大鼠小脑皮质内神经肽Y能神经元的形态与分布小脑的运动学习、记忆及整合功能

背景神经肽Y能神经元分布于大脑皮质、尾壳核、边缘系统、丘脑、脑干等多个部位,与运动的学习、记忆及高级整合功能有关;小脑具有通过学习而重新组合的能力,研究大鼠小脑皮质内神经肽Y阳性神经元的形态与分布,可对小脑皮质运动学习的形态学基础有所了解.目的研究大鼠小脑皮质内神经肽Y免疫阳性神经元的形态与分布,探讨神经肽Y能神经元与小脑运动学习、记忆的关系.设计以动物为研究对象,单一样本研究.单位新乡医学院解剖学教研室、病理生理教研室和形态中心.材料实验于2001-07/12在新乡医学院形态中心进行.清洁级SD大鼠10只,雌雄不限,体质量100～200g.方法腹腔麻醉后,升主动脉灌注固定,开颅取小脑,人相同固定液中后固定48 h,常规石蜡包埋;沿小脑矢状面作连续切片.神经肽Y免疫组化染色,阳性对照采用大鼠大脑切片;阴性对照用正常小牛血清替代第一抗体,0.01 mol/L磷酸盐缓冲液替代第二抗体.光镜下观察,显微照相.主要观察指标观察大鼠小脑皮质内神经肽Y能神经元的形态与分布.结果大鼠小脑内神经肽Y免疫阳性神经元分布在皮质的Purkinje细胞层,胞体呈梨形或烧瓶状,细胞核清晰不染色,轴突伸向颗粒层,树突呈网状伸向分子层,突起未见染色.分子层和颗粒层未见阳性细胞,但可见神经纤维的存在.结论小脑Purkinje细胞层内神经肽Y阳性神经元可能与运动学习、记忆、内脏活动及高级整合功能有关.     

雌激素对去卵巢大鼠小脑皮质内脑源性神经营养因子及神经肽Y表达的影响

目的探讨雌激素对大鼠小脑皮质内脑源性神经营养因子(BDNF)、神经肽Y(NPY)表达水平的影响。方法成年雌性大鼠分为3组:正常对照组(INT组),去卵巢组(OVX组)及雌激素处理组(E组)。用放射免疫分析方法检测血中雌二醇含量,运用免疫组织化学方法检测小脑皮质内BDNF、NPY的表达水平。结果去卵巢大鼠体内雌激素水平与对照组比较明显降低(P<0.001);BDNF免疫阳性反应物分布于小脑皮质的蒲肯野氏细胞层,分子层及颗粒细胞层可见散在阳性细胞。NPY阳性产物主要定位于蒲肯野细胞中。去卵巢大鼠小脑皮质BDNF、NPY的表达强度及阳性细胞数量较对照组明显降低(P<0.001),E组较OVX组阳性产物的强度和阳性细胞数目明显回升(P<0.001),但仍低于对照组。结论雌激素可促进大鼠小脑皮质内BDNF、NPY的表达,在维持和保护小脑神经元的结构和功能中发挥重要作用。     

神经肽Y的记忆调节作用与运动

目的：分析神经肽Y的记忆调节作用与运动的关系，以期为合理的运动增强机体的学习记忆能力提供理论支持。资料来源：应用计算机检索Medline1982-01／2005—10期间的相关文章，检索词“neuropeptideY，memory，exercise”，并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊网1990-01／2005—12期间的相关文章，检索词“神经肽Y，记忆，运动”，限定文章语言种类为中文。资料选择：选取实验包括运动组和对照组神经肽Y变化比较的相关文献，进行初审，删除明显与记忆功能无关的研究。然后，查找余下文献的全文，进一步判断是否为运动对记忆的作用。纳入标准：①与记忆有关，无论形态上或是功能上相关；②与运动有关，并涉及其机制研究。排除标准：运动与记忆之间没有建立关联的实验。文献质量评价主要考察资料的真实性和实验的严谨性。资料提炼：共检索到56篇相关文献，其中20篇文献根据相应标准采纳，其余文献均被排除。资料综合：神经肽Y作为神经调节因子广泛地分布在中枢及外周神经系统，对机体的学习记忆具有调节作用。运动可通过调节机体内神经肽Y的变化来调节机体的学习记忆能力。结论：神经肽Y在学习记忆中有重要作用。运动可以使机体内的神经肽Y产生变化，但只有适宜的运动才可以提高机体的学习记忆能力。目前关于运动与神经肽Y的研究还较少，其具体作用机制仍需要进一步探索。     

电磁脉冲辐照后大鼠小脑、海马中一氧化氮合酶的变化

目的拟从观察电磁脉冲（ＥＭＰ）辐照后大鼠小脑、海马中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的表达情况，探讨ＥＭＰ所致大鼠学习、记忆能力改变的可能机制。方法采用ＳＰ免疫组织化学染色检测ＥＭＰ辐照后大鼠小脑、海马组织中ＮＯＳ阳性神经元的变化。结果ＥＭＰ辐照后１．５、２４ｈ海马中ＮＯＳ阳性神经元数目较对照组显著下降，且着色变浅，照后４８ｈＮＯＳ阳性神经元数目恢复至对照水平，但着色仍浅。小脑中ＮＯＳ阳性细胞在照后无明显变化。结论ＮＯＳ在ＥＭＰ所致大鼠学习、记忆功能障碍过程中起一定作用     

高功率微波辐射对大鼠脑皮质及海马神经肽Y、nNOS表达的影响

目的：探讨高功率微波（HPM）辐射对大鼠脑皮质和海马形态结构以及神经元神经肽Y（NPY）、神经型-氧化氮合酶（nNOS）表达的影响。方法：分别采用10，30和100mW／cm^2HPM辐射Wistar大鼠，并于微波辐射后6h，1d，3d，7d，14d和28d时处死，同时取出大脑皮质和海马组织。通过HE染色观察实验大鼠脑皮质及海马的形态结构改变情况；采用免疫组化和图像分析技术检测实验大鼠脑皮质和海马神经元NPY、nNOS表达的变化。结果：实验大鼠经10，30，100mW／cm^2HPM辐射后，其脑皮质及海马区神经元固缩、深染；HPM辐射后3d时，大鼠神经元胞浆内nNOS表达显著增加（P〈0.05），NPY表达显著降低（P〈0.01）。结论：10，30及100mW／cm^2HPM辐射可引发大鼠脑皮质和海马神经元损伤，致使其NPY及nNOS表达异常。     

神经肽Y的记忆调节作用与运动

目的:分析神经肽Y的记忆调节作用与运动的关系,以期为合理的运动增强机体的学习记忆能力提供理论支持。资料来源:应用计算机检索Medline1982-01/2005-10期间的相关文章,检索词“neuropeptideY,memory,exercise”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊网1990-01/2005-12期间的相关文章,检索词“神经肽Y,记忆,运动”,限定文章语言种类为中文。资料选择:选取实验包括运动组和对照组神经肽Y变化比较的相关文献,进行初审,删除明显与记忆功能无关的研究。然后,查找余下文献的全文,进一步判断是否为运动对记忆的作用。纳入标准:①与记忆有关,无论形态上或是功能上相关;②与运动有关,并涉及其机制研究。排除标准:运动与记忆之间没有建立关联的实验。文献质量评价主要考察资料的真实性和实验的严谨性。资料提炼:共检索到56篇相关文献,其中20篇文献根据相应标准采纳,其余文献均被排除。资料综合:神经肽Y作为神经调节因子广泛地分布在中枢及外周神经系统,对机体的学习记忆具有调节作用。运动可通过调节机体内神经肽Y的变化来调节机体的学习记忆能力。结论:神经肽Y在学习记忆中有重要作用。运动可以使机体内的神经肽Y产生变化,但只有适宜的运动才可以提高机体的学习记忆能力。目前关于运动与神经肽Y的研究还较少,其具体作用机制仍需要进一步探索。     

N-甲基-D-天冬氨酸2A/B受体亚型在大鼠丘脑前核和扣带后回的表达

目的:观察N-甲基-D-天冬氨酸2A/B受体亚型是否在丘脑前核和扣带后回表达,为其在基因分子基础上确定参与学习记忆信号转导的细胞膜受体机制提供形态学依据。方法:实验于2006-04/09在大连医科大学解剖学教研室神经生物学研究室完成。选取体质量250～300g的Wistar大鼠10只腹腔麻醉,冲洗后灌注固定,取脑后震动连续冠状切片,每隔3张选1张行免疫组织化学染色,实验切片滴加兔抗N-甲基-D-天冬氨酸2A/B,空白对照切片采用磷酸盐缓冲液代替兔抗N-甲基-D-天冬氨酸2A/B,观察N-甲基-D-天冬氨酸2A/B受体抗体阳性神经元的区域分布和特点。结果:①丘脑前背侧核和前腹侧核N-甲基-D-天冬氨酸2A/B受体抗体阳性神经元密集均匀分布。②扣带后回皮质区域N-甲基-D-天冬氨酸2A/B受体抗体阳性神经元在不同大脑皮质分布有差异,在分子层染色最弱,外颗粒层密集分布且染色增强,外锥体细胞层、内颗粒层、节细胞层和多形细胞层较外颗粒层松散,染色细胞减少。③空白对照切片为阴性,未见N-甲基-D-天冬氨酸2A/B表达阳性神经元胞体。结论:N-甲基-D-天冬氨酸2A/B受体亚型在丘脑前核和扣带后回表达并广泛分布。     

大鼠学习记忆能力和特定脑区的抗氧化酶活性

背景：学习记忆是一个十分复杂的生物现象，参与学习记忆的物质以及与学习记忆有关的脑区虽然研究较多，但是，其机制仍没有完全阐明。目的：探讨不同学习记忆能力大鼠的不同脑区抗氧化酶活性的差异，以揭示学习记忆能力与特定脑区抗氧化酶活性的关系。设计：以实验动物为对象，完全随机设计实验。单位：济宁医学院生物化学教研室。材料：实验于2001-03／2004-01在济宁医学院生化教研室及苏州医学院完成。Mstar大鼠40只，15月龄，雄性，体质量580～650g。干预：学习记忆能力的检测在MG-2型三等分辐射式迷宫中进行。大鼠受电击后直接逃至安全区为正确反应，连续10次有9次正确即达到了学会的标准，观察指标有达标所需反应次数及正确反应率。达标所需反应次数低于(或等于)40次者为学习能力好。否则为学习能力差。24h后重复检验，观察其记忆保持情况。连续3次均能正确反应者为记忆能力好，否则为记忆能力差。学习能力、记忆能力均好组(10只)；学习能力、记忆能力均差组(12只)。其余被淘汰掉。主要观察指标：两组大鼠大脑皮质、小脑、纹状体、海马、下丘脑5个脑区超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果：学习记忆能力均差的大鼠与学习记忆能力均好的大鼠比较：皮质、海马、纹状体超氧化物歧化酶活性显著降低(t=3．82。4．50．6．76，P&;lt;0．01)；过氧化氢酶活性在皮质、海马、纹状体、下丘脑4个脑区均显著降低(t=4．75，7．06，10．88，17．28，P&;lt;0．001)；各脑区谷胱甘肽过氧化物酶活性两组间无统计学差异。结论：海马、皮质、纹状体、下丘脑可能均参与学习记忆过程，这些脑区的抗氧化酶活性与学习记忆密切相关。     

一氧化氮合酶阳性神经元与小鼠学习记忆障碍的关系

背景：通过竞争性抑制一氧化氮合酶(mitric oxide synthase，NOS)，可损害大鼠的学习记忆行为，表明NO／NOS对维持正常的学习记忆功能是必需的，但有关学习记忆障碍时NOS神经元的变化尚不十分清楚。目的：探讨NOS神经元与学习记忆障碍的关系。设计：完全随机设计，对照实验研究。地点和材料：本研究地点为中南大学湘雅医学院人体解剖学和神经生物学系，材料为健康昆明雄性小鼠32只，6～8周龄，体质量20—25g，购于湖南医科大学动物学部。干预：32只小鼠随机分为模型组和对照组，每组各取7d和14d两个时间点，每个时间点各8只小鼠。采用辐射式三等份Y型迷宫测试装置，检测动物的空间辨别性学习记忆能力。应用免疫组化结合组织化学方法显示学习记忆障碍小鼠脑中NOS神经元的变化。主要观察指标：检测动物的空间辨别性学习记忆能力，观察切片NOS神经元形态并计数。结果：随训练次数的增加，对照组小鼠在Y型迷宫中的正确次数逐渐增加(术前第1天8．3&;#177;1．2，术后第7天10．1&;#177;1．0)，而模型组小鼠术后在Y型迷宫测试中的正确次数较术前(8．3&;#177;1．2)明显减少(术后第7天4．7&;#177;2．4，P&;lt;0．05)，与对照组同时间点相比，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)；但术后14d模型组小鼠在迷宫测试中的正确次数渐有增加(9．3&;#177;0．7)。学习记忆障碍小鼠海马CA1-4区NOS神经元数目显著减少，齿状回颗粒细胞层和梨状区皮质外颗粒细胞层内出现大量新的NOS神经元。结论：海马内NOS神经元与小鼠学习记忆有重要关系；梨状区皮质和齿状回颗粒细胞层内出现新的NOS神经元可能是学习记忆障碍后的代偿性反应。它们可能在随后的学习记忆功能恢复中发挥了重要作用。     

老年性学习记忆减退与大鼠脑发育过程中周期素依赖性蛋白激酶5的表达

背景：周期素依赖性蛋白激酶5是周期素依赖性蛋白激酶家族的成员之一，脑发育过程中周期素依赖性蛋白激酶5mRNA及其蛋白在脑内的表达及分布状况与神经退行性变思维认知学的关系一直被研究者关注。目的：探讨大脑发育过程中的周期素依赖性蛋白激酶5对神经系统的发生和退行性变的影响。设计：单因素方差分析实验。单位：解放军第一军医大学组织学与胚胎学教研室和神经生物学教研室。材料：实验在解放军第三军医大学组织学与胚胎学实验室完成。Wistar大鼠胚胎期（E8-E21）、新生期（P0-P15）、幼年期（P16-2个月）、成年期（〉2个月）及老年期（〉8个月后）5个阶段25只大鼠，每组5只。方法：采用胚胎期至老年期大鼠脑片行原位杂交组织化学和免疫细胞化学染色。主要观察指标：不同脑区内周期素依赖性蛋白激酶5mRNA及其蛋白的阳性细胞分布及表达状况。结果：25只大鼠全部进入结果分析。①周期素依赖性蛋白激酶5mRNA在大鼠E14-P350整个发育过程中均有表达，成年后趋于稳定；周期素依赖性蛋白激酶5mRNA主要定位于神经元，阳性区域主要分布于大脑皮质、海马、丘脑、下丘脑、小脑及部分神经核团。②出生后周期素依赖性蛋白激酶5表达较强，胚胎及老年鼠表达较弱；阳性区域集中在室周区、海马、小脑及部分神经核团内；老年鼠仅在海马、小脑蒲肯野细胞层内表达。结论：脑内周期素依赖性蛋白激酶5的作用贯穿了整个神经发育的各个时期，在新生期、幼年期有较为显著的表达，成年后表达下降，尤以老年期显著。老年大鼠海马内周期素依赖性蛋白激酶5的表达下调可能与老年性学习记忆减退的发生密切相关。     

大鼠杏仁皮质核内γ-氨基丁酸与一氧化氮共存神经元分布及对痛觉信息传递的调控

背景大鼠杏仁复合体分布有较多的还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元,γ-氨基丁酸也是广泛地存在于哺乳动物中枢神经系统的一种重要的抑制性神经递质,γ-氨基丁酸与一氧化氮合酶是否在大鼠杏仁复合体内共存目前尚不清楚.目的采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学和免疫组化双重染色相结合的方法,观察杏仁皮质核内是否存在γ-氨基丁酸与还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶共存的神经元.设计以实验动物为研究对象,验证性对照研究.单位两所大学的解剖教研室.材料实验于2004-05/06在浙江大学医学院解剖教研室完成.选择SD大鼠6只,雌雄不拘,体质量250～300 g.干预制备大鼠脑组织冠状连续冰冻切片,取4套切片分别用作尼氏染色、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学和γ-氨基丁酸免疫组化双重染色以及检查抗体特异性的对照实验.计数杏仁皮质核核团内γ-氨基丁酸标记神经元数目、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元数目以及还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶/y-氨基丁酸双标神经元的数目,计算出双标阳性神经元数占单标阳性神经元数的百分比.内氏染色用作核团定位.主要观察指标还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶和γ-氨基丁酸双标和单标神经元分布情况.结果显示γ-氨基丁酸阳性神经元多散在分布于杏仁皮质后内侧核、杏仁皮质后外侧核,以小型为主,中型较少,还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元多散在分布于杏仁皮质后内侧核、杏仁皮质后外侧核,杏仁皮质前核以中、小型神经元为主,双标神经元(γ-氨基丁酸/还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶均阳性)多散在分布于杏仁皮质后外侧核,以中、小型神经元为主.还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶和γ-氨基丁酸双标神经元与单标神经元的比例分别24.5%(γ-氨基丁酸),46.7%(还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶).结论大鼠杏仁皮质核内有γ-氨基丁酸与还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶共存的神经元,提示一氧化氮对杏仁皮质核内的γ-氨基丁酸能神经元可能有调控作用.     

大鼠杏仁皮质核内γ-氨基丁酸与一氧化氮共存神经元分布及对痛觉信息传递的调控

背景:大鼠杏仁复合体分布有较多的还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元,γ-氨基丁酸也是广泛地存在于哺乳动物中枢神经系统的一种重要的抑制性神经递质,γ-氨基丁酸与一氧化氮合酶是否在大鼠杏仁复合体内共存目前尚不清楚.目的:采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学和免疫组化双重染色相结合的方法,观察杏仁皮质核内是否存在γ-氨基丁酸与还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶共存的神经元.设计:以实验动物为研究对象,验证性对照研究.单位:两所大学的解剖教研室.材料:实验于2004-05/06在浙江大学医学院解剖教研室完成.选择SD大鼠6只,雌雄不拘,体质量250～300 g.干预:制备大鼠脑组织冠状连续冰冻切片,取4套切片分别用作尼氏染色、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学和γ-氨基丁酸免疫组化双重染色以及检查抗体特异性的对照实验.计数杏仁皮质核核团内γ-氨基丁酸标记神经元数目、还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元数目以及还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶/y-氨基丁酸双标神经元的数目,计算出双标阳性神经元数占单标阳性神经元数的百分比.内氏染色用作核团定位.主要观察指标:还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶和γ-氨基丁酸双标和单标神经元分布情况.结果:显示γ-氨基丁酸阳性神经元多散在分布于杏仁皮质后内侧核、杏仁皮质后外侧核,以小型为主,中型较少,还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶阳性神经元多散在分布于杏仁皮质后内侧核、杏仁皮质后外侧核,杏仁皮质前核以中、小型神经元为主,双标神经元(γ-氨基丁酸/还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶均阳性)多散在分布于杏仁皮质后外侧核,以中、小型神经元为主.还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶和γ-氨基丁酸双标神经元与单标神经元的比例分别24.5%(γ-氨基丁酸),46.7%(还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶).结论:大鼠杏仁皮质核内有γ-氨基丁酸与还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶共存的神经元,提示一氧化氮对杏仁皮质核内的γ-氨基丁酸能神经元可能有调控作用.     

去松果体大鼠学习能力、大脑皮质胆碱能纤维及一氧化氮合酶的变化

目的:探讨松果体功能减退对大鼠学习能力、大脑皮质胆碱能纤维分布以及一氧化氮合酶表达影响。方法:实验于1997-07/2000-06在珠江医院神经内科实验室完成。选择经Y型迷宫测试学习正常的雄性SD大鼠12只,随机分两组,实验组6只,行松果体摘除术,对照组6只行假手术。①学习能力测试:大鼠学习能力测试用三等分Y型迷宫进行,以大鼠学习尝试次数表示。②采用酶组织化学法测乙酰胆碱酯酶表达,采用SABC法检测神经元型一氧化氮合酶表达。③乙酰胆碱酯酶纤维定量分析:采用LeicaDiaplan显微镜及LeicaQuantimet500 图像分析仪,测量单位面积内乙酰胆碱酯酶的密度,定量参数为每374693.656μm2内乙酰胆碱酯酶纤维覆盖面积(μm2)。运动皮质,体感皮质测量第Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ层,海马为CA1,CA2,CA3区的辐状层、腔隙层、分子层和齿状回多形细胞层。皮质神经元型一氧化氮合酶表达以每只大鼠随机取相同部位的3张切片,共计6张切片,光镜下分别随机选右侧皮质、内侧隔核-斜角带核、纹状体、海马区各部位相邻4个视野(×400),统计神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数。结果:纳入动物12只,均进入结果分析。①大鼠学习能力测试:术前实验组大鼠学习能力(14.67±4.97)次,与对照组(14.33±4.32)次基本一致(P>0.05),松果体摘除40d后大鼠学习能力(28.67±2.42)次,比术前自身对照及术后对照组(13.83±8.33)次明显下降(P<0.01)。②大鼠大脑皮质中乙酰胆碱酯酶纤维密度测定结果:实验组各部位均比对照组明显降低[实验组运动皮质、体感皮质、海马CA1,CA2,CA3区和齿状回多形细胞层纤维密度分别为(15244±1339),(14764±1391),(12991±970),(15077±1020),(19546±1489),(19337±1378)μm2,对照组分别为(21001±1021),(17930±2225),(17260±1342),(18911±1048),(24108±1671),(22917±1909)μm2,P<0.01]。③不同脑区神经元型一氧化氮合酶表达:实验组大鼠大脑皮质含有较多神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数,细胞数为(5.90±0.68)个,并以体感皮质稍多于运动皮质,多于对照组(3.68±0.39)个(P<0.05);隔核-斜角带核部神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数(16.21±2.03)个,明显多于对照组(9.32±1.05)个(P<0.01);海马部神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数(4.27±0.75)个、纹状体区(9.35±2.58)个,与对照组(3.94±0.53)个和(8.96±2.31)个相比差异无显著性(P>0.05)。结论:大鼠松果体摘除可以引起大鼠学习能力障碍,其原因可能与大脑皮质、隔核-斜角带核神经元型一氧化氮合酶过度表达,引起一氧化氮神经毒性致胆碱能神经元受损伤有关。     

去松果体大鼠学习能力、大脑皮质胆碱能纤维及一氧化氮合酶的变化

目的：探讨松果体功能减退对大鼠学习能力、大脑皮质胆碱能纤维分布以及一氧化氮合酶表达影响。方法：实验于1997—07／2000—06在珠江医院神经内科实验室完成。选择经Y型迷宫测试学习正常的雄性SD大鼠12只，随机分两组，实验组6只，行松果体摘除术，对照组6只行假手术。①学习能力测试：大鼠学习能力测试用三等分Y型迷宫进行，以大鼠学习尝试次数表示。②采用酶组织化学法测乙酰胆碱酯酶表达，采用SABC法检测神经元型一氧化氮合酶表达。③乙酰胆碱酯酶纤维定量分析：采用Leica Diaplan显微镜及Leica Quantimet 500&;#177;图像分析仪，测量单位面积内乙酰胆碱酯酶的密度，定量参数为每374693．656μm^2内乙酰胆碱酯酶纤维覆盖面积（μm^2）。运动皮质，体感皮质测量第Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ层，海马为CA1，CA2，CA3区的辐状层、腔隙层、分子层和齿状回多形细胞层。皮质神经元型一氧化氮合酶表达以每只大鼠随机取相同部位的3张切片，共计6张切片，光镜下分别随机选右侧皮质、内侧隔核一斜角带核、纹状体、海马区各部位相邻4个视野（&;#215;400），统计神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数。结果：纳入动物12只，均进入结果分析。①大鼠学习能力测试：术前实验组大鼠学习能力（14．67&;#177;4．97）次，与对照组（14．33&;#177;4．32）次基本一致（P〉0．05），松果体摘除40d后大鼠学习能力（28．67&;#177;2．42）次，比术前自身对照及术后对照组（13．83&;#177;8．33）次明显下降（P（0．01）。②大鼠大脑皮质中乙酰胆碱酯酶纤维密度测定结果：实验组各部位均比对照组明显降低[实验组运动皮质、体感皮质、海马CA1，CA2，CA3区和齿状回多形细胞层纤维密度分别为（15244&;#177;1339），（14764&;#177;1391），（12991&;#177;970），（15077&;#177;1020），（19546&;#177;1489），（19337&;#177;1378）μm^2，对照组分另4为（21001&;#177;1021），（17930&;#177;2225），（17260&;#177;1342），（18911&;#177;1048），（24108&;#177;1671），（22917&;#177;1909）μm^2，P（0．01]。③不同脑区神经元型一氧化氮合酶表达：实验组大鼠大脑皮质含有较多神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数，细胞数为（5．90&;#177;0．68）个，并以体感皮质稍多于运动皮质，多于对照组（3．68&;#177;0．39）个（P＜0．05）；隔核一斜角带核部神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数（16．21&;#177;2．03）个，明显多于对照组（9．32&;#177;1．05）个（P＜0．01）；海马部神经元型一氧化氮合酶阳性细胞数（4．27&;#177;0．75）个、纹状体区（9．35&;#177;2．58）个，与对照组（3．94&;#177;0．53）个和（8．96&;#177;2.31）个相比差异无显著性（P〉0．05）。结论：大鼠松果体摘除可以引起大鼠学习能力障碍，其原因可能与大脑皮质、隔核-斜角带核神经元型一氧化氮合酶过度表达，引起一氧化氮神经毒性致胆碱能神经元受损伤有关。     

学习记忆过程中磷酸化的CREB在大鼠脑纹状体内的表达

目的：探讨大鼠在学习记忆过程中磷酸化的转录因子环磷酸腺苷反应单元结合蛋白(cAMP responsive element binding protein，CREB)在脑纹状体内的表达。方法：将动物首先在Y迷宫中进行学习记忆训练，然后应用免疫组织化学方法检测磷酸化的CREB(phospharylated CREB，pCREB)在脑纹状体内的表达。结果：大鼠经电Y迷宫训练后，脑纹状体内侧的边缘区内即有明显的pCREB阳性表达，而假训练组或对照组的边缘区内均无明显的pCREB阳性表达。此外，在海马、前额叶皮质和扣带回等处也有较多的pCREB阳性表达。结论：大鼠进行电Y迷宫厌暗学习时，脑纹状体边缘区内磷酸化的转录因子pCREB参与学习记忆的信号转导过程。     

神经生长因子对新生的大鼠小脑皮质神经细胞凋亡的影响

目的：探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对小脑皮质神经元凋亡的影响，为临床治疗小脑变性疾病的提供新的措施。方法：实验于2001-12／2003-03在锦州医学院科技楼实验室完成。以原代培养的新生SD乳鼠小脑皮质细胞建立谷氨酸诱导的神经细胞凋亡模型。通过流式细胞术检测神经细胞凋亡率；利用光学显微镜技术观察细胞凋亡的形态学改变。结果：谷氨酸(500μmol／L)作用5min可诱导小脑神经细胞凋亡。应用流式细胞仪检测发现受损细胞在G1峰前出现一个G1亚峰，凋亡细胞所占比例为50．2％及45．7％，通过荧光染色观察发现模型组细胞核出现染色体聚集，凋亡小体形成等形态学变化。流式细胞仪检测结果显示模型组与正常对照组亦有明显差异，光学和荧光显微镜观察发现受损细胞的形态学变化也得到明显改善。结论：外源性NGF能够减轻大鼠小脑皮质神经细胞凋亡。     

神经生长因子对老年痴呆鼠学习记忆能力的影响

背景：神经生长因子(nerve growth factor，NGF)能促进青年痴呆鼠的学习记忆能力的恢复，但老年痴呆鼠对NGF是否敏感?目的：探讨NGF对老年痴呆鼠学习记忆能力的影响。设计：以动物实验为依托，与对照组比较分析。地点和材料：实验在广州医学院解剖学教研室完成。材料：24个月龄雄性SD大鼠30只，NGF(人工脑脊液配制，3．0g／L，军事医学院提供)，人工脑脊液配制细胞色素C溶液。方法：切断老年SD大鼠左侧穹窿海马伞(fimbria-fornix，FF)，侧脑室注射NGF，用Moreis水迷宫和Y迷宫测试正常组、损伤组和治疗组大鼠的学习记忆能力。主要观察指标：Morris水迷宫行为测试中大鼠平台平均潜伏期的变化及撤除平台后3组大鼠120s内在各象限游泳距离占总距离的百分比和跨过原平台位置数；Y迷宫检测中大鼠的学习和记忆能力的改变。结果：治疗组大鼠与损伤组相比较，治疗组平均逃避潜伏期缩短，原平台象限游泳距离和穿环次数增多，学会Y迷宫所需训练次数减少和正确反应次数增多，但未完全达到正常水平。结论：NGF能够改善老年FF损伤鼠学习记忆能力。     

MTBE诱导C—fos基因在中枢神经系统的表达

目的了解甲基叔丁基醚（MIBE）对中枢神经系统的作用部位，为进一步探讨MTBE对中枢神经系统的急性毒作用机制。方法雄性SD大鼠腹腔注射MIBE（0．075mL／50g）染毒1h后，应用免疫组织化学、显微图像分析技术检测Fos蛋白阳性神经元在中枢神经系统内的分布。结果7MTBE染毒组大鼠大脑皮质、下丘脑、小脑皮质均有Fos阳性神经元核团表达。结论MTBE对中枢神经系统具有明确的毒作用位点。     

肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

背景：肝硬化时可对脊髓等身体其他组织器官产生严重的影响。目的：应用四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型，探讨肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶分布情况。．设计：完全随机对照实验。单位：首都医科大学解剖教研室。材料：实验于2002—03／2003—12在首都医科大学解剖教研室完成。20只Wistar雄性大鼠随机分为肝硬化组和正常组，每组10只。方法：肝硬化组经四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型，正常大鼠组不作任何处理。于模型制备后3个月，各组大鼠在麻醉状态下开胸，灌注，固定，取脊髓组织，制备切片，采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法及Leica Q500IW图像分析系统对肝硬化大鼠脊髓一氧化氮合酶阳性细胞进行数量及灰度的测定。主要观察指标：①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度值。②两组大鼠一氧化氮合酶阳性细胞分布情况。结果：20只大鼠均进入结果分析。①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度均为60（P〉0．05）。②在脊髓灰质区，一氧化氮合酶阳性细胞主要分布在中央管周围即脊髓板层第X层和中间外侧核。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法呈色为强阳性，细胞形态多为三角形和梭形，胞核不着色，胞质色深。细胞中等大小，以25μm为主。在脊髓颈、胸、腰各段灰质中间带一氧化氮合酶阳性细胞分布的数量基本相等，没有特异性变化。结论：肝硬化大鼠与正常大鼠一氧化氮合酶在脊髓内的表达基本相同。一氧化氮在脊髓节段的分布特性可能说明肝硬化大鼠在低级交感神经的调控上与正常无差异。     

大鼠脑内Fos蛋白在脂多糖免疫激发过程中的传导通路变化

背景：越来越多的研究事实表明免疫系统不是一个仅有自主调节的孤立系统．而是与中枢神经系统之间存在双向联系的，但中枢神经系统哪些部位参与免疫调节仍是一个尚未解决的问题。目的：研究与神经免疫调节有关的功能神经元在大鼠脑内的分布。设计：随机对照的研究。单位：解放军第一军医大学珠江医院神经外科，解放军第四军医大学神经科学研究所和解放军第四军医大学唐都医院呼吸科。对象：实验在第一军医大学珠江医院神经外科和第四军医大学全军神经科学研究所完成。10只健康清洁级成年SD大鼠由第四军医大学实验动物中心提供。干预：以腹腔注射脂多糖(LPS)为免疫激发模型，采用免疫组织化学抗Fos蛋白ABC方法进行染色。主要观察指标：Fos蛋白在脑内不同区域内的分布。结果：Fos阳性产物多集中分布在大脑额顶皮质、边缘前脑(扣带皮质、梨状皮质、外侧隔核和中央杏仁核等)、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、弓状核、视上核、视交叉上核、下丘脑外侧区、中脑导水管周围灰质腹外侧部、外侧臂旁核和延髓内脏带。小脑内无明显Fos分布密集区。结论：LPS诱发的Fos阳性神经元在脑内有相对广泛的分布。