SAM肝细胞色素P4503A对衰老的作用

大鼠肝细胞色素Ｐ４５０含量与年龄相关的变化是由特异的细胞色素Ｐ４５０酶引起的。探讨衰老与细胞色素Ｐ４５０３Ａ的活性是否有关。本文用红霉素Ｎ－脱甲基酶活性测定法分别检测了ＳＡＭ－Ｒ１、ＳＡＭ－Ｐ１和ＳＡＭ－Ｐ８三组衰老加速鼠中肝微粒体细胞色素Ｐ４５０３Ａ的活性。每动动物分为７ｗｋ、３６ｗｋ组。结果发现ＳＡＭ－Ｐ１和ＳＡＭ－Ｐ组中随年龄增长,ＣＹＰ３Ａ的活性均降低。１３ｗｋ时,ＳＡＭ－Ｐ１组ＣＹＰ３活     

5—氟脲嘧啶对耐顺铂人肺腺癌细胞A549^DDP的程序依赖性逆转作用

用耐顺铂（ＣＤＤＰ）人肺腺癌细胞系Ａ５４９ＤＤＰ作模型，研究了５－ＦＵ对ＣＤＤＰ耐药的程序依赖性逆转作用。５－氟脲嘧啶（５－ＦＵ）预处理Ａ５４９ＤＤＰ２４ｈ后立即给予ＣＤＤＰ，ＣＤＤＰ细胞毒性增加３．９倍；５－ＦＵ预处理Ａ５４９ＤＤＰ后间隔２４或４８ｈ再给予ＣＤＤＰ，其细胞毒性分别增加２０倍和２５０倍，甚至较亲代细胞Ａ５４９更为敏感；如先给ＣＤＤＰ后给５－ＦＵ则细胞毒性仅增加１．８倍。５－ＦＵ对亲代细胞亦有类似效应但细胞毒性增加程度明显低于耐药细胞。５－ＦＵ预处理后间隔２４，４８ｈ，细胞内ＧＳＨ含量逐渐降低，与细胞毒性逐渐增加相一致。如用ＢＳＯ耗竭Ａ５４９ＤＤＰ细胞内ＧＳＨ，ＣＤＤＰ细胞毒性增加６．４倍，仅能部分逆转ＣＤＤＰ耐药。５－ＦＵ明显抑制ＭＲＰ的表达，但对ＧＳＴπ的表达无影响。在５－ＦＵ预处理后的无药间隔时间内，给予无毒浓度的三苯氧胺则有明显的协同效应。结论：程序性给予５－ＦＵ通过降低细胞内ＧＳＨ含量和抑制ＭＲＰ的表达能完全逆转ＣＤＤＰ耐药     

石斛多糖增强脐带血和肿瘤病人外周血LAK细胞体外杀伤作用的研究

目的：探讨石斛多糖（ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＤＣＰ）与ｒＩＬ－２联合应用对脐带血ＬＡＫ细胞（ＣＢ－ＬＡＫ）和肿瘤病人外周血ＬＡＫ细胞（ＰＢ－ＬＡＫ）体外杀伤肿瘤细胞作用的影响。方法：应用＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法测定ＣＢ－ＬＡＫ和ＰＢ－ＬＡＫ细胞的杀伤活性。结果：①ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）能明显提高ＣＢ－ＬＡＫ对Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性，０ｈ的ＣＢ－ＬＡＫ活性为１３．６３％，ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）诱导４８、７２、９６、１２０ｈ后，ＣＢ－ＬＡＫ活性分别提高至２２．２８％、２６．２３％、２８．５５％和２５．７６％（Ｐ〈０．０１）；②ＤＣＰ（１００ｍｇ／Ｌ或４００ｍｇ／Ｌ）与ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）联合诱导ＣＢ－ＬＡＫ的活性，比单纯ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）的作用     

大白菜抑制大鼠体内致癌物PhIP-DNA加合物形成及其可能的作用机理

目的研究大白菜（ｂｒａｓｓｉｃａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）对结肠致癌物２－氨基－１－甲基－６－苯基咪唑［４,５－ｂ］吡啶（ＰｈＩＰ）致癌的预防作用及机理。方法雄性ＳＤ大鼠喂饲基础饲料或掺有大白菜粉（２０％）混合饲料１０天后,经口摄入ＰｈＩＰ（１０ｍｇ／ｋｇ）。以３２Ｐ－后标记方法分析动物结肠粘膜、心、肺和肝中ＰｈＩＰ－ＤＮＡ加合物含量,并测定参与ＰｈＩＰ代谢的细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ）１Ａ１和１Ａ２以及谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）活性。结果经喂饲含大白菜饲料的大鼠,其结肠、心、肺、肝等器官中,ＰｈＩＰ－ＤＮＡ加合物含量显著低于喂饲基础饲料的动物（Ｐ＜０．０１）,抑制率结肠为８２．３％、心脏为６０．６％、肺为４８．４％、肝脏为４８．９％。大白菜对参与ＰｈＩＰ解毒的ＣＹＰ１Ａ１和ＧＳＴ有显著的诱导作用。与对照组比较,喂饲大白菜大鼠的肝ＣＹＰ１Ａ１活性增加８０．６％（Ｐ＜０．０１）,肝和肺细胞浆ＧＳＴ活性分别增加１８．２％和３５．６％（Ｐ＜０．０５）。结论食用大白菜可有效抑制ＰｈＩＰ－ＤＮＡ加合物形成,其作用机理可能是诱导解毒酶     

耐顺铂人肺腺癌细胞系A549DDP的建立及耐药机制

采用递增顺铂（ＤＤＰ）浓度的方法，体外连续培养建成一株耐ＤＤＰ的人肺腺癌细胞系Ａ（５４９）ＤＤＰ，耐ＤＤＰ为亲代Ａ（５４９）的２４．４倍。在无ＤＤＰ的培养基中培养５月余，其耐药性仍稳定。Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞内谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平显著高于亲代细胞（Ｐ＜０．０１）。ＢＳＯ耗竭细胞内ＧＳＨ后，Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞对ＤＤＰ敏感性增加５倍，ＢＳＯ对亲代Ａ（５４９）细胞无增敏作用，Ａ（５４９）ＤＤＰ细胞ＧＳＴ酶同功酶ＧＳＴ—π含量较Ａ（５４９）高１．６倍，却无ＧＳＴ基因扩增，表明ＧＳＨ／ＧＳＴ解毒系统参与Ａ（５４９）ＤＤＰ耐药性的产生。实验结果亦示Ａ（５４９）ＤＤＰ与卡铂及氨甲喋呤间存在交叉耐药，而与易产生ＭＤＲ或ａｔＭＤＲ之ＡＤＭ、ＶＣＲ、ＶＰ－１６、ＶＭ－２６无交叉耐药，Ａ（５４９）细胞无Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）表达，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ研究Ａ（５４９）ＤＤＰ无ｍｄｒｌＴｏｐｏⅡ基因扩增，提示Ａ（４５９）ＤＤＰ细胞系与ＭＤＲ及ａｔ－ＭＤＲ无交叉耐药。     

丁酸钠对 Bel-7402 人肝癌细胞几种酶活性的影响

为了探讨丁酸钠对人肝癌细胞各种酶活性的影响，采用丁酸钠处理Ｂｅｌ－７４０２人肝癌细胞，测定其γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）、酪氨酸－α－酮戊二酸转氨酶（ＴＡＴ）、醛缩酶（ＡＬＤ）的比活力和细胞增殖速度。结果显示，２．５ｍｍｏｌ／Ｌ和５．０ｍｍｏｌ／Ｌ的丁酸钠能明显抑制人肝癌细胞增殖，并使肝癌标志酶γ－ＧＴ活性及反映肝细胞恶变或损伤的ＡＬＤ活性明显降低（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），而使反映肝细胞分化的ＴＡＴ活性明显升高（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。结果表明，丁酸钠能引起人肝癌细胞γ－ＧＴ、ＴＡＴ、ＡＬＤ明显改变，提示这几种酶可作为肝癌细胞分化诱导的酶学指标     

阿霉素耐药株及维拉帕米逆转后的GST活性变化

我们通过测定Ｐ３８８／ＡＤＲ及Ｌ１２１０／ＤＤＰ抗药株ＧＳＴ活性表明：Ｐ３８８／ＡＤＲ耐药株ＧＳＴ活性分别为敏感株的１．３６（耐药８．７倍）和１．７３倍（耐药４４．４倍），顺铂耐药株ＧＳＴ活性为敏感株的１．２６倍，ＶＰ使耐药株ＧＳＴ活性增加１．１９倍。表明阿霉素耐药与ＧＳＴ活性增强有关。     

羧乙基锗倍半氧化物抗移植瘤实验

将移植了ＨｅｐＡ鼠肝癌的ＮＩＨ鼠随机分为四组，一组作对照组，另三组分别给予Ｇｅ－１３２、ＣＹ、Ｇｅ－１３２＋ＣＹ治疗。２周后处死，测定血清中ＳＯＤ活性，对瘤体进行病理切片检查。结果表明：治疗组肿瘤重量较轻，ＳＯＤ活性较高（Ｐ＜０．０５）。Ｇｅ－１３２组的癌组织中白细胞浸润程度较高，细胞免疫力较强。对鼠肝癌的抑制率，Ｇｅ－１３２与ＣＹ合用有相加作用。     

半乳糖基修饰的反义硫代寡核苷酸对肝癌多药耐药细胞株MDR_1基因过度表达的抑制作用

设计合成三种互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的反义硫代寡核苷酸（ＡＳＯＤＮ），分别互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡ序列起始区、含ＡＵＧ起始密码子区及针对Ｌｏｏｐ形成位点区的序列，作用于阿霉素（ＤＯＸ）诱导的肝癌多药耐药细胞株ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ。经流式细胞分析及ＲＴ－ＰＣＲ的方法检测，发现三种ＡＳＯＤＮ均能不同程度地降低ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞膜表面Ｐ－ＧＰ含量；同时ＭＤＲ１ｍＲＮＡ的表达也有轻度降低，其中尤以互补ＭＤＲ１ｍＲ－ＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ抑制作用最强。以导向配体Ｇａｌ１０－ＰＬＬ修饰此ＡＳＯＤＮ后，作用于ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ细胞，发现与相同剂量未修饰ＡＳＯＤＮ比较，Ｐ－ＧＰ含量由７６．８％降至１９．８％；对ＡＤＭ的ＩＣ５０由１．２８μｇ／ｍｌ降至０．４２μｇ／ｍｌ。实验说明，半乳糖基修饰的互补ＭＤＲ１ｍＲＮＡＬｏｏｐ形成位点的ＡＳＯＤＮ能够明显降低肝癌多药耐药细胞膜表面Ｐ－ＧＰ的含量，并较大程度地逆转多药耐药细胞ＢＥＬ－７４０２／ＤＯＸ对化疗药物的耐受性。     

硒酸酯多糖对癌症患者血清MDA含量及CuZn-SOD活性的影响

目的：了解硒酸酯多糖对肿瘤患者体内ＭＤＡ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性的影响。方法：对６０例肿瘤病人随机分成３组：不服硒组，服硒４００μｇ／ｄ组及服８００μｇ／ｄ组并与１５名正常人对照比较。结果：癌症患者血清ＭＤＡ明显高于正常人（Ｐ＜０．０１），血清Ｓｅ及ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性明显低于正常人（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；服硒酸酯多糖者化疗后血清Ｓｅ较不服者明显升高（Ｐ＜０．０５），ＣｕＺｎ－ＳＯＤ也明显升高（Ｐ＜０．０１），ＭＤＡ含量显著下降（Ｐ＜０．０５）；服４００μｇ／ｄ组与服８００μｇ／ｄ组之间上述各指标均无明显差异。结论：肿瘤病人摄入适量（４００μｇ／ｄ）硒酸酯多糖可能增加体内ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性，减轻了化疗药物对正常细胞的过氧化损伤。     

鼠肝脏癌变过程中GGT及其同工酶的表达与动态变化

本文对化学致癌剂２－ＦＡＡ诱发鼠肝癌过程中，膜结合γ－谷氨酰移换酶（ＧＧＴ）及其同工酶的表达与动态变化进行了研究，Ｗｉｓｔａｒ大鼠经２－ＦＡＡ喂饲后，经病理学及的组织化学证实，在肝脏由癌前病变到癌变过程中，肝细胞大量表达ＧＧＴ并分泌入血。肝组织ＧＧＴ，实验各组均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），接近胎鼠肝ＧＧＴ水平，血中ＧＧＴ呈持续住增加．早期升高速度慢于ＡＤＡ，ＧＳＴ和ＡＬＴ，正常鼠肝及血ＧＧＴ仅为单一区带，肝癌鼠肝与血清ＧＧＴ也呈动态改变，显示正常鼠和胎鼠肝ＧＧＴ的双重特征，研究结果提示鼠肝癌时ＧＧＴ大量表达，且有癌胚性质，且血中同工酶异常区带出现较早，检测其同工酶有助于对鼠肝癌的早期诊断。     

若干植物生长调节剂衍生物对 DNA 多聚酶及肿瘤生长的抑制作用

目的：为了在体外培养的肿瘤细胞中证实一组有生物活性载体：磺胺（ＳＵ）、９－氨基吖啶（ＡＣＤ）、异烟肼（ＩＮＨ）的植物生长调节剂４－氯（Ｍ）、２，４－二氯（Ｄ）或２，４，５－三氯（Ｔ）的萘氧乙酸、２，３，５－三氯苯甲酸（ＴＢ）、α－萘乙酸（ＮＡＡ）的衍生物对小鼠艾氏腹水癌细胞ＤＮＡ多聚酶（ＤＰ）的抑制作用，并筛选出抑酶力最强的化合物。方法：参照Ｋ．Ｏｎｏ法分离、纯化并检测ＤＰ活性。ＭＴＴ法测定对体外培养肿瘤细胞的ＩＣ５０。结果：１１个植物生长调节剂中５个化合物在１００μｇ／ｍｌ浓度下对ＤＰ粗酶抑制作用大于５０％，抑制率分别是Ａ８４０３（２，４－Ｄ－ＡＣＤ）７８．５±５．５％，Ａ８８４５（２，４，５－Ｔ－ＳＭＺ）７５．８±１６．０％，Ａ８６０１（ＮＡＡ－ＳＮ）７４．５±６．０％，Ａ８８７４（２，４，５－Ｔ－ＩＮＨ）７３．４±２．９％，Ａ８８７３（４Ｍ－ＩＮＨ）７１．０±１２．１％。其中Ａ８４０３（９－２，４－二氯苯氧乙酸氨基吖啶，２，４－Ｄ－ＡＣＤ）抑制ＤＰ能力最强。对ＤＰα的ＩＣ５０为３．４１４２μｇ／ｍｌ，对ＤＰβ的ＩＣ５０为３．７５２３μｇ／ｍｌ。Ａ８４０３对体外培养的低分化鼻咽癌ＣＮＥ－２细胞及ＨｅＬａ     

卵巢癌细胞对顺铂耐药机制的研究

目的：探明卵巢癌对顺铂产生耐药的机理。方法：采用顺铂体外诱导法建立卵巢癌耐药细胞株ＨＯ－８９１０/２。ＭＴＴ法测定其耐药倍数和交叉耐药性，原子收法测定细胞内Ｐt浓度，分光光度法测定ＧＳＨ、ＧＳＴ，流式细胞仪分析细胞周期，检测bcl-2和Ｐ－ＧＰ的表达，结果：ＨＯ－８９１０/２耐顺铂是亲代细胞ＨＯ－８９１０的６．６倍，与５－Ｆ Ｕ，ＡＤＲ有交叉耐药性。对照亲代细胞，耐药细胞中ＧＳＨ含量与ＧＳＴ活性明显增高，     

多抗甲素对LAK细胞增殖及杀伤活性的影响

将Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾淋巴细胞分成四组：①单纯培养液组；②单纯ＰＡ组；③ｒＩＬ－２组；④ｒＩＬ－２＋ＰＡ组。采用ＭＴＴ比色方法及间接免疫荧光法测定并比较各组淋巴细胞增殖反应，淋巴细胞对ｐ８１５肿瘤细胞的细胞毒作用以及淋巴细胞表面ＩＬ－２表达的情况，以此观察ＰＡ体外对小鼠脾ＬＡＫ细胞增殖反应、杀瘤活性及ＩＬ－２Ｒ表达的影响。结果表明，ＰＡ单独对静止淋巴细胞增殖反应无作用，也不能诱导出ＬＡＫ活性，但能显著增强ＩＬ－２诱导的淋巴细胞增殖反应，杀瘤活性及其表面ＩＬ－２Ｒ表达。当浓度为１０μｇ／ｍ１的ＰＡ与低剂量（２００ｕ／ｍ１）ＩＬ－２联合应用时，诱导出的ＬＡＫ活性强度相当于浓度为１０００ｕ／ｍ１ＩＬ－２水平。提示，ＰＡ与ＩＬ－２合用能共同诱导ＬＡＫ活性，降低ＩＬ－２用量，ＰＡ可望作为一种新的免疫调节剂用于肿瘤的ＬＡＫ／ＩＬ－２生物治疗。     

中华眼镜蛇毒对荷人鼻咽癌裸鼠血浆MDA和SOD的影响

目的：为了探讨中华眼镜蛇毒（ＮＮＡＶ）对荷人鼻咽癌（ＮＰＣ）裸鼠血浆丙二醛（ＭＤＡ）和超氧化物歧化酶鼠血浆ＭＤＡ和ＳＯＤ活性。结果：荷瘤鼠血浆ＭＤＡ（８．４２ｎｍｏｌ／ｍｌ）比正常裸鼠（３．９２ｎｍｏｌ／ｍｌ）明显升高，而荷瘤鼠血浆总ＳＯＤ（Ｔ－ＳＯＤ）、锰ＳＯＤ（Ｍｎ－ＳＯＤ）和铜锌ＳＯＤ（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）活性（５２．１９Ｎｕ／ｍｌ，２０．３１Ｎｕ／ｍｌ，３１．８８Ｎｕ／ｍｌ）比正常裸鼠（１２     

低剂量IL-2诱导的人胚胎脾脏CD_3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤效果及实验研究

用ＣＤ３ＭｃＡｂ和低剂量ＩＬ－２（５００Ｕ／ｍｌ）诱导的人胎脾ＣＤ３ＡＫ细胞治疗４３例晚期恶性肿瘤患者，取得疗效。经２～８疗程治疗，多数患者症状缓解，生活质量改善，ＰＲ＋ＭＲ１８例（４１．９％），Ｓ＋Ｐ２５例（５８．１％），死亡９例（２０．９％）。全组无严重毒副反应发生。同时比较ＣＤ３ＡＫ细胞和常规ＬＡＫ细胞体外增殖及其杀伤活性，表明前者１４４ｈ增殖力高于后者（Ｐ＜０．０１），靶细胞抑制率二者无显著差异（Ｐ＞０．０５）。初步表明ＣＤ３ＡＫ／ＩＬ－２疗法效果肯定，毒副作用小，可能成为继ＬＡＫ／ＩＬ－２之后更为有效的肿瘤辅助治疗。     

SPC－A－1／DDP耐药细胞株的建立及其生物学特性的初步观察

目的建立耐药细胞株，观察其生物学特性。方法采用体外诱变和药压的方法，建立耐顺铂（ＤＤＰ）的人肺腺癌细胞株ＳＰＣ－Ａ－１的耐药株（ＳＰＣ－Ａ－１／ＤＤＰ）。结果ＳＰＣ－Ａ－１／ＤＤＦ耐药细胞株能耐受的ＤＤＰ浓度为耐ＤＤＰ细胞株的１．５～１５倍，且细胞增殖和传代及耐药性均甚稳定。其倍增时间为３４．３５±０．３５３６ｈ，细胞被抑制５０％时的药物浓度（ＩＣ５０）为４５μｇ／ｍｌ，耐药指数为５．６２５，集落形成率为５３．９７％±２．４９３２％。结论ＳＰＣ－Ａ－１／ＤＤＰ耐药株可以作为研究抗癌药物耐药性机制的实验模型。     

CD3AK细胞和LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤的临床和实验研究

将５１例晚期恶性肿瘤患者（男性２３例，女性２８例）分成两组，其中一组（３１例）以ＣＤ３ＭｃＡｂ（ＣＤ３单克隆抗体）和小剂量ＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）共同诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞治疗，另一组（２０例）输注大剂量ＩＬ－２（１０００ｕ／ｍｌ）诱导的常规ＬＡＫ细胞治疗，以探讨降低ＩＬ－２用量、提高杀伤细胞细胞毒活性的可能性。结果显示ＣＤ３ＡＫ组患者生活质量改善、症状缓解均优于ＬＡＫ组。ＣＤ３ＡＫ组ＰＲ＋ＭＲ率较ＬＡＫ组高２９．０％，Ｓ＋Ｐ率和死亡率分别较ＬＡＫ组低１２．４％和９．６％。同时比较了ＣＤ３ＡＫ细胞与ＬＡＫ细胞的体外增殖和细胞毒活性，结果表明ＣＤ３ＡＫ细胞增殖率高于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１），靶细胞抑制率二者在０．０５水平无显著差异。提示ＣＤ３ＭｃＡｂ在刺激杀伤细胞活性，尤其在提高其增殖能力方面，具有显著的作用，ＣＤ３ＡＫ／ＩＬ－２能更有效地治疗晚期恶性肿瘤。     

耐顺铂人肺腺癌细胞系A549^DDP耐药机理进一步探讨

应用递增浓度的方法建立了一株顺铂（ＣＤＤＰ）耐药细胞系Ａ５４９ＤＤＰ。用溴化乙啶荧光分光光度法测定细胞内Ｐｔ－ＤＮＡ链间交联物（ＩＣＬ）；用无焰原子吸收光谱法测定细胞浆内及细胞核内铂含量；用流式细胞法及荧光显微镜测定铂的外排速度。结果显示：耐药细胞Ａ５４９ＤＤＰ较亲代敏感细胞Ａ５４９对ＣＤＤＰ耐受性增加８．９倍，与亲代敏感细胞Ａ５４９相比，Ａ５４９ＤＤＰ胞浆内及核内ＣＤＤＰ积聚分别为亲代细胞的１６．９％与２４．３％，铂含量与ＣＤＤＰ浓度正相关；Ａ５４９ＤＤＰ外排ＣＤＤＰ的功能较Ａ５４９明显增强，ＩＣＬ形成量低８４．１％，而修复功能增强２倍。结果提示：Ａ５４９ＤＤＰ细胞内ＣＤＤＰ积聚减少和修复功能增强是ＣＤＤＰ的主要耐药机理。     

PCR和探针自我杂交──Northern Blot方法对二甲基苯蒽诱导的P_（450）Cyp~（1b－1）mRNA的定量

通过ＰＣＲ和探针自我杂交──ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ方法对０．３μＭ二甲基苯蒽（ＤＭＢＡ）诱导的２×１０６个小鼠胚胎成纤维细胞１０Ｔ１／２产生的Ｐ４５０Ｃｙｐ１ｂ－１ｍＲＮＡ进行了定量。在这个方法中，与Ｐ４５０Ｃｙｐ１ｂ－１ｍＲＮＡ相同的特定的单链ＣＤＮＡ探针片断通过ＰＣＲ合成。而双链探针中的一条链与单链探针和Ｐ４５０Ｃｙｐ１ｂ－１ｍＲＮＡ的特定片断是相同的。双链探针上的另一条链（Ｈ链）则与单链探针和Ｐ４５０Ｃｙｐ１ｂ－１ｍＲＮＡ的特定片断是互补的。用３２Ｐ－ｄＣＴＰ标记Ｈ链后，它就能够与单链探针和Ｐ４５０Ｃｙｐ１ｂ－１ｍＲＮＡ同时进行杂交。这样，就能用已知浓度的单链探针作为标准物制做标准工作曲线和对Ｐ４５０Ｃｙｐ１ｂ－１ｍＲＮＡ的含量进行定量。经测定，在０．３μＭＤＭＢＡ分别于１、２、３、４、６小时对２×１０６个细胞进行诱导后，２×１０６个细胞在不同时间产生的Ｐ４５０Ｃｙｐ１ｂ－１ｍＲＮＡ分别为０．００９８、０．０１３５、０．０１７４、０．０１９０和０．０１２０μＭ。