mda-7/IL-24对裸鼠肝癌移植瘤的生长抑制和促凋亡作用

目的:探讨mda7/IL24对裸鼠肝癌细胞移植瘤的生长抑制和促凋亡作用及其相关机制。方法：构建携带mda7基因的重组腺病毒载体Admda7。以HepG2细胞皮下接种建立裸鼠肝癌移植瘤模型,采用瘤内单点注射的方法分别给予AdGFP、Admda7和ALLN（毒胡萝卜素,NAcLLnorleucinal）+Admda7,观察瘤质量和瘤体积的变化,通过免疫组化和TUNEL法检测肿瘤组织内凋亡相关蛋白caspase3活化、细胞增殖相关抗原ki67和微血管密度、细胞凋亡率,并通过Western blotting检测caspase12、caspase3和Bax的表达。结果： Ad.mda7治疗组和Ad.GFP对照组肿瘤体积分别为（312.6±30.2）mm3和（520.6±30.0）mm3（P<0.01）,两组的肿瘤质量分别为（0.321±0.031）g和（0.534±0.030）g（P<001）;Ad.mda7治疗后瘤细胞的凋亡率显著高于对照组（P<0.01）;Ad.mda7可抑制肝癌组织ki67表达、微血管密度和促进caspase3的表达。 经 ALLN 处理的裸鼠,明显抑制Ad.mda7对肝癌细胞的致凋亡作用（P<0.05）,并且下调Ad.mda7诱导的caspase12、caspase3和Bax的表达。结论： Ad.mda7可显著抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长和新生血管的形成,并通过内质网应激通路显著诱导肿瘤细胞的凋亡。     

携带mda-7基因的复制缺陷型腺病毒通过促进线粒体释放促凋亡蛋白杀伤肝癌细胞

目的 探讨黑色素瘤分化相关基因7/白介素24(mda-7/IL-24)基因选择性杀伤肝癌细胞的机制.方法 应用携带mda-7基因的复制缺陷型腺病毒Ad.mda-7感染正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2.通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附实验(ELISA)及Western blot方法,观察mda-7/IL-24基因的表达;应用Hoeehst染色和流式细胞仪观察mda-7/IL-24对肝癌细胞的杀伤作用;采用RT-PCR和Western blot方法,观察Bcl-2家族和caspase-9基因表达的变化,分离不同感染时点细胞内线粒体和胞浆蛋白,并检测线粒体释放促凋亡蛋白细胞色素C(Cyt-C)和Smac/DIABLO的变化过程.结果 Ad.mda-7能介导mda-7/IL-24在两种细胞株中的高效表达.能选择性杀伤肝癌细胞,感染24 h后,HepG2细胞凋亡率为24.0%±4.6%,而对正常的肝细胞没有影响.RT-PCR和亚细胞蛋白的分析结果显示,胞浆内Bel-2和Bcl-xL的表达在HepG2细胞中明显下降,而在L02细胞中的表达无变化,Bax在肝癌细胞中的表达明显增强,Bak的表达无变化;Ad.mda-7能促进细胞线粒体释放cyt-C和Smac/DIABLO蛋白,并促进caspase-9的表达.结论 Ad.mda-7能选择性杀伤肝癌细胞HepG2,通过促进线粒体促凋亡蛋白的释放而诱导肝癌细胞凋亡.     

Ad-mda-7联合多柔比星对人肝癌裸鼠移植瘤的协同抑制作用

目的:将重组腺病毒介导的黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation-associated gene-7,mda-7)/IL-24与多柔比星(adriamycin,ADM)联合治疗人肝癌细胞裸鼠移植瘤,探索基因治疗和化疗相结合治疗肝癌的新方法.方法:构建携带人mda-7/IL24基因的重组腺病毒载体(Ad-mda-7),单独使用该载体或ADM以及两者联合使用对人肝癌细胞裸鼠移植瘤进-行治疗,观察抗肿瘤效果.用免疫组织化学方法检测各组肿瘤组织中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)与转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1的表达.结果:成功构建重组腺病毒并实现体内表达,Ad-mda-7 ADM联合治疗组的裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,与其他3组相比生存期明显延长(P<0.01);Ad-mda-7 ADM组裸鼠移植瘤平均大小与单独使用ADM或Ad-mda-7相比明显缩小(P<0.01).Ad-mda-7能显著降低TGF-β1和MMP-2的表达,明显优于ADM组(P<0.01).结论:重组腺病毒介导mda-7/IL-24联合多柔比星对裸鼠人肝癌转移模型有明显的抗肿瘤作用及协同效应,其机制可能与抗肿瘤侵袭转移有关.     

重组腺病毒Ad5F35-SH2-DED对K562细胞裸鼠致瘤能力的影响

目的:研究融合蛋白SH2-DED(SD)对白血病K562细胞裸鼠皮下移植瘤的影响.方法:建立K562细胞裸鼠皮下移植瘤的重组腺病毒预防和治疗模型.预防模型采用皮下注射经重组腺病毒Ad5F35-SD或Ad5F35-SmD预处理的K562细胞;治疗模型采用皮下注射K562细胞建立皮下移植瘤后,进行Ad5F35-SD或Ad5F35-SmD的瘤体内多点注射.观察裸鼠移植瘤的生长情况以及移植瘤肿瘤细胞的形态学变化.应用TUNEL法和电子显微镜观察移植瘤肿瘤细胞的凋亡情况.结果:治疗模型组中,Ad5F35-SD处理组移植瘤体积明显缩小,肿瘤细胞核浓缩,细胞质染色加深.TUNEL法和电子显微镜检测结果提示,肿瘤细胞发生凋亡,且凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-8表达上调.Ad5F35-SD在预防模型组中同样具有抑制移植瘤生长的作用.结论:重组腺病毒Ad5F35-SD能够抑制K562细胞在裸鼠体内的致瘤能力以及裸鼠皮下移植瘤的生长,并促进肿瘤细胞凋亡.     

复制缺陷型腺病毒Ad-p14ARF治疗肝细胞癌的实验研究及作用机制的探讨

目的 研究复制缺陷型重组腺病毒Ad—p14ARF用于肿瘤基因治疗的可行性及其作用机制。方法 利用Ad—Easy系统构建并扩增了Ad—p14ARF复制缺陷型腺病毒;应用台盼蓝细胞计数法和倒置相差显微镜观察Ad-p14ARF对肝癌细胞的生长抑制作用;AnnexinV／PI双染法结合流式细胞仪检测不同滴度的Ad-p14ARF作用后肝癌细胞的凋亡情况;Western blot法检测相关蛋白的表达情况,构建皮下肝癌移植瘤裸鼠模型,研究Ad—p14ARF在体内的抑瘤活性。结果 Ad—p14ARF可以明显抑制野牛型p53和突变型p53表型的肝癌细胞增殖、生长。AnnexinV／PI双染色法显示,Ad—p14ARF能促进肝癌细胞株HepG2和BEL7402的细胞凋亡,凋亡细胞比例与腺病毒滴度呈现一定的剂量相关性。凋亡相关蛋白检测提示,Ad—p14ARF能上调p53下游基因Bax、p21的表达。体内抑瘤试验显示,Ad—ECRG2可以明显抑制肝癌细胞BEL7402裸鼠移植瘤的生长。结论 p14ARF基因的导入可以通过p53依赖和非依赖途径抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,有望在恶性肿瘤的基因治疗中发挥重要作用。     

延龄草总皂苷抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231裸鼠移植瘤的增殖和促进凋亡作用

目的:观察延龄草总皂苷对乳腺癌细胞MDA-MB-231裸鼠皮下移植瘤的影响及相关机制。方法:培养乳腺癌细胞MDA-MB-231,接种至BALB/c裸鼠背部皮下。接种后第5天通过腹腔注射的方式给裸鼠予延龄草总皂苷治疗,每隔3天测量移植瘤的体积以及裸鼠的体重;实验结束时,采用TUNEL试剂盒检测移植瘤细胞的凋亡情况;Western blot法检测凋亡相关蛋白剪切型caspase-3,8,9表达的变化。结果:延龄草总皂苷可有效地抑制裸鼠移植瘤的增殖,实验结束时,肿瘤的体积分别为:模型组(1142.24±164.32)mm3,延龄草总皂苷(5 mg/kg)(552.90±49.71)mm3,延龄草总皂苷(10 mg/kg)(269.78±48.84)mm3。延龄草总皂苷能诱导移植瘤细胞的凋亡,可浓度依赖性地促进细胞中剪切型caspase-3,9的表达。结论:延龄草总皂苷可有效地抑制MDA-MB-231裸鼠移植瘤的增殖,其方式可能通过caspase依赖的方式促使MDA-MB-231发生凋亡。     

Apogossypolone对人前列腺癌LNCaP移植瘤的生长抑制作用

目的:探讨apogossypolone(ApoG2)对前列腺癌LNCaP细胞系裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及可能的机制.方法:建立人前列腺癌LNCaP细胞系的裸鼠移植瘤模型,观察ApoG2对皮下移植瘤的生长抑制作用,通过免疫组化方法检测肿瘤组织中PCNA、Bcl-2 、CD31 、caspase-3及caspase-8的表达,并进行平均微血管密度(MVD)计数.结果:ApoG2可以有效抑制LNCaP移植瘤的生长,ApoG2降低肿瘤组织内PCNA和CD31的表达,增强了caspase- 3,8的表达.结论:ApoG2可有效抑制LNCaP移植瘤的生长.     

左旋棉酚对裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长抑制作用

目的:探讨左旋棉酚对裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长抑制作用及其机制.方法:建立裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤模型,将移植瘤裸鼠80只随机分成4组,每组20只,分别为10.0mg/kg、5.0mg/kg、2.5ng/kg左旋棉酚治疗组和对照组,进行疗效分析与组织病理形态学观察,同时检测肿瘤组织内PCNA、bcl-2、caspase-3和caspase-8的表达.结果:左旋棉酚可使人前列腺癌PC-3细胞荷瘤裸鼠存活率提高,肿瘤体积缩小,肿瘤组织坏死明显,PCNA与bcl-2表达减少,caspase-3和caspase-8表达增加,但高剂量左旋棉酚对PC-3荷瘤裸鼠肝脏和肠道有一定毒性.结论:当治疗剂量大于5.0mg/kg时,左旋棉酚可通过增殖抑制和诱导凋亡,明显抑制裸鼠人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的生长.     

米非司酮对子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞凋亡调控的研究

目的探讨抗孕激素米非司酮对人子宫内膜癌HHUA细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的调控作用。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸鼠皮下接种HHUA细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机分为2组,分别应用米非司酮、精制花生油治疗4周,应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率;免疫组化技术检测凋亡基因bcl2、Fas和FasL蛋白的表达情况。结果米非司酮治疗组裸鼠移植瘤细胞G0/G1期比例升高,S期细胞比例(SPF)降低(P<0.05),移植瘤细胞凋亡率为15.03%±2.19%,明显高于对照组(3.06%±1.13%)(P<0.01);移植瘤细胞bcl2蛋白表达水平明显下降,而Fas蛋白表达水平升高,与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。结论抗孕激素米非司酮通过调节移植瘤细胞周期分布和凋亡基因,抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的作用及IGF—IR的影响

[目的]观察青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤生长的作用，并探讨其抑制肿瘤的机制。[方法]建立人乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤模型，给予不同剂量青蒿琥酯治疗并观察其对移植瘤的抑制作用；电镜观察移植瘤细胞形态学改变；流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期的变化：免疫组化检测移植瘤细胞p53、bcl-2、bax和caspase-3的表达情况，分析它们之间的相关性；Westernblot检测IGF—IR蛋白的表达：[结果]给药12d后，低剂量、高剂量青蒿琥酯组、CTX组和联合给药组抑瘤率分别为（24．39±10．20）％、（40．24±7．02）％、（57．01±5．84）％和（68．29±5．1）％；青蒿琥酯使肿瘤细胞阻滞于G0／G1期而使S期细胞减少；在青蒿琥酯组中，bcl-2的蛋白表达量明显下降，bax、caspase-3蛋白表达上调，p53蛋白表达量与对照组比较无差异：bcl-2／bax及bcl-2／caspase-3表达均呈负相关．IGF-IR蛋白表达下调。[结论]青蒿琥酯可显著抑制乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的生长，其机制可能与其影响细胞凋亡相关蛋白、诱导凋广、抑制细胞增殖有关．     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

裘法祖教授生平

Prof.Fazu Qiu,member of the Chinese Communist Party,surgery professor of Tongji Hospital,departed in Tongji Hospital,Wuhan,China,at fourteen to nine a.m,June 14,2008,after a disease.He turns 94 this year.He was the senior academician of the Academia Sinica,the illustrious medical scientist of China,and the Honorary Director of Tongji Medical College,as well as Huazhong University of Science & Technology.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

Dermatomycosis in Dogs

During the routine examination of dogs for cutaneous lesions, 205 dogs were screened for fungi other than dermatophytes. Twenty-two dogs (10.8%) revealed the presence of non-dermatophytic fungi suspicious for representing the etiologic agents of the skin lesions. The fungi isolated were Alternaria sp. (2.9%), Penicillium sp. (2.4%), Aspergillus fumigatus (2.0%), Mucor sp. (1.5%), Cladosporium sp. (1.5%) and Fusarium sp. (0.5%). No dermatophyte was isolated in association with these fungi. The incidence of these infections was found to be greater in warm and humid climate.     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.