大肠埃希菌尿液分离株7种抗菌制剂外排泵基因研究

目的调查7种抗菌制剂外排泵基因(smr-2、emrB、emrD、emrE、mdf A、tehA、qacE△1)在大肠埃希菌尿液分离株中的存在情况。方法收集宁波市第一医院2008年10月～2009年3月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共28株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析7种外排泵基因。结果6种外排泵基因emrB、emrD、emrE、mdf A、tehA、qacE△1的阳性株数分别为26株(92.9%)、17株(60.7%)、21株(75.0%)、28株(100.0%)、27株(96.4%)、19株(67.9%),只有smr-2未能检出;且这6种外排泵基因以11种阳性模式存在,其中6种基因同时检出的模式:emrB+emrD+emrE+mdf A+tehA+qacE△1检出率最高,共9株(32.1%);另外,1号株mdf A和tehA的基因序列与美国NCBI中已登录的相关序列比对后,发现均为同义突变的新基因型。结论同时检测这7种抗菌制剂外排泵基因中6种基因在大肠埃希菌尿液分离株中被检测到,且阳性率很高,这或许是导致分离株呈多药耐药的一个重要原因。     

大肠埃希菌尿液分离株消毒剂与灭菌剂耐药基因研究

目的 了解临床尿液标本分离的60株大肠埃希菌消毒剂、灭菌剂耐药基因的存在情况.方法 收集2006年1月-2008年10月从住院患者尿液中分离出大肠埃希菌60株,应用K-B纸片扩散法检测细菌对15种抗菌药物的敏感性;应用PCR及序列分析3种消毒剂、灭菌剂耐药基因(qacE△1、tehA、merA).结果 60株大肠埃希菌除对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素有较高的敏感率(>70.0 %)外,对其他10种抗菌药物的敏感率均较低(<50.0%)}60株菌中42株检出qacE△1基因(70.0%),10株检出merA基因(16.7%),全部检出tehA基因,1号菌tehA基因测得序列与美国核酸库(GenBank)已登录的tehA基因序列不同,为新亚型.结论 临床尿液标分离的大肠埃希菌70.0%携带qacE△1基因,未来细菌消毒剂的耐药可能是医院感染的主要因素之一.     

从血培养中分离出一株不典型大肠埃希菌

多数大肠埃希菌对人类有益，常为肠道正常菌群，也有某些小数大肠埃希菌因寄居部位改变，可引起人类某些疾病，在婴儿、老人或免疫力低下者大肠埃希菌可引起败血症。于2005年10月，笔者收到一株来自血培养细菌，鉴定结果为大肠埃希菌，由于此菌生物学性状特殊，与普通大肠埃希菌有差异，故特对此菌进行详细试验，现将结果报导如下：     

尿液分离185株大肠埃希菌药敏试验结果分析

目的 分析泌尿系统感染患者大肠埃希菌对临床常用抗菌药物的敏感性,以指导无法开展微生物检验的基层医疗机构经验性用药.方法 收集2010-2011年住院及门诊泌尿系统感染患者标本进行细菌接种,筛选出其主要致病菌,采用VITEK-2全自动细菌鉴定系统鉴定细菌,用纸片法进行药敏试验.结果 分离出的大肠埃希菌对亚胺培南敏感率为100.0％,对呋喃妥因、头孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦的敏感率分别达到75.9％、71.3％、69.0％.结论 大肠埃希菌对传统药物敏感性不断变迁,目前对亚胺培南最敏感,可作为治疗大肠埃希菌所致泌尿系感染的首选药物.     

大肠埃希菌尿液分离株可移动遗传元件研究

目的调查大肠埃希菌尿液分离株中质粒、转座子和整合子等可移动遗传元件的存在情况。方法收集宁波市第一医院2008年10月～2009年3月患者尿液标本中分离的大肠埃希菌共28株,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析10种可移动遗传元件:traA、trbC、tnpA、tnpU、tnp513、tnsA、merA、intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3。结果28株大肠埃希菌共检出3种基因:traA、trbC、intⅠ1,其余7种基因未检出;各种基因阳性率以traA最高25株(89.3%),intⅠ1次之19株(67.9%),trbC8株(28.6%);所有28株(100.0%)至少检出1种基因,各菌株基因阳性数1～3种,5株ECO同时检出3种基因,13株同时检出2种基因,10株仅检出1种基因。结论同时检测10种可移动遗传元件是国内首次报道,traA和intⅠ1基因阳性率较高,而trbC基因阳性率较低;可移动遗传元件介导各种耐药基因使受体菌表现为多药耐药,检出trbC基因为国内首次报道。     

多药耐药大肠埃希菌11种外排泵基因的研究

目的 调查多药耐药大肠埃希菌中11种外排泵基因存在情况.方法 用PCR方法检测多药耐药大肠埃希菌中11种外排泵基因(emrB、emrD、emrE、mdfA、sugE、mdtI、tehA、oqxA、qacE△1、qacE、smr-2),并进行BIOCYC基因数据库检索.结果 20株多药耐药大肠埃希菌中共检出emrB、emrD、emrE、mdfA、sugE、mdtI、qacE△1、tehA、oqxA 9种基因,检出率分别为100.0％、100.0％、95.0％、100.0％、100.0％、100,0％、75.0％、100.0％、20.0％,未检测到qacE、smr-2基因;每株细菌中均检测到了6～9种基因.结论 多药耐药大肠埃希菌中外排泵基因携带率较高,或许是多药耐药大肠埃希菌的高度耐药的一个重要原因.     

尿路感染患者分离的202株大肠埃希菌的耐药性检测

[目的]了解尿路感染患者大肠埃希菌的产ESBLs检测和耐药情况。[方法]2008年6月至2010年6月从尿路感染住院患者的尿液标本中分离的202株大肠埃希菌,采用ATB细菌鉴定分析仪进行产ESBLs检测和药敏试验。[结果]202株大肠埃希菌中检出产ESBLs菌81株,占40.09%;非产ESBLs菌121株,占59.91%。产ESBLs菌的耐药率为70.37%（57/81）,非产ESBLs菌的耐药率为26.45%（32/121）,差异有统计学意义（P〈0.01）。[结论]大肠埃希菌产ESBLs株耐药性强,应结合药敏试验选择合适的药物。     

263株大肠埃希菌的耐药性分析

目的：了解大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性及不同标本中大肠埃希菌的耐药性差异，为临床选择抗菌药物提供依据。方法：用VITEK32型全自动细菌分析系统对我院2002年元月至2004年7月临床分离的263株大肠埃希菌进行鉴定，药敏试验采用K-B法，判断标准按．NCCIS2000年版进行。结果：大肠埃希菌对头孢哌酮／舒巴坦和亚胺培南的耐药率分别为2．3％和0；对头孢3代和4代抗生素、头霉素类、氨曲南、阿米卡星、呋喃妥因、哌拉西林／三唑巴坦的耐药率为8．7％-21．3％；对青霉素类、喹诺酮类、磺胺类的耐药率为61．6％-83．3％；痰标本中大肠埃希菌的耐药率明显高于血液和尿液及其他标本的分离株。结论：大肠埃希菌对青霉素类、喹诺酮类、磺胺类的耐药性较高；对头孢3代和4代抗生素、头霉素类、氨曲南、阿米卡星、呋喃妥因和哌拉西林／三唑巴坦的耐药性较低；目前对亚胺培南和头孢哌酮／舒巴坦敏感；不同标本中大肠埃希菌对同种抗菌药物的耐药性存在着差异。     

在腹泻婴儿粪便中分离到一株不发酵乳糖的大肠埃希菌

在日常工作中大肠埃希菌常被人认为是一种条件致病菌而忽视。舟山出入境检验检疫局保健中心从婴儿粪便中分离到一株不发酵乳糖的大肠埃希菌实属罕见,经鉴定为肠侵袭性大肠埃希菌,有毒力,具有一定的致病性。提示需要加以重视。     

198株肺炎克雷伯菌和491株大肠埃希菌耐药性分析

目的　探讨肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌ESBLs的耐药性情况 ,为产ESBLs细菌的监控和治疗提供依据。方法　采用MicroscanwatRAway 4 0系统全自动细菌鉴定 /药敏分析仪、双纸片协同试验法和K B纸片扩散法进行产ESBLs菌株鉴定及药敏测定。结果　两年中共分离到肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌 6 89株 ,产ESBLs菌株 77株 ,总检出率为 11.18% ,其中肺炎克雷伯菌检出率 16 .16 % ,大肠埃希菌检出率 9.16 % ;产ESBLs菌株主要分布在ICU、血液科、烧伤病房 ;两种产ESBLs菌株对阿米卡星、亚胺培南均有高度敏感性 ,对头孢唑啉、头孢拉啶、氨苄西林、哌拉西林、阿莫西林 /棒酸、替卡西林、庆大霉素、妥布霉素和奈啶酸均有极高的耐药性 (耐药率 >80 % ) ,高于不产ESBLs组 ,差别有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的产ESBLs菌株在临床分离率较高 ,对多种抗生素具有较高耐药性 ,应加强对ESBLs的检测和预防。     

不同临床标本分离的大肠埃希菌耐药性分析

目的了解临床不同标本分离的大肠埃希菌的耐药特点及差异,以合理使用抗菌药物。方法收集2004年1月-2005年12月分离自中段尿、痰、分泌物标本的大肠埃希菌,采用VITEK全自动微生物鉴定药敏仪进行细菌鉴定及药敏测定,并统计比较不同标本所检出大肠埃希菌对抗菌药物的耐药率。结果共检出大肠埃希菌241株,其中中段尿检出128株,痰54株,分泌物59株。中段尿与痰分离的大肠埃希菌对复方磺胺甲唑、庆大霉素、阿莫西林/克拉维酸的耐药率差异均有显著性(均P<0.05);中段尿与分泌物分离的大肠埃希菌对复方磺胺甲唑、头孢他啶、妥布霉素、阿莫西林/克拉维酸的耐药率差异均有显著性(均P<0.05);痰与分泌物分离的大肠埃希菌对培氟沙星、替卡西林的耐药率差异均有显著性(均P<0.05)。结论不同标本分离的大肠埃希菌对同一抗菌药物耐药率不同,治疗不同部位大肠埃希菌引起的感染,要考虑由于感染部位不同而产生的耐药性以及药物有效浓度的差异,按照药敏结果合理、有效使用抗菌药物。     

健康鸡共生的产质粒型AmpC型β一内酰胺酶大肠埃希菌流行情况和酶基因型别的研究

健康动物肠道共生的大肠埃希菌是人类和动物条件致病菌,随着β-内酰胺类抗生素在临床及畜牧养殖行业的大量应用,大肠埃希菌耐药菌逐渐增加,共生的大肠埃希菌可以引起或通过携带的耐药基因传播给致病性更强的菌株,从而引起动物和人类的相关感染,因此研究产质粒型AmpC型β-内酰胺酶大肠埃希菌流行情况具有一定的实用价值,本研究主要分析质粒型bla_(AmpC)在健康鸡共生的大肠埃希菌中的流行情况及其基因型别.     

2017年院内不同标本来源的大肠埃希菌耐药性分析

目的及时监测临床分离的主要标本类型和主要科室来源大肠埃希菌的耐药性,为医院抗菌药物及医院感染控制提供依据。 方法用WHONET5.6对本院2017年1月1日~12月31日间临床主要标本类型来源的大肠埃希菌(尿液、血液、痰液)和主要科室来源的大肠埃希菌(肾内科病房、ICU病房、儿内科病房)分别进行耐药性分析。 结果痰液、血液和尿液标本分离的大肠埃希菌对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南的耐药率分别为1.63%、0.46%和0.30%。对喹诺酮类抗菌药物左氧氟沙星的耐药率分别为45.65%、41.94%和56.70%。ICU病房、肾内科病房和儿内科病房分离的大肠埃希菌对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南的耐药率分别为2.15%、0.00%、0.00%,对喹诺酮类抗菌药物左氧氟沙星的耐药率分别为52.69%、50.00%和21.84%。 结论我院主要标本类型和主要科室来源分离的大肠埃希菌对临床常用多数抗菌药物的耐药率相差较大,临床医师及时掌握不同来源主要病原菌的耐药性,可减少治疗失败。     

广西首次发现食品中集聚性大肠杆菌

目的：了解食品中肠集聚性大肠杆菌污染状况。方法：对127份食品标本进行EaggEC分离，用EaggEC特异性引物进行分子生物学鉴定，并进行小鼠毒力试验。结果：自田螺及生葱各分离出一株EaggEC，分别引起实验小鼠66.67％和33.33％死亡。结论：研究结果表明食品中存在EaggEC污染，从中分离到的EaggEC有较强的毒力。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌β-内酰胺酶基因研究

目的检测20株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的β-内酰胺酶基因,以便了解该20株产ESBLs大肠埃希菌β-内酰胺酶基因亚型携带存在状况。方法收集医院2013年分离到的20株产ESBLs大肠埃希菌,采用聚合酶链反应(PCR)方法分析16种A类β-内酰胺酶基因、6种C类β-内酰胺酶基因、3种D类β-内酰胺酶基因。结果 20株产ESBLs大肠埃希菌对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟的耐药率均为100.0%;共检出4种A类β-内酰胺酶基因,其中检出blaTEM16株、blaSHV1株、blaCTX-M-1 cluster 3株、blaCTX-M-9 cluster 14株,检出率分别为80.0%、5.0%、15.0%、70.0%,C类β-内酰胺酶基因检出blaDHA2株,检出率为10.0%,D类β-内酰胺酶基因检出blaOXA-1 cluster 3株,检出率为15.0%;20株产ESBLs大肠埃希菌每一株均有β-内酰胺酶基因检出,少者检出1种,多者同时检出2⁴种,且该组菌株blaCTX-M总检出率85.0%。结论产β-内酰胺酶基因是该组大肠埃希菌对β-酰胺类抗菌药物产生耐药的重要原因。     

健康人肠道大肠埃希菌耐药性调查与分析

目的:研究健康人肠道大肠埃希菌的耐药性。方法:按有关文献提供的方法分离鉴定健康人肠道大肠埃希菌,K-B法测定150株大肠埃希菌对16种抗生素的敏感性。结果:165份健康人肛拭子分离到150株大肠埃希菌;150株试验菌对6种抗生素的耐药率超过35.00%,对四环素、萘啶酸、磺胺甲基异噁唑、氨苄西林、复方新诺明和链霉素6种抗生素的耐药率分别为63.33%、49.33%、40.67%、38.67%、35.33%,全部菌株对头孢美唑、阿米卡星敏感,122株(81.33%)对一种以上抗生素耐药,对2种以上抗生素耐药的菌株为88株(58.67%),44株(29.33%)对5种以上抗生素耐药,有2株对10种抗生素耐药。结论:健康人肠道大肠埃希菌耐药情况较严重。     

北京地区腹泻病患者致泻性大肠埃希菌感染类型及其流行特征

目的：了解北京地区腹泻人群中致泻性大肠埃希菌（DEC）毒力基因的分布及流行特征。方法对2012-2013年监测医院的腹泻患者粪便样本进行分离培养,再采用实时荧光PCR检测毒力基因。结果6370份粪便标本有253份阳性,共分离到DEC 262株,阳性检出率为4.0%（253/6370）,9份标本发现两种不同型别的DEC混合感染。肠致病性大肠埃希菌（EPEC）为42.8%,其中非典型EPEC占42.0%,典型EPEC占0.8%;肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）为38.9%,其中耐热肠毒素基因st阳性占24.8%,不耐热型肠毒素基因lt阳性占9.9%,st和lt均阳性占4.2%;肠聚集性大肠埃希菌（EAEC）为15.3%;肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）为2.7%;检出1株产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）,血清型为O26∶K60。ETEC感染具有明显的年龄分布特征;各型DEC全年均有检出,且呈季节性变化。结论北京地区腹泻病患者DEC感染类型以EPEC和ETEC为主,且EPEC分离株多为非典型,并存在混合感染,不同型别DEC感染具有年龄和季节性分布特征。     

某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因检测及分型

目的了解某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）基因型。方法采用表型确证试验测定并收集该院产ESBLs大肠埃希菌（40株）和肺炎克雷伯菌（20株）,提取质粒DNA。采用特异性引物扩增TEM、SHV和 CTX M系列基因,测序后进行序列分析。结果60株表型确证试验阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,聚合酶链反应（PCR）扩增均阳性,包括TEM、SHV、CTX M 3组和CTX M 9组4种基因型。大肠埃希菌中上述4种基因型阳性率分别为37.50%（15株）、2.50%（1株）、62.50%（25株）、50.00%（20株）;肺炎克雷伯菌上述4种基因型阳性率分别为40.00%（8株）、90.00%（18株）、65.00%（13株）、40.00%（8株）。100.00%的大肠埃希菌和80.00%的肺炎克雷伯菌产生blaCTX M,12.50%(5/40)的大肠埃希菌和25.00%(5/20)的肺炎克雷伯菌携带2种CTX M酶基因。23例TEM基因皆为TEM 1型;19例SHV型基因包括SHV 1型6株、SHV 11型6株、SHV 12型5株及SHV 25型2株,仅SHV 12为ESBLs基因,且均来源于肺炎克雷伯菌;66例CTX M型基因,其中CTX M 14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为45.00%和35.00%,CTX M 55检出率均为35.00%,CTX M 15检出率分别为20.00%和15.00%,检出少量CTX M 3、CTX M 65、CTX M 101及CTX M 123基因型。结论该院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX M 为主,其次为SHV 12。CTX M基因型中以CTX M 14最为常见,CTX M 101及CTX M 123型ESBLs为山东省首次检出。