Synaptotagmin 1在成年期甲减大鼠海马内表达变化及甲状腺素治疗效应

目的 研究成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠海马突触小体内突触结合蛋白1(syt 1)的表达量及甲状腺素替代治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复的分子基础.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,采用Western blot方法 分析甲减组、小剂量甲状腺素替代治疗组、大剂量甲状腺素替代治疗组、正常对照组大鼠海马内syt 1的表达情况.结果甲减组大鼠血清T3、T4水平显著低于正常对照组(P<0.05);背侧海马突触小体内syt 1的蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05).小剂量甲状腺素替代治疗后,血清T3、T4恢复至正常水平;syt1蛋白表达水平与甲减组比较未见明显改变(P>0.05).经大剂量替代治疗后血清T3、T4高于正常;syt1的蛋白表达恢复到正常水平(P<0.05).结论 成年期甲减大鼠海马内syt1蛋白表达降低,甲状腺素治疗能使其恢复,且恢复的程度与甲状腺素的治疗剂量有关,大剂量替代治疗较小剂量效果好.     

甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症大鼠海马syntaxin-1的影响

目的 观察甲状腺素( T4 )联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠的海马内突触前膜相关蛋白1 (syntaxin-1)表达的影响,探讨甲减脑损伤及可能的恢复机制. 方法 44只SD大鼠随机分为4组:对照组、甲减组、T4替代治疗组及T4和多奈哌齐联合治疗组. 通过饮水给予丙基硫氧嘧啶0. 05%建立成年期大鼠甲减模型共6 周. 第5周开始,对照组腹腔注射等量生理盐水, T4替代治疗组每日给予左旋甲状腺素(L-T4) 6 μg/100 g 体重(BW)腹腔注射,联合治疗组每日给予6 μg/100g BW L-T4腹腔注射及饮用水中加入0. 005%多奈哌齐. 采用免疫组织化学法和West-ern blot法分析4 组大鼠海马syntaxin-1 的表达情况. 结果与对照组比较,甲减组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸( T3 )、T4水平减低,促甲状腺激素(TSH)水平升高(P<0. 01),海马内syntaxin-1在CA1、CA3 各层及齿状区多形层( DG-PL)表达显著增加( P <0. 01 );T4 替代治疗后,血清 T3、T4 和TSH水平恢复至正常水平, syntaxin-1 蛋白的表达未完全恢复到对照组水平(P<0. 05);T4联合多奈哌齐治疗后syntax-in-1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义. 结论 T4联合多奈哌齐治疗可以修复成年期甲减导致的脑损伤.     

成年期甲减大鼠海马SynaptotagminⅠ表达和替代治疗的效果

目的 探讨成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马内突触结合蛋白(SytⅠ)的表达及甲状腺素替代治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复可能的分子基础.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,免疫组织化学方法分析甲减组、替代治疗组、正常对照组大鼠海马内SytⅠ的表达情况.结果 甲减组大鼠血清T3(triiodothyronine, T3)、T4(tetraiodothyronine, T4)显著低于正常对照组(P<0.05);海马CA1、CA3和齿状回(dentate gyrus,DG区)SytⅠ的蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01).甲状腺素替代治疗后,血清T3、T4恢复至正常水平(P>0.05);SytⅠ的蛋白表达水平在DG区分子层明显增加,达到正常水平(P>0.05);其他区域与甲减组比较无增加,仍明显低于正常对照组(P<0.05).结论 成年期甲减降低海马内SytⅠ蛋白表达,短期替代治疗可使血清甲状腺素恢复正常,部分SytⅠ的蛋白表达恢复.     

成年期甲减对大鼠额叶SNAP-25蛋白表达的影响

目的 研究成年期甲状腺功能减退症(甲减)大鼠额叶内突触相关蛋白SNAP-25的表达,探讨甲减脑损伤的分子机制.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减模型,采用放射免疫法测定甲减组和正常对照组大鼠的血清甲状腺素水平,免疫组化方法 分析两组大鼠额叶内SNAP-25蛋白的表达情况.结果 甲减组大鼠血清T3、T4水平显著低于正常对照组(P＜0.01、P＜0.05);额叶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V层SNAP-25蛋白的表达水平显著高于正常对照组(P＜0.05、P＜0.01).结论 成年期甲减大鼠额叶SNAP-25蛋白表达增多.     

成年期甲减大鼠海马Munc18表达及甲状腺素的治疗效应

目的 观察成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马神经突触前膜胞内蛋白Munc18表达及常规剂量和大剂量替代治疗后的变化.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)建立成年期大鼠甲减及治疗模型,放射免疫法测定血清甲状腺素水平,免疫组织化学法观察Munc18在大鼠海马结构的表达与分布.结果 与正常对照组比较,甲减大鼠血清T3、T4水平减低,差异有统计学意义,常规剂量替代治疗后恢复正常,大剂量替代治疗后升高,差异有统计学意义.免疫组织化学法显示甲减组海马CA3区、齿状回 (DG)和CA1区多形层的Munc18平均光密度值减低,常规剂量替代治疗后,仅DG区分子层平均光密度值减低,大剂量替代治疗后,其差异无统计学意义.结论 成年期甲减可致海马内Munc18蛋白表达减少,常规剂量甲状腺素替代治疗能使其大部分恢复,大剂量替代治疗能全部恢复.     

成年期甲减大鼠海马syntaxin-1表达及甲状腺素干预效应

目的 观察成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马突触相关蛋白syntaxin-1表达及不同剂量甲状腺素干预后的恢复情况,探讨甲减脑损伤及替代治疗的可能分子机制.方法 通过腹腔注射丙基硫氧嘧啶建立成年期甲减大鼠模型(甲减组)共6周,第5周起每100 g体重腹腔注射给予左旋甲状腺素5 μg(常规剂量组)或20 μg(大...     

甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症大鼠额叶乙酰胆碱、munc-18的影响

目的：观察甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠额叶内乙酰胆碱含量以及munc-18表达的影响,探讨甲减脑额叶损伤及恢复的可能分子机制。方法采用给予含0．05%丙基硫氧嘧啶的饮用水6周建立大鼠甲减模型。自第5周起,给予多奈哌齐、甲状腺素或甲状腺素联合多奈哌齐治疗2周,采用放射免疫法检测血清甲状腺激素水平,碱性羟胺比色法测定额叶内乙酰胆碱含量,免疫组化法检测额叶内munc-18的分布与表达。结果甲减组、多奈哌齐治疗组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)水平显著减低、促甲状腺激素( TSH)水平明显增加( P<0．01),甲状腺素治疗组、联合治疗组T3、T4、TSH水平与正常对照组相比差异无统计学意义;甲减组大鼠额叶内乙酰胆碱含量下降(P<0．05),多奈哌齐治疗组、甲状腺素治疗组、联合治疗组乙酰胆碱含量均恢复至正常水平,其中联合治疗组有进一步恢复趋势;甲减组、多奈哌齐治疗组大鼠munc-18在额叶内Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层表达下降(P<0．05)。其中,以Ⅲ/Ⅴ层下降最为显著(P<0．01),甲状腺素治疗组munc-18表达仍下降(P<0．05),联合治疗组额叶内munc-18表达正常。结论多奈哌齐可以改善甲状腺功能减退引起的额叶内乙酰胆碱含量改变;甲状腺素联合多奈哌齐治疗有利于成年期甲状腺功能减退造成的额叶内胆碱含量改变和突触蛋白损伤的恢复。     

甲状腺功能减退症对成年期SD大鼠肾脏超微结构的影响及L-T4替代治疗的效果

目的 观察甲状腺功能减退症(简称甲减)对成年期 SD大鼠肾脏超微结构的影响及左旋甲状腺素(L-T4)替代治疗的效果.方法 将30只健康3月龄雄性SD大鼠适应性喂养1周,随机均分为对照组、甲减组和L-T4治疗组.通过丙基硫氧嘧啶饮水法建立甲减模型,共6周.从第5周开始,L-T4治疗组大鼠给每日予L-T4腹腔注射(剂量按体质量6 μg/100 g计算);对照组及甲减组每日予同等剂量生理盐水腹腔注射.造模结束后对所有大鼠进行称重,之后使用放射免疫法检测三组大鼠甲状腺功能,同时使用透射电镜完成肾脏超微结构观察.结果 造模前,三组大鼠体质量水平比较差异无统计学意义;造模结束后,对照组、甲减组和L-T4治疗组三组大鼠体质量较造模前各增加了 48. 14％、 22. 18％ 、34. 90％.造模后三组间体质量比较显示:甲减组、 L-T4治疗组大鼠体质量显著低于对照组(P<0. 05);与对照组相比,甲减组大鼠血清甲状腺激素(T3、T4)水平明显降低,促甲状腺素水平显著升高(P<0.01) ,L-T4治疗组血清甲状腺激素及促甲状腺素水平与对照组相比差异无统计学意义;电镜下观察显示对照组大鼠肾小球足细胞结构完整,足突排列清晰,线粒体发达、内部嵴结构清晰;甲减组大鼠肾小球基底膜结构不规则,足细胞明显肿胀、融合,内部细胞器结构不清晰,线粒体明显空泡变性,内部嵴断裂消失,粗面内质网有脱颗粒现象,间质水肿;L-T4治疗组以上超微结构改变明显改善.结论 甲减可致成年期SD大鼠肾脏超微结构发生病理学损害,L-T4替代治疗有利于上述损伤的恢复.     

甲状腺激素联合多奈哌齐治疗对成年甲减大鼠额叶SNAP-25的影响

目的 研究甲状腺激素联合多奈哌齐治疗对成年甲减大鼠额叶突触相关蛋白25(SNAP-25)的表达的影响.方法 将50只成年健康SD大鼠随机分为5组:对照组(CON)、甲减组(Hypo)、多奈哌齐组(DON)、左甲状腺激素钠组(L-T4)、左甲状腺激素钠联合多奈哌齐组(L-T4+DON);除对照组外,其余4组通过含0.05℅丙基硫氧嘧啶(PTU)饮用水喂养6周诱导成年期甲减大鼠模型;DON组、L-T4组、L-T4+DON组分别予多奈哌齐、左甲状腺激素钠、左甲状腺激素钠联合多奈哌齐治疗2周后,放射免疫法测定血清甲状腺激素水平,免疫组化法、Western blot法观察大鼠额叶SNAP-25的表达.结果 与CON组相比,Hypo组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)水平显著降低(P<0.01),促甲状腺激素(TSH)显著上升(P<0.01);额叶SNAP-25的表达水平显著高于CON组(P<0.05).L-T4组与CON组比较,血清T3、T4、TSH差异无统计学意义;SNAP-25的表达升高(P<0.05).DON组与CON组比较,血清T3、T4、TSH差异有统计学意义(P<0.01);SNAP-25的表达升高(P<0.05).L-T4+DON组与CON组比较,血清T3、T4、TSH差异无统计学意义;SNAP-25的表达差异无统计学意义.结论 甲状腺激素联合多奈哌齐治疗能有效地恢复成年甲减大鼠额叶SNAP-25的表达.     

甲状腺激素对成年大鼠额叶内synaptotagmin 1表达的影响

目的 研究不同甲状腺激素水平对SD大鼠额叶内突触结合蛋白1(syt 1)表达的影响.方法 用丙基硫氧嘧啶(PTU)复制成年期大鼠甲状腺功能减退(甲减)模型,左旋甲状腺素复制甲状腺功能亢进(甲亢)模型,放射免疫法测定血清甲状腺激素T3、T4水平,免疫组化SP法分析甲减组、甲亢组及正常对照组大鼠额叶分子层(Ⅰ层)、外颗粒层(Ⅱ层)、外锥体细胞层(Ⅲ层)、内颗粒层(Ⅳ层)和内锥体细胞层(Ⅴ层)syt 1蛋白的表达情况.结果甲减组大鼠血清T3、T4显著低于正常对照组(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层syt 1免疫反应产物明显少于正常对照组(P<0.05);甲亢组大鼠血清T3、T4显著高于对照组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ层syt 1免疫反应产物也比正常对照组减少(P<0.05),仅在第Ⅳ层与正常对照组比较无统计学意义.结论甲状腺激素水平的降低和增高可导致成年期大鼠额叶内syt 1蛋白表达减少,其减少的原因可能是不同的.     

A morphometric study on the endometrium of rat uterus in hypothyroid and thyroxine treated hypothyroid rats

Hypothyroidism increases the rate of pregnancy loss. Other manifestations include menstrual disorder, and infertility. Serum levels of gonadotropins are low in hypothyroid patients. Though studies of uterine ultrastructure are well established as approaches to investigating the pathophysiology of infertility, they have scarcely been extended to the study of hypothyroid related infertility. The present study investigates the effect of hypothyroidism on the ultrastructure of uterine epithelium. Three groups of Wistar rats were studied. Two groups were initially made hypothyroid using methimazole, and the third group was an untreated control. One hypothyroid group was given daily injections of thyroxine for six weeks. The uteri were removed in all three groups, and processed for transmission electron microscopy and morphometry. It was found that absolute epithelial cell volume was decreased in hypothyroidism. The volume of the nucleus had decreased though its relative volume in the cell had increased. The height of the luminal epithelium in hypothyroid rats also decreased by (33.8%) as compared with controls. Basement membrane thickness was significantly increased in hypothyroidism. The changes were all substantially abrogated by the administration of thyroxine. This study suggests that thyroid hormones might be importantly concerned in the maintenance of the normal structure of uterine epithelial cells.     

A Morphometric Study on the Endometrium of Rat Uterus in Hypothyroid and Thyroxine Treated Hypothyroid Rats

Hypothyroidism increases the rate of pregnancy loss. Other manifestations include menstrual disorder, and infertility. Serum levels of gonadotropins are low in hypothyroid patients. Though studies of uterine ultrastructure are well established as approaches to investigating the pathophysiology of infertility, they have scarcely been extended to the study of hypothyroid related infertility. The present study investigates the effect of hypothyroidism on the ultrastructure of uterine epithelium. Three groups of Wistar rats were studied. Two groups were initially made hypothyroid using methimazole, and the third group was an untreated control. One hypothyroid group was given daily injections of thyroxine for six weeks. The uteri were removed in all three groups, and processed for transmission electron microscopy and morphometry. It was found that absolute epithelial cell volume was decreased in hypothyroidism.

The volume of the nucleus had decreased though its relative volume in the cell had increased. The height of the luminal epithelium in hypothyroid rats also decreased by (33.8%) as compared with controls. Basement membrane thickness was significantly increased in hypothyroidism. The changes were all substantially abrogated by the administration of thyroxine. This study suggests that thyroid hormones might be importantly concerned in the maintenance of the normal structure of uterine epithelial cells.     

Heart rate variability and its response to thyroxine replacement therapy in patients with hypothyroidism

目的　测定甲状腺功能减退 (甲减 )患者心率变异 (HRV)及观察甲状腺素替代治疗后的变化。方法　记录 38例甲减患者与 2 1例正常者 2 4小时动态心电图 ,并进行HRV分析。 18例甲减患者治疗 3月后重复HRV测定。结果　甲减时 ,HRV的时阈指标较对照组明显降低 ;频阈指标中 ,高频功率 (HF)较对照组明显增高 ,而低频 (LF)与HF比值较对照组显著减低。甲减患者经甲状腺素替代治疗后 ,HRV时阈指标和频阈指标均明显改善 ,且与FT3和FT4 的恢复程度相一致。结论　甲减时 ,自主神经活动明显改变 ,且以迷走神经兴奋性增加占优势。这种自主神经异常在甲状腺素替代治疗后可部分改善。     

甲状腺素对胎鼠脑bcl—2和bax基因表达的影响

目的　研究甲状腺素对胎鼠脑bcl 2和bax基因表达的影响。方法　采用丙基硫氧嘧啶灌胃制备甲减孕鼠模型 ,出生后小鼠即为先天性甲减鼠 ,另一组出生后即日起用腹腔注射T4,剂量为 2 μg/ 10 0g·d-1(替代组 ) ,采用逆转录 -聚合酶链反应检测胎鼠出生后 1、5、10d胎鼠bcl 2和bax基因的表达。结果　bax基因在甲减胎鼠脑第 1天表达最高 ,随着鼠龄增长 ,表达降低 ;正常第 1天胎鼠及替代组胎鼠脑未检测到bax表达 ;bcl 2基因在第 1天甲减胎鼠表达高于正常对照组 ;第 5天、第 10天降低 ;bcl 2在替代组鼠脑中表达较甲减组高。结论　甲状腺激素对bcl 2和bax基因表达的不同影响 ,在脑细胞凋亡中有重要的作用。     

围生期甲状腺功能低下对仔鼠大脑皮质及海马ARmRNA影响的研究

目的:研究围生期甲状腺功能低下(甲低)对仔鼠大脑皮质及海马雄激素受体mRNA(ARmRNA)表达的影响.方法:对雌大鼠从孕15 d起每日以丙基硫氧嘧啶(PTU)溶液灌胃(50mg/d)至断奶,造成大鼠围生期甲低模型 , 部分甲低仔鼠每日腹腔注射左旋甲状腺素(L-T4)2μg/100g体重.收集出生后1、 5、10、15、20 d的正常、甲低及T4-替代仔鼠的大脑皮质及海马组织,用竞争性RT -PCR法测定ARmRNA水平.结果:正常组仔鼠生后ARmRNA水平随日龄增加而增高,海马高于大脑皮质,雄性组高于雌性组.与同日龄正常对照组相比,甲低组大脑皮质及海马ARmRNA水平明显降低.T4-替代组ARmRNA水平增加,但在10、20日龄的雄性组和15、20日龄的雌性组海马的表达仍未达正常对照组水平,大脑皮质各组与正常组已无显著性差异.结论:围生期甲状腺功能低下会引起发育期大鼠大脑皮质和海马的ARmRNA表达下降,及时替代治疗能恢复大脑皮质ARmRNA的正常表达,但海马的ARmRNA表达则未能达到正常水平.     

益气健脾方对甲状腺功能减退大鼠海马CA1区神经颗粒素及LTP的影响

目的:观察益气健脾方对甲状腺功能减退大鼠海马CA1区神经颗粒素(Neurogranin,Ng)及长时程增强(long-term potentiation,LTP)损伤的影响。方法将SPF级成年Wistar大鼠,每日灌服他巴唑混悬液2.7 mg·kg-1,持续45 d。第46天,将造模后大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、左旋甲状腺素片组、益气健脾方小剂量组、益气健脾方大剂量组、益气健脾方合甲状腺片组,除正常对照组和模型组灌胃10 m L·kg-1去离子水,其余各组灌胃不同药物,1次·d-1,共15d。观察大鼠海马CA1区Ng及LTP的表达。结果各治疗组可显著改善甲状腺功能减退症大鼠海马CA1区Ng蛋白表达水平,与模型组比较,差异均有显著性(P0.01),左甲状腺素片组、益气健脾大剂量组、益气健脾方加左甲状腺素组等3组之间无显著性差异(P0.05),左甲状腺素片组、益气健脾大剂量组、益气健脾方加左甲状腺素组与益气健脾小剂量组比较,优于益气健脾小剂量组,差异有统计学意义(P0.01)。甲状腺功能减退大鼠,经过左旋甲状腺素及益气健脾方的治疗后的LTP幅度明显高于模型组(P0.01),但是甲状腺素片组、益气健脾大剂量组、益气健脾方加左甲状腺素组与益气健脾小剂量组的LTP幅度仍低于正常对照组的LTP幅度(P0.05)。结论益气健脾方在一定程度上可修复甲状腺功能低下引起的海马CA1区的LTP的损伤,能显著提高大鼠脑C1区Ng水平。