uPA在肝癌细胞株及肝癌组织中的表达及意义

目的:从mRNA水平探讨uPA在不同转移潜能肝癌及恶性黑色素瘤细胞株中的表达,从蛋白水平探讨uPA在肝癌组织中的代表表达及其与肝癌转移的关系。方法:检测uPA在不同转移潜能人肝癌及恶性黑色素瘤细胞株中的mRNA表达,用免疫组织化学方法检测uPA在肝癌组织中的蛋白表达。结果:uPAmRNA在高转移潜能肝癌和恶性黑色素瘤细胞株呈高表达,在相应低潜能转移细胞株呈低表达;uPA蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织和正常对照组,在有转移及静脉癌栓形成的肝癌组织阳性表达高于无转移及无癌栓者,癌巢边缘的癌细胞表达强于癌巢中央,血管内癌栓呈强阳性表达。结论:uPA在肝癌的的生长、侵袭和转移中起重要作用,可能作为治疗的操作、预防转移复发的对象。     

Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1促进肝癌细胞的转移

目的:探讨Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK1)在肝癌中的表达及在肝癌侵袭中的作用?方法:荧光定量PCR(real-time PCR)检测肝癌及癌旁组织中ROCK1的mRNA表达水平,同时检测肝癌细胞系及正常人肝细胞中ROCK1mRNA表达水平,免疫组织化学染色(IHC)法检测肝癌及癌旁组织中ROCK1蛋白的表达量,并通过在肝癌细胞株中过表达及干扰ROCK1分析ROCK1蛋白对肝癌细胞转移的作用?结果:60对样本中有42对ROCK1的mRNA表达水平在肝癌组织中高于癌旁组织,免疫组织化学染色提示肝癌组织中ROCK1蛋白表达量高于癌旁组织?在体外肝癌细胞的功能实验中,过表达ROCK1能促进HepG2细胞的侵袭和转移,而干扰ROCK1的表达能减少SMMC-7721细胞的侵袭和转移?结论:ROCK1在肝癌组织中高表达,过表达ROCK1能促进肿瘤的侵袭及转移,ROCK1可能成为临床治疗中抑制肿瘤侵袭和转移的靶点?     

MTA1、nm23、c-myc在肝癌组织中的表达及其相关性

目的     检测肝癌组织及相应癌旁组织中MTA1、nm23、c-myc的表达,探讨三者之间的相关性及与肝癌侵袭、转移和肝癌生物学行为的关系。方法     采用免疫组织化学法检测60例肝癌组织及其相应癌旁组织中MTA1、nm23、c-myc蛋白的表达,并结合相关临床病理特征进行分析。结果    ① 肝癌组织中MTA1蛋白、c-myc蛋白的阳性表达率显著高于其相应癌旁组织（P<0.01）,而肝癌组织中nm23蛋白的阳性表达率显著低于其相应癌旁组织（P<0.01）。② 在肝癌组织中MTA1蛋白、c-myc蛋白的高表达及nm23蛋白的低表达,均与肿瘤分化程度, 肝内、外转移及门静脉癌栓相关（P<0.05）。此外,MTA1蛋白的高表达及nm23蛋白的低表达还与HBsAg水平有关（P<0.05）,c-myc蛋白的高表达还与有无肿瘤包膜有关（P<0.05）。③ Spearman相关分析显示,MTA1与nm23的表达呈负相关(rs =-0.625, P<0.01),MTA1与c-myc的表达呈正相关(rs =0.392, P<0.05),而nm23与c-myc之间未见明显相关性。结论    MTAl、c-myc蛋白水平的高表达和nm23蛋白水平的低表达与肝癌的侵袭、转移有关,三者的联合检测可用于判断肝癌的生物学行为,有助于肝癌的基础研究及临床治疗。      

MIG7调节肝细胞癌中血管生成拟态的形成及其对肝癌转移潜能的影响

目的探讨肝细胞癌（HCC）中迁移诱导基因7（ MIG7）的表达与血管生成拟态（VM）形成的相关性,以及MIG7的表达与不同肝癌细胞株VM形成能力及转移潜能的关系。方法应用免疫组织化学方法分析配对的40例HCC原发灶及其转移灶标本中MIG7蛋白的表达和VM形成情况;应用三维培养技术培养不同转移潜能的人肝癌细胞株（高转移潜能肝癌细胞MHCC-97H、低转移潜能肝癌细胞MHCC-97L和非转移肝癌细胞Huh-7）及人正常肝细胞L-02,分别检测VM形成情况; 应用RT-PCR技术检测不同转移潜能肝癌细胞中 MIG7 mRNA的水平;应用Western blot技术检测不同转移潜能肝癌细胞株中MIG7蛋白表达水平。结果①40例配对的HCC原发灶和相应转移灶中,MIG7蛋白的表达与VM形成呈正相关（ rs=0.595,PMIG7 mRNA和蛋白表达及VM的形成能力均大于低转移潜能肝癌细胞株MHCC-97L及非转移肝癌细胞株Huh-7。人正常肝细胞L-02未见VM形成。结论MIG7高表达的肝癌组织中VM形成能力强,MIG7通过调节VM的形成影响HCC的侵袭转移,MIG7是抑制HCC侵袭转移的潜在靶点。     

肾母细胞瘤过表达基因促进肝癌细胞的侵袭与转移

目的:探讨肾母细胞瘤过表达基因(NOV CCN3)在肝癌中的表达及在肝癌侵袭中的作用?方法:荧光定量PCR(real-time PCR)检测肝癌及癌旁组织中的CCN3的mRNA表达水平,同时检测肝癌细胞系及正常人肝细胞中CCN3的mRNA表达水平,Western blot检测肝癌及癌旁组织中CCN3蛋白的表达量;通过肝癌细胞过表达CCN3分析CCN3蛋白对肝癌细胞转移的作用;运用Transwell侵袭实验和划痕迁移实验研究CCN3过表达对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响?结果:50对样本中有39对CCN3的mRNA表达水平在肝癌组织中高于癌旁组织,Western blot提示肝癌组织中CCN3蛋白表达量高于癌旁组织?体外肝癌细胞的功能试验中,过表达CCN3能促进MHCC-97H?SMMC-7721细胞的侵袭与转移?结论:CCN3在肝癌组织中高表达,过表达CCN3能促进肝癌的侵袭与转移,CCN3发挥作用机制的研究能为肝细胞肝癌的治疗提供新的思路?     

膜联蛋白A4在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的观察膜联蛋白A4（Annexin A4）在不同肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达情况,探讨其临床病理意义。方法先应用RT-PCR验证ANX A4在不同类型肝组织中mRNA的表达,再应用免疫组织化学方法检测在15例正常肝组织、15例乙肝后肝硬化组织和63例不同表型肝癌组织标本中的表达,探讨其差异表达与临床病理资料之间的联系及其意义。结果（1）ANX A4mRNA表达水平在肝硬化及肝癌组织中均比正常肝组织上调（P〈0．05）,但肝硬化组与肝癌组差异无统计学意义（P〉0．05）;（2）ANXA4蛋白阳性表达率正常肝组织为20％,乙肝后肝硬化组织为26．67％;在63例HCC中阳性率为49．21％,癌旁组织为61．90％,其中小肝癌阳性率为50．00％,大肝癌为64．29％,多发癌为28．57％,相应癌旁组织阳性率分别为50．00％、64．29％、66．67％。随着肝细胞的恶性转化并进展,ANXA4蛋白呈逐渐上调趋势,但当肿瘤出现侵袭转移时反而下调。与临床病理指标的相关性研究表明Annexin A4与HCC进展及侵袭相关。结论（1）从正常肝一肝硬化一肝癌组织,Annexin A4的mRNA表达水平逐渐上调;（2）ANxA4蛋白在HCC组织中的表达明显失调,其变化可能与HCC进展及侵袭相关。     

Cripto-1在人肺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨Cripto-1蛋白在人肺癌组织中的表达及其临床意义。方法:通过免疫组织化学方法检测60例肺癌患者的肺癌组织及50例癌旁组织中Cripto-1的表达,分析Cripto-1在人肺癌组织中的表达与临床的关系。结果:Cripto-1蛋白在人肺癌组织中的阳性表达明显高于癌旁组织(P<0.05);Cripto-1在人肺癌中的表达与患者的年龄和性别无明显相关(P>0.05),但与淋巴结转移、远处转移、侵袭范围及临床分期显著相关(P<0.05)。结论:Cripto-1可能在人肺癌的发生、发展、侵袭和转移过程中有重要作用,检测人肺癌组织中Cripto-1表达水平可能为肺癌的早期诊断提供依据,对肺癌的恶性程度评估及预后判断有一定参考价值。     

LRG1基因在肝细胞癌中的表达情况研究

目的：研究富亮氨酸重复1（leucine-rich-alpha-2-glycoprotein 1,LRG1）在人肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）中的表达情况,探讨其与 HCC 的相关性。方法：选取6个肝癌细胞系及30对连续的新鲜冰冻HCC 组织及其相应的癌旁非瘤肝组织标本,采取 qRT-PCR 检测 LRG1mRNA 的表达;Western blot 检测 LRG1的蛋白表达。结果：肝癌细胞系中 LRG1的 mRNA、蛋白的表达水平明显高于正常肝细胞系 LO2,LRG1的表达量与肝癌细胞系的侵袭转移能力正相关,新鲜冰冻组织中 LRG1的 mRNA、蛋白的表达水平明显高于相应的癌旁非瘤肝组织。结论：LRG1的高表达与 HCC 的恶性程度密切相关,对其研究可用于研发新的靶向药物。     

Tiam1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的：检测肝细胞癌（ HCC ）标本中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（ Tiam1）的表达,探讨Tiam1在肝细胞癌发生、发展及转移中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）和免疫组化方法检测Ti-am1 mRNA和蛋白质在肝癌组织和癌旁肝组织中的表达,并分析Tiam1的表达与肝癌转移的关系。结果 Tiam1 mRNA在癌旁肝组织中的相对表达量（0．136＆#177;0．136）明显低于肝细胞癌组织（0．718±0．089）（ P＜0．05）。 Ti-am1在肝细胞癌转移组mRNA的相对表达量（0．917±0．123）明显高于非转移组（0．678±0．136）（P＜0．05）。Tiam1蛋白在癌旁肝组织中的阳性率（38．4％）明显低于肝细胞癌组织（80．7％）（P＜0．05）。 Tiam1在肝细胞癌转移组蛋白表达阳性率（90．9％）明显高于非转移组（73．3％）（P＜0．05）。结论 Tiam1的表达升高在肝细胞癌的发生发展过程中起重要作用,可作为预测肝细胞癌转移的参考指标。     

P53、CD44v和nm23-H1在肝癌中的表达及意义

目的：探讨P53、CD44v和nm23-H1基因产物蛋白与肝癌侵袭、转移预后的关系。方法：用免疫组织化学技术检测了46例肝癌、癌旁组织（8例）和正常组织（8例）中P53、CD44v和nm23-H1基因产物蛋白的表达．结果：肝癌组织P53（63．1％）、CD44v（76．1％）、nm23-H1（60．1％），分别明显高于正常组织和癌旁组织（P＜0．05）。肝癌转移组三种基因产物蛋白的阳性表达率又分别与肝癌非转移组比较差异显著（P＜0．05）。结论：肝癌的侵袭、转移及预后可能与P53、CD44v和nm23-H1三种基因产物蛋白的异常表达有关。     

HSPA2在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的 检测并对比热休克蛋白A2(HSPA2)在胰腺癌及癌旁胰腺组织中的表达水平,分析HSPA2蛋白在胰腺癌标本中的表达水平与其临床病理参数之间的相关性.方法 采用实时定量PCR、Western blot法检测并对比胰腺癌及癌旁胰腺组织中HSPA2蛋白和mRNA的表达水平,采用免疫组织化学染色方法测定胰腺癌患者组织中HSPA2蛋白的表达,并探讨其表达与临床病理特征之间的关系.结果 与癌旁胰腺组织相比,胰腺癌组织中HSPA2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高.HSPA2蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率为68.8%(55/80).HSPA2蛋白表达量与胰腺癌的分化程度、血管侵犯、TNM分期差异有统计学意义(P=0.011、0.005、0.012),而与患者性别、年龄、肿块大小及位置、血清CA199水平差异无统计学意义.结论 HSPA2在胰腺癌组织中的表达明显高于与之相应的癌旁胰腺组织,且HSPA2的高表达与胰腺癌的恶性进展、侵袭和转移等事件密切相关.     

热休克蛋白90α在 HBV 相关性肝细胞癌中表达的意义

目的：探讨热休克蛋白90α（ HSP90α）在不同转移潜能人肝癌细胞株及HBV相关性肝细胞癌（ HCC）患者血清中表达的临床意义。方法：采用Western blotting、ELISA技术检测不同转移潜能肝癌细胞株及HBV相关性肝癌患者、良性肝病患者和健康对照者血清中HSP90α表达水平;回顾性分析HSP90α表达与临床病理资料间的关系。结果：HSP90α在高转移潜能MHCC97H细胞中的表达水平显著高于无转移潜能HepG2细胞（ P＝0.0002）。肝癌患者及良性肝病患者血清中HSP90α表达水平均明显高于健康对照者（ P＝0.0001）,但肝癌与良性肝病患者间差异无统计学意义（ P＝0.990）。肝癌患者血清HSP90α表达水平女性高于男性（ P＜0.05）,患者年龄、HBeAg是否阳性、AFP水平、HBV DNA水平及TNM分期均无统计学差异（ P＞0.05）。结论：HSP90α与HBV相关性HCC转移潜能相关,可望成为HCC侵袭转移、预后评估及区分HBV相关性肝病与健康者的标志物之一。     

AIP1在肝细胞癌中的表达及其与EMT的相关性研究

目的:研究肌动蛋白相互作用蛋白1(AIP1)在人肝细胞癌(HCC)中的表达情况,并探究其表达与上皮间质转化(EMT)的相关性.方法:选取6个肝癌细胞系和正常的肝细胞系L02,以及40对HCC组织和配对的癌旁非瘤肝组织标本,通过qRT-PCR检测AIP1 mRNA的表达,western blot检测AIP1蛋白的表达,最后采用免疫组织化学染色(IHC)验证组织中AIP1的表达并分析其表达与EMT标志物的关系.结果:肝癌细胞系中AIP1的mRNA和蛋白表达水平都显著高于正常肝细胞系L02.同样在新鲜冰冻的组织标本中,肝癌组织中AIP1的mRNA和蛋白表达都显著高于相应的癌旁非瘤肝组织,且通过IHC得到了进一步的证实.最后,IHC结果发现AIP1的上调可能与肝癌的EMT现象相关.结论:AIP1在肝癌中的表达发生上调,并可能通过促进肝癌的EMT而促进肝癌的侵袭转移.     

miR-30c减轻肝细胞肝癌的侵袭与转移

目的:观察miR-30c/snail在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达并探讨其在肝癌侵袭中的作用?方法:定量PCR检测肝癌及肝癌细胞系中miR-30c/snail的mRNA表达水平,通过免疫组织化学和Western blot分别检测肝癌及肝癌细胞系中snail的蛋白表达水平,并在肝癌细胞株中转染miR-30c模拟物或抑制物,分析其对肝癌细胞侵袭的作用?结果:与无脉管转移组相比,miR-30c在有脉管转移组的HCC组织中表达明显下调,同时在高转移肝癌细胞株MHCC-97H中也有相似的结果?转染miR-30c模拟物可减少snail的表达,并减少MHCC-97H细胞的侵袭性,然而,转染miR-30c抑制剂则增加snail的蛋白水平,增加HepG2细胞的侵袭力?结论:上调miR-30c的表达通过直接抑制snail,可减弱HCC的侵袭性?一种新的针对miR-30c的治疗策略可能有利于伴侵袭转移的HCC患者?     

miR-497抑制肝癌细胞的侵袭与转移

目的:检测miR-497/IGF-1R在肝癌中的表达并探讨其在肝癌侵袭与转移中的作用?方法:定量PCR(real-time PCR)检测肝癌及癌旁组织中miR-497的表达,同时检测肝癌细胞系及正常人肝细胞中miR-497/IGF-1R mRNA的表达水平,免疫组织化学及Western blot检测肝癌与肝癌细胞系中IGF-1R蛋白表达,通过过表达或干扰肝癌细胞系中miR-497的表达,分析其对肝癌细胞侵袭与转移的作用?结果:肝癌组织中miR-497表达水平低于癌旁组织?与无脉管转移组相比,有脉管转移组降低更为明显?同时在肝癌细胞系也有相似的结果,高侵袭性肝癌细胞系MHCC-97H中降低最为明显?IGF-1R在肝癌组织及肝癌细胞系中表达增加?过表达miR-497能降低MHCC-97H中IGF-1R的表达,抑制其侵袭和转移;干扰miR-497表达能增加IGF-1R表达,促进SMMC-7721细胞的侵袭和转移?结论:miR-497在肝癌组织中表达降低,过表达miR-497能下调IGF-1R,抑制肝癌的侵袭与转移,miR-497可能为治疗肝细胞肝癌提供新的靶点?     

CXCR4在不同转移潜能肝癌细胞中的表达及意义

  目的研究趋化因子受体CXCR4在高、低转移潜能肝癌细胞中的表达,并探讨其在肝癌细胞增殖和侵袭转移过程中的作用。方法 利用3B肝癌细胞株对人工基底膜穿透能力的差异获得不同转移潜能肝癌细胞亚系,并通过transwell小室侵袭实验比较两细胞亚系的侵袭能力从而对其进行验证, 应用RT-PCR和Western Blot检测CXCR4在两细胞亚系中的表达。CCK8法检测两细胞亚系生长曲线和倍增时间,流式细胞仪检测两细胞亚系细胞周期和凋亡率。结果成功筛选出高、低转移潜能肝癌细胞亚系,并通过transwell小室侵袭实验证实高转移潜能肝癌细胞的侵袭能力高于低转移潜能肝癌细胞;RT-PCR和Western Blot均显示高转移潜能肝癌细胞在基因水平和蛋白水平的CXCR4表达均显著高于低转移潜能肝癌细胞;且两细胞亚系体外生长速度、倍增时间、细胞周期和凋亡率均具有明显差异。结论上述结果表明CXCR4在肝癌进展中发挥了重要的作用,可能为未来肝癌的诊疗提供理论依据。     

PDCD6 Promotes Hepatocellular Carcinoma Cell Proliferation and Metastasis through the AKT/GSK3β/β-catenin Pathway

Objective Programmed cell death 6(PDCD6), a Ca²⁺-binding protein, has been reported to be aberrantly expressed in all kinds of tumors. The aim of this study was to explore the role and mechanism of PDCD6 in hepatocellular carcinomas(HCCs).Methods The expression levels of PDCD6 in liver cancer patients and HCC cell lines were analyzed using bioinformatics and Western blotting. Cell viability and metastasis were determined by methylthiazol tetrazolium(MTT) and transwell assays, respecti...     

保罗样激酶1蛋白在肝细胞癌中的表达及临床意义

 目的 探讨肝细胞癌（HCC）组织及细胞系中保罗样激酶1（Plk1）蛋白的表达情况及其临床意义。方法 应用免疫组化SP法检测HCC组织67例、配对癌旁肝硬化组织27例及正常肝组织5例中Plk1蛋白的表达情况,并分析其与临床病理特征之间的关系。应用Western blot检测肝癌细胞系BCL-7402及HepG2细胞中Plk1蛋白的表达情况。结果 Plk1蛋白在HCC肝癌组织中的阳性表达率为76.1%(5167),其中强阳性44.8%(3067),在配对的癌旁肝硬化组织中均呈阳性表达,而5例正常肝组织中均无明显表达。高分化HCC肝癌中Plk1蛋白的表达明显高于中低分化HCC 肝癌(P0.01);无包膜侵犯的HCC肝癌组织中Plk1蛋白的表达高于有包膜侵犯的HCC肝癌组织(P0.05);Plk1的表达与患者年龄、肿瘤直径、肿瘤数目、淋巴结转移、肝外转移、及门静脉有无癌栓无关。肝癌细胞系BCL-7402及HepG2中均存在Plk1蛋白的过表达。结论 Plk1在HCC肝细胞癌中表达率较高,其阳性表达可能是HCC发生过程中一个关键的早期因素。     

microRNA-616在肝细胞癌侵袭转移中的作用机制研究

目的探讨microRNA-616（miR-616）在肝细胞癌（HCC）中的表达及其在HCC侵袭转移中的作用机制。方法通过qRT-PCR检测miR-616在60例HCC及癌旁组织中的表达,同时检测miR-616在不同肝癌细胞系中的表达情况;免疫组织化学染色检测miR-616在HCC及癌旁组织中波形蛋白（vimentin）、上皮型钙黏素（E-cadherin）及同源性磷酸酶-张力蛋白（PTEN）的表达情况;qRT-PCR检测miR-616在人正常永生化肝细胞（LO2）及5种不同肝癌细胞系（HepG2、SMMC-7721、Hep3B、Hu7）中的表达水平;使用miR-616抑制物作用Hep3B细胞,TranswellTM实验检测miR-616抑制后Hep3B细胞侵袭能力变化;应用miR-616抑制物及PTENsiRNA转染Hep3B细胞,qRT-PCR检测Hep3B中miR-616、vimentin、PTEN、E-cadherin的mRNA水平,Westernblot法检测癌细胞中vimentin、PTEN、E-cadherin的蛋白水平。结果miR-616在HCC组织中表达水平高于对应癌旁组织;miR-616在不同肝癌细胞系中表达均高于LO2细胞;miR-616高表达与低表达在血管侵犯、Edmonson-Steiner分级、TNM分期比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);miR-616高表达肝癌组PTEN及E-cadherin水平低于miR-616低表达肝癌组,而vimentin水平高于miR-616低表达肝癌组,相关性分析结果显示HCC组织中miR-616与E-cadherin、PTEN水平呈负相关,与vimentin水平呈正相关;在肝癌细胞中抑制miR-616后PTEN及E-cadherin表达水平上调,而vimentin表达降低,Hep3B细胞的侵袭能力明显降低。结论miR-616在HCC组织中表达上调,其表达与HCC恶性临床病理特征有关,miR-616促进肝癌细胞侵袭转移的作用可能与其抑制PTEN表达及诱导上皮间质转化有关。