK-Ⅱ(生物梅里埃公司)生化鉴定仪、API20c生化鉴定试纸条和念珠菌显色琼脂以及聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)方法进行酵母样真菌菌种的鉴定,应用ATB Fungus3 进行药敏试验。 结果 96株酵母样真菌,可分为6个种,包括白色念珠菌40株 (41.7%)、热带念珠菌36株 (37.5%)、光滑念珠菌13株 (13.54%)、近平滑念珠菌5株 (5.21%)、克柔念珠菌1株 (1.04%)、挪威念珠菌 1株(1.04%)。各种假丝酵母菌对5种抗真菌药呈现不同的敏感性,对两性霉素B和5-氟胞嘧啶的敏感率为100%,而对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑则表现出一定的耐药性。 结论 基因间隔转录区分子生物学分析结合传统培养和生化方法,可有效提高假丝酵母菌鉴定的准确性。本研究结果提示医院内非白假丝酵母菌感染有增多趋势。重症监护病房(intensive care unit, ICU)是重要的假丝酵母菌来源科室。60岁以上的老龄患者是医院内真菌感染的高危人群。体外药敏试验提示部分假丝酵母菌出现了唑类药物(氟康唑和伊曲康唑)的耐药性。     

深部酵母菌感染的病原学特征及其药物敏感性

目的　了解深部酵母菌感染的病原学特征及其对常用抗真菌药物的敏感性。方法　使用常规方法或用商品试剂盒包括API 2 0CAUX和VITEKYBC生化卡鉴定菌种 ;使用E test检测部分菌株对氟康唑、酮康唑、伊曲康唑和两性霉素B等 4种抗真菌药的敏感性。结果　 1998年 5月～ 2 0 0 2年 5月 4年间从深部标本中共分离出酵母菌 30 7株 ,其中念珠菌占 94 .79% ;检出率居前 4位的菌种为 :白色念珠菌 (4 7.88% )、热带念珠菌(2 6 .72 % )、光滑念珠菌 (8.4 7% )、近平滑念珠菌 (7.4 9% )。念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的耐药率分别为 12 .8%和 13.9%。结论　不同标本中各菌种所占比例有所不同 ,不同菌种对不同药物的敏感性也不同。     

卡泊芬净和米卡芬净对酵母的体外活性比较

棘白菌素是脂肽类抗真菌药,通过抑制真菌细胞壁的1-3-β葡聚糖合成而起作用。棘白菌素真菌敏感性试验的方法仍存在争议。本研究根据欧洲药敏试验指南,采用肉汤微量稀释法,对法国临床分离酵母株进行了卡泊芬净和米卡芬净体外敏感性试验。本研究收集2005—2006年法国1038株酵母标本大多数(84%)来自血液或其他无菌部位。对所获菌株均再鉴定后进行卡泊芬净和米卡芬净药敏试验。结果显示,白念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌对卡泊芬净和米卡芬净最为敏感(MIC90分别为≤1mg/L和≤0.125mg/L);两药对近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌和热带念珠菌的MIC分别≥2mg/L和≥0.25mg/L。其他90%以上念珠菌能被2mg/L的卡泊芬净和1mg/L的米卡芬净所抑制。两种棘白菌素对地丝菌属的MIC较高(&gt;8mg/L)。两药对新型隐球菌、毛孢子菌属和红酵母属均无抗菌活性。总体而言,米卡芬净的MIC显著比卡泊芬净低(P&lt;0.01)。然而,两药的MIC分布具有明确的相关性,卡泊芬净MIC低的菌株对米卡芬净也更敏感。与既往文献相类似,卡泊芬净和米卡芬净对大多数念珠菌属具有良好的活性,尤其对白念珠菌、热带念珠菌和光滑念珠菌。卡泊芬净和米...     

真菌性阴道炎的病原菌特点及药敏分析

目的了解真菌性阴道炎的临床分离菌特点及对抗真菌药物的耐药情况.方法运用API-20C AUX酵母菌鉴定系统和ATB-Fungus药敏系统进行菌种鉴定与药物敏感试验.结果 495例标本中共检出真菌96株,检出率为19.4%.临床分离菌以白色念珠菌居多(69.8%);其次为光滑念珠菌(18.8%);较少的有热带念珠菌(5.2%)与克柔念珠菌(4.2%),偶见新型隐球酵母菌及酿酒酵母菌(各占1%).药物敏感试验显示制霉菌素、两性霉素B的敏感性均在90%以上;耐药率以5-氟胞嘧啶为最高(32.3%),其次为咪康唑(22.9%).结论真菌性阴道炎的临床分离菌除了白色念珠菌外,尚有光滑念珠菌、热带念珠菌及克柔念珠菌等菌种,制霉菌素与两性霉素B对真菌的敏感性较好,而5-氟胞嘧啶与咪康唑的耐药率比较高,应引起临床医师的重视.     

两种MALDI-TOF MS系统快速鉴定血培养中白念珠菌以外酵母样真菌

目的评价2种基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)系统(Autoflex MALDI-TOF MS和Vitek MALDI-TOF MS)在快速鉴定血培养中分离的白念珠菌以外酵母样真菌的应用。方法收集复旦大学附属中山医院2010年10月至2013年1月住院患者血培养中分离的白念珠菌以外酵母样真菌59株,以真菌内转录间隔区(ITS)测序鉴定结果为金标准,比较Autoflex MALDI-TOF MS、Vitek MALDI-TOF MS和API 20C AUX 3种系统鉴定的准确性。结果 59株菌株包含了11种真菌,其中近平滑复合体30株(占50.8%)、热带念珠菌11株(占18.6%)、光滑念珠菌8株(占13.6%)、克柔念珠菌2株(占3.4%)、新生隐球菌2株(占3.4%)、异常威克汉姆酵母2株(占3.4%)、季也蒙念珠菌复合体1株(占1.7%)、葡萄牙念珠菌1株(占1.7%)、阿萨希毛孢子菌1株(占1.7%)和酿酒酵母1株(占1.7%)。3种系统鉴定真菌总的准确性分别为Autoflex MALDITOF MS 93.2%、Vitek MALDI-TOF MS 83.1%和API 20C AUX 79.7%,2种MALDI-TOF MS比较,差异无统计学意义(P=0.155)。其中对白念珠菌以外酵母样真菌的鉴定准确性分别为Autoflex MALDI-TOF MS 100.0%、Vitek MALDI-TOF MS 84.9%和API 20C AUX 84.9%,2种MALDI-TOF MS比较,差异具有统计学意义(P=0.006)。对念珠菌属外的少见真菌鉴定准确性分别为Autoflex MALDI-TOF MS 33.3%、Vitek MALDI-TOF MS66.6%和API 20C AUX 33.3%。结论 MALDI-TOF MS系统和目前常规生化鉴定方法相比,具有快速、操作简便、结果准确等优点;对于临床血培养分离真菌的鉴定,Autoflex MALDI-TOF MS鉴定准确性和Vitek MALDI-TOF MS相似,但对常见非白念珠菌的鉴定,Autoflex MALDI-TOF MS鉴定准确性优于Vitek MALDI-TOF MS。     

评价3种体外敏感试验方法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的敏感性

目的 评价3种实验室常用念珠菌体外药敏试验方法在测定氟康唑和伏立康唑对念珠菌的体外活性上的可靠性及实用性.方法 应用美国临床实验室标准化委员会微量肉汤稀释法(NCCLS M27-A2),NCCLS念珠菌纸片扩散法(M44-A),丹麦ROSCO纸片扩散法、法国生物梅里埃公司ATBFUNGUS3药敏试验板条法检测氟康唑和伏立康唑对85株临床分离念珠菌及2株质控菌株的体外抗菌活性.采用SPSS 13.0软件分析结果,比较3种实验室常用药敏试验方法与NCCLS M27-A2微量肉汤稀释法的相关性.结果 3种体外药敏试验方法所得结果分别与M27-A2肉汤微量稀释法进行比较,氟康唑药敏试验结果比对,NCCLS M44-A纸片扩散法一致率为83.5%,ROSCO纸片扩散法一致率为76.4%,ATB FUNGUS 3药敏试验板条法一致率为72.9%;伏立康唑药敏试验结果比对,3种药敏试验方法一致率均为85.9%.结论 在检测氟康唑和伏立康唑对常见念珠菌体外抗菌活性的3种方法所得结果与肉汤稀释法存在一定的差异.对部分菌株(尤其是剂量依赖敏感株)需要进一步应用M27-A2肉汤微量稀释法确定其MIC值.各种体外药敏试验结果与临床体内疗效还需进一步研究.     

阴道感染酵母菌样真菌大鉴定及耐药性分析

目的了解引起女性真菌性阴道炎真菌的分布及药敏检测。方法对常规涂片检出的酵母样真菌用科玛嘉念球菌显色培养基初步鉴定,通过形态学和API20AUXC真菌鉴定条进一步证实,APIFungus3进行药敏分析。结果 320份标本中共检出71株酵母样真菌,其中白色念珠菌占71.8%,热带念珠菌占16.9%,光滑假丝酵母占5.6%,葡萄牙念珠菌占2.8%,克柔念珠菌占2.8%;念珠菌敏感性较高的是两性霉素B 100%,氟胞嘧啶94.4%,敏感性稍低低的药物是氟康唑81.7%,伏立康唑84.5%,伊曲康唑81.7%。结论酵母样真菌在女性阴道分泌物中的分布已发生变化,白色念珠菌比率下降,非白色念珠菌比率的增加,部分难治性真菌性阴道炎可能由非白色念珠菌引起。酵母样真菌对常用的抗真菌药物除氟胞嘧啶,两性霉素敏感性很高外外,其他有所降低,临床医生应根据药敏结果来合理用药。     

218株临床分离酵母样真菌的分类及分布调查分析

目的 通过调查酵母样真菌的分类及分布,了解武汉市第十一医院患者酵母样真菌的带菌状况和感染特点,为临床一线对预防和控制感染提供科学依据.方法 对从武汉市第十一医院625份临床标本中分离的218株酵母样真菌进行培养及鉴定分类.严格按照卫生部<全国临床检验操作规程>进行操作,并采用APⅠ CandⅠda鉴定系统进行鉴定与分类.结果 酵母样真菌218株中白色念珠菌占首位,共检出96株,阳性检出率为44.04%,占第2、3位的依次为热带念珠菌和星形念珠菌,而其后其他酵母样真菌按检出率从高到低排列依次为光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌以及假热带念珠菌等.结论 由于抗生素、激素、免疫抑制剂的使用,造成患者免疫系统严重受损.临床对长期大量使用抗生素或免疫功能低下等危重病患者要特别注意预防和监测真菌感染,以利于及时治疗.     

117株酵母样真菌感染及耐药性分析

目的了解患者真菌感染情况,对其耐药性进行分析,以指导临床合理用药。方法用念珠菌显色平板进行初步鉴定,再使用天地人药敏鉴定系统进行鉴定和药敏试验,进行判读。结果送检的890例标本检出酵母样真菌117株,检出率13.1%(117/890),其中白色念珠菌81株,热带念珠菌15株,光滑念珠菌6株,近平滑念珠菌4株,青酒念珠菌4株,克柔念珠菌2株,其他念珠菌5株,分别占69.2%、12.8%、5.1%、3.4%、3.4%、1.8%、4.3%。结论以白色念珠菌感染为主,其次是热带念珠菌,两种念珠菌总分离率82%(96/117)。7种抗真菌药物以两性霉素B、制菌霉素耐药性较低,而伊曲康唑、氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、益康唑耐药率均较高。