重组人白细胞介素3和白细胞介素6对骨髓基质细胞生长的调 …

目的 了解重组人白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）和重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对骨髓造血微环境的调节作用。方法 应用成纤维细胞体外集落形成法，观察了ｒｈＩＬ－３、ｒｈＩＬ－６对成纤维细胞集落ＣＦＵ－Ｆ）体外生长的影响。结果 ｒｈＩＬ－３、ｒｈＩＬ－６能显著地刺激ＣＦＵ－Ｆ的生长，两者联合应用时地ＣＦＵ－Ｆ生长的刺激作用明显强于两者单用，表现出协同效应和放疗骨髓移植后造血微环境的恢复和重建具有重要     

重组白细胞介素2对骨髓造血祖细胞体外增殖的影响

为了了解重组白细胞介素２对骨髓造血祖细胞体外增殖的影响，应用体外半固体培养法研究了ｒｈＩＬ－２及其与ＧＭ－ＣＳＦ和Ｅｐｏ组合对骨髓祖细胞集落形成的调节作用。结果：ｒｈＩＬ－２单独对骨髓造血祖细胞的体外增殖无刺激作用；当其与ＧＭ－ＣＳＦ联合应用时，在浓度为１０．０×１０４～４０．０×１０４Ｕ·Ｌ－１时，ＣＦＵ－ＧＭ集落数明显高于ＧＭ－ＣＳＦ对照组；当其与Ｅｐｏ联用时，在浓度为１０．０×１０４～４０．０×１０４Ｕ·Ｌ－１时ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ集落数明显高于Ｅｐｏ单用组；但当其浓度升至１０．０×１０５Ｕ·Ｌ－１时，各种集落数均明显减少。重组人白介素２（ｒｈＩＬ－２）对骨髓造血祖细胞体外增殖的研究结果显示，在一定的浓度范围内，ｒｈＩＬ－２与ＧＭ－ＣＳＦ和Ｅｐｏ联合对骨髓造血祖细胞的体外增殖具有协同的刺激作用，单独应用无集落形成能力，大剂量应用可能会抑制骨髓造血。     

PKC抑制剂Ro31—8220对大鼠肝产生IL—6和纤维蛋白原的作用

目的；研究重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对原代培养大鼠肝细胞分泌纤维蛋白的ＩＦｉｂｒｉｎｏｇｅｎ，Ｆｇｎ）的影响及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｒｏ３１－８２２０对枯否细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法；以酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）测定Ｆｇｎ；测定ＩＬ－６采和「＾３Ｈ」－ＴｄＲ掺入增殖法。结果；大鼠肝细胞（３×１０＾５／ｍｌ）与ｒｈＩＬ－６（０－１００ｋＵ／Ｌ）孵育２４ｈ，刺激肝细胞分泌Ｆｇｎ增加     

rhIL—1α对小鼠骨髓细胞长周期培养中造血细胞增殖的影响

应用小鼠骨髓细胞长周期培养（ＬＴＢＭＣ）体系，观察重组人白细胞介素－１α（ｒｈＩＬ－１α）对造血细胞增殖的影响。结果显示，经ｒｈＩＬ－１α作用后，小鼠ＬＴＢＭＣ中悬浮细胞数增多，其中粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）数量也明显增加，维持时间延长。表明ｒｈＩＬ－１α能促进小鼠造血细胞在体外ＬＴＢＭＣ中增殖并分化，而且与剂量有关系。ｒｈＩＬ－１α加入的时间，以骨髓细胞２次接种时同时加入为好，延迟加入则作用减     

重组人白细胞介素—6对急性髓细胞白血病和非白血病祖细胞…

观察了重组人白细胞介素－６（ｒｈＩＬ－６）对２２例非白血病骨髓和１２例急性髓细胞白血病骨髓祖细胞的增殖影响。结果表明ｒｈＩＬ－６有促进人正常骨髓造血祖细胞增殖作用，其主要作用靶细胞为粒系祖细胞。但对骨髓正常细胞群增殖周期各时相变化影响不明显。而在白血病骨髓，ｒｈＩＬ－６促克隆形成作用较低，但可促进Ｇ０／１期细胞进入Ｓ期。     

重组人白细胞介素6对人肺癌细胞系生长的调控及机制研究

探讨重组人白细胞介素６（ＩＬ－６）对人肺癌生长调控作用及机制。方法以人肺巨细胞癌系ＰＧ和人肺腺癌细胞系ＰＡａ为研究对象，研究ｒｈＩＬ－６对ＰＧ、ＰＡａ细胞体外生长的作用；并应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ｒｈＩＬ－６对ＩＬ－６、ＩＬ－６受体（ＩＬ－６Ｒ）、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ等基因表达的影响。结果发现ｒｈＩＬ－６促进ＰＧ、ＰＡａ细胞生长，呈浓度依赖性和时间依赖性。逆转录聚合酶链反应检测证实，ＰＧ、ＰＡａ细胞均表达ＩＬ－６及ＩＬ－６ＲｍＲＮＡ。ｒｈＩＬ－６上调ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒ及ｃ－ｍｙｃ等基因表达，而对ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ基因表达无明显影响。结论ｒｈＩＬ－６促进ＰＧ、ＰＡａ细胞生长；ｒｈＩＬ－６上调ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒ及ｃ－ｍｙｃ等基因表达作用可能与其促进ＰＧ、ＰＡａ细胞生长有关     

rhIL－3对人骨髓粒单祖细胞集落的影响

应用骨髓细胞体外培养技术，观察了国产重组人白细胞介素３（ｒｈＩＬ－３）对人骨髓粒单祖细胞集落的影响。结果显示，ｒｈＩＬ－３能刺激正常骨髓细胞形成由粒细胞或（和）单核细胞构成的细胞集落，这种效应在一定范围内与ｒｈＩＬ－３剂量呈依赖关系。     

重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备

目的 制备重组人白细胞介素１０（ｒｈＩＬ－１０）单克隆抗体。方法 应用鼠－鼠 瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系,ＥＬＩＳＡ检测朵交瘤细胞培养上清、腹水效价,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定,Ｇｉｅｍｓａ染色镜下计数杂交瘤染色体数目。结果获得了２株能分泌抗ｒｈＩＬ－１０单克隆抗体的杂交瘤细胞系（１Ｄ３、２Ａ３）,无血清培养液效价为１：５１２、１：２５６,腹水效价１：１０＾４、１：１０＾４。ＵＪＦ     

白细胞介素—2对人红系早期祖细胞生长的调节作用

应用微量甲基纤维素半固体培养红系早期祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ）的方法，观察了白细胞介素－２（ＩＬ－２）和白细胞介素－２刺激人外周血单个核细胞的条件培养液（ＩＬ－２－ＭＮＣＣＮ）对１１例正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ生长的调节作用。发现ＩＬ－２并不直接刺激ＢＦＵ－Ｅ增殖，而ＩＬ－２－ＭＮＣＣＮ对ＢＦＵ－Ｅ有增殖作用。提示体外ＩＬ－２对ＢＦＵ－Ｅ的增殖作用可能通过辅助细胞为媒介。     

PKC抑制剂Ro31－8220对大鼠肝产生IL－6和纤维蛋白原的作用

目的：研究重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）对原代培养大鼠肝细胞分泌纤维蛋白原（Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ，Ｆｇｎ）的影响及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｒｏ３１－８２２０对枯否细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法：以酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）测定Ｆｇｎ；测定Ｉ－６采用［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入增殖法。结果：大鼠肝细胞（３×１Ｏ６／ｍｌ）与ｒｈＩＬ－６（０～１００ｋＵ／Ｌ）孵育２４ｈ，刺激肝细胞分泌Ｆｇｎ增加；Ｒｏ３１－８２２０（０．１～１０μｍｏｌ／Ｌ）显著抑制枯否细胞释放ＩＬ－６。结论：提示ＩＬ－６是调节纤维蛋白原合成的重要细胞因子，推测ＰＫＣ抑制剂可通过抑制枯否细胞分泌ＩＬ－６来降低Ｆｇｎ的分泌。     

IL-6及其与其他细胞因子联合应用对白血病细胞体外增殖的影响

目的 观察ＩＬ－６对急性白血病原代细胞体外生长的作用。方法 应用ＭＴＴ、ＣＦＵ－Ｌ及间接免疫荧光法以ＩＬ－６及其与其他细胞因子联合应用对１８例急性白血病鹗２骨髓细胞的作用进行观察。结果 ＩＬ－６体外单独应用对急性白血病原代细胞无明显促增殖及话导分化作用,但与Ｇ－ＣＳＦ联合应用则常可抑制原代白血病增殖。结论 ＩＬ－６与Ｇ－ＣＳＦ联合用于化疗、放疗后的骨髓抑制可能更为安全 。     

白细胞介素2激活的外周血和脐带血及骨髓单个核细胞培养上清对骨髓造血的影响

目的：探讨用白细胞介素2（IL-2）激性的外周血（APB）和脐带血（ACB）及骨髓（ABM）单个核细胞的培养上清,对骨髓造血的影响和作用的可能机制。方法：应用MTT法,在体外同时检测APB和ACB及ABM培养上清,对骨髓和外周血单个核细胞增殖能力的影响;同时用集落培养法,检测这3种上清对骨髓粒-单细胞集落和成纤维细胞集落形成能力的影响。结果：加入APB和ACB及ABM培养上清,对正常骨髓和外周血单个核细胞增殖能力,以及粒-单细胞集落和成纤维细胞集落形成无显著的影响。结论：应用IL-2对自体干细胞移植物进行体外净化时,培养上清对正常造血细胞和单个核细胞无显著影响。     

rhGM-CSF和rhG-CSF对急性白血病骨髓CFU-F形成的影响

应用人骨髓CFU F体外培养技术 ,观察rhGM CSF和rhG CSF对急性白血病骨髓CFU F生成的影响。结果表明 ,上二者对CFU F的形成均有明显促进作用及协同效应 ,且rhGM CSF的作用大于rhG CSF。提示二者可能通过这种促进作用和改善骨髓微环境而更有效地发挥造血调节机能 更多还原     

人参总皂甙诱导人骨髓基质细胞表达GM-CSF的实验研究

目的：研究人参总皂甙(TSPG)对人骨髓基质细胞表达GM—CSF的影响及其与人粒单系血细胞发生的关系。方法：采用造血祖细胞与骨髓基质细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术。结果：TSPG能显著刺激粒单系造血祖细胞(CFU—GM)增殖；经TSPG诱导制备的骨髓基质细胞条件培养液富含GM—CSF样活性；TSPG能显著促进骨髓基质细胞的GM—CSF蛋白和mRNA表达。结论：TSPG可能通过直接和/或间接途径促进造血诱导微环境中的骨髓基质细胞合成和分泌GM—CSF，进而促进CFU—GM的增殖分化。     

Inducing effects of macrophage stimulating protein on the expansion of early hematopoietic progenitor cells in liquid culture

Background Macrophage stimulating protein （MSP） is produced by human bone marrow endothelial cells. In this study we sought to observe its effects on inducing the expansion of early hematopoietic progenitor cells which were cultured in a liquid culture system in the presence of the combination of stem cell factor （SCF）, interleukin 3 （IL-3）, interleukin 6 （IL-6）, granulocyte macrophage-colony stimulating factor （GM-CSF）, erythropoietin （EPO） （Cys） and MSP or of Cys and bone marrow endothelial cell conditioned medium （EC-CM）. Methods Human bone marrow CD34^＋ cells were separated and cultured in a liquid culture system for 6 days. Granulocyte-macrophage colony forming unit （CFU-GM） and colony forming unit-granulocyte, erythrocyte, macrophage, megakaryocyte （CFU-GEMM） were employed to assay the effects of different treatment on the proliferation of hematopoeitic stem/progenitor cells. The nitroblue tetrazolium （NBT） reductive test and hoechest 33258 staining were employed to reflect the differentiation and apoptosis of the cells respectively. Results MSP inhibited the proliferation of CFU-GM and CFU-GEMM in semi-solid culture and the inhibitory effect on CFU-GEMM was stronger than on CFU-GM. MSP inhibited the differentiation of early hematopoietic progenitor cells induced by hematopoietic stimulators. Bone marrow （BM） CFU-GEMM was 2.3-fold or 1.7-fold increase or significantly decreased in either Cys＋EC-CM, Cys＋MSP or Cys compared with 0 hour control in liquid culture system after 6 days. Conclusion MSP, a hematopoietic inhibitor, inhibits the differentiation of early hematopoietic progenitor cells induced by hematopoietic stimulators and makes the early hematopoietic progenitor cells expand in a liquid culture system.     

扶正养营汤对免疫介导再生障碍性贫血小鼠的治疗作用

目的：观察扶正养营汤对免疫介导再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓增殖及外周血IL-2水平的影响。方法：采用完全随机数字表法将制作的免疫介导再障小鼠(BALB/c)模型40只分为4组,另用10只同批正常小鼠设为正常对照组(E组)。采用盲法分别胃饲生理盐水(A组及E组)、扶正养营汤(B组)、环孢霉素A (C组)、扶正养营汤+环孢霉素A (D组)共10d。检测各组小鼠外周血象、骨髓有核细胞计数、测定各组骨髓造血组织容量及外周血IL-2水平。结果：A组小鼠外周血象、骨髓有核细胞数、造血组织容量显著低于E组(P<0.05);B,C,D组较A组增加(P<0.05),尤以D组最为明显(P<0.05);而B组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。A组小鼠外周血IL-2水平明显高于E组(P<0.05);B,C,D组低于A组(P<0.05);D组低于B组及C组(P<0.05);B组与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论：扶正养营汤具有促进免疫介导再障小鼠骨髓增殖,降低其外周血IL-2水平的作用。     

电离辐射对胎鼠皮肤间充质干细胞支持骨髓粒系造血作用的影响

目的：观察不同剂量的X射线照射对体外培养的胎鼠皮肤间充质干细胞(MSCs)支持造血细胞增殖作用的影响,为提高造血干细胞体外扩增效率提供一种更为有效的方法,进而为造血干细胞移植提供一个新的途径。 方法：分别用不同剂量的X射线照射培养的胎鼠皮肤MSCs层,然后将骨髓细胞种植于该细胞层上,扩增后不同时间(0~12 d)进行骨髓CFU-GM集落培养,同时取经X射线照射的皮肤MSCs的上清液进行骨髓CFU-GM、CFU-E及BFU-E培养,观察射线对胎鼠皮肤MSCs造血支持作用的影响。 结果：6、8和10 Gy剂量X射线照射胎鼠皮肤MSCs与骨髓细胞共同作用7 d时,骨髓祖细胞集落显著增加,其中6 Gy组增加最为明显,CFU-GM是0 Gy组的2.17倍。6、8和10 Gy剂量X射线照射培养皮肤的上清液体外亦可刺激骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E的生长,与0 Gy组比较差异均有显著性(P<0.05)。其中6 Gy组增加最为明显,分别达0 Gy组的1.81倍、3.94倍和3.51倍,集落亦明显加大。 结论：一定剂量X射线照射胎鼠皮肤MSCs,其体外支持造血的作用增强,无论照射后的单纯MSCs细胞层还是上清液都可使骨髓细胞集落数增多。     

三七总皂甙对粒单系造血祖细胞增殖调控机理的研究

采用造血祖细胞体外培养与造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术,研究三七总皂甙（ＴＳＰＮ）,对小鼠粒单系造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）增殖凋控的影响及其机理。结果表明：在有粒单系集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）存在的条件下,ＴＳＰＮ能促进正常或贫血小鼠ＣＦＵ－ＧＭ的集落形成;经ＴＳＰＮ诱导制备的肌条件培养液,Ｌ细胞条件培养液和脾细胞条件培养液能显著提高ＣＦＵ一ＧＭ的集落产率。研究提示,ＴＳＰＮ可能通过诱导机体产生造血凋控因子或协同这些因子促进机体单系血发生。