骨髓间充质干细胞的生物学特性及在组织修复中的应用

骨髓间充质干细胞MSC具有多向分化潜能,具有向骨、软骨、韧()带、肌腱等中胚层组织及神经外胚层组织分化的能力。MSC固有的优势和特性,使其成为组织工程理想的种子细胞。描述MSC在骨组织工程、软骨组织工程、神经组织修复及其他组织修复中的研究和应用进展情况。MSC将在医学组织工程中发挥重大作用,具有广阔的应用前景。     

骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中的应用

目的：总结近年来骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中应用的文献，阐明骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中的应用前景。资料来源：应用计算机检索Medline 1996—01／2004—12文章，检索词为“Bone marrow mesenchymal stem cells,Bone tissue engineering,Cartilagetissue engineering”限定文章语言种类为English。资料选择：纳入标准：骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中应用的文献。排除标准：①较陈旧的文献。②重复研究。资料提炼：共收集到190篇与骨髓间充质干细胞和骨及软骨组织工程有关的文献，其中30篇符合纳入标准。资料综合：①骨髓间充质干细胞的成骨分化：骨髓间充质干细胞具有在一定的环境下向成骨细胞和软骨细胞分化的能力。（缈骨髓间充质干细胞在骨和软骨组织工程中的应用：研究表明，骨髓间充质干细胞复合适宜载体可用来修复骨缺损，但因骨缺损的多样性和载体材料本身的特点，目前尚未找到理想的骨组织工程支架材料，还未探明骨髓间充质干细胞与支架材料复合的最佳浓度和最佳时间；骨髓间充质干细胞体外诱导性培养和体内关节软骨的修复均能有效地生成软骨，但只能达到组织形态及生化成分上类似，不能实现与原有软骨相同的再生。③骨髓间充质干细胞的软骨分化潜能：骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能，适宜条件下还能向软骨方向分化，但其增殖和定向软骨分化需适宜生长因子调控。结论：骨髓间充质干细胞完全具备理想的骨软骨组织工程种子细胞的特点，在骨软骨组织工程方面是非常有应用前景的种子细胞。     

间充质干细胞"归巢"研究进展

间充质干细胞（mesenchymal stemcells，MSCs）是具有多向分化潜能的非造血干细胞，已广泛应用于干细胞移植、组织工程和器官移植免疫治疗等方面，但MSC回输体内后的分布和分化直接影响其应用，本文就MSC体内“归巢”特点、“归巢”机制及”归巢“的意义作一综述。     

骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中的应用

目的:总结近年来骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中应用的文献,阐明骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中的应用前景。资料来源:应用计算机检索Medline1996-01/2004-12文章,检索词为“Bonemarrowmesenchymalstemcells,Bonetissueengineering,Cartilagetissueengineering”限定文章语言种类为English。资料选择:纳入标准:骨髓间充质干细胞在骨及软骨组织工程中应用的文献。排除标准:①较陈旧的文献。②重复研究。资料提炼:共收集到190篇与骨髓间充质干细胞和骨及软骨组织工程有关的文献,其中30篇符合纳入标准。资料综合:①骨髓间充质干细胞的成骨分化:骨髓间充质干细胞具有在一定的环境下向成骨细胞和软骨细胞分化的能力。②骨髓间充质干细胞在骨和软骨组织工程中的应用:研究表明,骨髓间充质干细胞复合适宜载体可用来修复骨缺损,但因骨缺损的多样性和载体材料本身的特点,目前尚未找到理想的骨组织工程支架材料,还未探明骨髓间充质干细胞与支架材料复合的最佳浓度和最佳时间;骨髓间充质干细胞体外诱导性培养和体内关节软骨的修复均能有效地生成软骨,但只能达到组织形态及生化成分上类似,不能实现与原有软骨相同的再生。③骨髓间充质干细胞的软骨分化潜能:骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,适宜条件下还能向软骨方向分化,但其增殖和定向软骨分化需适宜生长因子调控。结论:骨髓间充质干细胞完全具备理想的骨软骨组织工程种子细胞的特点,在骨软骨组织工程方面是非常有应用前景的种子细胞。     

用组织块培养法从骨髓滤网颗粒物中分离大量骨髓间充质干细胞

本研究探讨能否从废弃的骨髓滤网颗粒物中获得间充质干细胞(MSC)。应用组织块培养法,对2例正常供者骨髓滤网中的颗粒物进行分离培养,计数获得的MSC数量,对其表型和分化能力进行鉴定。结果表明:骨髓滤网颗粒物中存在大量的MSC,经过3代扩增后其数量接近107;这些细胞具有典型的MSC形态和表型特征,可以分化为骨、软骨和脂肪细胞。结论:用组织块培养法可以从骨髓滤网颗粒物中获得大量MSC。     

成人和胎儿骨髓间充质干细胞的比较研究

目的 比较成人和胎儿骨髓间充质干细胞（MSC）的表型和生物学性状差异，为临床选择使用MSC提供实验依据。方法 取正常人和胎儿骨髓单个核细胞，在SF培养基中进行MSC培养，测定生长曲线。电镜观察MSC形态，利用流式细胞仪进行SMC表型测定和细胞周期分析；SA方法测定Ⅰ，Ⅲ型胶原和vWF因子表达。通过碱性磷酸酶染色，苏丹黑染色及骨钙蛋白和脂蛋白酯酶mRNA的表达等来检测细胞向成骨，成脂肪细胞分化情况。结果 从成人和胎儿骨髓中可培养出MSC，并保持多向分化潜能。两者在细胞形态，生长特性，表面抗原表达等方面是相似的。胎儿骨髓MSC的扩增潜力及多向分化能力明显强于成人MSC。成人骨髓MSC的粘附功能则强于胎儿。结论 从成人及胎儿骨髓中可分离培养出MSC，在体外有效扩增且保持其低分化状态和多向分化能力。胎儿MSC较成人MSC更原始，具有更大的多向分化和体外扩增潜能，可作为组织工程的种子细胞；而成人MSC支持造血，促进造血功能恢复和重建造血的功能则强于胎儿，具有更广泛的临床移植应用前景。     

间质干细胞在神经损伤后组织修复与功能重建中的作用

间质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)来源广泛，可取自骨髓、脐带血、外周血、肌肉、骨骼、软骨、腱、脂肪、血管利用MSC在体外具有贴壁生长的特性将MSC从中分离出来，这种分离出来的细胞具有干细胞持续增殖和多向分化的特性,可跨胚层分化，能够分化成为神经元和胶质细胞、造骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞，而且移植免疫排斥反应弱。动物实验表明MSC移植对神经损伤的治疗有潜在优势。国内外众多研究已取得可喜的进展，并对其治疗机制做出初步的阐述，主要有以下两方面：①MSC在诱导剂、细胞因子和微环境等因素作用下，能直接分化为神经细胞，重建神经环路移植。②MSC的营养支持在治疗中起重要作用。     

组织工程软骨种子细胞的定向诱导分化

背景：软骨修复一直是骨科治疗难题和研究热点。随着组织工程学的发展,近年来应用种子细胞诱导分化为软骨细胞,构建组织工程软骨修复软骨缺损的思路倍受关注,并已取得一定成功。目的：讨论组织工程软骨的种子细胞选择、成软骨定向诱导分化的培养条件,尤其是细胞因子、诱导方法、培养方式等因素的作用。方法：计算机检索中国期刊全文数据库及PubMed数据库2000-01/2010-09相关文章,检索词为＂软骨形成,软骨缺损,刺激因子,软骨修复,组织工程,chondrification,cartilage defect;stimulating factor,cartilage repair,tissue engineering＂。语种限定为：中文与英文。纳入与软骨形成、诱导分化、组织工程支架方面的基础和临床研究,排除内容陈旧及重复研究。计算机初检得到155篇文献,根据纳入排除标准,最终纳入41篇。结果与结论：种子细胞在特定细胞因子作用下可定向分化为软骨细胞。通过选择合适的种子细胞及细胞因子定向诱导分化构建组织工程软骨,能够为成功治愈关节软骨缺损提供新思路。软骨定向分化因子转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子、骨生成蛋白、胰岛素样生长因子、生长激素等调控诱导可通过介质添加物、基因转染、不同培养方式等几种方式促进向软骨方向转化。相信随着软骨定向诱导分化研究的深入,为临床上运用软骨组织工程学来解决关节软骨缺损修复这一难题提供了有效依据,有广泛的临床应用前景。     

诱导骨髓基质细胞向软骨细胞分化的实验研究

目的 探索用骨形态发生蛋白(BMP)—2和高分子透明质酸在体外诱导骨髓基质细胞(MSC)向软骨细胞分化的可能性。方法 自兔双侧股骨粗隆处抽取4—6ml骨髓后在体外行原代和传代培养，实验分为两组，实验组培养液中含BMP—2(100ng／ml)，培养瓶底预涂高分子透明质酸；对照组常规培养及传代。传代细胞玻片行苏木精—伊红染色、甲苯胺蓝染色、碱性磷酸酶染色(ALP)、免疫组织化学染色：培养细胞与聚乳酸／聚乙醇酸(PLGA)复合后植入自体兔股部肌内，大体及组织学观察形成的结节。结果 实验组传代细胞，尤其是第3代细胞甲苯胺蓝染色阳性，免疫组织化学染色S—100蛋白阳性，兔股部植入PLGA—细胞后3周形成软骨结节；而对照组免疫组织化学染色个别细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原染色阳性，植入PLCA—细胞后主要形成纤维组织。结论 应用BMP-2和高分子透明质酸有效诱导MSC向软骨细胞分化，MSC源性软骨细胞可作为软骨组织工程修复关节软骨损伤的较理想的种子细胞。     

人骨髓间充质干细胞的培养及多能性研究

目的：培养人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）并检测其多能性。方法：抽取人胚胎骨骨髓，Percoll分离液梯度分离后，将含MSC的低密度层培养于MSCGM培养基并扩增MSC。将MSC种植于裸鼠皮下，4周后观察MSC的分化情况。结果：成功地进行了MSC的原代和传代培养。植入裸鼠体内后MSC可分化成骨、软骨、脂肪、骨骼肌、肌腱样组织等结构。结论：人MSC是一种具有多能性的干细胞。     

组织工程软骨种子细胞的定向诱导分化

背景:软骨修复一直是骨科治疗难题和研究热点.随着组织工程学的发展,近年来应用种子细胞诱导分化为软骨细胞,构建组织工程软骨修复软骨缺损的思路倍受关注,并已取得一定成功.目的:讨论组织工程软骨的种子细胞选择、成软骨定向诱导分化的培养条件,尤其是细胞因子、诱导方法、培养方式等因素的作用.方法:计算机检索中国期刊全文数据库及PubMed 数据库2000-01/2010-09 相关文章,检索词为"软骨形成,软骨缺损,刺激因子,软骨修复,组织工程,chondrification,cartilage defect; stimulating factor,cartilage repair,tissue engineering".语种限定为:中文与英文.纳入与软骨形成、诱导分化、组织工程支架方面的基础和临床研究,排除内容陈旧及重复研究.计算机初检得到155 篇文献,根据纳入排除标准,最终纳入41 篇.结果与结论:种子细胞在特定细胞因子作用下可定向分化为软骨细胞.通过选择合适的种子细胞及细胞因子定向诱导分化构建组织工程软骨,能够为成功治愈关节软骨缺损提供新思路.软骨定向分化因子转化生长因子β、碱性成纤维细胞生长因子、骨生成蛋白、胰岛素样生长因子、生长激素等调控诱导可通过介质添加物、基因转染、不同培养方式等几种方式促进向软骨方向转化.相信随着软骨定向诱导分化研究的深入,为临床上运用软骨组织工程学来解决关节软骨缺损修复这一难题提供了有效依据,有广泛的临床应用前景.     

间充质干细胞与相关因子

间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)具有向成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞及成肌细胞分化的多向潜能，可在造血微环境形成、组织修复及基因治疗中得到应用。多种生长因子如TGF—β，IGF—I，BMP及FGF在MSC分化中发挥不同的促进作用并有协同性；MSC可分泌G—CSF，SCF，LIF，M—CSF，IL—6和IL—11等多种细胞因子支持造血并与某些疾病的发生有关；相关因子作用后的MSC将在基因工程应用中发挥重要作用。     

软骨组织工程基因转染技术中目的基因的研究与进展

目的:阐述软骨组织工程中的基因转染技术及其应用的研究现状,对目的基因的种类和选择进行,并提出其进一步应用的前景.方法:以cartilage tissue engineering,gene transfer为检索词,检索Science Direct数据库(2003-01/2009-04)i以软骨组织工程,基因转染为检索词,检索CNKI数据库(2003-01/2009-04).文献检索语种限制为英文和中文.纳入与软骨组织工程基因转染相关的内容,包括临床和基础研究;排除重复研究和明显不符合标准的文章.观察软骨细胞的分化情况及基因表达情况.结果:计算机初检得到90篇文献,根据纳入排除标准,对软骨组织工程中的基因转染技术和基因的种类和选择进行分析.基因转染技术在软骨组织工程领域有着广阔的应用前景.选择哪些与软骨修复相关的基因作为转染的目的基因,是软骨组织工程中亟待解决的课题.目前用于研究的目的基因主要分为刺激软骨细胞增殖分化和基质形成、抑制软骨细胞肥大和成骨分化、抗炎性反应、抑制衰老和抑制凋亡这几大类.结论:选择适当的目的基因,并用安全的基因转染方法进行软骨修复具有特别重要的意义.基因转染技术能否应用于临床将取决于是否能构建出安全有效的载体、目的基因和转染系统.     

不同细胞来源外泌体在骨科退行性疾病中的研究进展

外泌体是一种由细胞分泌至胞外的膜性囊泡样微体。外泌体在以骨关节炎（osteoarthritis，OA）和椎间盘退变为主的骨科退行性疾病的诊疗中具有应用价值。包括间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）在内的多种细胞来源的外泌体具有抑制软骨细胞退化、促进再生等作用。其中研究最为广泛的是MSC来源外泌体，其优点在于细胞来源丰富、产量较高、易获得。而软骨细胞外泌体内的微小RNA（microRNA，miRNA）表达谱与其亲本细胞存在显著差异，提示其在软骨分化和维持内稳态也具有重要作用。正常髓核细胞来源外泌体可促进MSC迁移及向髓核细胞定向分化，炎症下的滑膜细胞外泌体还可成为加重软骨退变的因素。本文通过对不同细胞来源外泌体在骨科退行性疾病中的研究进行综述，为该类疾病的诊断和治疗带来新的思路。     

骨髓间充质干细胞成骨诱导及在骨组织工程中的应用研究进展

骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是骨髓基质细胞中具有多向分化潜能的干细胞，它可以向骨、软骨、肌组织、脂肪、神经等多种组织分化。骨髓间充质干细胞以其它干细胞无可比拟的优越性成为骨组织工程种子细胞的理想来源，成为干细胞研究的热点。近年来国内外学对其成骨诱导的生物学特性及在骨组织工程中应用进行了广泛而深入的研究。本就骨髓间充质干细胞成骨诱导及在骨组织工程中的应用研究进展作一综述。[第一段]     

干细胞在骨性关节炎治疗中的理论与应用

骨性关节炎与关节软骨组织代蹴失衡有关，由于关节软骨的磨损和丢失，导致疾病的进一步发展。干细胞具有向中胚叶组织如软骨、骨、脂肪等组织分化的能力，最近的研究发现软骨巾也有间充质十细胞的表达。文章综述了间充质干细胞的特性及功能，以及应用干细胞治疗骨性关节炎的临床方法，应用局部激活、募集和输注合适的干细胞群落是研究关节软骨损伤修复和恢复关节动态甲衡的新方法。运用干细胞技术合成组织工程化软骨用于疾病治疗，对关节软骨的缺损修复及骨关节病的治疗具有重要意义。     

优化骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的研究

目的:探讨全骨髓贴壁培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的优化方法.方法:全骨髓贴壁法分离、体外培养原代大鼠骨髓MSC,种植后3h首次换液,培养前72 h内频繁换液;通过流式细胞学方法检测原代培养细胞的MSC特征性表面标记的表达及比例;通过体外培养诱导成脂、成骨、成软骨分化,确立原代培养骨髓MSC的多向分化潜能.结果:早期、频繁换液的方法分离培养大鼠骨髓MSC,P0 MSC以单克隆生长,呈典型漩涡状排列,细胞形态均一;P1细胞均一表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45;原代培养骨髓MSC具有成脂、成骨、成软骨分化潜能.结论:全骨髓贴壁法分离培养大鼠原代骨髓MSC,早期、频繁换液有助于在早期获得高纯度细胞,原代细胞具有多向分化潜能.早期、频繁换液的全骨髓贴壁法是体外分离培养骨髓MSC的优化方法.     

诱导骨髓基质细胞向软骨细胞分化的实验研究

目的探索用骨形态发生蛋白(BMP)-2和高分子透明质酸在体外诱导骨髓基质细胞(MSC)向软骨细胞分化的可能性。方法自兔双侧股骨粗隆处抽取4～6ml骨髓后在体外行原代和传代培养,实验分为两组,实验组培养液中含BMP-2(100ng/ml),培养瓶底预涂高分子透明质酸;对照组常规培养及传代。传代细胞玻片行苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色、碱性磷酸酶染色(ALP)、免疫组织化学染色;培养细胞与聚乳酸/聚乙醇酸(PLGA)复合后植入自体兔股部肌内,大体及组织学观察形成的结节。结果实验组传代细胞,尤其是第3代细胞甲苯胺蓝染色阳性,免疫组织化学染色S-100蛋白阳性,兔股部植入PLGA-细胞后3周形成软骨结节;而对照组免疫组织化学染色个别细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原染色阳性,植入PLGA-细胞后主要形成纤维组织。结论应用BMP-2和高分子透明质酸有效诱导MSC向软骨细胞分化,MSC源性软骨细胞可作为软骨组织工程修复关节软骨损伤的较理想的种子细胞。     

胎儿肝脏间充质干细胞的分离培养及鉴定

目的　建立胎儿肝脏间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSC)的分离培养方法 ,并检测其表面标志及多向分化潜能。方法　取胎龄 4～ 5月水囊引产胎儿肝脏 ,用 1 0 73g ml的percoll密度梯度离心分离低密度细胞 ,MSC培养基纯化贴壁细胞 ,用流式细胞术检测其表面标志 ,成脂肪及成骨诱导鉴定多向分化潜能 ,研究其增殖及生长特征。结果　流式细胞术证明 ,胎肝MSC表达干细胞标志 ,具有间充质干细胞的特征及多向分化能力。原代及传代培养显示 ,具有活跃增殖的能力。结论　胎儿肝脏中可成功的分离MSC ,为组织工程的种子细胞和基因工程的载体细胞提供新的、可行的来源     

间质干细胞在神经损伤后组织修复与功能重建中的作用

间质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)来源广泛,可取自骨髓、脐带血、外周血、肌肉、骨骼、软骨、腱、脂肪、血管利用MSC在体外具有贴壁生长的特性将MSC从中分离出来,这种分离出来的细胞具有干细胞持续增殖和多向分化的特性,可跨胚层分化,能够分化成为神经元和胶质细胞、造骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞,而且移植免疫排斥反应弱。动物实验表明MSC移植对神经损伤的治疗有潜在优势。国内外众多研究已取得可喜的进展,并对其治疗机制做出初步的阐述,主要有以下两方面:①MSC在诱导剂、细胞因子和微环境等因素作用下,能直接分化为神经细胞,重建神经环路移植。②MSC的营养支持在治疗中起重要作用。