慢性丙型肝炎患者外周血树突细胞含量与病毒载量的相关性分析

目的 分析慢性丙型肝炎患者外周血树突细胞含量与HCV-RNA病毒载量的相关性,探讨HCV感染慢性化的免疫学机制.方法 流式细胞仪检测40例慢性丙型肝炎患者（CHC）外周血中髓样树突细胞（mDC）及浆样树突细胞（pDC）的含量,22例健康人作对照比较.实时荧光定量PCR法检测外周血HCV-RNA载量.结果 HCV-RNA1＋ E003 IU/ml患者及HCV-RNA≥1＋E003 IU/ml患者外周血mDC表达（0.25％±0.09％,0.14％±0.07％）均低于健康对照组（0.38％±0.10％）,差异有统计学意义（t=4.340 9,9.222,P值均＜0.05）;HCV-RNA1＋ E003 IU/ml患者及HCV-RNA≥1＋E003 IU/ml患者外周血pDC（0.23％±0.10％,0.13％±0.08％）均低于健康对照组（0.33％±0.09％）,差异有统计学意义（t=6.552 4,11.04,P值均＜0.05）;HCV RNA≥1＋E003 IU/ml患者外周血mDC,pDC的表达量明显低于HCVRNA1＋E003 IU/ml患者的表达,差异有统计学意义（t=4.349 6,2.671 8,P值均＜0.05）.结论 CHC患者外周血DC含量与HCV-RNA病毒载量呈负相关,CHC患者免疫功能低下.     

严重烧伤患者外周血树突细胞的变化及临床意义

目的 探讨严重烧伤患者外周血树突细胞(DC)的变化及与烧伤严重程度和脓毒症发生的关系.方法 22例严重烧伤患者根据脓毒症的诊断分为烧伤组(10例)和烧伤脓毒症组(12例);按烧伤总体表面积(TBSA)分为TBSA Ⅰ组(TBSA 30％～50％,14例)和TBSA Ⅱ组(TBSA 51％～80％,8例).采集患者伤后1、3、7、14和20 d外周静脉血,用流式细胞仪检测外周血中髓样树突细胞(mDC,Lineage1- HLA-DR+CD11e+)和浆样树突细胞(pDC,Lineage1-HLA-DR +CD123+)两种DC亚型的数量.以同期10例健康体检者作为对照.结果健康对照组外周血mDC为(0.450±0.150)％,pDC为(0.241±0.084)％.与健康对照组比较,烧伤组患者伤后1、3、7d外周血mDC[(0.257±0.116)％、(0.274±0.086)％、(0.317±0.056)％]和pDC[(0.122±0.058)％、(0.165±0.051)％、(0.177±0.024)％]均显著减少(均P＜0.05),14 d、20 d时mDC、pDC数量恢复至正常水平;烧伤脓毒症组患者伤后1d外周血mDC[(0.230±0.090)％]和pDC[(0.114±0.071)％]即较烧伤组进一步减少(均P＜0.05),至20 d时外周血mDC和pDC仍显著低于烧伤组[mDC:(0.246±0.076)％比(0.412±0.097)％; pDC:(0.097±0.032)％比(0.203±0.039)％,均P＜0.05].与健康对照组比较,TBSA I组患者伤后1、3、7d外周血mDC[(0.266±0.062)％、(0.289±0.071)％、(0.351±0.054)％]和pDC[(0.131±0.025)％、(0.163±0.037)％、(0.178±0.038)％]均显著减少(均P＜0.05),14 d、20 d时mDC、pDC数量恢复至正常水平;TBSAⅡ组患者伤后1d外周血mDC[(0.227±0.070)％]和pDC[(o.112±0.047)％]即较TBSA Ⅰ组进一步减少(均P＜0.05),至20 d外周血mDC和pDC仍显著低于TBSA Ⅰ组[mDC:(0.297±0.072)％比(0.423±0.046)％;pDC:(0.107±0.061)％比(0.197±0.042)％,均P＜0.05].结论严重烧伤患者早期外周血mDC和pDC数量均减少,烧伤程度越严重DC数量减少越明显;外周血DC数量减少导致烧伤后机体免疫功能低下,数量减少明显者易并发脓毒症;烧伤后定期检测外周血DC数量可以作为脓毒症的早期预警指标.     

健康人骨髓和外周血树突状细胞的分类和计数

本研究应用流式细胞仪采用两种四色抗体组合检测并计数国内健康个体骨髓和外周血树突状细胞DC亚群。检测35例健康骨髓中Lin^-HLA—DR^＋CD11c^hiBDCAl^＋的mDC和Lin^-HLA—DR^＋CD123^hiBDCA2^＋的pDC数量,并与普遍采用的Lin^-HLA-DR^＋CD11c^hi的mDC和Lin^-HLA-DR^＋CD123^hi pDC的三色设门方法进行比较。结果表明：骨髓中DC亚群的绝对计数和pDC的相对计数均随年龄的增加而降低;男性DC亚群的绝对计数值高于女性（P〈0．05）。三色和四色设门方法均显示健康个体骨髓和外周血DC亚群的分布不同（P〈0．05）。外周血中mDC含量较高,两种方法检测的mDC与pDC的比值分别为2．70和2．31;骨髓与外周血截然不同,骨髓中含有大量pDC,mDC与pDC的比值分别为0．90和0．71。三色和四色的流式分析方法显示具有很好的相关性（相对计数mDCr=0．86;pDC r=0．96,绝对计数mDC r=0．95;pDC r=0．98）。两种方法检测的DC亚群计数除在外周血pDC检测无明显差异外,外周血中的mDC和骨髓中mDC与pDC计数均明显不同（P〈0．001）,三色方法确定的值明显高于四色方法,因三色方法确定的mDC与pDC中分别存在一定比例的Lin^-HLA-DR^＋CD11c^hi BDCA1^-细胞和Lin^-HLA-DR^＋CD123^hiBDCA2^dim/-细胞,在骨髓中这些细胞比例较高。结论：标本来源,性别,年龄和有核细胞计数是健康人DC绝对计数的影响因素（P〈0．05）。四色抗体组合可以界定更加严格意义的骨髓DC亚型。骨髓和外周血的DC分布不同,外周血含有大量的mDC,而骨髓中以pDC为优势群体。     

大肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-调节性T细胞的含量及临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-调节性T细胞（Treg）的变化及意义。方法流式细胞术检测36例大肠癌患者及30例健康人外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg的变化；ELISA检测同一标本血清中转化生长因子β（TGF—β）的表达水平。结果36例大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg占CD4^＋、淋巴细胞的比例为（6．92±1．31）％，与正常对照组（4．91±1，24）％相比差异有显著性（P〈0．05）。20例腺癌、7例黏液癌、9例未分化癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例分别为（6．81±1．52）％、（6.99±1．21）％、（7．08±1．17）％，各组间比较差异无显著性（P〉0．05），均高于对照组的（4．91±1．24）％，差异有显著性（P〈0，05）。IV期大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg高于Ⅱ期大肠癌患者（P〈0．05）。大肠癌组外周血清中TGF—β水平显著高于正常对照组，随着TGF—β水平增加，CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例逐渐增高，两者呈正相关。结论大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg表达增高，与临床分期相关，但与组织学分类无关，导致机体免疫抑制，可能参与大肠癌发生。     

免疫相关性全血细胞减少症患者树突状细胞亚群、数量及其临床意义

本研究旨在检测免疫相关性全血细胞减少症(IRP)患者树突状细胞(DC)亚群和数量,并探讨DC在IRP发病中的作用。应用流式细胞术检测65例IRP(37例初治、28例恢复)患者及17名健康对照者外周血浆细胞样DC(plasmacytoid dendritic cells,pDC)(Lin-HLA-DR+CD123+细胞)、髓系DC(myeloid dendritic cell,mDC)(Lin-HLA-DR+CD11c+细胞)数量、亚群。结果显示,IRP初治组外周血pDC占外周血单个核细胞(PBMNC)的比例为(0.91±0.64)%,明显高于恢复组(0.39±0.11)%和正常对照组(0.29±0.13)%(均P<0.01),恢复组明显高于正常对照组(P<0.05)。初治组、恢复组mDC占PBMNC的比例分别为(0.21±0.20)%、(0.34±0.21)%,与正常对照组(0.29±0.09)%比较均无统计学意义(P>0.05)。初治组pDC/mDC比值为6.75±7.11,明显高于恢复组(1.55±0.93)和正常对照组(1.07±0.43,均P<0.01),恢复组与对照组比较没有明显差别(P>0.05)。IRP组外周血pDC占PBMNC的比例与Th1/Th2呈负相关(r=-0.347,P<0.05),与骨髓单个核细胞膜表面抗体阳性率呈正相关(r=0.606,P<0.05),与CD5+B细胞数量呈正相关(r=0.709,P<0.05),与血红蛋白(r=-0.381,P<0.01)和血小板水平(r=-0.343,P<0.01)均呈负相关;mDC占PBMNC的比例与Th1/Th2呈正相关(r=0.595,P<0.05),与血红蛋白水平呈正相关(r=0.292,P<0.05);pDC/mDC与Th1/Th2水平呈负相关(r=-0.395,P<0.05),与骨髓单个核细胞膜表面抗体阳性率呈正相关(r=0.421,P<0.05),与CD5+B细胞数量呈正相关(r=0.423,P<0.05),与血红蛋白(r=-0.304,P<0.05)和血小板水平(r=-0.287,P<0.05)均呈负相关。结论:IRP患者外周血pDC数量增多,可能与IRP发病有关。     

CD4＋CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞在急性白血病患者外周血的表达及意义

目的·探讨CD4＋CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞（Tregs）在急性白血病（AL）患者外周血中的表达及其临床意义。方法采用流式细胞术分别检测34例AL初诊（A组）、30例经化疗完全缓解（cR）（B组）患者以及20名健康对照者（c组）外周血CD4＋CD25nt/hiCD127loTregs的比例。结果AL患者中A组外周血CD4＋CD25nt/hiCD127loTregs比例显著高于C组（7.31±3．37）％vs（3．24±O．58）％,P〈O．01】。B组CD4＋CD25nt/hiCD127loTregs比例较A组及C组均明显增加【（11．32±5．87）％vs（7．31±3．37）％,P〈O．01;（11．32±5．87）％vs（3．24±O．58）％,P〈O．O1】。结论初治AL患者外周血CD4＋CD25nt/hiCD127loTregs细胞比例显著增加,说明Tregs细胞的免疫抑制作用可能参与了AL的发病。AL缓解后Tregs细胞比例增加,可能与AL患者化疗后免疫功能进一步抑制以及化疗药物相关。     

慢性特发性血小板减少性紫癜患者外周血树突细胞的变化及意义

目的 探讨慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者体内树突细胞(DC)数量和功能的变化.方法 慢性ITP患者予以大剂量地塞米松(HD-DXM)冲击治疗,剂量40 mg/d,口服,连续4 d,观察短期疗效.用流式细胞术检测患者外周血中髓系DC(mDC)和浆细胞样DC(pDC)在治疗前后绝对数量的变化及与CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的相关性;流式细胞术检测外周血总Dc表面协同刺激分子的表达.将慢性ITP患者外周血单核细胞来源的DC、CD4+T淋巴细胞与自身血小板或健康人同源异基因血小板混合培养,观察CD4+T淋巴细胞增殖情况,检测DC血小板相关抗原的呈递功能.结果 与正常对照组比较,慢性ITP患者外周血pDC和mDC绝对数量均无明显变化(P值均》0.05);而外周血CD4+FOXP3+T细胞数明显降低(P《0.01),pDc和mDC与CD4+FOXP3+T细胞数之间均存在负相关性(r=-0.396,P=0.045和r=-0.410,P=0.037).HD-DXM治疗初始反应率达92.3%,pDC绝对数量较治疗前减少达75.5%(P《0.01);而mDC较治疗前虽增加了24.3%(P《0.05),但mDC上CD11c表达的平均荧光强度(MFI)从治疗前340±30降至199±21(P《0.01);CD4+F0xP3+T细胞数较治疗前显著增加(P《0.01),治疗后pDC与CD4+F0XP3+T细胞存在负相关(r=-0.524,P=0.006),而mDC与CD4+F0XP3+T细胞间无相关性(r=-0.360,P=0.071).慢性ITP患者外周血DC表面协同刺激分子CD86表达的MFI明显高于正常对照组(P《0.05);CD86、CD40、CD80表达阳性率及CD40、CD80表达的MFI与正常对照组比较差异均无统计学意义(P值均》0.05).慢性ITP患者CD4+T淋巴细胞增殖反应强度高于对照组(P《0.05),DC对血小板相关抗原呈递功能亢进.结论 DC可能参与了慢性ITP的免疫发病机制,并与CD4+CD25+Treg细胞有一定的关联.     

血红素加氧酶1在间充质干细胞上调哮喘患者外周血调节性T细胞中的作用

背景：上调CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞是目前治疗哮喘的新靶点。骨髓间充质干细胞在体外可上调正常人外周血的调节性T细胞,但机制尚未明确。目的：观察血红素加氧酶1对间充质干细胞上调哮喘患者外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞的影响。方法：分别加入0,15,30,45,60μmol/L氯化高铁血红素和0,5,10,15,20μmol/L锌-原卟啉对骨髓间充质干细胞进行预处理,荧光定量PCR检测各组间充质干细胞中血红素加氧酶1mRNA的表达量。密度梯度离心法分离哮喘急性发作期患者和健康对照者的外周血单个核细胞,分别与经氯化高铁血红素预处理、经锌-原卟啉预处理、不经预处理的间充质干细胞共孵育,加入植物血凝素反应72h,流式细胞仪检测各组CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞占CD4＋T细胞的比例。结果与结论：人骨髓间充质干细胞中有血红素加氧酶1表达,其表达在体外可被诱导和抑制。间充质干细胞中血红素加氧酶1mRNA的表达量随氯化高铁血红素浓度增加而增加（P〈0.05）,随锌-原卟啉浓度增加而减少（P〈0.05）,具有剂量依赖性。间充质干细胞在体外可提高哮喘患者和健康对照者CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞的水平（P〈0.01）,诱导间充质干细胞中血红素加氧酶1的表达可使共孵育后CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞水平提高（P〈0.01）,抑制间充质干细胞中血红素加氧酶1的表达可使共孵育后CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞的水平降低（P〈0.01）,但仍高于对照组（P〈0.01）。提示骨髓间充质干细胞部分通过血红素加氧酶1上调哮喘患者外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞。     

CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋CD25＋检测在急性髓系白血病中的应用

目的：探讨CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋CD25＋检测与急性髓系白血病的发病机制、治疗效果及预后的关系,并与CD4＋CD25＋/CD4＋法比较两种检测方法是否存在差异。方法应用流式细胞术法分别检测41例初治AML患者（初治组）、11例一次化疗缓解的患者（化疗敏感组）、9例两次以上化疗不缓解的患者（化疗耐药组）、13例化疗缓解后一直没有复发的患者（持续缓解组）、8例化疗缓解后又再次复发的患者（复发组）和20例健康体检者（对照组）CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋CD25＋及CD4＋CD25＋/CD4＋在外周血中的比例。结果与对照组相比较, AML患者初治组两类细胞比例均较正常人明显升高（P＜0.01）,初治患者组两种检测方法间存在显著差异（P＜0.01）。与化疗缓解组比较,化疗耐药组两种检测方法检测的比例均明显升高（P＜0.01）,耐药患者组两种方法间存在显著差异（P＜0.01）。与持续缓解组比较,复发组患者的比例明显升高（P＜0.01）,复发组两种方法间存在显著差异（P＜0.01）。结论急性髓系白血病患者外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋/CD4＋CD25＋与急性髓系白血病的发生相关,并且检测其比例能预测白血病患者对化疗药物的反应及预后,且其灵敏度高于CD4＋CD25＋/CD4＋检测法,而其特异性与CD4＋Foxp3＋/CD4＋检测法一致。     

重型再生障碍性贫血患者CD8+效应T细胞损伤骨髓造血途径的研究

目的 研究重型再生障碍性贫血(SAA)患者外周血CD8+ CD25+和CD8+HLA-DR+T细胞数量及其杀伤靶细胞的途径,探讨SAA的免疫发病机制。方法 应用流式细胞术检测29例SAA(初治14例、缓解15例)患者及12名健康对照者外周血CD8+ CD25+和CD8+ HLA-DR+T细胞的数量及其胞质内穿孔素、颗粒酶B、肿瘤坏死因子β(TNF-β)、胞膜FasL表达。结果 SAA初治组患者CD8+ CD25+T细胞占CD8+和CD3+T细胞的比例分别为(3.67±2.58)％和(2.25±1.35)％,缓解组为(5.19±4.29)％和(2.98±1.35)％,正常对照组为(4.84±2.31)％和(2.11±1.88)％,CD8+CD25+T细胞占CD8+和CD3+T细胞的比例三组间比较差异无统计学意义(P值均＞0.05)。初治组CD8+ HLA-DR+T细胞占CD8+T细胞比例为(39.30±8.13)％,缓解组为(20.65±5.38)％,正常对照组为(18.34±6.68)％,初治组明显高于缓解组及正常对照组(P＜0.01),缓解组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。SAA初治组CD8+ HLA-DR+T细胞占CD3+T细胞比例为(27.81±7.10)％,缓解组为(12.02±3.03)％,正常对照组为(8.50±2.33)％,初治组明显高于缓解组及正常对照组(P＜0.01),缓解组明显高于正常对照组(P＜0.05)。SAA初治组CD8+ HLA-DR+T细胞穿孔素、颗粒酶、TNF- β、FasL中位表达比例分别为8.51％、96.08％、72.11％、94.25％,均明显高于缓解组(1.78％、85.20％、34.38％、51.20％)及正常对照组(1.86％、82.09％、17.92％、32.91％)(P值均＜0.05),缓解组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 SAA患者外周血CD8+ HLA-DR+效应T细胞比例增加,CD8+效应T细胞影响靶细胞的穿孔素-颗粒酶途径、细胞因子(TNF-β)途径、Fas/FasL途径均参与了骨髓造血细胞损伤的过程。     

慢性心力衰竭患者外周血Th17/Treg失衡的研究及意义

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血中Th17细胞、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(Treg)的变化及意义。方法 53例CHF患者按照NYHA心功能分级分为CHF1组(NYHA心功能Ⅰ~Ⅱ级,n=24)和CHF2组(NYHA心功能Ⅲ~Ⅳ级,n=29)。20例健康体检者作为对照组。采用流式细胞分析法检测外周血中Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例。结果 CHF1组和CHF2组患者外周血中Th17/CD4+T细胞的比例明显高于对照组(1.89±1.24 vs 0.51±0.35,3.35±1.78 vs 0.51±0.35;P<0.05;P<0.01),CHF2组亦明显高于CHF1组(3.35±1.78 vs 1.89±1.24,P<0.01);CHF1组和CHF2组患者外周血中Treg/CD4+T细胞的比例明显低于对照组(5.69±0.74 vs 7.89±1.66,3.31±0.98 vs 7.89±1.66;P<0.01;P<0.01),CHF2组亦明显低于CHF1组(3.31±0.98 vs 5.69±0.74,P<0.01);CHF1组和CHF2组患者Th17/Treg的比值明显高于对照组(0.35±0.17 vs 0.11±0.09,1.06±0.49 vs 0.11±0.09;P<0.05;P<0.01),CHF2组亦明显高于CHF1组(1.06±0.49 vs 0.35±0.17,P<0.01)。结论 CHF患者外周血中存在Th17/Treg失衡,且与心功能有一定关系,Th17/Treg失衡可能参与了CHF的发生发展。     

胃癌外周血调节性T细胞表达与预后的关系

目的：探讨胃癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋、CD4^＋FOXP3^＋、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞的表达状态与临床病理特征及预后关系。方法：采用流式细胞术检测35例胃癌患者及17例健康对照者外周血中CD4^＋CD25^＋、CD4^＋FOXP3^＋、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比率及细胞数目;收集胃癌患者临床病理资料并进行术后随访,分析调节性T细胞表达状态与临床病理特征及无瘤生存率之间的关系。结果：胃癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋、CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞比率与健康对照者间有显著差异（P〈0.01）,CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞数目与健康对照间差异有统计意义（P〈0.05）。CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比率[（2.57±1.50）%]高于对照组[（0.68±0.67）%],并与TNM分期及肿瘤大小有明显相关（P〈0.01）。CD4^＋FOXP3^＋、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比率与无瘤生存率相关,有显著差异（P〈0.01）,CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞数目与无瘤生存率相关,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：CD4^＋FOXP3^＋及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞可能在胃癌免疫耐受中发挥重要作用,检测其比率及数目对于判断胃癌的病期及预后有一定价值。     

强直性脊柱炎活动期患者调节性T细胞表达及与其它指标相关性的研究

目的探讨CD4＋CD25＋CDl27low/-调节性T细胞（Treg）在强直性脊柱炎（AS）活动期患者发病中的作用机制及其与C-反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）的相关性。方法采用流式细胞术分别检测39例AS活动期患者和20例健康对照者外周血CD4＋CD25＋CDl27low/-调节性T细胞占CD4＋T细胞比例,同时分别检测两组C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）的表达水平,并分析AS活动期患者CD4＋CD25＋CDl27low/-调节性T细胞与CRP、ESR的相关性。结果AS活动组外周血CI）4＋CD25＋CDl27low/-Treg与对照组比较明显降低,具有统计学意义（P〈0．01）。AS活动组CRP、ESR与对照组比较均明显升高（P〉0．05）,具有统计学意义（P〈0．01）。但AS活动期患者CD4＋CD25＋CD127low/-Treg表达率与CRP、ESR均未见明显相关性。结论AS活动期患者CD4＋CD25＋CDl27low/-Freg细胞数量的减少可能使免疫活性细胞逃避机体对它们的免疫调节,导致体内诱导免疫耐受机能不足,从而促进AS的发生发展。进行CD4＋CD25＋CDl27low/-Treg的检测有助于评估AS活动期患者免疫状态,判断疾病进展,但其与CRP、ESR的相关性尚有待于进一步的研究。     

严重多发伤患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节T细胞的变化特点

目的观察严重多发伤患者早期SIRS中CD4^＋CD25^＋调节T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）比例的变化，并探讨其与患者继发感染之间的关系。方法对符合SIRS诊断标准的23名严重多发伤患者，于确诊后的24h内无菌抗凝抽取静脉血，用流式细胞仪技术检测CD4^＋CD25^＋Treg的比例及CD4／CD8的比值，同时留取细胞培养，以嗜银染技术观察患者外周血淋巴细胞核仁形成区银染蛋白（Ag—NORs）的量，以核仁银染面积与核面积的比值（IS％）表示，了解淋巴细胞的增殖情况。并对入选患者于诊断成立的第1、5天留取痰、分泌物等标本行细菌学培养，观察患者的情况。结果符合SIRS的严重多发伤患者早期即有CD4^＋CD25^＋Treg比例的显著升高。并有IS％及CD4／CD8显著下降，和对照组相比，均有P〈0．01。CD4’CD25’Treg比例升高愈显著者，继发感染机率愈高。结论检测CD4^＋CD25^＋Treg的水平对于评估严重多发伤患者的细胞免疫状态，预测继发感染均有很大的帮助。     

急性髓系白血病患者骨髓中树突状细胞亚群的定量分析

本研究探讨初诊急性髓系白血病（AML）患者骨髓中树突状细胞（dendritic cells,DC）亚群数量的变化特点。采用直接免疫荧光标记法,对30例健康志愿者和77例初诊AML患者的骨髓进行髓样Dc（myeloid DC,mDC）和浆细胞样DC（plasmacytoid DC,pDC）标记,用流式细胞仪进行检测,并用4色与传统3色两种设门方法进行分析。结果表明：与正常人骨髓中mDC与pDC的数量相比,4色设门方法分析显示,在77例初诊AML患者中：mDC数量减低、正常与增高的患者分别占74．0％（57例）、6．5％（5例）和19．5％（15例）,pDC数量减低、正常与增高的患者分别占90．9％（70例）、7．8％（6例）与1．3％（1例）;3色设门方法分析显示,mDC数量减低、正常与增高的患者分别占58．4％（45例）、19．5％（15例）和22．1％（17例）;pDC数量减低、正常与增高的患者分别占46．8％（36例）、26．0％（20例）与27．3％（21例）。两种设门方法所得结果,有统计学差异（p〈0．05）。在AML—M2、M3与M4／M5几个亚型中,4色设门方法分析显示：mDC数量减低患者所占比例分别为81．4％、100％与42．1％;pDC数量减低患者所占比例分别为88．4％、100％与89．5％。M4／M5型与M2、M3型相比,mDC数量正常或增高的患者较多,差异有统计学意义（P〈0．05）;pDC在各亚型中的数量变化无统计学差异（P〉0．05）。结论：4色设门方法比传统3色设门方法更适用于初诊AML患者骨髓中mDC与pDC数量的研究;大部分初诊AML患者表现为mDC与pDC数量的减低;M4／M5型与M2、M3型相比,mDC数量正常或增高的患者较多,而pDC在各亚型之间未见明显差别。     

CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞水平在胃癌患者外周血中的变化

目的探讨T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值水平在胃癌患者外周血中的表达及意义。方法采用血液分析仪技术,检测40例胃癌手术前患者(按临床分期为Ⅰ～Ⅱ级组18例,Ⅲ～Ⅳ级组22例)及25名正常对照组外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平。结果胃癌患者外周血CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值分别为0.78%±0.35%、0.37%±0.21%、0.61%±0.42%,明显低于正常对照组(P<0.05);胃癌Ⅲ～Ⅳ级组CD3+、CD4+细胞CD4+/CD8+比值分别为0.42%±0.27%、0.21%±0.17%、0.29%±0.25%,明显低于Ⅰ～Ⅱ级组(0.95%±0.35%、0.45%±0.19%、0.76%±0.30%,P<0.05)。结论检测胃癌患者手术前外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平,可以初步评估胃癌患者机体免疫状态,也为肿瘤的免疫增强治疗提供了理论依据。     

免疫性血小板减少症患者骨髓滤泡辅助性T细胞数量及功能的研究

本研究检测免疫性血小板减少症（ITP）患者骨髓滤泡辅助性T细胞（Tfh细胞）数量及功能,探讨Tfh细胞在ITP发病机制中的作用。选取2013年1月至10月在天津医科大学总医院血液科就诊的21例初治ITP患者、20例恢复期ITP患者及18名正常对照者,采用流式细胞术检测骨髓Tfh细胞数量、Tfh细胞功能相关分子CD40L、ICOS、IL-21的表达,采用RT-PCR技术检测BMMNC转录因子BCL-6mRNA相对表达水平;并将各项指标与疾病严重程度进行相关性分析。结果表明,ITP初治组骨髓CD4＋CXCR5＋／CD4＋细胞比例[（5．532±2．599）％]高于恢复期组[（4．064±2．026）％]和对照组[（4．048±1．413）％]（P〈0．05）;ITP初治组骨髓CD4＋CXCR5＋ICOS＋／CIM＋CXCR5＋细胞比例[（14．586±8．561）％]高于恢复期组[（12．884±10．161）％]和对照组[（7．487±5．176）％],初治组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）;ITP初治组和恢复期组骨髓CIM＋CXCR5＋CD40L＋／CD4＋CXCR5＋细胞比例[（15．309±10．756）％]及[（18．242±12．243）％],高于对照组[（8．618±5．719）％]（P〈0．05）;ITP初治组和恢复组骨髓CD4＋CXCR5＋IL-21＋／CD4＋CXCR5＋细胞比例1（58．560±26．285）％]及[（57．035±30．936）％]高于对照组[（36．289±24．868）％]（P〈0．05）;初治组、恢复组、对照组BCL-6mRNA的表达水平分别为（1．407±0．264）、（1．149±0．217）和（0．846±0．157）,差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。结论：Tfh细胞在ITP患者的骨髓中数量增加,功能分子表达增多,功能亢进,在ITP发病机制中可能有重要作用。