Smad1/5和p38丝裂原活化蛋白激酶在大鼠再生肝组织中的表达和意义

本研究通过肝部分切除术(partial hepatectomy,PH)后加入骨形成蛋白-2(bone morphogenetic proteins,BMP-2)的拮抗剂Noggin,检测肝组织的再生率及再生肝中BMP-2、Smad1/5、038丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)的表达,探讨BMP-2在再生肝中的信号转导途径.     

骨形态发生蛋白2和4在外源性Noggin模型大鼠再生肝的表达及其意义

骨形态发生蛋白(BMPs)信号转导通路是肝再生过程中重要的信号转导通路[1].本研究通过外源性Noggin的干预,探讨BMP-2和BMP-4对大鼠肝大部切除(partial hepatectomy,PH)后肝再生过程的影响. 一、材料与方法 1. 材料:外源性Noggin试剂盒购于美国R&DSystems,Inc.试剂公司,兔抗鼠BMP-2多克隆抗体、即用型SABC试剂盒、DAB显色剂均购自武汉博士德生物有限公司.兔抗鼠BMP-4多克隆抗体、即用型SP试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司.大鼠BMP-2定量酶联检测试剂盒购自上海森雄科技实业有限公司.     

BMP-2和p21在乳腺癌原发灶及骨转移灶中的表达及意义

目的 检测骨形成蛋白-2(BMP-2)和p21在乳腺癌患者原发灶及骨转移灶中的表达,探讨它们在乳腺癌骨转移发生中的意义.方法 选取临床及病理资料完整的乳腺癌患者126例,其中,至今未发生骨转移者88例,发生骨转移者38例.应用免疫组织化学方法对原发灶及骨转移灶中BMP-2和p21的表达进行测定,并结合患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移状况、临床分期等,探讨它们之间的相互关系.结果 发生骨转移的乳腺癌患者腋窝淋巴结转移率为84.2％( 32/38).临床Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌患者的骨转移发生率分别为13.2％、34.2％、52.6％.Ⅲ～Ⅳ期与Ⅱ期比较有统计学意义(P＜0.01).乳腺癌组织中BMP-2阳性表达率在合并骨转移和无骨转移组中分别为15.79％和54.5％ (P＜0.01);在合并有淋巴结转移和无淋巴结转移组中分别为15.2％和58.75％ (P ＜0.01);而在临床Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌组织中为20.59％,明显低于临床Ⅱ期的BMP-2阳性表达率(66.67％)(P＜0.01).乳腺癌组织p21蛋白阳性表达率在合并骨转移和无骨转移组中分别为18.4％和53.4％ (P ＜0.01);在合并有淋巴结转移和无淋巴结转移组中分别为34.8％和83.75％ (P＜0.01);而在临床Ⅲ～Ⅳ期的乳腺癌组织中为23.53％,明显低于临床Ⅱ期的p21阳性表达率(64.58％)(P＜0.01).BMP-2阳性表达率在乳腺癌原发灶中为21.74％ (5/23),而骨转移灶中下降至0(0/23),P＜0.05;虽然p21在乳腺癌骨转移灶中的阳性表达率4.35％ (1/23)也低于乳腺癌原发灶26.09％ (6/23),但无统计学意义.BMP-2及p21与乳腺癌密切相关.结论 乳腺癌发生骨转移的患者腋窝淋巴结转移率高;临床分期越晚,骨转移的发生率越高;BMP-2和p21高表达者淋巴结转移少、发生骨转移的机会较少;而BMP-2和p21的低表达预示具有形成骨转移的潜能.     

复方接骨中药介导MAPK信号通路促进骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化

目的探讨复方接骨中药介导MAPK信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及成骨分化的促进作用。方法取健康雄性SD大鼠60只,随机平均分为实验组和对照组,实验组灌喂复方接骨中药煎剂,对照组灌喂等体积自来水,处理10 d后提取各组大鼠血清。分离BMSCs,利用体积分数为0.1的含药血清及非含药血清单独处理BMSCs 24、48、72 h及联合10μmol/L p38MAPK抑制剂SB203580处理BMSCs 72 h后,MTT检测细胞增殖;RT-PCR及Western印迹检测两组血清单独处理及联合SB203580处理BMSCs 72 h后成骨细胞分化标记基因ALP、BGP、BMP-2的表达;Western印迹检测两组血清处理BMSCs 72 h p38蛋白表达及磷酸化。结果含药血清处理24、48 h,细胞OD值与非含药血清组及对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),第72小时含药血清组细胞OD值显著高于对照组及非含药血清组(P<0.01),非含药血清组细胞OD值与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。两组血清处理72 h后,含药血清处理组ALP、BGP、BMP-2表达及p38磷酸化明显高于对照组及非含药血清组(P<0.01),非含药血清组ALP、BGP、BMP-2表达及p38磷酸化与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),p38总蛋白表达三组差异无统计学意义(P>0.05)。SB203580联合两组血清处理72 h后,非含药血清+SB203580组与SB203580组细胞增殖及ALP、BGP、BMP-2表达差异无统计学意义(P>0.05),明显低于对照组(P<0.01),含药血清+SB203580组细胞增殖及ALP、BGP、BMP-2表达显著高于SB203580组(P<0.01),与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方接骨中药可能通过促进MAPK信号通路促进BMSCs的增殖及成骨分化。     

骨髓间充质干细胞对改良Kessler建模后大鼠跟腱纤维化粘连、腱细胞活性及p38、ERK蛋白表达的影响

目的 探究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对改良Kessler建模后大鼠跟腱纤维化粘连、腱细胞活性及p38、细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达的影响。方法 选取健康雄性大鼠40只,分为健康组、模型组、研究组、药物对照组,10只/组。健康组每日常规腹腔注射生理盐水;模型组用蘸有100μl生理盐水的明胶海绵包裹损伤跟腱断端周围,缝合皮肤;研究组将BMSCs 0.25 ml(1×10⁹/L)1次/w,注射入大鼠跟腱周围;药物对照组用蘸有浓度为2.5 mg/ml维拉帕米药物100μl的明胶海绵包裹损伤部位,缝合皮肤。对跟腱粘连结果进行评分,采用苏木素-伊红(HE)染色观察病理形态,TUNEL检测腱细胞凋亡,Western印迹检测p38、ERK、p-ERK蛋白表达,聚合酶链反应(PCR)检测跟腱组织中骨形态发生蛋白(BMP)-12、BMP-13、BMP-14 mRNA。结果 与健康组比较,模型组跟腱粘连评分、跟腱细胞凋亡、跟腱组织中BMP-12、BMP-13、BMP-14 mRNA、p38、ERK、p-ERK蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,研究组以上指...     

血清miR-125a-3p、BMP-2水平与骨质疏松性椎体压缩性骨折术后延迟愈合的关系

目的 探讨血清微小RNA-125a-3p(miR-125a-3p)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)水平与骨质疏松性椎体压缩性骨折（OVCF）术后延迟愈合的关系。方法 选择OVCF患者147例，均接受经皮椎体后凸成形术治疗，术后延迟愈合67例（延迟愈合组）、正常愈合80例（正常愈合组）。采集所有研究对象术前空腹外周静脉血，离心留取血清，采用RT-qPCR法检测血清miR-125a-3p，采用化学发光免疫分析法检测血清BMP-2。比较两组血清miR-125a-3p、BMP-2水平，采用Spearman相关分析法分析OVCF患者血清miR-125a-3p、BMP-2水平的关系。采用多因素Logistic回归模型分析OVCF术后延迟愈合的影响因素。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-125a-3p、BMP-2水平对OVCF术后延迟愈合的预测价值。结果 延迟愈合组血清miR-125a-3p水平高于正常愈合组，血清BMP-2水平低于正常愈合组（P均<0.01）。Spearman相关分析显示，OVCF患者血清miR-125a-3p水平与血清BMP-2水平呈负相关关系（r=-0.78...     

硫化氢通过p38MAPK信号通路对肝纤维化大鼠肝细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对肝纤维化大鼠肝细胞增殖、凋亡的调节作用以及P-p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)蛋白的表达的影响.方法:用四氯化碳诱导肝纤维化SD大鼠模型,将提取的肝纤维化大鼠肝细胞分组:对照组、H2S组(对照组基础上加H2S的供体N a H S至最适浓度)、S B组(对照组基础上加SB203580至最适浓度)、SB+H2S组(对照组基础上加Na HS、SB203580至最适浓度).M T T法检测N a H S及S B203580对肝纤维化大鼠肝细胞的增殖、增殖抑制率的影响;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测肝纤维化大鼠肝细胞凋亡率;Western blot技术检测P-p38MAPK蛋白在各组中的表达水平.结果:与对照组相比,低浓度H2S(50μmol/L)促进肝纤维化大鼠肝细胞增殖明显(P=0.000),对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡无影响;SB203580可抑制肝纤维化大鼠肝细胞的增殖,伴随药物浓度的升高细胞存活率降低(P=0.000),并诱导肝纤维化大鼠肝细胞凋亡(P=0.000);P-p38MAPK蛋白在各组中均有表达,H2S组表达水平高于对照组(P=0.000),SB组、SB+H2S组与对照组、H2S组相比,P-p38MAPK蛋白的表达量均减少(均P=0.000).结论:低浓度H2S对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡无诱导作用,但能通过激活p38MAPK信号转导通路促进其细胞增殖.     

P38MAPK信号通路在骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞中的作用

目的 研究P38MAPK信号通路在骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为心肌样细胞中的调控作用,探讨BMSC向心肌样细胞分化的可能信号机制.方法 BMSC分离与体外培养;分3组:对照组、BMP-2组(诱导剂组)和BMP-2+ SB203580组(阻断剂组).倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化;免疫细胞化学检测诱导后BMSC心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)和连接蛋白43(Cx43)的表达;Western blot检测诱导后细胞内p-P38MAPK/P38MAPK的变化.结果 BMP-2诱导15 min,p-P38 MAPK蛋白呈弱表达,30 min达到高峰,60 min逐渐降低;用P38MAPK阻断剂SB203580预处理细胞后,p-P38MAPK表达明显降低;与诱导剂组比较,阻断剂组的p-P38MAPK蛋白表达减弱,差异有统计学意义(P＜0.05).诱导4周后,对照组cTnT、Cx43呈阴性表达;诱导剂组和阻断剂组呈阳性表达,且阻断剂组Cx43阳性细胞数多于诱导剂组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 BMP-2可诱导BMSC分化为心肌样细胞,P38MAPK信号通路在诱导过程中发挥负性调节作用.     

肝损伤修复过程中p75神经营养因子受体的作用

p75神经营养因子受体(p75NTR)是肝星状细胞(HSC)表面表达的与神经生长因子(NGF)特异结合的受体,在肝脏损伤修复过程中发挥重要作用。在肝脏损伤修复过程中,p75NTR能提高肝组织肝细胞生长因子的表达,促进受损肝细胞的再生和肝组织结构的恢复;对于静息状态的HSC,p75NTR能促进HSC活化;在肝损伤晚期,随着再生肝细胞和活化HSC的增多,NGF分泌明显增加,NGF与p75NTR结合能促进活化的HSC凋亡和肝纤维化逆转。     

中药软肝冲剂对肝纤维化大鼠p21细胞周期调控的影响

目的 :研究中药软肝冲剂对肝纤维化大鼠 p2 1m RNA表达及细胞周期各时相 DNA含量的影响 ,探讨软肝冲剂促进肝细胞再生、阻止肝纤维化、肝硬化形成的作用机制。方法 :采用 RT- PCR及流式细胞计数仪分别检测 CCl4 肝纤维化大鼠 p2 1m RNA表达、细胞周期各时相 DNA含量。结果 :软肝冲剂有降低肝纤维化大鼠 p2 1m RNA含量的作用 ,与模型组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ,在实验的第 12天及 4 5天 ,大剂量组疗效明显优于小剂量组 (P <0 .0 1) ,且呈一定的量效关系 ;正常肝组织 p2 1m RNA呈相当低水平表达 ,其表达相对值为 (0 .17± 0 .0 6 ) U。定量 DNA分析发现模型组中处于 G1 期的细胞数要明显多于其他各组 (P <0 .0 1) ,软肝冲剂大剂量组中处于 G1 期的细胞数明显少于小剂量组 (在实验的第 12、 4 5天 ,均 P <0 .0 1)。结论 :软肝冲剂能调节 CCl4 肝纤维化大鼠 p2 1基因表达 ,调节细胞周期 ,促进肝细胞再生 ,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。     

咽部吞咽的生理解剖学与吞咽障碍的失代偿

0引言吞咽是维持人体生存的重要功能活动.每人每天均必须进行无数次吞咽.对吞咽障碍(deglutitiondisoders,DD)进行有效的预防、诊断和治疗必须了解咽部有关的解剖和功能.1吞咽的生理解剖学“吞咽”不仅指口腔内食团(包括液、固体食物、药物和唾液等)在咽部的通过,而应将之定义为是在构成吞咽通道的唇、舌、腭、咽、喉、食管等各器官肌肉、神经的密切协同下,将吞咽物顺利、安全地运送至胃的全过程[1].食物在口腔内经过咀嚼、搅拌,由唾液润湿,变成食团,然后被吞咽经咽和食管入胃.咀嚼的作用是把大块食物分成小块,并经舌肌、颊肌、颌肌等的搅…     

Preparation and separation of the glucuronide and sulfate conjugates of thyroxine and triiodothyronine

An enzymatic method for synthesis of labelled thyroxine glucuronide (T4G) and triiodothyronine glucuronide (T3G) from labelled thyroxine (T4) and triiodothyronine (T3) is presented. The synthetic glucuronides are completely digested by beta-glucuronidase, with recovery of the parent T4 or T3. They have distinctive elution patterns on HPLC and on Sephadex G25 chromatography, and can be clearly separated from T4 and T3 as well as from synthetic T4 sulfate (T4S) and T3 sulfate (T3S). On LH 20 chromatography, elution of T4G and T3G is intermediate between that of T4 and T3 and that of T4S and T3S. T3G can be well separated from other thyronines by HPLC alone, but T4G coelutes with rT3 on HPLC; these are then separated by adding a Sephadex G25 chromatography step. Biosynthetic 131I-T3G and 125I-T4G from the bile of a cat given 131I-T3 and 125I-T4 had similar HPLC chromatographic patterns to those of synthetic T3G and T4G. That the identified peaks from analysis of the bile were indeed T3G and T4G was confirmed by recovery of the parent T3 and T4 after beta-glucuronidase digestion.     

我国骨关节结核诊治的回顾与展望

骨关节结核是危害人们健康的严重感染性疾病,近95％由他处结核病继发而来.罹患骨关节结核疾病后几乎均将致残,严重影响人们的健康、工作和生活.建国以来在党和国家的关心和支持下,骨关节结核的诊治水平取得了长足进步.时至今日,由于多种原因,学科发展和被重视程度受到一定的制约,同整个医疗行业的发展不相适应.回顾过去,展望未来,我们需要重新审视骨关节结核的诊治方法,努力推进骨关节结核诊疗技术的科学发展.     

妊娠时间与肺结核复发的相关性研究及诊治对策

目的 分析肺结核史患者妊娠时间和肺结核复发间相关性.方法 选取我院收治的有肺结核史的妊娠妇女576例作为研究对象,对其妊娠前肺结核治疗、治愈后妊娠时间、妊娠后复发肺结核等进行分析,总结有肺结核史育龄女性的妊娠时间和肺结核复发之间的关系.结果 肺结核治愈后不同时间段妊娠者的结核复发率比较,差异具有显著性（P＜0.05）,停药后间隔时间越久妊娠,肺结核复发的几率越小.结论 加强孕期痰菌检查,及早发现复发肺结核,提高母婴安全.     

血管通路的评价、选择及并发症防治

随着终末期肾衰竭患者的逐年增多，用于维持性血液透析患者的费用支出也逐年增加，其中相当比例的资金用于血管通路的建立及相关并发症的处理。据Lysaght估计，2001年全球维持性透析患者超过110万人，并以每年7％的速度增长，到2010年将达到200万人，今后10年医疗费用将超过1万亿美元。美国国立卫生研究院(NIH)估计，每年因血管通路建立和相     

Kinetics and persistence of cardiovascular and locomotor effects of immobilization stress and influence of ACTH treatment

Stress triggers crucial responses, including elevated blood pressure and heart rate (HR), to handle the emergency and restore homeostasis. However, continuation of these effects following cessation of the stress is implicated with many stress-related disorders. Here, we examine the kinetics and persistence of cardiovascular and locomotor responses to single and repeated immobilization stress (IMO), with and without prior treatment with adrenocorticotropic hormone (ACTH). Radiotelemetry probes were implanted into male Sprague-Dawley rats to continually monitor mean arterial pressure (MAP), HR and locomotor activity. Rats were subjected to IMO for 2 h daily (10 a.m. to noon, 6 consecutive days). The first IMO induced the greatest change in MAP (about 30 mm Hg) and HR (about 200 bpm). Following each IMO, MAP and HR were elevated during the remaining light phase and in the subsequent dark phase, HR was lower than prior to IMO. We further examined whether elevation of ACTH to a level similar to IMO will elicit similar effects, and if it will alter subsequent responses to IMO. Injection of ACTH (13 IU/kg, s.c.) triggered a short-lived rise in MAP, and decreased HR. After six daily injections of ACTH and recovery time (8 days), rats were immobilized as above. The cardiovascular responses were similar during the IMO, but the ACTH-pretreated group displayed differences following cessation of the IMO. In addition, IMO led to a large reduction of locomotor activity during the dark (normally active) phase to levels similar to the light phase. Following the IMOs, locomotor activity recovered more slowly in the ACTH-pretreated group. The study revealed that IMO-triggered cardiovascular and locomotor responses are evident after termination of the stress. In addition, prior exposure to ACTH delayed recovery in cardiovascular and locomotor functions following cessation of stress.