白藜芦醇通过BRD4调控Wnt/β-catenin通路逆转胶质瘤细胞替莫唑胺耐药的机制研究

目的 探究白藜芦醇（RES）逆转胶质瘤细胞替莫唑胺（TMZ）耐药的作用是否与通过溴结合域蛋白4（BRD4）调控Wnt/β-链蛋白（β-catenin）通路有关。方法 取人神经胶质瘤TMZ低敏细胞株（U138）、高敏细胞株（U251）、耐药株（T98G）,Western blot法检测3种细胞株中BRD4、Wnt3a、β-catenin、TMZ耐药蛋白（MGMT）蛋白表达。取T98G细胞株分为对照1组（添加100 μmoL/L TMZ）、RES1组（添加50 μmoL/L RES）、RES+TMZ（添加100 μmoL/L TMZ和50 μmoL/L RES）组,用CCK-8法、流式细胞术检测各组细胞增殖、凋亡情况;Western blot法检测各组BRD4、Wnt3a、β-catenin、MGMT蛋白表达。为分析BRD4过表达对TMZ耐药性的影响,在添加100 μmoL/L TMZ的基础上,转染BRD4过表达质粒（pcDNA BRD4）或加入50 μmoL/L RES分别作为pcDNA NC组、pcDNA BRD4组、RES2组、RES+pcDNA BRD4组。为验证BRD4对Wnt3a/β-catenin通路的调控作用,在添加100 μmoL/L TMZ的基础上,加入BRD4抑制剂JQ1和Wnt3a/β-catenin通路激活剂LiCl,分为对照2组、JQ1组、JQ1+LiCl组。将T98G细胞接种于裸鼠左肩胛区,给予RES、TMZ和（或）JQ1治疗,检测瘤体中Ki67,BRD4、MGMT及Wnt3a/β-catenin蛋白表达。结果 与U251细胞相比,U138、T98G中BRD4、Wnt3a、β-catenin及MGMT表达均依次升高（P<0.05）。与对照1组相比,RES干预可抑制T98G细胞BRD4、Wnt3a/β-catenin、MGMT蛋白表达及增殖,促进凋亡,逆转细胞的耐药性（P<0.05）。pcDNA BRD4可逆转RES的抗增殖、促凋亡等上述作用。BRD4抑制剂JQ1可抑制T98G细胞BRD4、Wnt3a/β-catenin、MGMT蛋白表达及增殖,促进凋亡（P<0.05）;LiCl可逆转JQ1的抗增殖、促凋亡作用。RES单独或与JQ1联合治疗,可激活TMZ对瘤体内Wnt3a/β-catenin通路、MGMT表达和细胞增殖的抑制作用（P<0.05）。结论 RES可能通过下调BRD4,进而抑制Wnt3a/β-catenin通路活化,实现对胶质瘤T98G细胞TMZ耐药性的逆转。     

新药替莫唑胺酯抗原发性耐药胶质瘤机制研究

目的 以替莫唑胺(temozolomide,TMZ)为阳性对照,研究新药替莫唑胺酯(temozolomide hexyl ester,TMZ-HE)在体外抑制脑胶质瘤T98G细胞生长并诱导凋亡的作用及其机制。方法 MTT比色法和克隆形成实验比较TMZ和TMZ-HE对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测TMZ-HE和TMZ对细胞凋亡率及细胞周期的影响;Western blot检测TMZ和TMZ-HE对Bax、Bcl-2以及O⁶-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O⁶-methyl-oguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)、γH2AX蛋白表达的影响。结果 TMZ-HE较TMZ明显抑制T98G细胞的生长,呈浓度及时间依赖性,长期作用时效果更加明显;TMZ-HE诱导T98G细胞凋亡率高于TMZ;TMZ-HE能够导致T98G细胞发生G2期阻滞;TMZ-HE能够增加Bax/Bcl-2的比值,诱导发生凋亡,TMZ-HE比TMZ更明显地消耗MGMT,产生更强的DNA损伤。结论 TMZ-HE对胶质瘤T98G细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用优于TMZ,消耗MGMT以及DNA损伤能力强于TMZ。     

双酚S通过诱导神经胶质瘤细胞干性维持增强替莫唑胺抵抗的机制探讨

目的 探讨双酚S(BPS)在神经胶质瘤细胞干性维持中的作用,及其与替莫唑胺(TMZ)抵抗的关系。方法 以BPS刺激神经胶质瘤U251细胞,必要时以TMZ处理细胞,细胞成球实验检测细胞成球能力;平板克隆实验观察细胞克隆形成能力;MTT实验观察细胞存活能力;蛋白印迹和/或免疫荧光实验检测细胞CD133和SOX-2蛋白表达。结果 与对照组(Control组)相比,BPS(0.1、1、10μM)处理后,U251细胞干细胞球直径明显增加,干细胞球数量也显著增加(P<0.05)。BPS(0.1、1、10μM)处理明显增强U251细胞克隆形成能力(P<0.01)。BPS(10μM)显著上调U251细胞CD44和CD133蛋白表达(P<0.01)。BPS(10μM)处理显著抵抗TMZ诱导的细胞活力降低(P<0.05)。结论 BPS在神经胶质瘤细胞干性维持中发挥作用,该作用可能与TMZ抵抗有关。     

替莫唑胺和Bcl-2 siRNA对人胶质瘤U251细胞生长的影响

目的 探讨联合应用Bcl-2 siRNA和替莫唑胺(TMZ)能否有效提高TMZ对人胶质瘤U251细胞生长的抑制作用.方法 应用转染试剂LipofectaminTm2000将Bcl-2 siRNA转入U251细胞,同时加入TMZ联合培养.24 h后验证Bcl-2基因沉默效应,并检测U251细胞增殖、凋亡、侵袭和细胞线粒体膜电位变化.结果 Bcl-2 siRNA明显抑制U251细胞Bcl-2基因的表达;联合应用TMZ和Bcl-2 siRNA有效抑制人胶质瘤U251细胞生长,诱导凋亡,同时降低U251细胞线粒体膜电位(P＜0.05).结论 联合TMZ和Bcl-2 siRNA可能通过改变神经胶质瘤细胞线粒体膜电化水平,有效提高U251细胞对TMZ敏感性.     

三维适形放疗联合替莫唑胺治疗恶性脑胶质瘤的临床疗效观察

目的 探讨三维适形放疗联合替莫唑胺治疗恶性脑胶质瘤的临床疗效.方法 将2011年2月-2012年2月在该院治疗的恶性脑胶质瘤患者86例随机分为观察组和对照组各43例.观察组给予三维适形放疗联合替莫唑胺同步化疗;对照组给予单纯三维适形放疗.观察2组临床疗效及不良反应发生情况.结果 观察组有效率为53.5%高于对照组的30.2%,差异有统计学意义（P〈0.05）.观察组6个月生存率为86.0%（37/43）高于对照组的67.4%（29/43）;观察组1年生存率为81.4%（35/43）高于对照组的60.5%（26/43）,差异均有统计学意义（P〈0.05）.结论 术后三维适形放疗联合替莫唑胺治疗恶性脑胶质瘤能有效提高治疗有效率,且患者耐受性良好,能够提高部分患者的生存质量.     

新型烷化剂替莫唑胺的临床应用进展

目的：通过对替莫唑胺治疗肿瘤的国内文献进行统计分析,对替莫唑胺的疗效、使用注意事项（不良反应）和应用前景进行总结和展望。方法：对替莫唑胺作用机制、临床应用以及不良反应进行综述。结果及结论：替莫唑胺对胶质瘤具有较好的临床疗效,能显著延长患者生存期,具有良好的临床应用前景;同时其不良反应需要进一步深入广泛地研究。     

化疗治疗神经胶质瘤的研究进展

胶质瘤（Glioma）是成人脑肿瘤中最常见的颅内恶性肿瘤。手术、术后替莫唑胺（Temozolomide, TMZ）联合放疗以及替莫唑胺辅助化疗是目前胶质瘤的标准治疗方案。尽管如此,神经胶质瘤的预后仍然很差。本文主要介绍神经胶质瘤的综合治疗,尤其是化学治疗的相关研究进展。     

地塞米松拮抗替莫唑胺抑制胶质瘤细胞生长的体外试验

目的:探讨替莫唑胺(TMZ)联合地塞米松(DXM)对体外培养的人胶质瘤细胞系U251细胞的增殖影响。方法:U251细胞分为TMZ组(分别加入10、25、50、100、200、400μmol·L~(-1)浓度的TMZ)、TMZ+DXM组(在各浓度TMZ的基础上加入40μmol·L~(-1)的DXM)和对照组(不加任何药物)。各组细胞加入相应药物72 h后,观察细胞形态学改变,检测细胞增殖抑制率及细胞周期和凋亡率。结果:TMZ浓度大于100μmol·L~(-1)时,TMZ组抑制率大于TMZ+DXM组(P<0.01)。与TMZ组比较, TMZ+DXM组细胞G_(0-1)期比例增加、G_2～M期比例减少,细胞的凋亡率进一步降低。结论:DXM可能通过改变细胞周期分布而减弱TMZ抑制胶质瘤细胞生长作用,2药联用具有负协调作用。     

异柠檬酸脱氢酶1基因突变对替莫唑胺干预下脑胶质瘤U87细胞凋亡的影响

目的 研究异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)基因突变对替莫唑胺干预下脑胶质瘤U87细胞凋亡的影响,以期深入了解其生物学特性及其化疗敏感性.方法 通过DNA重组技术构建携带野生IDH1基因(wIDH1)或突变的IDH1基因(mIDH1)的真核表达载体;通过CCK-8检测三种...     

替莫唑胺耐药细胞系U87/TR的构建及槲皮素对其耐药性的逆转作用

目的探讨槲皮素逆转对替莫唑胺耐药细胞系U87/TR细胞系的作用。方法采用替莫唑胺对U87细胞进行体外分步诱导,产生对替莫唑胺耐药的U87/TR细胞系;采用细胞集落法确定U87/TR的耐药性;噻唑蓝(MTT)法检测替莫唑胺对U87/TR细胞毒性作用,计算半数抑制浓度(IC50),得到U87/TR细胞系对替莫唑胺的耐药指数(RF);将槲皮素联合替莫唑胺分别作用于U87/TR细胞系及其亲本细胞U87,采用乳酸脱氢酶法和MTT法分别测定不同给药组细胞的细胞毒性和增殖抑制作用。结果通过体外分步诱导法成功地建立了对替莫唑胺具有稳定耐药性的U87/TR细胞株。细胞集落法确定诱导过程中的U87/TR-160的耐药性为1.5～8.0倍;MTT法检测结果显示,U87/TR的耐药指数约为4.18。随着槲皮素联合替莫唑胺作用时间的延长(48 h)细胞生存率<50%。结论成功建立了由替莫唑胺诱导的人脑胶质瘤耐药细胞株U87/TR。槲皮素联合替莫唑胺能显著逆转U87/TR细胞系的耐药性。     

放疗联合替莫唑胺治疗术后恶性胶质瘤的Meta分析

目的比较放疗联合替莫唑胺与单纯放疗相比治疗成人恶性胶质瘤术后患者的疗效及安全性。方法检索CNKI、中国生物医学文献数据库、Pubmed、Medline、Cochrane Library、中国科技期刊数据库中的相关文献,纳入相关研究,2名研究员背对背独立提取有效数据,应用SPSS软件进行Meta分析。结果最终纳入8篇文献,包括418例患者。Meta分析结果显示:在近期疗效方面,放疗联合替莫唑胺疗法高于单纯放疗疗法,差异有统计学意义(OR=3.42,95%CI:2.09⁵.58,P<0.000 01);1年、2年、3年生存率放疗联合替莫唑胺疗法均高于单纯放疗疗法,差异均有统计学意义(1年生存率:OR=2.99,95%CI:1.855.58,P<0.000 01);1年、2年、3年生存率放疗联合替莫唑胺疗法均高于单纯放疗疗法,差异均有统计学意义(1年生存率:OR=2.99,95%CI:1.85⁴.84,P<0.000 01;2年生存率:OR=4.52,95%CI:2.554.84,P<0.000 01;2年生存率:OR=4.52,95%CI:2.55⁸.01,P<0.000 01;3年生存率:OR=4.41,95%CI:1.838.01,P<0.000 01;3年生存率:OR=4.41,95%CI:1.83¹0.64,P=0.001 0),在安全性方面,放疗联合替莫唑胺疗法不增加恶心呕吐、骨髓抑制、头晕头痛不良反应发生,P>0.05。结论恶性胶质瘤术后患者行放疗同时联合替莫唑胺口服化疗明显增加临床疗效,安全可靠,值得临床推广。     

放疗联合替莫唑胺对照尼莫斯汀同步化疗治疗脑恶性胶质瘤疗效观察

目的观察脑胶质瘤术后放疗联合替莫唑胺（TMZ）与放疗联合尼莫司汀（ACNU）的近期疗效及安全性。方法经手术后病理确诊的高级别脑胶质瘤患者36例,根据患者的意愿及经济情况分为放疗联合替莫唑胺组（RT—TMZ组）18例与放疗联合尼莫司汀组（RT—ACNU组）18例,分别应用替莫唑胺（TMZ）和尼莫司汀（ACNU）化疗4～6个周期。同时进行放疗,总照射剂量60Gy,2Gy／次,1次／d,5次／周。结果两组患者观察期内均未出现Ⅲ度以上毒性反应,RT—TMZ组的I。Ⅱ度不良反应发生率较RT—ACNU组为低（P〈0．05）。RT—TMZ组有效率、控制率（83．3％,88．9％）均明显高于RT—ACNU组（55．6％,66．7％）,两组差异具统计学意义（P〈0．05）。RT—TMZ组的中1、2年生存率分别为77．8％、55．6％,优于RT—ACNU组的61．1％、33-3％（P〈O．05）。结论与放疗联合ACNU组相比,放疔联合TMZ联合组对脑胶质瘤术后患者更安全、有效。脑恶性胶质瘤患者术后放疗联合TMZ化疗疗效较好,毒副作用较轻,且TMZ口服应用方便,有较好的临床应用前景。     

替莫唑胺治疗多形性胶质母细胞瘤的化疗耐药机制

胶质瘤约占原发性颅内肿瘤的50%以上,多形性胶质母细胞瘤(GBM)为WHOⅣ级胶质瘤,复发率高,5年生存率不到10%。化疗是GBM综合治疗中的重要一环,而替莫唑胺作为多形性胶质母细胞瘤基石化疗药物在临床广泛应用,然而因其化疗耐药性的存在,严重影响了治疗效果的进一步提高。本文针对目前胶质瘤化疗药物的主要耐药机制:多药耐药、DNA损伤修复机制、凋亡通路异常、胶质瘤干细胞学说等几个方面,结合替莫唑胺药理机制进行分析、总结,希望对提高替莫唑胺在多形性胶质母细胞瘤中的疗效有一定启示。     

替莫唑胺治疗复发性恶性脑胶质瘤疗效

目的评价替莫唑胺治疗复发性脑恶性胶质瘤的疗效及安全性。方法 38例复发的恶性胶质瘤患者给予单药替莫唑胺100-200mg/m2,连续口服5d,28d为一周期。所有患者至少接受两个疗程治疗。替莫唑胺化疗后以头颅MRI判断疗效,并记录相关治疗反应。结果中位随访时间8.5个月。8例患者的肿瘤明显缩小,PR率为21.05%;13例患者肿瘤稳定,SD率为34.24%。中位无进展生存期为5.4个月;17例(44.74%)患者无进展生存期超过6个月;1年生存率23.68%(9/38)。替莫唑胺主要不良反应为恶心、呕吐、乏力和骨髓抑制等。结论口服替莫唑胺对恶性复发性胶质瘤患者安全有效。     

替莫唑胺化疗联合放疗治疗术后恶性脑胶质瘤的疗效评价

目的：探讨恶性脑胶质瘤术后行放疗联合替莫唑胺化疗的疗效。方法选取52例恶性脑胶质瘤术后患者,随机分为两组,每组各26例。1组行放疗,每次2Gy,5次/周,共30次,总剂量60Gy。2组行放疗联合替莫唑胺化疗,除给予1组相同的放疗外,还接受替莫唑胺同期化疗,化疗完毕比较两组患者的整体疗效及生活质量。结果2组完全缓解7例,部分缓解11例,有效率为69.23%;1组完全缓解4例,部分缓解6例,有效率占38.46%。两组疗效比较差异有统计学意义（ P〈0.01）。结论替莫唑胺联合放疗方案治疗术后恶性脑胶质瘤优于单纯放疗,值得临床推广。     

博莱霉素联合替莫唑胺治疗脑胶质瘤的疗效观察

目的研究注射用盐酸博莱霉素联合替莫唑胺胶囊治疗脑胶质瘤的临床疗效。方法选取2015年1月—2018年1月海口市人民医院收治的60例脑胶质瘤患者为研究对象,将患者随机分为对照组和治疗组,每组各30例。对照组患者口服替莫唑胺胶囊,150 mg/m~2,1次/d,连续服用5 d,然后停药23 d,再重复给药,1个治疗周期为28 d;治疗组患者在对照组基础上静脉注射注射用盐酸博莱霉素,1支/次,1次/d,连续给予2 d,然后停药26 d,再重复给药,1个治疗周期为28 d。两组患者均接受治疗2个周期。观察两组的临床疗效,比较两组的生命质量测定量表(QLQ-C30)评分和1年生存率。结果治疗后,对照组和治疗组的临床有效率(ORR)分别为46.67%、63.33%,疾病控制率(DCR)分别为66.67%、86.67%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组认知评分、躯体评分、角色评分、社会功能评分、情绪评分均显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组认知评分、躯体评分、角色评分、社会功能评分、情绪评分明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,对照组和治疗组1年生存率分别为46.67%、73.33%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论注射用盐酸博莱霉素联合替莫唑胺胶囊治疗脑胶质瘤具有较好的临床疗效,能改善生活质量,延长患者生存期,具有一定的临床推广应用价值。     

阿帕替尼对卵巢癌术后复发铂类耐药的影响

目的 探讨阿帕替尼治疗卵巢癌术后复发铂类耐药的临床价值.方法 选择2017年10月至2019年3月期间邢台市人民医院66例卵巢癌术后复发铂类耐药的病人作为研究对象,采用随机数字表法分为阿帕替尼联合化疗组、化疗组及阿帕替尼单药组,各22例.其中联合化疗组给予阿帕替尼+多西他赛(或吉西他滨)治疗,4个周期后阿帕替尼单药维持...     

原发性肝癌介入治疗与多药耐药基因表达的关系

目的探讨原发性肝癌中多药耐药基因编码的P．糖蛋白（Pgp）表达对介入治疗疗效的影响。方法60例原发性肝癌按介入药物不同将患者分为TAE＋MMC＋ADM组（A组）20例，TAE＋5-FU＋DDP组（B组）20例和TArE＋LAK细胞组（C组）20例，采用链霉亲合索．生物素酶复合物（streptavidin-bioton complex，SABC）免疫组化方法检测Pgp表达。结果60例患者中Pgp阳性27例（45．0％），Pgp阴性33例（55．0％）；A、B、C组Pgp阳性表达率分别为9例（45．0％）、8例（40．0％）和9例（45．0％），Pgp阴性表达率分别为11例（55．0％）、12例（60．0％）和11例（55．0％）；A、B、C组Pgp阴性表达有效率为10例（50．0％）、9例（45．0％）和8例（40.0％），Pgp阳性表达5例（25．0％）、5例（30．0％）和5例（25．0％）；三组的Pgp阴性表达的有效率均高于Pgp阳性表达（均P〈0．05）。结论Pgp表达是影响介入疗效的重要因素，治疗前检测Pgp表达对制定个体化治疗方案有重要意义。     

人表皮生长因子受体3与肿瘤治疗耐受的研究进展

人表皮生长因子受体3(human epidermal growth factor receptor 3,Her3)是人表皮生长因子跨膜受体家族的成员.Her3可通过配体依赖和非依赖的二聚化激活,进而激活下游关键的信号通路,如磷脂酰肌醇3激酶-丝氨酸苏氨酸蛋白激酶信号通路和丝裂原活化蛋白激酶信号通路,参与肿瘤的病理进程及肿瘤对靶向药物治疗、化疗等的耐受.目前,Her3已经成为乳腺癌、卵巢癌等肿瘤治疗极具前景的候选靶点.此文综述了Her3与肿瘤对靶向治疗等耐受的关系及靶向Her3单克隆抗体药物开发的研究进展.