实验动物福利与人的保护

实验动物学是一门研究实验动物和动物实验的综合性学科。是生命科学研究的基础和支撑条件。随着社会经济的长足发展和生命科学研究的突飞猛进,国际交流与合作的不断加强,实验动物福利倍受人们的关注。进入21世纪后国际上又对从事实验动物饲养管理和动物实验的工作人员的防护问题提出了新的要求,这就要我们必须考虑到人与实验动物如何和谐相处,促进科学发展。既要做到加强动物福利,又要注意人的保护,找到二者之间的平衡点,加快实验动物科学的发展。     

医学动物实验应关注“动物福利”

目的：促进医学实验工作者对“动物福利”问题的重视，科学、合理、人道地使用动物，使生物医学研究与人类道德文明同步协调发展。方法：从生物医学和伦理学角度阐述“动物福利”的慨念及关注“动物福利”的必要性，并介绍动物实验中体现“动物福利”的具体方法。结果：在医学动物实验中关注和贯彻“动物福利”观念，旨在唤醒动物实验工作者和医学研究者爱护、保护、善待动物。结论：尊重生命，尊重实验动物是每个医学工作者应有的道德，医学实验工作者应树立科学的“动物福利”观。     

新药评价教学中应贯穿动物福利思想

新药评价需进行许多动物实验,涉及各种实验动物。教学过程中贯穿动物福利思想非常必要。动物福利是人类精神文明建设的需要,是科学技术和社会经济发展的需要,是与我国现行法律法规相衔接的需要,是科学管理动物的需要,也是遵循减少、替代和优化(3Rs)原则的需要。关注动物福利是社会走向稳定和文明的重要标志。     

实验动物的环境与福利

实验动物在生物科学研究领域中的应用不断发展,其饲养环境和福利保障的问题已越来越被国际所关注.实验动物的环境与福利不仅是对动物本身的保护,更重要的是对动物试验结果的保证.本文详细论述了大环境(温度、湿度、气流等方面)及小环境( 笼具、饲养密度、垫料)对实验动物福利的影响,通过总结国内外的研究概况,旨为我国改善和提高实验动物的福利提出一些思路.     

加强替代方法管理

当今世界生命科学正在飞速发展,作为现代科学研究的重要支撑条件,实验动物在转基因研究、功能基因组研究以及生物高技术产品的研发过程中扮演着不可替代的角色,其发展速度和应用程度,已成为衡量一个国家或地区科技水平高低的重要标志之一[1]。在大量使用实验动物的同时,对实验动物福利的保护也日益受到人们的关注。动物福利的实质就是———让动物过上符合其天性的生活,不给他们造成不必要的伤害或痛苦。在科学研究上,保护动物福利的实际内容主要是3R原则。所谓3R就是Reduction(减少)、Replacement(替代)、Refinement(优化)。3R理论是195…     

基于对生命的尊重：略谈实验动物纪念日与纪念碑

实验动物作为生命科学、医学、药学等领域研究的基础载体和关键条件,对现代科学的发展发挥了极其重要的作用。动物福利伦理建立于人类文明道德基础之上,是社会、经济发展到一定阶段的产物。从科学角度看,善待动物既是人道主义的需要,也是科学实验的需要。本文从实验动物福利伦理的发展历程及法规政策内容、是否需要设立及如何设立实验动物纪念日和纪念碑等几个方面阐述实验动物福利的作用和意义,呼吁实验人员遵循“3R”原则并增强责任感和规范意识。     

论我国实验动物福利之保障

发展生态文明要求我们保护自然环境,爱护动物?动物实验在生命科学发展中起到了至关重要的作用,是其发展的基础和条件?随着国际动物权益保护的观念逐渐深入人心,保护实验动物?维护动物福利的呼声日益高涨?重视并保障实验动物的福利,既是自然科学发展的趋势,也是社会科学发展的必然?     

动物实验的人道干预点

随着动物福利研究的深入,作为3R优化原则的重要组成部分,动物实验过程中的人道干预点日益受到国际关注,人道干预点的确定和干预措施的选择是保障动物福利的关键。人道干预点是指动物实验过程中动物出现应该被干预状态的时间点,人道终点属于人道干预点的一种特殊表现形式,安乐死是人道干预点的一种实施方式。目前为保护实验动物福利,我国已出台多项标准和规范,而针对人道干预点的确定原则和干预措施仍没有系统要求,也缺乏相关的研究报道。本文拟综合国内外指导性文件及文献报道,系统描述动物实验过程中的人道干预点,以期为实验动物从业人员提供科学参考,最大程度减轻实验过程中动物所承受的疼痛和痛苦。     

日本三角涡虫无性繁殖系Dugesia ZB-1的建立

动物实验是生命科学研究中不可或缺的手段,因此实验动物对生物医学发展有着重要作用.随着人类社会的发展进步,实验动物福利日益受到人们的关注.本文从动物福利的内涵出发,讨论了实施实验动物福利的必要性,阐述了其发展历史及遵循原则,比对了国内外实验动物福利的现状,并探讨了实施实验动物福利的影响因素与改善措施.旨在提高实验动物福利在动物实验工作者心中的地位,号召与引导人们实施实验动物福利,使其得到良好保障.     

医药院校实验教学中存在的动物福利问题及对策

实验动物福利是动物实验结果准确性和可靠性的重要保证。科学研究中的动物福利正逐渐受到研究人员的重视,但在动物实验的教学中,情况还不容乐观。本文重点分析了医药院校实验教学中的动物福利伦理问题,并从动物福利的制度保障、动物福利思想的普及、贯彻"3R"原则等方面,阐述了在教学中保障动物福利的具体措施和建议。     

人黑皮素4受体基因变异与肥胖病的关联研究

目的探讨摄食行为及能量代谢相关的重要蛋白质,黑皮素4受体（MC4R）基因变异与中国人肥胖的相关性。方法选取563例上海地区中国人,其中BMI≥30kg／m^2者258例,BMI〈23kg／m^2者305例,用DNA测序法检测MC4R基因nt-216C／T、nt-178A／C和Val103Ile变异。并测定所选人群身高、体重、腰围、臀围、股围、舒张压和收缩压。对所选人群进行口服糖耐量试验,测定空腹和糖负荷后120min血糖水平,并测定空腹血脂谱。以生物电阻抗法测定体脂含量。结果（1）中国人中nt-216C／T、nt-178A／C和Val103Ile变异频率均小于5％;（2）Logistic回归分析见到,MC4R基因Val103Ile变异是肥胖的独立相关因素（0R=0．414,P=0．040）,Ile等位基因频率在肥胖患者中较低。（3）在正常体重组和肥胖组中分别比较VaL／Val纯合子与Ile携带者体脂参数、血糖、血脂、血压,差异无统计学意义。结论MC4R基因Val103Ile变异与中国人肥胖相关。     

Intracellular retention of human melanocortin-4 receptor: a molecular mechanism underlying early-onset obesity in F261S pedigree of Chinese

Objective To investigate how F261S mutation identified from Chinese obese patients affects the function of melanocorfin 4 receptor （MC4R） and to analyze the obesity-related phenotypes in subjects carrying the F261S mutation. Methods F261S mutant of MC4R was generated by site-directed mutagenesis. Plasmids encoding wild-type or F261S mutant of MC4R were transfected into HEK293 and COS-7 cells to examine their functional characteristics. Signaling properties of F261S MC4R were assessed by measuring intracellular cAMP levels in response to α-MSH stimulation. Cell surface expression of F261S MC4R was compared with that of wild-type MC4R. Clinical examinations were performed in subjects carrying F261S mutation and in non-mutated controls. Results The a-MSH-stimulated reporter gene activity was significantly reduced in cells expressing F261S MC4R, with a maximal response equal to 57% of wild-type MC4R. The F261S mutation also led to a significant change in the EC50 value compared with the wild-type receptor （P〈0.01）. Immunofluorescent assay revealed a marked reduction in plasma membrane localization of the MC4R in cells expressing the F261S mutant receptor. The resting metabolic rate and fat composition of the mutant carriers were not significantly different from those of the non-mutated obese controls. Conclusions The decreased response to α-MSH due to the intracellular retention of MC4R may cause early-onset obesity in the F261S pedigree of Chinese.     

犬MC1R基因R306ter与毛色性状相关性研究

目的　分析犬MC1R基因中R30 6ter位点多态性与犬毛色表型的相关性 ,为遗传育种 ,培育出更加优良的实验用犬奠定基础。方法　采用PCR SSCP技术 ,对MC1R基因R30 6ter位点进行基因多态性检测 ,分析位点多态性与毛色性状之间的相关性 ,并对该位点进行克隆测序。结果　PCR SSCP分析结果表明 ,R30 6ter位点序列具有多态性 ,表现为C、D二个等位基因和CC、CD及DD三种基因型。对R30 6ter多态性片段克隆测序发现 ,MC1R基因在编码第 30 6位氨基酸的密码子处存在一个由CGA到TGA的终止突变。结论　经统计分析结果表明在杂种犬中MC1R基因多态性与毛色性状不存在显著的相关性 ,这可能是由于外科手术学教学用犬是杂种犬 ,其遗传背景不同所致。由于MC1R基因的R30 6ter位点内存在碱基变异 ,因此在杂种犬中表现出明显的PCR SSCP多态性     

云南省洱源县大足鼠的年龄鉴定

本文报道了用胴体重法将大足鼠分为幼体、亚成体、成体和老体４个年龄组：幼体４２.０ｇ以下，亚成体４２.１～６６．０ｇ，成体６６．１～１４２．０ｇ，老体１４２．１以上。分析其胴体重与体重的相互关系及年龄组的体重变化。结果表明，胴体重法准确简便，可作为大足鼠年龄鉴定方法之一。     

洱源县黄胸鼠和褐家鼠的年龄鉴定

用胴体重法将黄胸鼠和褐家鼠各分为幼体、亚成体、成体和老体4个年龄组。黄胸鼠Ⅰ.36.0g以下,Ⅱ.36.1～92.0g,Ⅲ.92.1～144.0g,Ⅳ.144.1g以上;褐家鼠Ⅰ.44.0g以下,Ⅱ.44.1～100.0g,Ⅲ.100.1～168.0g,Ⅳ.168.1g以上。分析了它们的胴体重与体重的相互关系及年龄组的体重变化。结果表明,该法简便而较准确,可作为2种鼠类年龄鉴定的方法之一。但体重不宜作为其年龄指标。     

人黑皮素4受体F261S突变基因的克隆和功能验证

目的　研究黑皮素 4受体(MC_4R)基因的新突变F261S是否造成了MC4R蛋白功能改变。方法　用携带F261S纯合突变的先证者及正常人的基因组DNA,PCR扩增突变型及野生型MC4R基因全长,克隆到topo -TA真核表达质粒载体,测序鉴定后转染人胚肾 293细胞。用浓度为 1×10-11 ~1×10-5 mmol/L的α -黑色素细胞刺激素(α- MSH)与表达的MC4R蛋白结合后,用双荧光素酶报告基因测试系统检测胞内cAMP,萤火虫荧光 /海洋腔肠荧光二者强度之比体现了cAMP浓度。结果　α- MSH浓度在 1×10-9 ~1×10-8 mmol/L时野生型胞内双荧光强度比值显著高于突变型细胞(P<0 .05),在 1×10-7 ~1×10-5 mmol/L时差异更为显著 (P<0 .01)。结论　F261S突变使MC_4R介导的信号转导能力下降,此突变与中国人早发性肥胖有关。     

犬MC1R基因多态性与毛色表型相关性的研究

目的利用PCR—RFLP技术检测犬MC1R基因中T105A位点的多态性,分析该多态性与犬毛色表型的相关性。方法抽取36只比格犬血液并提取DNA,记录毛色表型。采用PCR—RFLP技术,对MC1R基因T105A位点进行基因多态性分析。用相关分析的统计学方法分析位点多态性与毛色性状之间的相关性。结果PCR—RFLP分析结果表明,T105A位点序列具有多态性,表现为A、B二个等位基因和AA、AB及BB三种基因型。A、B等位基因频率分别为58．33％和41．67％,基因杂合度（H）为0．59。基因型从频率为33．33％,BB为16．67％,AB为50．00％。经统计分析结果表明MC1R基因多态性与毛色性状不存在显著的相关性,这可能与Agouti蛋白对毛色的影响有关。结论在比格犬中MC1R基因的T105A位点表现出明显多态性并与毛色性状无相关性。     

促肾上腺皮质激素对不同黑素皮质素受体2基因型婴儿痉挛症疗效及高度失律缓解的影响研究

背景　婴儿痉挛症为婴幼儿期常见的灾难性癫痫,对多种抗癫痫药物反应欠佳。促肾上腺皮质激素（ACTH）作为其首选用药,有效率在60%~80%。寻找影响ACTH疗效的因素,并加以利用而提高ACTH有效率,成为当前该领域研究的热点及难点之一。目的　探讨ACTH对不同黑素皮质素受体2（MC2R）基因型婴儿痉挛症疗效及高度失律缓解的影响,进而指导临床治疗。方法　选取2016年10月—2018年10月在河北省儿童医院住院部行ACTH治疗且符合入组标准的婴儿痉挛症56例,进行体格检查、视频脑电图、基因全外显子检查等。根据MC2R基因启动子区4个单核苷酸多态性（SNP）构成的单体型类型分为TCCT携带组（n=46）即TCCT/TCCT或TCCT/0,TCCT非携带组（n=10）即0/0型。均给予ACTH治疗：1 U/kg×3 d+2 U/kg×25 d（共28 d,最大量不超过25 U）。观察两组患儿治疗有效率及高度失律缓解率。结果　治疗28 d后,TCCT携带组有效36例,无效10例,有效率为78.2%;TCCT非携带组有效3例,无效7例,有效率为3/10。TCCT携带组有效率高于TCCT非携带组（χ2=9.26,P<0.05）。视频脑电图检查结果显示高度失律检出率为43例,占76.8%（43/56）,TCCT携带组36例,治疗28 d后,缓解24例,未缓解12例,缓解率为66.7%;TCCT非携带组7例,治疗28 d后,缓解3例,未缓解4例,缓解率为3/7。两组高度失律缓解率比较,差异无统计学意义（χ2=1.46,P>0.05）。结论　在婴儿痉挛症治疗中,ACTH对MC2R基因TCCT携带型的痉挛发作治疗效果显著,而两组高度失律缓解率无明显差异。     

MC9204对大鼠心肌肥厚模型的影响

目的：观察新的二氢吡啶类钙拮抗剂ＭＣ９２０４对大鼠心肌肥厚的影响。方法：建立大鼠腹主动脉狭窄左室肥厚（ＬＶＨ）模型，并给予新的二氢吡啶类钙拮抗剂ＭＣ９２０４治疗３ｍｏ，观察在鼠ＬＶＨ时心肌重量指数，心室厚度，氧自由基（ＯＦＲ）、心肌酶释放等的变化。