中性粒细胞弹性蛋白酶致急性肺损伤机制的研究进展

急性肺损伤（Au）和急性呼吸窘迫综合征（ARDs）是机体遭受严重创伤、休克、酸中毒及严重感染，如严重急性呼吸综合征（sARs）等因素引起的继发性弥漫性肺实质损伤，临床表现为呼吸窘迫和顽固性低氧血症。目前认为，ALI／ARDS发病的根本原因是肺内过度、失控的炎性反应。ALI和ARDS同属急性呼吸衰竭（ARF）范畴，是临床常见呼吸系统急危重症．其病因及发病机制错综复杂，致病环节多，病死率高，已成为临床危重病学研究的热点和难点。     

中性粒细胞蛋白酶及其抑制剂与体外循环肺损伤

在体外循环(CPB)过程中由血液暴露于人工管道表面引发的全身炎症反应(SIRS)以及肺缺血-再灌注(I/R)等多重损伤综合作用导致中性粒细胞(PMN)在肺内扣押、黏附、游出,并释放细胞因子、氧自由基和蛋白水解酶等活性因子,使肺泡基底膜受损,微血管通透性增加,肺水肿,肺内分流增加而产生急性肺损伤(ALI),并可进一步向急性呼吸窘迫综合征(ARDS)及多器官功能障碍综合征(MODS)进展.其中,PMN激活释放的PMN蛋白酶在肺损伤过程中起着关键性作用[1],可通过水解其特异性底物而直接导致组织损伤,并有可能是SIRS情况下各种原因(包括氧自由基)导致组织损伤的共同通路[1-2].因而对其在CPB肺损伤中的作用以及相关研究意义重大.……     

急性肺损伤与中性粒细胞凋亡

研究表明 ,急性肺损伤 (ＡＬＩ)是始于有害环境及内源性因子作用下的肺泡壁爆炸性炎症反应。中性粒细胞的增多与激活以及血管内皮细胞的功能受损 ,释放多种炎症介质是ＡＬＩ的主要发病机制 ,其病理组织学表现为肺泡Ⅱ型细胞增生、成纤维细胞增殖及胶原的聚集[1 ] 。传统观念认为 ,急性损伤常引起组织坏死 ,自从 1972年Ｋｅｒｒ等人提出细胞凋亡的概念后 ,细胞凋亡已被证实在许多生物过程中起着重要的调节作用 ,包括炎症反应[2 ] 。有实验显示 ,内毒素、烧伤、缺血与再灌流损伤及脑外伤等均可导致相关脏器的细胞凋亡[3 ] 。本文即是从细胞凋…     

中性粒细胞凋亡与急性肺损伤

急性肺损伤时,中性粒细胞是造成过度性、失控性炎症反应的主要因素.中性粒细胞凋亡异常引起的功能和数量上的改变,可能是参与过度炎症反应的重要机制之一.中性粒细胞凋亡涉及到多基因、多因素的综合作用.深入了解Au时PMN凋亡的规律及调控机制,不仅有助于进一步阐明ALI发病机制,而且可能为治疗ALI提供新的思路和手段.     

中性粒细胞弹性蛋白酶在重度脑损伤继发性肺损伤中的作用研究

目的 探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)在重度脑损伤继发性肺损伤中的作用.方法 SD雄性大鼠50只,随机分为对照组(n=10)和损伤组(n=40),损伤组又分为2 h、6 h、24 h和48 h组,每组10只.分别测定各组大鼠脑组织含水量,血浆及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中NE含量;BALF中白蛋白浓度;光学及电子显微镜观察肺组织病理改变.结果 6 h、24 h和48 h三组大鼠的脑组织含水量均明显增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);在肉眼、光学、电子显微镜下,损伤组部分大鼠肺组织可见不同程度的充血水肿、中性粒细胞浸润、线粒体肿胀及绒毛消失等;脑损伤2 h血浆及灌洗液中NE含量开始升高,灌洗液中NE升高水平较血浆中NE明显;支气管肺泡灌洗液中白蛋白在伤后6 h 开始升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);NE变化水平与白蛋白、脑组织含水量均呈正相关(P<0.05).结论 重度脑损伤可导致不同程度的肺组织损伤,NE是脑损伤继发肺损伤的重要原因之一,早期监测血中NE含量可间接衡量肺损伤情况.     

中性粒细胞与急性呼吸窘迫综合征

长期以来脓毒性休克被认为是引起急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的重要原因。革兰阴性菌释放致死性内毒素即脂多糖(LPS)引起全身炎性反应综合征(SIRS)，导致多器官功能衰竭(MODS)，肺是损伤过程中的重要靶器官。近年来．随着许多关键性的炎症介质的发现，ARDS的发病机制逐步被阐明。其中中性粒细胞(PMN)被认为是这一复杂病理过程中     

急性肺损伤患者血清中中性粒细胞弹性蛋白酶活性的变化

目的检测急性肺损伤(ALI)患者血清中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,探讨其临床意义。方法选择符合ALI患者22例,健康对照组15例。计算动脉血氧分压(PaO2)与吸入气氧浓度(FiO2)比值,测定NE活性、α1抗胰蛋白酶α1AT)浓度和活性、白介素6(IL6)和白介素8(IL8)浓度等。结果ALI患者的NE活性、IL6和IL8均明显高于健康对照组,而α1AT活性较健康组降低(P<0.05)。ALI患者中死亡组(10例)的NE活性明显高于存活组(12例)(P<0.01)。而且ALI患者的血清NE活性与PaO2FiO2呈显著负相关(r=-0.874,P<0.01)。结论ALI患者的NE活性明显升高,α1AT活性显著降低,出现蛋白酶抗蛋白酶失衡,而且血清NE活性水平与患者的肺损伤严重程度和预后密切相关。     

清热燥湿方对急性肺损伤大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶和肿瘤坏死因子-α蛋白及mRNA的影响

目的探讨清热燥湿方对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）和肺组织肿瘤坏死因子-a（TNF-a）蛋白及mRNA表达的影响。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组、清热燥湿方组,每组再分为4h和8h两个亚组,每个亚组5只。尾静脉注射LPS10mg／kg制备大鼠ALI模型。地塞米松组和清热澡湿方组分别于制模前灌胃地塞米松0．45mg／kg和清热燥湿方6．48g／kg。分别采用酶联免疫吸附法、免疫组化法及实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测NE含量和TNF—a蛋白及mRNA的表达;同时进行肺组织病理观察。结果与模型组相比,清热燥湿方组4h、8hBALF中NE含量均显著降低（均P〈0．01）;地塞米松组和清热燥湿方组4h时TNF—a蛋白表达及4h、8h时TNF—amRNA表达均显著降低（P〈0．05或P〈0．01）。组织病理学观察显示,模型组大鼠肺组织出现大片出血及坏死;清热燥湿方组大鼠肺组织病理损伤程度较模型组减轻。结论清热燥湿方能减轻LPS致ALI大鼠肺组织损伤,其机制可能与清热燥湿方能降低LPS致ALI大鼠体内NE含量和TNF—a的表达有关。     

急性肺损伤患者中性粒细胞凋亡变化的研究

目的观察急性肺损伤(ALI)患者中性粒细胞(PMN)凋亡的发生以及与肺损伤的关系,并探讨其临床意义。方法对37例符合ALI诊断标准的患者,分离纯化肺灌洗液中的PMN,应用流式细胞术测定PMN凋亡、坏死、存活细胞比例及呼吸瀑发功能的变化,设健康对照组,并观察与乳酸脱氢酶(LDH)和胞浆游离Ca2 变化之间的关系。结果灌洗液中PMN凋亡比例显著降低,24h持续在低水平(P<0.05或P<0.01);各检测点活细胞增多(P<0.05或P<0.01);而灌洗液PMN的呼吸瀑发明显升高,8h达峰值,并持续升高(P<0.01)。灌洗液中LDH水平2～24h明显高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);PMN胞浆游离Ca2 各检测点显著增高(P<0.05或P<0.01)。PMN凋亡与LDH水平有相关性(r=-0.7151,P<0.01),PMN凋亡与胞浆游离Ca2 水平有相关性(r=-0.6039,P<0.01)。结论ALI时PMN在肺组织中大量扣押,且正常的凋亡途径发生障碍,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物持续释放,与肺组织的损伤有密切关系,并且PMN凋亡延迟可能与LDH、胞浆游离Ca2 的升高有关。     

急性肺损伤病人中性粒细胞凋亡变化的研究

目的　观察急性肺损伤 (ALI)病人中性粒细胞 (PMN)凋亡的发生以及与肺损伤的关系 ,并探讨其临床意义。方法　对 37例符合ALI诊断标准的病人 ,分离纯化肺灌洗液中的PMN ,应用流式细胞术测定PMN凋亡、坏死、存活细胞比例及呼吸瀑发功能的变化 ,设健康对照组 ,并观察与乳酸脱氢酶 (LDH)和胞浆游离Ca2 变化之间的关系。结果　ALI病人肺灌洗液中PMN凋亡比例显著降低 ,2 4h持续在低水平 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;各检测点活细胞增多 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;而灌洗液PMN的呼吸瀑发明显升高 ,8h达峰值 ,并持续升高 (P <0 0 1)。灌洗液中LDH水平 2～ 2 4h明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ,P<0 0 1) ;PMN胞浆游离Ca2 各检测点显著增高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。PMN凋亡与LDH水平呈显著相关性 (r =- 0 715 1,P <0 0 1) ;PMN凋亡与胞浆游离Ca2 的浓度有显著的相关性 ( r=- 0 6 0 39,P <0 0 1)。结论　ALI时PMN在肺组织中大量扣押 ,且正常的凋亡途径发生障碍 ,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物的持续释放 ,与肺组织的损伤有密切关系 ,并且PMN凋亡延迟可能与LDH、胞浆游离Ca2 的升高有关     

中性粒细胞在输血相关的急性肺损伤中的作用

中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)是固有性免疫系统中重要的效应细胞.在激活状态下,PMN可以产生大量的超氧阴离子和活性氧(reactive oxygen species,ROS),这些分子具有很高的反应性,可以与细菌的细胞膜、核酸分子及蛋白质发生氧化还原反应,造成微生物的损伤和死亡[1].PMN的这种反应通常是很短暂的、大量的、足以处理感染和炎症反应而不至于对机体组织产生损伤.但是,当反应失控时,特别是当大量的PMN聚集在身体的敏感部位(如肺部微血管)时,可以造成机体正常组织的损伤和发生急性肺损伤(acute lung injury,ALI)[2,3].     

中性粒细胞弹性蛋白酶在炎症性肠病中的研究进展

中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophilelastase,NE）是由多形核中性粒细胞释放的弹性蛋白酶,在炎症性肠病（In—flammatoryboweldisease,IBD）中,既有促进炎症反应的作用,又有抑制炎症反应的效应,与体内NE一抗NE平衡有关。IBD包括溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis,UC）和克罗恩病（Crohn’Sdisease,CD）,是一种病因和发病机制尚未完全明确的肠道疾病。肠黏膜免疫调节细胞和多种细胞因子参与免疫反应和炎症过程,免疫功能紊乱和免疫耐受异常是导致其发病的主要因素。此文就NE与IBD的研究进展作一综述。     

不同海拔高度下颅脑损伤后中性粒细胞弹性蛋白酶浓度变化

目的探讨不同海拔高度下,大鼠颅脑损伤后中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)浓度变化以及NE与大鼠高原颅脑损伤的相关性。方法取雄性SD大鼠64只,随机分为平原组和高原组。按Feeney自由落体撞击法制作大鼠高原与平原颅脑损伤模型,于12 h,24 h和36 h后对比观察高原与平原颅脑创伤NE浓度变化。另取雄性SD大鼠64只,模拟1 000、30005、000 m不同海拔高度行颅脑创伤,24 h后观察各组NE浓度变化。结果平原组与高原组大鼠颅脑损伤后NE水平明显增高(P0.05),并于24 h达到峰值。随着海拔高度的增高,大鼠颅脑损伤后NE的升高幅度明显增大。结论NE是评价颅脑损伤程度的重要因素,高原颅脑损伤病情程度与NE表达呈正相关。     

中性粒细胞凋亡对急性胰腺炎相关性肺损伤的影响

目的 研究中性粒细胞（PMN）在急性胰腺炎相关性肺损伤（PALl）中自发性凋亡的变化及与肺损伤的相关性，探讨PMN凋亡在这一过程中的病理意义。方法 采用5％牛磺胆酸钠（TAC）逆行胆胰管注射造成大鼠急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）模型。将36只实验动物随机分为AHNP组、假手术组及地塞米松（DXM）治疗组，3h后处死动物。从支气管肺泡灌洗液分离PMN，在体外分别孵育1、3、6h后，以Annexin V／PI双染色法测定其自发性凋亡率。取肺组织测定肺湿／干比值、髓过氧化物酶（MPO）含量及肺通透性指数，研究自发性凋亡率与肺损伤之间的相关性。结果 三组大鼠支气管肺泡灌洗液PMN的自发性凋亡率随体外孵育时间的延长而逐渐增加；在3、6h时，AHNP组均低于假手术组及DXM治疗组，而肺温／干比值、MPO含量及肺通透性指数则高于后两组。AHNP组3h凋亡率与肺温／干比值、MPO含量及肺通透性指数呈负相关。结论 肺PMN凋亡减低与PALI大鼠模型肺损伤成负相关，同时伴有活性增强，是PALI发生的重要原因；DXM可减轻PALI，与其促进PMN凋亡。     

中性粒细胞凋亡在大鼠急性肺损伤发病机制中的意义

目的从细胞凋亡的角度探讨急性肺损伤(ALI)的发病机制。方法雄性SD大鼠36只,随机分为模型组(ALI组)30只和正常对照组6只,观察肺组织病理切片,进行肺损伤评分(LIS)、肺水含量测定、肺通透性测定(LPI)、肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)测定、BALF中性粒细胞(PMN)凋亡测定。结果模型组可见肺泡腔狭窄、炎性细胞渗出等ALI表现,且随时程延长病变加重。模型组各时相肺损伤评分较对照组有显著性差异(P均<0·05),随时程延长肺损伤评分逐渐增加。模型组各时相点肺湿干重比较对照组明显升高(P均<0·05),但各时相点之间无差异。模型组LPI2、4h与对照组无差异,6、8、16h显著升高(P均<0·01)。模型组2hBALF中TNF-α达高峰(P<0·01),4、6h与对照组有显著差异(P均<0·05),8、16h与对照组组无差异。BALF中PMN凋亡结果,模型组各时相点均低于对照组(P均<0·01)。结论PMN在肺泡内的凋亡在ALI的发生发展中起重要作用。ALI时BALF中PMN凋亡率呈下降的趋势,总体低于正常值。     

地塞米松对家兔急性肺损伤早期中性粒细胞相关功能的影响

目的研究地塞米松对家兔急性肺损伤(ALI)早期中性粒细胞(PMN)相关功能的影响,为临床治疗提供理论依据。方法雄性新西兰家兔32只,随机对照组(N)8只,急性肺损伤组(L)10只,早期干预组(E)7只,预处理组(P)7只,建立内毒素ALI模型。E、P组分别于建模前、后一次性给予地塞米松2mg。结果L组在内毒素注射后血压、心率、pH、PMN下降明显。PMN表面CD11b表达强度进行性升高。E、P两组血压、心率降幅减小;CD11b表达强度的升高及3h血PMN计数下降被明显抑制;肺病理改变明显减轻。E组血压及PMN下降幅度大于P组。结论地塞米松对于感染中毒性休克有一定的改善作用,可以抑制ALI的发生、发展。在血压和外周血PMN计数两项指标上,实验结果表明激素的预处理对于实验动物有更好的保护作用。     

中性粒细胞在急性呼吸窘迫综合征发病机制中的作用

导致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的病因是多种多样的，但均可形成共同的病理状态，其中某些因素在ARDS发病机制中起着重要作用。越来越多的证据表明，中性粒细胞（PMN）是引起ALI／ARDS的关键细胞。     

急性肺损伤时中性粒细胞自身特性的改变及其意义

利用细胞微管吸吮实验系统对急性肺损伤家兔中性粒细胞（ＰＭＮ）的变形性及与培养单层血管内皮细胞（ＶＥＣ）的粘附性作单细胞定量测量。结果显示：给予内毒素后，ＰＭＮ变形性迅速降低、粘附性迅速升高，１小时已分别达最低点和高峰，并在整个观察时程基本保持该低变形和高粘附状态。实验结果提示，急性肺损伤时肺组织中大量ＰＭＮ积聚的重要原因是ＰＭＮ变形性下降、粘附性增加所致，在通过肺毛细血管床时易于滞留，从而进一步导致肺组织的炎性损伤     

体外循环围手术期患者血浆中性粒细胞肽和弹性蛋白酶的动态观察

目的 了解体外循环(CPB)围手术期患者血浆中性粒细胞肽(HNP)和中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在CPB诱发的全身性炎症反应综合征(SIRS)早期诊断中的价值.方法 以ELISA法定量测定CPB患者围手术期不同时间血浆中HNP1-3和NE的含量,同时测定血浆CK、CK-MB和CRP含量.结果 21例心脏直视手术患者CPB前血浆HNP1-3和NE含量((-x)±s)分别为(54.6±26.5)ng/ml和(41.1±9.9)ng/ml;CPB后0.5 h分别为(435.5±500.1)ng/ml和(250.9±97.2)ng/ml,比CPB前显著升高(P＜0.001);CPB后4 h血浆HNP1-3和NE含量达峰值,此后开始下降;血浆HNP1-3和NE浓度变化呈显著正相关(r=0.874,P＜0.001).血浆CK、CK-MB和CRP峰值出现在CPB后24 h,分别为(1 587.5±1 500.6)U/L,(38.2±39.3)U/L和(62.6±27.1)mg/L.结论 血浆HNP1-3和NE对CPB诱发SIRS反应敏感、迅速,血浆浓度的动态变化可能提示SIRS的严重程度和发展趋势.     

男性不育患者精浆中性粒细胞弹性蛋白酶浓度对精子质量的影响

目的探讨男性不育患者精子的质量与精浆中性粒细胞弹性蛋白酶的相关性。方法检测130例不育男性的中性粒细胞弹性蛋白酶浓度,根据精液中性粒细胞弹性蛋白酶浓度将研究对象分为三组,大于1 000ng/mL为A组,250~1 000ng/mL为B组,小于250ng/mL为C组,对各组精浆中的精液基本参数和生化指标(酸性磷酸酶、枸橼酸、锌和果糖)进行测定。结果 (1)A、B、C三组间,精液密度和精子活动率差异有统计学意义(P0.05),且中性粒细胞弹性蛋白酶浓度与精液密度(r=-0.43)和精子活动率(r=-0.37),精液体积及正常精子形态差异无统计学意义(P0.05);(2)A、B、C三组间,酸性磷酸酶、柠檬酸和锌浓度差异有统计学意义(P0.05),且中性粒细胞弹性蛋白酶的浓度与磷酸酶(r=-0.19)、柠檬酸(r=-0.17)和锌(r=-0.23)的浓度呈显著负相关,三组间果糖浓度差异无统计学意义(P0.05)。结论精液中性粒细胞弹性蛋白酶的水平与精液密度、精子活动率及生化指标参数(酸性磷酸酶、柠檬酸和锌)呈显著负相关,提示精液中性粒细胞弹性蛋白酶对精子的质量有负面的影响,进而影响男性的生育能力。