~(125)I放射性粒子对荷人结肠癌裸鼠治疗效应的实验研究

目的观察125I放射性粒子组织间植入对裸鼠皮下人结肠癌移植瘤的局部抑制作用。方法雌性Balb/c裸鼠20只,以人Colo205型结肠癌细胞建立裸鼠皮下人结肠癌实体肿瘤模型,待肿瘤体积长至理想大小,随机分成2组,对照组不予任何处理,治疗组给予移植瘤以125I放射性粒子组织间植入,每周测量2次肿瘤体积,治疗27d后,处死裸鼠,观察移植瘤的相对肿瘤体积(RTV)、相对肿瘤增殖率(T/C)、ABC免疫组化染色观察肿瘤增殖率[Brdu标记指数(LI)]。结果治疗27d后,裸鼠均存活。治疗组(125I粒子组)移植瘤的RTV为(251.59±72.24),明显小于对照组的RTV(1087.94±510.72),相对肿瘤增殖率为23.13%,明显减少,治疗组的LI为(15.00±5.00),明显小于对照组的LI(38.75±6.29)。结论①人Colo205型结肠癌模型是放射性粒子植入治疗大肠癌基础研究的良好模型之一;②125I放射性粒子对人结肠癌细胞增殖有明显的局部抑制作用;③125I放射性粒子在肿瘤体内累积一定剂量才会逐渐显现治疗效应。     

[125I]-(A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤特性研究

目的：观察放射性碘标记胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤或亲肿瘤（tumor-seeking）特性。方法：采用荷人肝癌裸鼠模型。用[¹²⁵I]-(A14)单碘胰岛素进行荷人肝癌裸鼠体内分布实验和抑制实验。结果：体内分布实验显示肝癌组织摄取[¹²⁵I]-(A14)单碘胰岛素明显高于本底组织（肌肉）,肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性比值随时间延长而增高。体内抑制实验发现肿瘤组织于30 min的抑制率为35.0%。结论：[¹²⁵I]-(A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内,通过受体介导作用,能被肝细胞癌组织特异性摄取。     

[~(125)I]-(A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤特性研究

目的 :观察放射性碘标记胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内的趋瘤或亲肿瘤 (tumor-seeking)特性。方法 :采用荷人肝癌裸鼠模型。用 [12 5I]- (A14)单碘胰岛素进行荷人肝癌裸鼠体内分布实验和抑制实验。结果 :体内分布实验显示肝癌组织摄取 [12 5I]- (A14)单碘胰岛素明显高于本底组织 (肌肉 ) ,肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性比值随时间延长而增高。体内抑制实验发现肿瘤组织于 30min的抑制率为 35 .0 %。结论 :[12 5I]- (A14)单碘胰岛素在荷人肝癌裸鼠体内 ,通过受体介导作用 ,能被肝细胞癌组织特异性摄取。     

125I放射粒子植入治疗晚期胰腺癌和放射粒子对正常胰腺组织损伤的实验研究

目的 探讨125I放射粒子植入术治疗浸润性胰腺癌的临床疗效、影响因素和正常胰腺组织放射损伤处理.方法对不能手术切除的浸润性胰腺癌27例,根据治疗计划实施125I放射粒子植入术,比较分析了术后肿瘤局部控制率、生存率、临床受益反应及其影响因素;24只家兔随机分为A、B两组,正常胰腺、肠系膜血管边缘植入125I放射粒子,植入后第40天及第80天分别处死,取粒子植入处直径1 cm范围内胰腺组织和部分肠系膜血管,HE染色评定胰腺组织及肠系膜血管慢性放射性损伤情况.结果 (1)本组病例中,CR 2例(8%);PR 8例(32%):SD 12例(48%);PD 3例(12%);有效率40%;疼痛缓解率为92%.本组病例术后6个月,12个月及18个月生存率分别为81%、29%和7%,术后中位生存时间为11.2个月.肿瘤体积大、植入粒子总活度高、术后未追加局部放疗显示术后生存率降低.本组2例(7.4%)发生术后胰腺炎,其中1例出现胰腺假性囊肿.(2)家兔胰腺慢性放射损伤呈逐渐恢复趋势.血管内膜上皮细胞的损伤性改变出现较晚,肌层变性及肌紊乱有明显修复.结论 125I放射粒子植入术是治疗浸润性胰腺癌的一种有效、安全、并发症较少的姑息治疗方法,其胰腺并发症能够预防.     

^125I放射粒子植入治疗晚期胰腺癌和放射粒子对正常胰腺组织损伤的实验研究

目的探讨^125I放射粒子植入术治疗浸润性胰腺癌的临床疗效、影响因素和正常胰腺组织放射损伤处理。方法对不能手术切除的浸润性胰腺癌27例,根据治疗计划实施^125I放射粒子植入术,比较分析了术后肿瘤局部控制率、生存率、临床受益反应及其影响因素;24只家兔随机分为A、B两组,正常胰腺、肠系膜血管边缘植入^125I放射粒子,植入后第40天及第80天分别处死,取粒子植入处直径1cm范围内胰腺组织和部分肠系膜血管,HE染色评定胰腺组织及肠系膜血管慢性放射性损伤情况。结果（1）本组病例中,CR2例（8％）;PR8例（32％）：SD12例（48％）;PD3例（12％）：有效率40％疼痛缓解率为92％。本组病例术后6个月,12个月及18个月生存率分别为81％、29％和7％,术后中位生存时间为11．2个月。肿瘤体积大、植入粒子总活度高、术后未追加局部放疗显示术后生存率降低。本组2例（7．4％）发生术后胰腺炎,其中1例出现胰腺假性囊肿。（2）家兔胰腺慢性放射损伤呈逐渐恢复趋势。血管内膜上皮细胞的损伤性改变出现较晚,肌层变性及肌紊乱有明显修复。结论^125I放射粒子植入术是治疗浸润性胰腺癌的一种有效、安全、并发症较少的姑息治疗方法,其胰腺并发症能够预防。     

CT引导下放射性粒子125I植入治疗原发性肝癌的近期疗效和安全性

目的 观察CT引导下放射性粒子125I植入治疗原发性肝癌的近期疗效和安全性.方法 收集2010年4月至2011年3月在中山大学附属第一医院及解放军第四五八医院收治的原发性肝癌病例63例,接受研究病灶75个（其中16个病灶长径小于5 cm,其余病灶长径大于5 cm）,均行CT引导下放射性粒子125I植入治疗.术后2个月分别行CT检查评价粒子植入治疗效果.分别记录术前、术后3d、1个月、2个月肝功能变化及术后6个月内并发症发生情况.结果 所有75个病灶术后2个月CT检查评价治疗效果完全缓解（CR）4个,部分缓解（PR）10个,稳定（SD）39个,进展（PD）22个,总有效率为18.7％.然而对于长径小于5 cm的16个病灶,治疗效果评价完全缓解（CR）4个,部分缓解（PR）8个,稳定（SD）3个,进展（PD）1个,总有效率为75％.术后1、2个月复查肝功能丙氨酸氨基转移酶（ALT）及天门冬氨酸氨基转移酶（AST）与术前比较差异具有统计学意义（P＜0.05）,均较术前升高;术后3 d ALT、AST与术前比较及术后各时间点间比较差异无统计学意义.术前、术后各时间血清总胆红素及白蛋白水平变化差异无统计学意义.术后6个月内共出现粒子移位24例,针道种植转移2例,气胸2例,1例出现恶心、呕吐、纳差.结论 对于失去外科手术机会的原发性肝癌患者,放射性粒子125I植入治疗对于长径小于5 cm肿瘤病灶,有效率较高.放射性粒子植入会引起一些不良反应和并发症,但未发现有致命性并发症发生.     

BCSG1-siRNA在乳腺癌裸鼠移植瘤的表达

目的 探讨小分子干扰RNA(siRNA)对人乳腺癌移植瘤组织中乳腺癌特异性基因BCSG1表达的抑制作用.方法 根据BCSG1的已知cDNA序列,设计并体外转录合成4条特异性siRNA,分别导入载体质粒中,用脂质体介导分别转染人乳腺癌细胞系MCF7细胞中,以无关序列转染和未转染的MCF7细胞为对照.将用上述4条特异性siRNA和无关序列转染后的细胞连同未转染的MCF7细胞(共6组细胞)注入裸鼠皮下,构建裸鼠乳腺癌移植瘤模型,分析肿瘤生长抑制情况.采用半定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学SP法分别检测6组裸鼠移植瘤中BCSG1 mRNA和BCSG1蛋白的表达情况.3组人肿瘤组织(浸润性导管癌、癌旁乳腺导管增生组织和乳腺纤维腺瘤)同时用作对照.结果 BCSG1-siRNA转染的4组的抑瘤率均明显大于无关序列转染组及未转染对照组(P＜0.01);与无关序列转染组及未转染对照组相比,BCSG1-siRNA转染的4组肿瘤组织中BCSG1蛋白的表达明显减弱;未转染细胞对照组和无关序列转染组、人乳腺浸润性导管癌组均有大量BCSG1 mRNA阳性条带,而在BCSG1-siRNA转染的4组中,仅有少量BCSG1较弱的mRNA阳性条带,与未转染细胞对照组和无关序列转染组相比,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 BCSG1-siRNA能有效抑制肿瘤的生长,下调裸鼠乳腺癌组织中BCSG1蛋白及mRNA的表达.     

卡托普利对AGS胃癌裸鼠移植瘤模型的调控作用*

 目的： 观察血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对胃癌发生与发展的调控作用,探索其应用于胃癌临床治疗的可行性。方法: 制备AGS裸鼠移植瘤模型,随机分为3组：阳性对照（5-氟尿嘧啶,5-Fu）组、对照（生理盐水）组和实验（卡托普利）组。各组分别腹腔注射或灌胃后,观察肿瘤生长情况,组织取样,采用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测Ki-67、STAT3、Bax和Bcl-2表达情况,TUNEL+DAPI染色法检测细胞凋亡。Western blotting 检测STAT3及p-STAT3表达。结果: 造模成功后,各组小鼠均出现差异不明显的肿瘤结块。14 d后,各组差异明显加大。对照组裸鼠肿瘤块生长最快,卡托普利组次之,阳性对照组最慢。实时荧光定量PCR与免疫组化检测结果显示,卡托普利组Bax较对照组表达升高,而STAT3、Ki-67以及Bcl-2的表达则降低（P<0.05）,卡托普利组上述因子表达趋势与5-Fu组表达趋势相一致,但2组间差异显著（P<0.05）;凋亡结果显示,相较于对照组,其它2组细胞凋亡率明显升高（P<0.05）; Western blotting结果也显示,5-Fu组及卡托普利组的p-STAT3与STAT3蛋白表达水平较对照组明显降低（P<0.05）。结论: 血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对AGS裸鼠胃癌有较为明显的治疗效果,推测其可能具有较为可行的应用性。其分子机制可能是通过对STAT3转录活化因子以及Bax、Bcl-2、Ki-67等的调控,促使肿瘤细胞凋亡或抑制其生长。     

表皮生长因子及其抗体对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的影响

在原代培养中添加大豆胰蛋白酶抑制剂，成功地建立了一株新的人胰腺癌细胞系ＰＣ一７。该细胞系经形态学和生物学研究证实为人胰腺癌细胞系。染色体核型分析和流式细胞ＤＮＡ含量分析表明ＰＣ一７细胞系为低二倍体。应用此细胞系建成的裸鼠移植瘤模型，观察表皮生长因子（ＥＧＦ）及其抗体（抗一ＥＧＦ）对裸鼠移植瘤生长的影响，发现ＥＧＦ组和抗一ＥＧＦ组分别是对照组肿瘤重量的１３８％和６７％。组织学和超微结构研究表明：ＥＧＦ组的核分裂明显多于对照组，而抗一ＥＧＦ组则少于对照组．结果表明ＥＧＦ促进ＰＣ一７裸鼠移植瘤的生长，而抗一ＥＧＦ抗体可部分地抑制ＰＣ一７移植瘤的生长。     

荷人鼻咽癌裸鼠血内皮抑素的水平变化

目的:探讨不同病期荷人鼻咽癌裸鼠血内皮抑素水平的变化,及其与肿瘤发展的关系。方法:采用BALB/C裸小鼠复制荷人鼻咽癌裸鼠模型,通过EIA方法测定不同病期荷人鼻咽癌裸鼠血内皮抑素的浓度,称取瘤重。结果:荷瘤鼠血中内皮抑素含量在种瘤5d组[(137.61±53.41)μg/L]或10d组[(103.06±17.33)μg/L]与正常裸鼠[(113.56±21.74)μg/L]比较未见明显差异(P>0.05),而种瘤20d组、30d组、40d组[(212.80±85.91)μg/L、(293.63±62.53)μg/L、(271.57±32.45)μg/L]显著高于正常裸鼠(P<0.05)。随着荷瘤时间的延长,瘤宿主血内皮抑素含量逐渐升高,种瘤20d组明显增高,并持续维持在高水平。瘤重与血中内皮抑素含量呈正相关关系(r=0.687)。结论:提示肿瘤的发展与血内皮抑素含量的变化可能有关。     

裸鼠荷人鼻咽癌细胞株后免疫状态的动态观察

本实验选用4～6周龄NC系裸鼠,原代用双侧颈背部皮下接种CNE-2细胞株,鼠间传代用套针双侧接种上代的新鲜瘤块,共传8代,成功率100%。动态观测裸鼠荷瘤后免疫状态变化的结果如下:(1)净体重显著减轻;(2)脾系数增大,瘤重增加,两者间高度正相关(r=0.8395);(3)脾NK活性在第5天时轻度升高,10天时开始下降,15天后显著下降;NK活性与瘤重及脾系数均呈高度负相关(r_1=-0.7132,r_2=-0.8237);(4)第5天时,脾NK细胞体外对人干扰素反应性良好,10天时仍有一定的反应性,15天后失去反应性;(5)荷瘤裸鼠牌细胞自然转化率高于对照组,而对ConA刺激的反应性低于对照组;(6)“癌克星”通过降低血清MDA、提高NK活性及增加瘤组织中单核细胞浸润而起抑瘤生长的作用。揭示在T细胞缺陷的裸鼠,其脾NK细胞是抗移植瘤生长的重要免疫活性细胞。     

~(131)I标记抗人结肠癌单克隆抗体MC_3在荷瘤裸鼠体内分布及肿瘤放射免疫显像

抗人结肠癌单克隆抗体(McAb)MC_3用~(131)Ⅰ标记后在裸鼠人肠癌模型上进行肿瘤定位和放射免疫显像研究。结果显示:体外标记抗体特异性结合率为37.5%,裸鼠体内在48～120h的ECT照相可见在肿瘤部位均有放射性的特异性浓聚,其摄取量随时间延长逐渐增加,肿瘤显影清晰,显像的合适时间为96～120h。而给予非特异性的~(131)Ⅰ-NMIgG后,肿瘤部位未见放射性浓聚,而呈全身均匀性分布。120h肿瘤组织与肝脏及正常肠组织的比值分别为3.61和9.81,肿瘤定位指数为4.26。病理组织学检查显示注射~(131)Ⅰ-MC_3裸鼠肿瘤呈大片坏死,仅局部肿瘤边缘尚存少数完整的肿瘤组织。提示McAbMC_3用于肠癌的诊断和导向治疗可能有良好的前景。     

白藜芦醇诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的研究

目的：探讨白藜芦醇诱导人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤凋亡的机制。 方法： 建立人胃癌原代细胞裸鼠移植瘤模型，采用瘤旁注射的方法，用不同剂量的白藜芦醇进行治疗，并设对照，用透射电镜和TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况，免疫组织化学法和RT-PCR法检测肿瘤组织的凋亡相关基因bcl-2和bax的表达情况。 结果： 白藜芦醇对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用； 透射电镜和TUNEL法发现白藜芦醇导致移植瘤内大量细胞发生凋亡；免疫组织化学法发现白藜芦醇注射组的Bcl-2蛋白阳性细胞率（3.92％±0.85％、5.70％±0.84％和11.86％±0.97％）明显低于两个对照组（P<0.05），两个对照组（27.56％±1.40％和29.48％±0.51％）之间无显著差异；Bax蛋白阳性细胞率（52.30％±1.54％、45.72％±0.88％和40.02％±1.20％）明显高于两个对照组（P<0.05），两个对照组（20.88％±0.91％和19.34％±0.35％）之间无显著差异； RT-PCR法发现白藜芦醇注射组的bcl-2 mRNA条带强度随剂量的增大而递减，并明显低于两个对照组（P<0.05），两个对照组之间无显著差异（P>0.05）；bax mRNA条带强度递增，并明显高于两个对照组（P<0.05），两个对照组之间无显著差异（P>0.05）。 结论： 白藜芦醇对胃癌原代细胞移植瘤有明显的抑制作用，通过下调bcl-2 的表达和上调bax 的表达而诱导胃癌裸鼠移植瘤细胞发生凋亡，是其抗胃癌作用的机制之一。     

荷人鼻咽癌裸鼠血浆MDA,cAMP／cGMP水平及PSP的影响

本实验利用ＢＡＬＢ／Ｃ裸小鼠，复制荷人鼻咽癌裸鼠模型，检测荷瘤鼠血浆丙二醛，ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值，观察云芝糖肽对荷人ＮＰＣ裸鼠的抑瘤作用及对荷瘤鼠血浆ＭＤＡ和ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ等的影响。结果发现荷瘤鼠血浆ＭＤＡ升高，ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ降低，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值升高，高你低浓度ＰＳＰ对荷人ＮＰＣ裸鼠均有明显抗癌作用（Ｐ＜０．０１），抑瘤率５９．５８－９５．５３％；并可降低荷瘤     

乳腺浸润性导管癌分子亚型与临床病理特征及预后的关系

目的 检测乳腺浸润性导管癌的临床病理特征及特定蛋白的表达情况,对其进行分型,探讨各哑型与预后的关系.方法 采用免疫组织化学EnVision法检测128例浸润性导管癌ER、PR、HER2和CK5/6的表达,参考文献报道的免疫分型方法 对其分型,并对HER2过表达型9例进行FISH检测.结果 ER、PR、HER2和CKS/6在本组128例浸润性导管癌中的阳性表达率分别为67%(86/128)、45%(58/128)、27%(34/128)和27%(34/128),并将128例分为5种免疫哑型,管腔A型55%(70/128),管腔B型20%(25/128),HER2过表达型7%(9/128),基底细胞样型10%(13/128),无法分类型8%(11/128).FISH检测HER2过表达型9例均为HER2基因扩增.各分子亚型间预后差异具有统计学意义,管腔A型预后最好,基底细胞型预后较差.多因素分析,乳腺癌临床分期和免疫分型是独立的预后因素.月经状态在乳腺癌各免疫亚型中的分布差异有统计学意义.结论 通过检测ER、PR、HER2和CK5/6的表达可以将乳腺浸润性导管癌分成具有不同生物学行为的5个免疫亚型,对于评估预后,指导治疗具有一定的意义.     

荷人鼻咽癌裸鼠血清丙二醛、自然杀伤细胞活性以及中药＂癌克星＂的影响

本实验用ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠复制人ＮＰＣ模型，检测荷人ＮＰＣ裸鼠血清ＭＤＡ和脾ＮＫ活性，以探讨瘤宿主ＮＫ活性改变的原因和可能机理，观察中药“癌克星”制剂对ＮＰＣ的抑瘤作用及对ＭＤＡ含量和脾ＮＫ活性等的影响；以探讨其抑瘤机理。结果发现荷人ＮＰＣ裸鼠血清ＭＤＡ含量（３７．９２±５．３６ｎｍｏｌ／ｍｌ）明显高于正常裸鼠（１３．９０±１．６３ｎｍｏｌ／ｍｌ）（Ｐ＜０．０１），而脾ＮＫ活性（４０．９３±２．３９）则明显低于正常裸鼠（６７．０９±６．２８）（Ｐ＜０．０１）。中药“癌克星”制剂对荷瘤鼠具明显抑瘤作用，抑瘤率２５．８５～９９．９９％；并可降低荷瘤鼠血清ＭＤＡ含量，部分提高ＮＫ活性，增加瘤组织单核细胞的浸润。本实验提示，ＦＲ可能作为免疫抑制因子之一，使ＮＫ活性下降。“癌克星”对ＮＰＣ具明显抑癌效应，其抑瘤作用可能是通过降低瘤宿主体内ＦＲ，提高机体免疫功能而实现。