化学萃取自体骨骼肌桥修复神经缺损初步研究

目的 观察化学萃取自体骨骼肌桥修复大鼠坐骨神经缺损的可行性。方法 用化学萃取方法制备自体肌骼肌的无细胞基底膜管，修复大鼠坐骨神经１５ｍｍ神经缺损，与冻融肌作骼肌桥作对照，用免疫组织化学方法及碱性磷酸酶组织化学方法观察神经及血管再生的情况。结果 化学萃取自体骨骼肌桥在修复神经缺损伤后，其物理性能，移植物血管化过程和神经再生速度与质量均优于冻融肌桥。     

PLGA神经导管联合ADSCs与自体神经组织修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的:探讨PLGA神经导管联合ADSCs与自体神经组织碎屑修复大鼠坐骨神经缺损的修复效果。方法:32只SD大鼠平均分成4组,无菌条件下切断右侧的坐骨神经,制成1 0衄长的大鼠坐骨神经缺损模型,A组采用PLGA神经导管连接缺损神经进行修复,B组由内置自体神经组织碎屑的PLGA神经导管连接,C组由内置ADSCs与自体神经组织碎屑的PLGA神经导管连接,D组采用自体神经移植方式。12周后通过对再生神经桥接体的一般观察、HE染色、免疫荧光染色、甲苯胺蓝染色来评价神经的再生情况;通过肌电图、腓肠肌的HE和Masson染色来评价神经对靶器官的再支配情况。结果:术后12周,各组的神经导管均已降解,切断神经通过神经导管向两端生长。一般观察、肌电图、组织学观察结果均提示PLGA神经导管联合ADSCs与自体神经组织碎屑组C组的修复效果显著优于内置神经组织碎屑的PLGA神经导管组B组和空导管组A组的修复效果,但仍稍差于自体神经移植组D组。结论:PLGA神经导管联合ADSCs与自体神经组织可以比较有效地修复周围神经缺损,为周围神经缺损的修复提供了一种新的方法。     

血管植入变性骨骼肌与自体神经瘤片段联合移植修复周围神经陈旧性缺损

目的 评估血管植入变性骨骼肌与自体神经瘤片段联合移植修复陈旧性神经缺损的效果。方法 用自体神经移植及血管植入变性骨骼肌作为对照组比较，经5个月观察，采用电生理和形态定量学的检测。结果 联合移植组在电生理、再生轴突密度恢复率和再生轴突面积恢复率方面与血管植入肌桥组有显著性差异（P＜0.05）。与自体神经移植组无显著性差异（P＞0.05）。结论 联合移植能获得与自体神经移植相似的效果。     

自体去肌浆骨骼肌的制备及其修复周围神经缺损初探

自体去肌浆骨骼肌的制备及其修复周围神经缺损初探金国华，田美玲修复周围神经缺损的非神经移植材料研究甚多，Ｆａｗｃｅｔｔ曾用化学和挤压的方法在体外主除骨骼肌肌浆，修复鼠和兔的周围神经缺损。本文将去肌浆骨骼肌的制备及其结果和用其修复大鼠坐骨神经１０ｍｍ缺损...     

经脂肪源性干细胞诱导的施万样细胞用于组织工程化人工神经的实验研究

目的研究经大鼠脂肪源性干细胞（ADSCs）体外诱导分化的施万样细胞应用于组织工程化外周神经,修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法Wistar大鼠48只,体重200-250g,随机分成3组,每纽i6只,分别用下面3种不同的方法修复15mm坐骨神经缺损：DMEM组（支架内注射培养基）、诱导组（支架内注射施万样细胞）和自体神经移植组．通过足迹实验（坐骨神经功能指数测定）、神经电生理检测、胫前肌湿重比率测定进行功能检测;应用透射电镜、图像分析系统进行组织学观察。结果术后12周诱导组的SFI指数、神经传导速度、潜伏期、波幅以及胫前肌重量恢复、神经纤维数目、轴突直径、髓鞘厚厦好于DMEM组（P〈0．05）,接近自体移植组。再生神经中标记细胞观察显示PKH-26标记的ADSCs,依然呈红色荧光。结论ADSCs诱导分化后的施万样细胞与去细胞同种异体神经两者构建的组织工程化神经能有效地修复大鼠坐骨神经缺损,其效果与自体神经移植相似：ADSCs经诱导后的细胞可以作为组织工程种子细胞新的来源。     

组织工程化人工神经修复犬盆腔内脏运动神经缺损

目的探讨组织工程化人工神经修复盆腔内脏运动神经缺损的效果,为解决直肠癌手术盆腔植物神经损伤所致性功能障碍的治疗提供新思路和实验依据。方法以密度梯度离心法分离比格犬骨髓间充质干细胞（BMSCs）,体外培养和扩增后备用。制作比格犬盆腔内脏运动神经10mm缺损模型,分3组予以修复。A组：将BMSCs与胶原蛋白海绵混合移植于聚羟基乙酸和聚乳酸共聚物（PLGA）导管中构建组织工程化人工神经桥接盆腔内脏运动神经缺损段;B组：仅将胶原蛋白海绵移植于PLGA导管中桥接神经缺损段;C组：自体神经移植。术后12周移植段神经通过大体观察和免疫组织化学观察及电镜扫描、轴突计数等方法评价各组神经缺损修复的效果。结果术后12周,PLGA导管基本吸收,各组再生神经均能通过缺损区长至神经远端,A组再生神经纤维密度和神经结构与C组相近,均优于B组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BMSCs与PLGA导管构建组织工程化人工神经用于修复盆腔内脏运动神经缺损效果好,与自体神经移植效果相当。     

外消旋聚乳酸复合神经生长因子缓释导管促周围神经再生的形态学研究

目的 建立外消旋聚乳酸复合神经生长因子（poly-D，L-lactic acid／nerve growth factor，PDLLA／NGF）可吸收性缓释导管桥接修复大鼠坐骨神经缺损的动物模型，观察复合导管对大鼠坐骨神经缺损再生的促进作用。方法利用溶剂挥发法制备PDLLA单纯导管和PDLLA／NGF缓释导管，每根缓释导管含NGF450U。SD大鼠40只随机分成4组，每组10只，切除中段坐骨神经10mm之后分别行自体神经移植（A组）、单纯导管桥接（B组）、单纯导管加一次性给药（C组）、PDLLA／NGF缓释导管桥接（D组）修复坐骨神经，除A组外，均保留10mm缺损。术后3个月观察神经再生情况，比较各组光镜、电镜及图像分析等指标。结果术后3个月导管与周围组织粘连松，并开始降解，但外形仍保持完整。再生神经均顺利通过导管腔，组织学观察A组和D组内神经纤维数目多，大小均匀，成熟良好；B组和C组纤维结缔组织多，神经纤维细小，髓鞘薄。图像分析显示除神经纤维计数D组高于A组外，A组和D组在纤维直径、轴突直径和髓鞘厚度方面差异均无统计学意义（P〉0．05），并明显优于B组和C组（P〈0．05）。结论 PDLLA／NGF缓释导管能够有效促进大鼠坐骨神经缺损再生，组织学观察指标接近自体神经移植。     

经等离子体修饰并复合BMSCs的组织工程神经研究

目的探讨经等离子体修饰的PLGA神经导管复合BMSCs后修复大鼠坐骨神经缺损的疗效。方法取30只新生SD大鼠股骨及胫骨骨髓,培养获得原代BMSCs,并传至第3代。将PGA和PLA按90∶10摩尔比例混合,制备PLGA神经导管,对其进行等离子体修饰。取30只4周龄SD大鼠,制备右后肢坐骨神经1cm缺损模型。按修复材料不同随机分成3组(n=10),实验组:第3代BMSCs复合经等离子体修饰PLGA神经导管;对照组:第3代BMSCs复合普通PLGA神经导管;自体组:自体神经。术后6周观察大鼠的行走步态变化,测定坐骨神经功能指数(sciatic function index,SFI)、电生理变化、腓肠肌湿重恢复率,采用再生神经轴突图像分析评价神经修复效果。结果术后大鼠均存活至实验完成。术后6周,实验组和自体组大鼠行走步态恢复情况较对照组好。实验组、对照组及自体组SFI分别为—51.02±6.54、—58.73±7.87及—48.73±3.95,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组运动神经传导速度及波幅明显高于对照组(P<0.05),但与自体组差别不明显(P>0.05),对照组与自体组差异有统计学意义(P<0.01)。实验组、对照组及自体组腓肠肌湿重恢复率分别为56.13%±4.27%、43.14%±6.52%、59.47%±3.85%,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组有髓神经纤维密度、直径及髓鞘厚度均高于对照组(P<0.05),低于自体组(P<0.05);对照组与自体组差异有统计学意义(P<0.01)。结论复合BMSCs的等离子体PLGA神经导管能有效促进周围神经的再生,为研制新型的组织工程神经修复周围神经缺损提供新的思路。     

骨骼肌包埋自体神经片段修复周围神经缺损的实验研究

作者设计用骨骼肌包埋自体神经片段修复周围神经缺损，试图克服单纯骨骼肌修复神经缺损中缺乏雪旺氏细胞的不足．选实验用大白鼠４０只．随机分成Ａ、Ｂ两组，每组２０只．造成坐骨神经缺损２ｃｍ，分别用骨骼肌包埋自体神经片段及单纯骨骼肌桥接．经２个月大体观察、镜下观察及电生理测定，证实骨骼肌包埋自体神经片段修复周围神经缺损所再生的神经纤维在直径、髓鞘厚度、数量及运动神经传导速度等方面均优于单纯骨骼肌桥接．     

冻干去细胞同种异体神经种植类许旺细胞修复坐骨神经缺损的实验研究

目的研究冻干去细胞异体神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法50只成年雌性DA大鼠随机分为5组，每组10只，分别用5种移植物桥接大鼠1．5cm坐骨神经缺损。A组：冻干去细胞异体神经种植类许旺细胞移植组；B组：冻干去细胞异体神经移植组；C组：去细胞异体神经移植组；D组：新鲜异体神经移植组；E组：自体神经移植组。术后4、24周通过大体观察、神经电生理、肌肉湿重及组织学指标评价各组修复神经缺损的效果。结果术后24周A、E组间差异无统计学意义（P〉0．05），A、E组的各项指标均优于B、C、D组（P〈0．05或P〈0．01）。结论冻干化学去细胞神经是良好的神经移植替代材料。     

静电纺纳米聚乳酸己内酮共聚物导管修复周围神经缺损的实验研究

目的 探讨应用同轴静电纺丝技术制备的聚乳酸己内酮共聚物[Poly(1-lactide-co-epsilon-caprolactone),P(LLA-CL)]导管,移植修复大鼠周围神经缺损的效果.方法 选取健康SD大鼠54只,随机分成3组,每组18只.先造成坐骨神经1.5cm缺损段,然后分别采用P(LLA-CL)导管桥接(A组)、硅胶管桥接(B组)、自体神经逆行原位移植(C组).分别在术后4、8、12周对大鼠进行大体观察、坐骨神经功能指数检查、神经电生理检查、肌肉湿重、再生有髓神经纤维计数、电镜观察,评价各组神经再生.结果 术后4周时A组再生神经已部分生长到导管的中部;8周时再生神经已通过神经导管,但再生的神经纤细;12周时再生神经粘连较轻,直径较粗.A组的坐骨神经功能指数、神经电生理、肌肉湿重和组织学观察等各项指标均略差于C组,但明显优于B组.结论 纳米聚乳酸己内酮神经导管具有促进神经轴突再生的作用,有望成为自体神经移植的替代材料应用于周围神经缺损的修复.     

几丁糖复合聚乙烯醇神经导管修复大鼠坐骨神经损

目的 径较粗,达到正常神经的直径。肌肉湿重和肌细胞截面积：A组和C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);A、C组明显优于B组,差异有统计学意义(P＜0.05)。组织学观察：A组和C组神经纤维数日多、大小均匀、成熟良好,B组神经纤维数目少、不均匀、髓鞘发育较差。神经示踪观察结果显示：A、B、C三组在L4～L6节段脊髓前角和背根节均可见到真蓝标记的神经元细胞,其中A组脊髓前角真蓝标记的神经元数目和C组相似,差异无统计学意义(P＞0.05),但明显优于B组,差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论 几丁糖复合聚乙烯醇神经导管具有促进神经轴突再生的作用,有望成为自体神经的替代材料,应用于周围神经缺损的修复。     

复合神经生长因子的纳米纤维导管促神经再生的初步研究

目的 探讨应用同轴静电纺丝技术制备复合神经生长因子的神经导管的可行性,检测神经生长因子的活性及对神经再生的作用.方法 应用同轴静电纺丝技术制备以可降解生物材料乳酸己内酯共聚物[P(LLA-CL)]为壳层材料、神经牛长冈子(NGF)和牛血清蛋白(BSA)为芯层材料的纳米纤维,纺织成神经导管复合体.模拟体内环境进行体外降解缓释8周,在不同时间点,应用PCI2细胞培养法检测缓释液中NGF的生物活性.构建大鼠坐骨神经10 mm缺损模型.分别采用自体神经移植(A组)、P(LLA-CL)/BSA/NGF导管(B组)、P(LLA-CL)/BSA导管加一次性注射NGF(C组)、P(LLA-CL)/BSA导管(D组)桥接神经断端,术后12周进行再生神经形态学等观察.结果 P(LLA-CL)/BSA/NGF导管在体外8周尚末完全降解.能够持续释放NGF,并保持牛物活性.解剖观察可见再牛神经均通过神经导管,B组再生神经的卣径最均匀一致,达到正常神经的直径.透射电镜图片显示,A组和B组神经纤维数日多、大小均匀、成熟良好,C组和D组纤维结缔组织多、神经纤维细小、髓鞘薄.结论 P(LLA-CL)/BSA/NGF导管具有良好的组织相容性和生物活性,能够诱导并促进神经再生,提高神经再牛的质量,其移植效果接近于自体神经移植.     

聚乳酸与聚羟基乙酸共聚物三维神经导管内微丝直径对周围神经缺损修复的影响

目的 应用含有微丝的聚乳酸与聚羟基乙酸共聚物(PLGA)三维神经导管修复大鼠周围神经缺损,最终探寻修复周围神经微丝直径的最佳范围.方法 将60只300～350 g健康、雌雄不拘SD大鼠随机均分为6组.制作大鼠12 mm的左侧坐骨神经缺损模型;A、B、C、D、E组PLGA神经导管内纵形放入20根不同直径(分别是60、80、100、120、140μm)微丝,各组神经导管内均注入层黏蛋白+神经生长因子混合液0.3 ml.F组:自体神经移植组.大鼠左后肢为实验侧,右后肢为对照侧.测量术后12周各实验组神经导管内再生神经的运动神经传导速度,通过免疫组织化学检测再生神经纤维的数目.结果 术后12周,再生神经中1/3段的光镜观察,各组再生神经均有通过神经导管长入远端,神经纤维计数以F组最多,B、C、D组次之,而与A组、E组比较差异均有统计学意义(P<0.05),B组、C组、D组、F组的再生神经纤维数量及成熟程度均要明显优于A组和E组.结论 三维立体管状结构中的微丝直径粗细对周围神经的再生有影响,最佳的直径80～120μm.     

Rat sciatic nerve repair with a poly-lactic-co-glycolic acid scaffold and nerve growth factor releasing microspheres

The effect of microsphere delivered Nerve Growth Factor (NGF) in a poly-lactic-co-glycolic-acid (PLGA) 85/15 nerve conduit bridging a 10mm rat sciatic nerve gap was assessed, comparing nine groups (n = 6): PLGA conduits filled with saline, saline and NGF, saline with blank microspheres; four different NGF microspheres (5, 20, 50, and 100 mg/ml); an autologous graft and sciatic nerve gap. Histomorphometry, retrograde tracing, electrophysiology, and functional outcomes were evaluated up to 16 weeks. The autologous graft showed the largest fascicular area (0.65 mm(2) ) and had a significantly greater number of myelinated fibers (P < 0.0001). Electrophysiology showed Compound Muscle Action Potential (CMAP) recordings for the autologous graft returning at 6 weeks after nerve transection, reaching their highest amplitude of 3.6 mV at endpoint. No significant differences were found in functional evaluation between groups or between conduits with microspheres and the saline filled conduit. A PLGA 85/15 nerve conduit is capable of sustaining nerve regeneration. The microsphere delivery system does not interfere with regeneration.     

同轴共纺复合神经生长因子导管修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的 观察同轴共纺复合神经生长因子(NGF)导管对大鼠坐骨神经缺损修复的促进作用.方法 以复合NGF的牛血清白蛋白为芯层、乳酸.己内酯共聚物[P(LLA-CL)]为壳层,采用同轴共纺技术制备具有"壳-芯"结构的可降解纳米纤维复合神经导管.取SD大鼠72只,随机分为四组:自体神经移植组(A组),单纯[P(LLA-CL)]导管组(B组),单纯导管内一次性汴射NGF组(C组)和复合NGF导管组(D组),每组18只.制作大鼠坐骨神经10 mm缺损模型,四组大鼠分别采用白体神经移植、单纯[P(LLA-CL)]导管、单纯导管内一次性注射NGF、复合NGF导管桥接修复缺损.于术后第1、2、3个月行大体观察、坐骨神经功能指数、小腿三头肌湿重恢复率测量、电生理检测和组织学检查. 结果术后复合NGF导管逐渐开始吸水膨胀并降解,3个月时,虽然管壁已经出现裂隙,但依然保持良好的外形,没有对再生神经形成卡压.术后1个月,再生神经均已通过缺损,连接两断端,但较细小;随着时间的延长,再生神经逐渐增粗.各组间比较发现,D组再生神经取得了和A组相似的效果,明显优于B组和C组(P<0.05).尽管D组与A组之间比较.差异无统计学意义(P>0.05),甚至D组的有髓神经纤维计数还稍高于A组,但其髓鞘的厚度和直径不如A组,并且坐骨神经功能指数和腓肠肌湿重恢复率也比A纽稍差. 结论同轴共纺复合NGF神经导管具有良好的组织相容性、生物活性和机械强度,能够有效地促进神经再生,效果接近自体神经移植.     

Nerve regeneration across a 2-cm gap in the rat median nerve using a resorbable nerve conduit filled with Schwann cells

OBJECT: In a rat model, nerve regeneration was evaluated across a 2-cm defect in the median nerve by using a resorbable artificial nerve conduit. The aim of this study was to develop an artificial, biocompatible nerve guide to induce regeneration in the peripheral nervous system. METHODS: The authors compared a nerve conduit of trimethylenecarbonate-co-epsilon-caprolactone (TMC/CL) filled with autologous Schwann cells with both an empty hollow conduit and an autologous nerve graft. Animals that did not undergo surgery served as the control group. Nerve regeneration was evaluated with the grasping test, histological analysis of the nerve, muscle weight analysis (flexor digitorum superficialis muscle), and electrophysiological examination. After an observation period of 9 months, regeneration occurred only in animals that had received an autologous graft or a Schwann cell containing nerve conduit. No signs of regeneration were found in animals supplied with the empty conduit. CONCLUSIONS: Results of this study reveal the important role of Schwann cells in the regeneration process across a 2-cm defect in the rat median nerve. Furthermore, Schwann cell-filled nerve conduits induced functional recovery, as demonstrated in the grasping test, that was comparable with that of the autologous graft 9 months after implantation.     

Functional assessment of sciatic nerve reconstruction: biodegradable poly (DLLA-epsilon-CL) nerve guides versus autologous nerve grafts

The aim of this study was to compare functional nerve recovery after reconstruction with a biodegradable p(DLLA-epsilon-CL) nerve guide filled with modified denatured muscle tissue (MDMT), or an autologous nerve graft. We evaluated nerve recovery using walking track analysis (measurement of the sciatic function index [SFI]) and electrostimulation tests. Functional nerve recovery after reconstruction with a biodegradable p(DLLA-epsilon-CL) nerve guide filled with MDMT was faster when compared with nerve reconstruction using an autologous nerve graft. We conclude that in case of a short nerve gap in the rat, reconstruction can best be carried out using a p(DLLA-epsilon-CL) biodegradable nerve guide filled with MDMT.     

胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的雪旺细胞对大鼠坐骨神经缺损的修复作用

目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (glialcellline derivesneurotrophicfactor ,GDNF)基因对周围神经断伤后促进轴突再生及神经元的保护作用。方法　应用体外获取的GDNF修饰的雪旺细胞结合细胞外基质凝胶及生物可降解聚乳酸 聚羟基乙酸共聚物管 (polyCDL lactide co glycolide ,PLGA)构建的神经移植复合体 ,修复大鼠坐骨神经的缺损。 2 0只成年Wistar大鼠按桥接物的不同随机分为 4组 ,每组 5只。A组 :细胞外基质凝胶 PLGA管桥接组 ;B组 :雪旺细胞 细胞外基质凝胶 PLGA管桥接组 ;C组 :GDNF基因修饰的雪旺细胞 细胞外基质凝胶 PLGA管桥接组 ;D组 :自体神经桥接组。术后 12周检测运动神经传导速度 ,并进行再生神经的组织形态学观察以及计量学分析。结果　术后 12周 ,坐骨神经的运动神经传导速度 ,轴突数、髓鞘的厚度、神经纤维的直径、神经组织面积的百分比和脊髓前角运动神经元存活率等 ,C组均优于A、B组 (P <0 .0 1) ,而与D组相比无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　雪旺细胞的转基因处理可能弥补单纯细胞移植神经营养因子含量的不足 ,而达到与自体神经移植相似的效果。     

A comparison of polyglycolic acid versus type 1 collagen bioabsorbable nerve conduits in a rat model: an alternative to autografting

PURPOSE: Severe nerve injury with segmental loss requires nerve graft or conduit repair. We compared 2 synthetic, bioabsorbable nerve conduits with the gold standard of autogenous nerve grafting using histopathologic and neurophysiologic analyses. METHODS: A 10-mm segment of the sciatic nerve of 45 Sprague-Dawley rats was resected, leaving a gap defect. Three experimental groups were used: 15 coaptations using type I collagen nerve conduits, 15 coaptations using polyglycolic acid (PGA) nerve conduits, and 15 coaptations using the excised segments as autogenous nerve grafts. The contralateral legs were used as unoperated controls. After 15 weeks, nerve regeneration was evaluated by measuring isometric muscle contraction force, axonal counting, wet muscle weights, and histology. RESULTS: Statistically significant differences in the isometric muscle contraction force, axonal counts, and wet muscle weights were found between type I collagen conduit and nerve graft compared to the PGA conduit. Axonal sprouting was less organized and less dense with the PGA conduits when compared to nerve reconstruction with the type I collagen conduits and nerve grafts. CONCLUSIONS: Type I collagen conduits and autografts produced comparable results, which were significantly better than PGA conduits. The use of type I collagen conduit is a reliable alternative to nerve grafting for gaps up to 10 mm in length.