高碘对大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的观察长期高碘对大鼠海马神经细胞形态结构及细胞凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法SD大鼠随机分为3组：对照组、高碘Ⅰ组、高碘Ⅱ组，分别以含碘量为5、5000、10000μg／L的自来水及普通饲料喂养。6个月时检测血清总甲状腺激素（TT3、TT4）水平；光、电镜下观察神经细胞尼氏小体及超微结构改变；流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期的变化；分光光度法检测一氧化氮（NO）水平及一氧化氮合酶（NOS）活性；RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、baxmRNA表达。结果对照组、高碘Ⅰ组、高碘Ⅱ组血清TT3、TT4水平呈逐渐下降趋势，组间比较差异无统计学意义。高碘Ⅰ、Ⅱ组光镜下神经元尼氏小体模糊减少，胞质淡染，电镜下细胞核内染色质浓缩成块．聚集在核膜边缘，形成花瓣状、马蹄状等不规则形态，核膜内陷、包裹聚集的染色质形成凋亡小体。海马神经细胞凋亡率高碘Ⅰ、Ⅱ组均较对照组明显升高（P〈0．01），但高碘Ⅰ组、高碘Ⅱ组间比较未见明显差异（P〉0．05）。与对照组相比，高碘I、Ⅱ组S期细胞减少（P〈0．01），G2／M期增加（P〈0．05），G．期无明显变化（P〉0．05）。高碘Ⅰ、Ⅱ组大鼠海马组织NOS活性及NO水平均明显低于对照组（P〈0．01），bcl-2mRNA表达降低（P〈0．01）、baxmRNA表达升高（P〈0、01），但高碘I组、高碘Ⅱ组间未见明显改变（P〉0．05）。结论长期高碘可诱导大鼠海马神经细胞凋亡，细胞周期改变；其机制可能与NOS活性、NO水平降低以及bax过度表达、bcl-2表达下调有关。     

银杏内酯A对海马神经细胞凋亡保护作用的研究

目的探讨银杏内酯A(GKA)对凋亡海马神经细胞的影响及机制。方法用MTT法分析GKA对原代培养海马神经细胞的毒性作用,用浓度分别为0.1、1、10μmol/L的GKA预处理神经细胞6h,再用50μmol/LSNP孵育神经细胞24h;用流式细胞仪分析各组凋亡情况,用RT-PCR和Westernblot分析bcl-2、bax和cpp32 mRNA和蛋白表达水平,用试剂盒测定各组Cpp32活性。结果流式细胞术结果显示GKA实验组凋亡率均显著低于SNP组(P<0.01);RT-PCR结果和WesternBlot结果表明,GKA可以对抗SNP,上调bcl-2表达,下调bax表达,不影响Cpp32表达,但能显著降低Cpp32的活性(P<0.01)。结论GKA可以对抗SNP,对海马神经细胞有保护作用。     

脑缺血与神经细胞凋亡

１９９３年以来，研究证明脑缺血后神经细胞凋亡参与梗塞灶形成，迟发性神经元死亡中有凋亡成分。高能磷酸盐竭程度，ｂｃｌ－２和Ｐ５３基因表达与神经细胞凋亡有关。     

砷对原代培养海马神经细胞凋亡的研究

目的 观察砷对海马神经细胞凋亡的影响。方法 采用光学显微镜、流式细胞术和免疫细胞化学方法检测砷致海马神经细胞凋亡。结果 随着砷剂量加大，作用时间延长，海马神经细胞逐渐出现凋亡的形态学改变。流式细胞术检测，砷可使亚二倍体峰的高度增高，面积增大。免疫细胞化学和图像分析显示海马神经细胞浆内Bax表达上调。结论 砷在一定剂量和作用时间内可致海马神经细胞的凋亡。     

神经细胞凋亡的分子调控

神经细胞凋亡是神经细胞接受某种异常信号或受到某些因互剌激后产生的一种主动的、由一些与凋亡相关基因相互作用的细胞消亡过程。Ｂｃｌ－２、ＩＣＥ、Ｆａｓ的Ｐ５３基因都参与了神经细胞凋亡过程，但它们之间的关系目前仍不清楚，有待进一步研究。     

益智合剂对模型鼠脑海马脂褐素和细胞凋亡的影响

老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)是老年性神经系统退行性疾病.纯中药制剂"益智合剂"经长期临床应用表明,对AD有较好的疗效.我们已经报道了它对D-半乳糖加速衰老模型大鼠学习记忆能力有改善作用,能降低乙酰胆碱酯酶,增加超氧化物岐化酶、一氧化氮含量及Na -K -ATP酶活力[1].本研究对脑海马区切片脂褐素和细胞凋亡进行了检测,探讨益智合剂的抗衰老作用机制.     

细胞凋亡与衰老

衰老是指增龄过程中机体出现的多器官渐进性功能减退,其确切机制并不清楚,有多种学说,如自由基学说、端粒学说和细胞凋亡学说等.     

老年鼠脑老化神经细胞凋亡及基因调控的研究

目的研究老年鼠脑老化神经细胞的凋亡及基因调控。方法用ＴＤＴ法及流式细胞仪观察不同鼠龄海马神经细胞凋亡及凋亡发生率，并用免疫组织化学检测ｂｃｌ－２、ｂｃｌ－ｘ１及ｂａｘ基因表达。结果老年组神经细胞在荧光显微镜下显示较典型的细胞凋亡特点，老年组海马神经细胞凋亡率与青年组比较有显著差异。老年鼠ｂｃｌ－２，ｂｃｌ－ｘ１表达下调，而ｂａｘ的表达量明显增加。结论脑老化过程中存在着以细胞凋亡形式的神经细胞的死亡。细胞凋亡的变化与基因的表达相一致     

外源性Rb基因对神经细胞衰老的影响

目的　观察外源性 Rb基因对神经细胞衰老的影响 ,并探讨 Rb基因对神经细胞 P2 1基因表达的调控。方法　用外源性 Rb基因重组腺病毒载体感染体外培养的胚胎大鼠神经细胞 ,以β-半乳糖苷酶染色观察神经细胞的衰老变化 ,用免疫组化法测定 P2 1蛋白表达水平。结果　外源性Rb基因导入神经细胞后 ,P2 1蛋白水平显著增高 ,与衰老相关的 β-半乳糖苷酶表达也增加。结论　 Rb基因可能通过上调 P2 1基因表达促进神经细胞衰老。     

大鼠海马CA3区发育中神经细胞凋亡的研究

目的 观察大鼠海马发育中神经细胞凋亡的特点，探讨细胞凋亡与大鼠海马发育和老化的关系。方法 用TUNEL法结合激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察分析细胞凋亡在大鼠海马发育中的表现。结果 各年龄组大鼠海马CA3区均有数量不等的TUNEL阳性凋亡细胞，细胞核固缩，核染色质呈浓染致密的绿色或黄绿色块状及颗粒状荧光。LSCM荧光定量分析：各年龄组中以成年组荧光强度值最低。结论 大鼠海马CA3区生长发育中确有细胞凋亡存在；各年龄组中以成年组细胞凋亡率最低，乳鼠、幼年鼠和老年大鼠海马CA3区细胞凋亡率较高。表明成年期大鼠海马CA3区细胞数目相对较稳定，而在神经系统发育早期及老化阶段细胞数目均发生较大变化。结论 细胞凋亡与神经系统功能的完备有关。     

丹参对内皮素-1介导的肝星状细胞Ca2+浓度变化的影响机制

目的:探讨丹参降门脉压作用是否与抑制ET-1介导的HSCs[Ca2 ]i升高有关．方法:制备丹参浸膏借助激光共聚焦显微镜(LSCM)观察丹参对ET-1介导HSCs[Ca2 ]i升高的影响．结果:含钙细胞培养液(A液)中加入浓度梯度的ET-1后,荧光强度逐渐增加,作出累积反应曲线后,EC50值约在1．1×10-9mol／L,此浓度的ET-1作用于A液和B液,钙波持续时间相比有显著性差异(165．2±10．1 s vs 91．0±7．2 s, P<0．01),而钙峰值相比无显著性差异．丹参预处理A液后加入ET-1,钙波持续时间同ET-1相比有显著性降低(69．1±12．5 svs165．2±10．1 s,尸<0．01)．丹参预处理B液后加入ET-1,同丹参处理A液组相比钙峰值和钙波持续时间均无显著性差异(P>0．05)．丹参预处理后,加入KCl可降低其诱发的[Ca2 ]i的升高,钙峰值(78．0％±6．1％→26.3％±1．2％,P<0．01)和钙波持续时间(70．8±10．4 s→15．9±5．1 s,P<0．011均明显下降．结论:丹参可抑制ET-1引发的细胞内钙释放,而与外钙内流关系不大,同时可抑制KCl诱发的钙内流,表明丹参具有电压依赖性钙通道阻断作用．     

丹参对大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1表达的影响

目的　观察大鼠局灶性脑缺血后神经元内细胞周期蛋白D1(cyclinD1)表达与神经细胞凋亡的关系以及丹参的影响。方法　采用线栓法大鼠大脑中动脉持续阻塞模型 ,应用免疫组织化学和TUNEL染色方法观察假手术组和缺血后不同时间阳性染色神经细胞的数量和分布情况及丹参的影响。结果　cyclinD1蛋白表达自缺血后 6h开始出现 ,缺血后 48h达高峰 ;丹参组各相应时间点cyclinD1蛋白表达明显减少 (P <0 .0 1)。凋亡细胞自缺血后 12h开始出现 ,缺血后 72h达高峰 ;丹参组各相应时间点凋亡细胞表达明显减少 (P <0 .0 1)。相邻切片可见cyclinD1蛋白表达和凋亡细胞染色区域基本相同。结论　脑缺血后cyclinD1的异常表达可能诱发了缺血神经细胞的凋亡 ,丹参可能通过抑制cyclinD1的表达而减少缺血后神经细胞的损害     

丹参对实验性肝硬变犬门脉高压的影响

研究丹参注射液对门脉高压血流动力学的影响．方法用胆总管结扎法制作犬门脉高压模型．分别测定用药前后门脉高压犬血流动力学变化．结果丹参静脉给药后３０ｍｉｎ，肝硬变犬门静脉压（Ｐｐｖ，２５６ｋＰａ±０３０ｋＰａ→１９８ｋＰａ±０３３ｋＰａ）、嵌塞肝静脉压（ＷＨＶＰ，２１７ｋＰａ±０３６ｋＰａ→１８４ｋＰａ±０３１ｋＰａ）、肝静脉压力梯度（ＨＶＰＧ，０９３ｋＰａ±０３３ｋＰａ→０６６ｋＰａ±０４３ｋＰａ）显著下降（Ｐ＜００５～００１），给药后６０ｍｉｎ，上述指标降至最低点（各为１８２ｋＰａ±０３３ｋＰａ，１７０ｋＰａ±０３０ｋＰａ，０６０ｋＰａ±０４３ｋＰａ），但对平均动脉压（ＭＡＰ）、心率（ＨＲ）、下腔静脉压（ＩＣＶＰ）和正常犬血流动力学无显著影响（Ｐ＞００５）．结论丹参为一疗效确切而无副作用的降门脉压药物．     

Progress in research into the mechanism of Radix salviae miltiorrhizae in treatment of acute pancreatitis

Introduction The active components of Radix salviae miltiorrhizae (Danshen) are tanshinone Ⅰ, tan- shinone ⅡA, tanshinone ⅡB, isotanshinoneⅠ, and isotanshinone ⅡA. Modern pharmacological studies have proven that Danshen can prevent calcium overload, eliminate oxygen free radicals (OFRs), combat inflammation, and improve microcirculation. Presently it has been extensively used in the treatment of acute pancreatitis (AP) with marked effects.[1] This review aims to summarize the therape…     

丹参对肝星状细胞一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨丹参降门脉压作用是否与促进NOS表达有关.方法:制备丹参浸膏,借助细胞免疫组化的方法观察丹参对一氧化氮合酶(NOS)iNOS和eNOS表达的影响.结果:丹参可促进活化的HSCs iNOS表达,其棕色吸光度值增加,同干预前相比有显著性差异(0.053±0.002vs 0.034±0.001,P＜0.05),而eNOS表达无明显变化.结论:丹参可促进活化的HSCs iNOS表达.     

APP17肽对D-半乳糖脑老化模型小鼠神经元凋亡的影响

目的观察D-半乳糖脑老化小鼠(DGAM)海马内凋亡相关蛋白Fas、Fas配体(Fas-L)、核因子κB(NFκB)、C-Fos、C-Jun的表达及其脑神经元是否发生凋亡,并观察APP17肽的作用. 方法用D-半乳糖(D-gal)制造脑老化小鼠模型,给模型小鼠皮下注射APP17肽进行预防或治疗.D-gal皮下注射8周后,小鼠灌注取脑,行脑切片,一部分切片做免疫组织化学染色,观察各组小鼠海马内凋亡相关蛋白Fas、Fas-L、NFκB、C-Fos、C-Jun的表达;另一部分切片用凋亡试剂盒检测神经元是否发生凋亡. 结果对照组小鼠海马内Fas、Fas-L、C-Fos、C-Jun阳性染色神经元的数目分别为20.60±4.60、20.00±4.24、9.93±3.79、13.44±4.18,DGAM组小鼠上述各种抗体的阳性染色神经元数目分别为42.80±15.83、38.53±8.13、23.25±5.18、23.47±8.49,DGAM组比对照组明显增加(P＜0.05).DGAM组海马内NFκB的阳性染色神经元数目为13.93±5.31,比对照组小鼠的23.93±3.69明显减少(P＜0.05).用APP17肽预防或治疗后小鼠上述各种蛋白质的表达恢复到接近对照组小鼠的水平.对照组小鼠未发现凋亡的神经元;DGAM组小鼠脑神经元出现大量凋亡,用APP17肽预防或治疗后,神经元凋亡的数目与对照组小鼠接近. 结论 DGAM海马内凋亡相关蛋白表达异常,脑神经元发生凋亡.APP17肽可恢复各种凋亡相关蛋白的表达,阻止神经元凋亡,维持神经元的正常功能.     

敦煌石室大宝胶囊对衰老大鼠脑组织单胺类神经递质的影响

目的 观察敦煌石室大宝胶囊(DHDB)对衰老模型大鼠脑组织单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA) 和5-羟色胺(5-HT)含量的影响.方法 采用D-半乳糖建立大鼠衰老模型,测定大脑皮层内的NE、DA和5-HT含量.结果 模型组大鼠脑组织内NE、DA、5-HT含量与空白组比较均有明显降低(P<0.05),应用DHDB治疗后,治疗组大鼠脑组织内NE、DA、5-HT含量均显著增高(P<0.05).结论 DHDB可提高衰老模型动物脑组织单胺类神经递质的含量,对改善大脑功能有一定的作用.     

丹参对重症急性胰腺炎大鼠腹腔器官血流的影响

目的:研究丹参对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠腹腔器官血流,特别是胰腺血流的影响及其作用机制.方法:将大鼠随机分成丹参治疗组(SM)和重症急性胰腺炎组(SAP).各组分别有数只大鼠于术后12、24 h处死,观察血浆淀粉酶的变化.另设正常对照组.运用多普勒超声测定胰腺局部动脉(相当于胰头、体交界处)、门静脉血流、脾动脉及肠系膜上动脉血流.结果:丹参组12、24 h的血浆淀粉酶明显低于相同时点的SAP组(8091.2±1574.9 vs 15 142.8±2900.5,8312.5±981.1 vs 16 987.1±1584.6,P<0.011.丹参组和SAP组大鼠胰腺局部动脉,门静脉、脾动脉及肠系膜上动脉中的血流在术后12 h时与对照组相比明显下降(P<0.01).随胰腺炎的病程进展,其24 h局部血流相比12 h时的下降更趋严重.丹参组12、24 h大鼠胰腺局部动脉,门静脉、脾动脉和肠系膜上动脉的血流量与SAP组相同时点相比明显增加(12 h:0.49±0.04 vs 0.33±0.06,0.60±0.04 vs 0.39±0.08.0.53±0.04 vs 0.42±0.08:0.57±0.08 vs 0.42±0.06:24 h:0.38±0.04 vs 0.29±0.04,0.59±0.04 vs 0.41±0.01.0.54±0.06 vs 0.32±0.02.0.49±0.05 vs 0.38±0.04,P<0.011.结论:丹参能促使SAP大鼠胰腺血流量增加     

牡蛎肉水提液延缓去卵巢大鼠脑衰老的作用

目的 观察牡蛎肉水提液对去卵巢大鼠脑衰老的影响。方法 4月龄的雌性大鼠行双侧卵巢摘除术后,给予牡蛎肉水提液灌胃3个月,测定大鼠脑形态计量学和生化指标。结果 牡蛎肉水提液组大鼠的纹状皮质分子层厚度增加,分子层厚度和皮层总厚度的比值下降,海马CA2区单位面积大锥体细胞数增多,超氧化物歧化酶（SOD）活性增强而丙二醛（MDA）含量下降。结论 牡蛎肉水提液能够延缓去卵巢大鼠脑衰老。