宣威地区肺腺癌病人肺组织特异miRNAs表达谱和靶基因及其信号通路预测

目的 筛选出宣威地区肺腺癌病人肺组织miRNAs差异表达谱,预测其相关靶基因和信号通路.方法 选取来自宣威地区肺腺癌24例和非宣威地区肺腺癌10例患者手术切除的肺癌组织和正常肺组织标本,miRNAs芯片检测34对肺癌切除标本,筛选宣威肺腺癌miRNAs差异表达谱,AGO分析和KEGG Pathway分析预测其miRNAs的生物与肺癌相关的靶基因和信号通路.结果 miRNAs芯片检测:与非宣威肺腺癌比较,宣威肺腺癌差异表达显著的特异miRNAs34个:表达上调的miRNAs有23个,表达下调的miRNAs有11个.AGO富集分析及KEGG数据库映射分析发现:预测主要集中在PI3K/Alt信号通路附近,其预测靶基因有:GF、RTK、SOS、IRS1、BCAP、CYTOKINSR、ECM、ITGB、FAK和GBY,可能对肺癌生物学功能产生影响的靶基因主要集中在PI3K/Alt,WNT和MAPK通路.结论 筛选出这些特异性miRNAs可能在宣威肺腺癌癌变和进展中起重要作用,预测的靶基因可能与调节PI3K/Alt,WNT和MAPK信号通路的作用有关.     

抑制survivin基因表达对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的研究survivin基因与肺腺癌的关系,探讨survivin对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法合成抑制survivin基因的siRNA,通过脂质体转染到肺腺癌A549细胞中,荧光倒置显微镜下观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测各组细胞增殖和凋亡指数,Western blot检测survivin编码表达的蛋白,RT-PCR检测survivin mRNA的表达。结果抑制survivin在肺腺癌A549细胞中的表达后,能够抑制A549细胞增殖,诱导细胞的凋亡,survivin基因编码表达的蛋白明显减少。结论应用RNAi抑制survivin基因,可以抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡。survivin能作为治疗肺腺癌的一个潜在的基因靶点。     

宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力的比较研究

目的比较宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株体外培养细胞活力.方法体外培养宣威肺腺癌xwlc-05和肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取传代培养后1 d、3 d、5 d 3个时间点分别计数细胞,MTT检测3时间点细胞活力变化,并进行统计学分析比较.结果宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株各时间点比较,培养1 d、3 d、5 d组的细胞数量逐渐增加,差异有统计学意义（P〈0.05）;同时,宣威肺腺癌xwlc-05细胞株和肺腺癌A549细胞株3 d组细胞活力较1 d组增加,而5 d组的细胞活力较3 d组下降,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论不同肺腺癌细胞株体外增殖和细胞活力不完全一致.     

厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的:探讨厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549的作用.方法:survivin siRNA转染、厄洛替尼单独或联合应用于人肺腺癌细胞A549,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察对A549细胞的增殖抑制作用,免疫组化染色法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况.结果:survivin ...     

不同放射敏感性肺腺癌细胞株中DNA-PKcs蛋白的表达情况比较

目的 通过检测DNA-PKcs在肺腺癌细胞中的表达情况,探讨其与放射敏感性的关系.方法 成克隆实验分别测定肺腺癌细胞株A549、H1299照射后的剂量.存活曲线,Western blotting及DNA-PK活性分析法检测两株细胞中DNA-Pkcs的含量与活性.分析放射敏感性与DNA-PKcs的关系.结果 成克隆实验结果显示:肺腺癌细胞H1299较A549放射更敏感,SF2分别为A549:0.7412,H1299:0.2473.Western-blot显示A549和H1299积分光密度比值分别为:3.29±0.44、0.50±0.17,A549中DNA-PKcs的表达更高(t=10.37,P<0.001).DNA-PKcs活性检测结果为A549:8.29±1.37.H1299:2.47±1.09(t=5.76,P=0.005).结论 放射敏感性不同的肺腺癌细胞株中DNA-Pkcs的表达不同.提示DNA-PKcs可能是影响肺腺癌细胞放射敏感性的重要因素.

Abstract：

Objective To investigate DNA-dependent protein kinase catalytic subunit (DNA-PKcs) content and activity in lung adenocarcinoma cell lines and its correlation with radiosensitivity. Methods The content and activity of DNA-PKcs were analyzed in two lung adenocarcinoma cell lines A549 and H1299 by Western blotting and the Signa TECT DNA-PK assay kit. The dose-survival relationship for two cell lines was analyzed using clonogenic formation assay. Results A549 was more radiosensitive than H1299. The survival fractions at 2 Gy (SF2) were 0.7412 in A549 cell line and 0.2473 in H1299 cell line. The content of DNA-PKcs was significantly higher in A549 cells than in H1299 cells (t=10.37, P<0.001). The integrated optical densities were 3.29±0.44 in A549 cells and 0.50±0.17 in H1299 cells. DNA-PKcs activities in A549 and H1299 cells were 8.29±1.37 and 2.47±1.09, respectively, showing a significant difference between them (t=5.76, P=0.005). Conclusion DNA-PKcs is an important factor to affect the radiosensitivity of lung adenocarcinoma cell lines.     

肺腺癌A549细胞中Nestin的表达

目的探讨nestin在肺腺癌A549细胞中的表达及意义.方法体外培养肺腺癌A549细胞株,用免疫组化检测肺癌标记物及nestin表达.结果四个肺癌标记物中鼠抗人p63蛋白,鼠抗人细胞角蛋白7,鼠抗人甲状腺转录因子染色阳性,nestin在肺腺癌A549细胞中部分细胞表达.结论肺癌细胞中存在部分神经干细胞的标记物nestin.     

相近分化的肺鳞癌和腺癌中PCNA及EGFR表达的研究

探讨ＰＣＮＡ和ＥＧＦＲ在肺鳞癌、腺癌中的表达及与癌组织分型，淋巴结转移等方面的关系。方法：用免疫组化Ｓ－Ｐ法分别对４４分分化相近肺癌组织、１６例正常肺组织ＰＣＮＡ和ＥＧＦＲ的表达进行检测。结果：肺癌组织ＰＣＮＡ和ＥＧＦＲ的表达明显高于正常肺组织。鳞癌与腺癌比较，ＰＣＮＡ和ＥＧＦＲ表达无统计学差异。（Ｐ〉０．０５）。淋巴结转移阳性癌组织ＰＣＮＡ和ＥＧＦＲ表达与淋巴 结转移阴性癌的组织比较，无学差异（     

肺腺癌及肺鳞癌MRP-mRNA的表达及临床意义

目的：观察３０例肺癌组织及癌旁肺组织ＭＲＰ的表达。方法：ＲＴ－ＰＣＲ方法。结果：４３．３３％的肺癌组织表达ＭＲＰ,且ＭＲＰ的表达与细胞分化程度有关,低分化者ＭＲＰ的表达明显高于中高分化者（Ｐ〈０．０５）。腺癌的表达（６２．５％）高于鳞癌（２１．４３％,Ｐ＝０．０５８）,ＭＲＰ的表达与临床分期无关（Ｐ＝０．５１１）。结论：４３．３３％的肺癌组织表达ＭＲＰ,ＭＲＰ的表达可能与肺癌的耐药有关。     

E-cadherin在肺腺癌中的差异性表达

目的探讨E-cadherin mRNA及其编码蛋白在肺腺癌中的表达是否存在差异性。方法选取肺腺癌20例,应用RT-PCR法和WESTERN-BLOT法分别检测肺腺癌区和正常区E-cadherin mRNA及其编码蛋白表达情况。结果肺腺癌中E-cadherin mRNA水平与蛋白水平存在明显不一致的情况,即尽管40%的肺腺癌病例的E-cadherin在mRNA水平有表达,但在蛋白水平却难以检出。结论在肺腺癌细胞内很可能存在某种转录后调节(沉默)机制,如RNA选择性剪接、microRNA。因此,该文为深入研究E-cadherin的表达调节机制及其肿瘤生物学意义提供颇有价值的线索。     

宣威昆明两地肺癌ras基因表达及突变的比较研究

目的 :比较ras基因在宣威、昆明两地肺癌中遗传变异的差异性 .方法 :采用免疫组化染色和PCR -SSCP -DNA直接测序技术 ,对 4 5例宣威地区肺癌和 4 5例昆明地区肺癌石蜡包埋组织标本中ras蛋白的表达及k -ras基因 12密码子突变进行检测 .结果 :5 5例 (5 5 / 90 )ras蛋白表达阳性 ,其中宣威肺癌组 31例 ,昆明肺癌组 2 4例 ,2 8例 (2 8/ 90 )检测到k -ras基因 12密码子突变 .对ras基因在两组肺癌中的表达及突变进行比较分析表明 :ras蛋白表达及k -ras基因 12密码子突变在宣威肺癌组中高于昆明肺癌组 ,但差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,ras蛋白在Ⅰ期肺癌病例以及腺癌病例中的表达 ,宣威肺癌组均高于昆明肺癌组 ,差异有统计学意义 (P =0 0 4 5 ,χ2 =4 5 72 ,P =0 0 32 ) .结论 :ras基因的激活是肺癌发生过程中常见的分子生物学事件 ;宣威地区肺癌与昆明地区肺癌相比 ,ras蛋白在Ⅰ期病例以及腺癌病例中的表达存在着差异 .k -ras基因 12密码子在宣威地区肺癌中的突变与昆明地区肺癌相比无明显特异性     

新型抗凋亡基因survivin在肺癌组织中表达及意义

目的：探讨survivin蛋白在肺癌中表达及其意义。方法：应用免疫组化S-P法检测24例正常肺组织和46例肺癌survivin蛋白表达。结果：survivin在正常肺组织和肺癌中表达率分别为3／24（12．5％）和26／46（56．5％）（P〈0．005），survivin基因表达与患者年龄、组织类型、细胞分化、临床分期及淋巴结转移无明显关联（P〉0．05），survivin表达阳性的肺癌患者3年生存率较低，有显著性意义（P〈0．05）。结论：survivin基因表达上调与肺癌发生的早期过程有关，survivin表达可作为估计肺癌患者预后及术后综合治疗的生物学指标。     

Survivin在子宫内膜异位症的表达及意义

目的:探讨凋亡抑制基因survivin在子宫内膜异位症中的表达及意义.方法:应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法),检测40例子宫内膜异位症异位子宫内膜组织中survivin蛋白的表达,并与正常在位子宫内膜组织25例进行对照.结果:子宫内膜异位症异位内膜组织中survivin蛋白阳性表达率为67.5%,明显高于正常在位内膜组织的阳性表达率4.2%(P＜0.01),并且异位内膜组织中survivin蛋白表达与月经周期无相关性(P＞0.05).结论:survivin在子宫内膜异位症异位内膜中高表达;并且可能通过抑制异位内膜细胞凋亡,对子宫内膜异位症的发生、发展起作用.     

脑膜瘤组织中survivin的表达及意义

目的：探讨凋亡抑制基因survivin在脑膜瘤的表达及意义.方法：应用免疫组织化学SP法,检测60例脑膜瘤瘤组织中survivin蛋白的表达,并结合临床病理参数进行综合分析.结果：脑膜瘤Ⅰ级中survivin蛋白表达率为32.0%,脑膜瘤Ⅱ级为60.0%,脑膜瘤Ⅲ级为86.7%,各级之间survivin蛋白表达率的差异有统计学意义（P＜0.05）,并且survivin蛋白的表达与肿瘤的侵袭行为、瘤周水肿显著相关（p〈0.05）.结论：survivin在脑膜瘤的表达与其恶性程度有关,随恶性程度升高而增高.因此survivin可能通过抑制肿瘤细胞凋亡,对脑膜瘤的恶性化起一定作用.     

survivin mRNA在胆管癌病人血清中的表达和意义

目的 检测胆管癌病人血清中survivin mRNA的表达,探究其临床意义. 方法 应用RT-PCR检测20例胆管癌患者、41例良性胆道疾病患者、10例健康志愿者血清中survivin mRNA的表达,并与胆管癌的病理分级进行相关性分析. 结果 在20例胆管癌病人、41例良性胆道疾病病人、10例健康人血清中,survivin mRNA的阳性表达率分别为85.0%(17/20)、21.9%(9/41)、0(0/10),前者血清中survivin mRNA的阳性表达水平明显高于后两者血清中的阳性表达水平(P<0.05).对胆管癌病人的病理分级进行相关性分析显示,其血清中survivin mRNA的表达与病理分级无相关性. 结论 在绝大多数胆管癌病人血清中都表达survivin mRNA,可以做为诊断胆管癌的一种新型肿瘤标记物.     

Survivin基因的表达在小儿急性白血病中的意义

目的:了解survivin基因的表达在小儿急性白血病发病过程中的意义.方法:用RT-PCR测定小儿急性白血病初诊患者survivin基因的表达,并结合临床特征、初步治疗反应进行比较.共研究了54例小儿白血病患儿并以36例非恶性血液病为对照,根据survivin基因的阳性和阴性分为2组,分析其临床特征和早期的治疗反应.结果:Survivin基因在非恶性血液病组中无1例被检出,白血病组中共41例被测出,明显高于对照组(P＜0.001).survivin基因阳性组的早期治疗反应好的病例数明显低于阴性病例组(P＜0.01).结论:测定survivin基因对诊断、判断预后、残留白血病的检测意义较大.     

survivin在病理性瘢痕中的表达及与微血管生成的关系

目的:探讨survivin在病理性瘢痕发生发展中的作用及与微血管生成的关系。方法:采用免疫组织化学检测10例正常皮肤组织、23例增生性瘢痕和30例瘢痕疙瘩组织中survivin和CD34的表达,并计数微血管密度(MVD),分析病理性瘢痕中survivin的表达与血管生成的关系。结果:survivin在正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中表达的阳性率分别为0(0/10)、34.78%(8/23)和66.67%(20/30);瘢痕疙瘩中survivin阳性表达明显高于增生性瘢痕和正常皮肤组;瘢痕疙瘩中,随survivin表达增强,MVD逐渐增高,呈正相关。结论:survivin蛋白在病理性瘢痕组织中表达上调,并与微血管生成关系密切,提示survivin与病理性瘢痕的发生发展过程有关。     

凋亡抑制因子survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的研究凋亡抑制因子survivin在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其临床意义.方法采用免疫组化法(S-P法),检测54例BTCC和8例正常膀胱组织中survivin的表达,分析其表达情况并与肿瘤病理学分级、临床分期和患者复发等情况的关系.结果 Survivin在正常膀胱组织中不表达,在BTCC中有不同程度表达,其表达随BTCC的病理分级、临床分期的增高而相应增高,复发BTCC表达明显增高.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级BTCC表达率分别为54.5%、75.0%、81.8% (P<0.05);浅表性(T1～T2)、浸润性(T3～T4) BTCC表达率分别为69.6%、87.5% (P<0.05);未复发、复发BTCC表达率为61.8%、90.0% (P<0.01).结论 Survivin在BTCC组织中表达上调, survivin随BTCC病理分级、分期增高而表达增高,并与肿瘤复发有关.Survivin有望成为判断分级、分期和监测复发的指标.     

凋亡抑制蛋白livin在人胃癌中的表达以及和survivin表达的关系

目的:探讨胃癌组织中凋亡抑制蛋白livin表达情况及其与各临床病理因素的关系,以及和凋亡抑制蛋白survivin表达的相关性。方法:采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中livinα、livinβ和survivin的mRNA的表达,并用westernblot分析livin和survivin蛋白的表达。结果:40例胃癌组织中livin表达阳性率为47.5%、survivin为60%,而在正常和癌旁组未检出阳性结果;livin的表达与组织分化和淋巴结转移有关,组织分化差,淋巴结转移者livin表达率高(P<0.05);24例survivin阳性样本中有14例livin呈阳性。结论:livin在胃癌组织中表达增高,可作为胃癌的分子标志物,可能成为胃癌治疗的新分子靶点,livin表达和survivin表达在本实验中结果显示没有相关性(P>0.05)。     

结肠癌组织中survivin与p53表达的相关性研究

目的研究survivin在结肠癌发生、发展中的作用及其与p53表达的关系。方法应用免疫组化SP法检测survivin、p53在32例正常结肠黏膜组织、96例结肠癌组织中的表达。结果survivin在结肠癌组织中的阳性表达显著高于正常结肠黏膜组织（P〈0．01），结肠癌浸润浆膜层组的survivin阳性表达明显高于浸润肌层组（P＜0．05），结肠癌伴淋巴结转移组的survivin阳性率显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05），survivin表达与结肠癌的Dukes分期密切相关（P〈0．05），p53阳性组的survivin阳性表达明显高于p53阴性组（P〈0．01）。结论survivin可作为结肠癌的诊断标记物，检测结肠癌组织中survivin的表达可作为判断结肠癌转移及预后的参考指标。在结肠癌组织中survivin的表达与p53的表达密切相关，survivin和p53在结肠癌的发生发展过程中起协调作用。