发性肝癌9号染色体等位基因杂合性丢失研究

目的：对广东地区３７例肝癌染色体９ｐ的９个位点进行微卫星多态性分析,明确这睦位点染色体等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）的情况,定位该区域可能存在的与肝癌有关的肿瘤抑制基因。方法：对所取位点用ＰＣＲ法进行微卫星多态性分析并确定发生ＬＯＨ的位点;结果：３０例（８０．８０％）在至少一个位点发生ＬＯＨ,其中ＬＯＨ频率最高的位点是Ｄ９Ｓ５４（６０．６％）,ＬＯＨ频率高于５０％的位点有位于９ｐ２１带的ＩＦＮＡ,Ｄ     

鼻咽癌染色体3p21-26的等位基因杂合性丢失研究

目的细胞遗传学研究表明,３号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明,染色体３ｐ在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）。本研究将进一步确定鼻咽癌３ｐ等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应用位于３ｐ２１２６区域１６个微卫星多态性位点,对２４例低分化鼻咽癌患者进行了ＬＯＨ分析。结果２４例患者中有１６例存在杂合性丢失（６６．７％）。丢失频率最高的两个位点是Ｄ３Ｓ１５６０（５０％,１１／２１）和Ｄ３Ｓ１６２０（５０％,９／１８）。在具有丢失的１６例患者中,８例显示为１个连续的多个相邻位点的杂合性丢失区域,５例患者存在２个或２个以上的杂合性丢失区。病例１,３,４,７,８,１０,１６,１７,１８,１９和２２在Ｄ３Ｓ１５９７和Ｄ３Ｓ１２９７之间,表现为一个不同大小的杂合性丢失区。结论最小共同丢失区位于Ｄ３Ｓ１５６０Ｄ３Ｓ１６２０（３ｐ２５．３２６．２）之间,提示该区域有一个尚未克隆的、与晚期鼻咽癌明显相关的抑癌基因。     

肝癌1号染色体等位基因杂合性缺失及临床意义

研究肝癌１号染色体等痊基因杂合性缺失（Ｌｏｓｓ ｏｆ ｈｅｌｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ,ＬＯＨ）及临床意义。方法采用ＰＣＲ及微卫星多态技术,对６５例肝癌１号染色体上２８个微卫生标志位点杂合性缺失进行检测。结果：６５例肝癌中６３例为杂合子,５７例至少在１个微卫星标志位点上发生ＬＯＨ,１号染色体ＬＯＨ率为９１％（５７／６３）,１ｐ７６％（４８／６３）,１ｑ８８％（５２／５９）;１ｐ３６．３２－ｐ３６．３３     

鼻咽癌染色体11q13等位基因杂合性缺失的研究

目的：对鼻咽癌中染色体11q13上的4个位点进行微卫星多态性分析,明确这些位点染色体位基因杂合性丢失的情况。方法：采用显微切割的方法获取较纯的肿瘤组织,然后用PCR的方法以PYGM、D11S4946、D11S449和INT－2为引物,对38例鼻咽癌进行微卫生序列分析。结果38例鼻咽癌组织中,至少有一个位点出现杂合性缺失者36例,占94．7％。其中D11S4946杂合性缺失的频率最高,占78．8％（26／33）,其余的引物分别为：INT－2占51．5％（17／33）,PYGM占45．5％（15／33）,D11S449占45．7％（16／35）。结论鼻咽癌染色体11q13区发生高频率杂合性缺失,提示缺失区域可能存在与鼻咽癌发生有关的抑癌基因。     

食管癌患者微卫星杂合性缺失特征及其意义

目的:探讨与食管癌发病密切相关的微卫星杂合缺失(loss of heterozygosity,LOH)变化特征及其意义.方法:将32例原发性食管癌手术切除标本采用微卫星DNA多态分析法,选取染色体3p、5q、6p、9p、13q、16q、17p、17q和18q的18个多态微卫星位点,对食管癌组织进行LOH分析.结果:18个微卫星位点均获得有效数据.结论:抑癌基因RASSF1A、APC、p15、BRCA2、p53、BRCA1和DCC的LOH可能是食管癌发生过程中重要的分子事件.     

胶质母细胞瘤3号染色体杂合性丢失的研究

目的　寻找胶质母细胞瘤 (GBM) 3号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失 (LOH)区域 ,为发现和定位肿瘤抑制基因 (TSG)提供线索和依据。方法　采用荧光标记的引物和 377型DNA序列自动分析仪 ,分析了 2 0例GBM 3号染色体上 2 3个微卫星多态性标记的LOH。结果　在 50 % (1 0 / 2 0例 )GBM的 3号染色体上观察到LOH ,在 2 5 .6 % (88/ 344)可提供信息位点存在LOH。其中 3q的LOH率明显高于 3p ,3q和 3p的LOH率分别为 50 % (1 0 / 2 0 )、35 % (7/ 2 0 )。在 3q上的下列位点检测到较高的LOH率 :3q2 2 2 3上的微卫星位点D3s1 569(35 .3 % )、3q2 4 2 7上的D3s1 61 4 (42 .9% ) D3s1 565(35 .3 % ) ;在3p1 4 .1 1 4 .3上D3s1 2 89的LOH率也较高 (33 .3 % )。 结论　 3号染色体可能在GBM的分子发病机制中发挥着重要作用 ,3p1 4 .1 1 4 .3上的D3s1 2 89和 3q2 2 2 3上的D3s1 569位点、3q2 4 2 7上的D3s1 61 4 D3s1 565位点间区域可能存在与GBM相关的肿瘤抑制基因     

B淋巴瘤6号染色体微卫星不稳定性及杂合性缺失

目的：探讨6号染色体微卫星不稳定性（microsatellite instability，MSI）及杂合性缺失（loss of heterozygosity，LOH），碱基错配修复系统GTBP和hMLH1基因蛋白在B细胞淋巴瘤（B cell non-hodgkin’s lymphoma，B-NHL）发生学上的意义。方法：选取6号染色体上7对多态微卫星标记，结合PCR及银染技术，采用凝胶成像图象分析系统，分别检测58例B-NHL染色体微卫星MSI及LOH。对其中23例BNHL细胞进行EnVinsion法检测MMR的功能基因GTBP、hMLH1的表达情况。结果：弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-celllymphoma，DLBCL）与滤泡性淋巴瘤（follicular lymphoma，FL）中GTBP和hMLH1蛋白表达差异无统计学意义，P值分别为0．98和1．30。原发生于淋巴结内与淋巴结外的GTBP、hMLH1蛋白表达差异无统计学意义，P值分别为0．54和0．67。GTBP蛋白在高、低度恶性表达之间差异无统计学意义，P=1．00；而hMLH1蛋白表达在低度恶性较高度恶性高，P=0．99。在位点D6S275 MSI的发生率为7．5％（4／53），其中包括DLBCL2例，FL和BCLL／SLL各1例，LOH总的发生率达66．0％（35／53），其中包括DLBCL19例（19／21，90．5％），FL8例（8／13，61．5％），B-CLL／SLL8例（8／19，42．1％），DLBCL的LOH率同B-CLL／SLL和FL相比，差异有统计学意义，P=10．60。结论：hMLH1和GTBP错配修复基因蛋白表达与BNHL组织学类型、肿瘤的发生部位可能无关系。位点D6S275可能存在一个抑癌基因，该基因的缺失以及与错配修复基因hMLH1突变的关系对B细胞淋巴瘤的发生作用有待进一步研究。     

原发性肝细胞癌多染色体杂合性丢失研究

研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）５对染色体３８个位点等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）,ＬＯＨ与肝癌的临床病理改变和肝炎病毒的关系。方法：用ＰＣＲ微卫星多态性分析检测肝癌ＬＯＨ。结果发生高频率ＬＯＨ的位点有染色体１ｐ的Ｄ１Ｓ１８６（这,４８．１％）和Ｄ１Ｓ２４３（１ｐ３６．３,５１．６％）;染色体９ｎ２４的Ｄ９Ｓ５４（６１．８％）,９这的Ｄ９Ｓ１７４７（５２．％）和ＤＤ９Ｓ１７５２（５１．８％）ＷＵＧ ＨＫ     

胶质母细胞瘤6号染色体杂合性丢失的初步研究

目的：寻找胶质母细胞瘤（GBM）6号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失（LOH）区域,为发现和定位肿瘤抑制基因（TSG）提供线索和依据。方法：应用聚合酶链反应（PCR）方法,采用荧光标记的引物及377型DNA序列自动分析仪,分析了21例GBM患者6号染色体上20个微卫星多态性标记的LOH。结果：6号染色体总的LOH检出率为47．6％（10／21）,在28．1％（81／288）能提价信息位上检测了LOH。其中,6p和6q的LOH检出率分别是28．6％（6／21）、38．1％（8／21）,在6q^tel上距短臂端粒201．1cM的微卫星位点D6S281检测到较高的LOH率（50％）,6q^16.3上D6S287的LOH率也高达50％,另外,6p^21.1-21.3上D6S276的LOH率也较高（35．3％）。结论：6号染色体分子遗传学异常改变可能在GBM的发生发展中起着重要作用,染色体6q^tel上的D6S281位点,6q^16.3上的D6S287和6p^21.1-21.3的D62S276位点所在的染色体区域可能存在与GBM相关的肿瘤抑制基因。     

口腔鳞吕中染色体9p,9q的杂合性丢失及p16表达的研究

检测９号染色体及Ｐ１６基因在口腔鳞吕发生发展中的作用。方法：应用聚合酶链反应技术,检测经显微切割的口腔鳞癌组织中两个ＤＮＡ微卫星殉态标记ＤｑＳ３１９和ＤｑＳ２９９,分析染色体９ｐ、９ｑ的杂合性丢失情况。同时应用免疫组织方法观察其Ｐ１６蛋白表达状况。     

散发性结直肠癌4号染色体长臂的杂合缺失分析

目的:通过在4号染色体长臂高频杂合缺失(LOH)位点寻找结直肠癌相关的肿瘤抑制基因.方法:荧光标记的微卫星引物与83例结直肠癌的肿瘤和正常组织进行聚合酶链反应(PCR).PCR产物在ABI 377DNA测序仪进行电泳分析,用Genescan 3.7和Genotype 3.7软件进行扫描及LOH分析.LOH结果与临床、病理因素进行χ2检验.结果:4号染色体长臂(4q)的平均LOH率为28.56%,发现明显的2个高频LOH区间,一个在D4S3000和D4S2915位点之间(4q12～21.1);另一个在D4S407和D4S2939位点之间(4q25～31.1).在D4S3018位点,肿瘤直径>5 cm的LOH明显高于直径<5 cm的LOH(56% vs 13.79%.P=0.01).在D4S1534位点.肝转移的LOH明显高于未发生肝转移的患者(80% vs17.25%,P=0.012).结论:2个4号染色体长臂的高频杂合缺失区域4q12-21.1、4q25-31.1可能存在散发性结直肠癌发生、发展相关的肿瘤抑制基因.     

卵巢癌及宫颈癌中17p13.3的杂合性丢失

目的探讨染色体１７ｐ１３．３的杂合性丢失（ＬＯＨ）与卵巢癌、宫颈癌发生及发展之间的相关性。方法采用ＰＹＮＺ．２２探针做Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹技术,检测２４例卵巢癌、９例宫颈癌及１３例妇科非癌患者手术切除组织染色体１７ｐ１３．３的ＬＯＨ。结果１２例卵巢癌（包括１例交界性粘液性囊腺癌）和４例宫颈癌发生１７ｐ１３．３的ＬＯＨ,丢失频率分别为５０．０％和４４．４％。１３例非癌组织中,仅１例（７．７％）发生丢失,该例经病理证实为宫颈上皮内瘤变Ⅲ级,属癌前期病变（Ｐ＜０．０１）。结论染色体１７ｐ１３．３的ＬＯＨ可能与宫颈癌和卵巢癌的发生相关,检测１７ｐ１３．３的杂合性丢失将有助于深入了解卵巢癌和宫颈癌发生及发展的分子基础。     

散发性结直肠癌1号染色体短臂遗传位点杂合缺失

目的：抑癌基因的杂合缺失（loss of heterozygosity，LOH）被认为是结直肠癌形成的关键步骤之一。本实验研究了结直肠癌1号染色体短臂杂合的缺失情况，并探讨其临床意义。方法：选取11个微卫星DNA标记与83例结直肠癌病例的肿瘤和正常组织进行PCR。PCR产物在ABI Prism 377自动荧光测序仪上进行电泳，以GeneScan3．1和Genotyper 2．1软件进行遗传位点扫描以及杂合缺失分析。结果：1号染色体短臂的平均杂合缺失率为18．00％，D1S468（1p36．33—36．31）位点的杂合缺失率最高，达36．54％。D1S2726位点的杂合缺失现象主要存在于直肠癌，缺失率为28．57％（6／21），而结肠癌的缺失率为0．00％（0／33），二者差异具统计学意义（P=0．002）。结论：在1号染色体短臂上可能存在与结直肠癌发生相关的抑癌基因，位于1p36．33—36．31这个区域。     

Loss of heterozygosity analysis on the long arm of chromosome 7 in gastric carcinoma

Objective In order to defne the common deleted region related to primary gastric carcinomas in Chinese, the frequency of loss of heterozygosit (LOH) on human chromosome 7q and its clinicai significance were investigated. Methods A set of 9 microsatellite markers on 7q with an average genetic distance of l0cM were used to identify LOH by muiti -PCR amplification of matched tumor and non-tumor DNAs from 70 patients with primary gastric carcinoma. The PCR products were separated by electrophoresis in poiyacrylamide gels and analysed for LOH by using Genescan and Genotyper software. Results The total frequency of LOH at any iocus on 7q was 34.3% (24/ 70) in the tumors. Compared fo non -tumor DNA, LOH at D7S486 and D7S798 loci were higher, 24.0% (12/50) and 19.2% (5/26), respectively The total frequency of LOH on 7q was markedly higher with an increase in the clinical stage (P<0.05). The frequency of LOH at D7S486 in cases with lymph node metastasis was significanty higher than in cases without lymph node metastasis,P=0.015. Conclusion The higher incidence of LOH at O7S486 and D7S798 in primary gastric carcinoma compared to normal tissue suggests that the potential tumor suppressor genes (TSGs) involved in the progression of gastric carcinoma might be nearby these 2 locl. This work was supported by the National Natureal Science Foundation of China. (No.30070840)     

Loss of Heterozygosity Analysis on the Long Arm of Chromosome 7 in Gastric Carcinoma

Objective  In order to defne the common deleted region related to primary gastric carcinomas in Chinese, the frequency of loss of heterozygosit (LOH) on human chromosome 7q and its clinicai significance were investigated. Methods  A set of 9 microsatellite markers on 7q with an average genetic distance of l0cM were used to identify LOH by muiti -PCR amplification of matched tumor and non-tumor DNAs from 70 patients with primary gastric carcinoma. The PCR products were separated by electrophoresis in poiyacrylamide gels and analysed for LOH by using Genescan and Genotyper software. Results  The total frequency of LOH at any iocus on 7q was 34.3% (24/ 70) in the tumors. Compared fo non -tumor DNA, LOH at D7S486 and D7S798 loci were higher, 24.0% (12/50) and 19.2% (5/26), respectively The total frequency of LOH on 7q was markedly higher with an increase in the clinical stage (P<0.05). The frequency of LOH at D7S486 in cases with lymph node metastasis was significanty higher than in cases without lymph node metastasis,P=0.015. Conclusion  The higher incidence of LOH at O7S486 and D7S798 in primary gastric carcinoma compared to normal tissue suggests that the potential tumor suppressor genes (TSGs) involved in the progression of gastric carcinoma might be nearby these 2 locl. This work was supported by the National Natureal Science Foundation of China. (No.30070840)     

Loss of heterozygosity on chromosome 9q21 (p16 gene) uncommon in soft-tissue sarcomas

Chromosome region 9p21 contains a tumor suppressor locus (p16) that may be involved in the genesis of several kinds of malignant tumors. To characterize the role of this gene in the development of soft-tissue tumors (STTs), we investigated the frequency of loss of heterozygosity (LOH) at this locus. DNA was obtained from 77 tumors and the peripheral blood of 23 of the patients with the tumors. Using one microsatellite marker distal to p16 (D9S171) and one intragenic sequence-tagged site (STS) marker (c5.1), we observed LOH in only one liposarcoma and one malignant schwannoma (2.6%). Homozygous deletions of the p16 markers were not found. The osteosarcoma cell line MG-63 was used as a control for loss of the p16 gene. Because of the low LOH frequency, we hypothesize that the p16 gene is not essential for STT oncogenesis. Mol. Carcinog. 18:63–65, 1997. © 1997 Wiley-Liss, Inc.     

食管癌血清标记物研究进展

近年来,蛋白质组学技术的发展不仅使癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)等临床常用的肿瘤标记物的阳性率明显提高,而且筛选出许多新的与食管癌相关的血清学肿瘤标记物,如血管内皮生长因子、血管生成素、Dickkopf21蛋白、肿瘤M2型丙酮酸激酶等,对这些新的标记物的临床研究,有可能改变食管癌诊断和治疗的现状.     

生活质量评价在食管癌外科治疗中的应用

生活质量(QOL)是健康和病情变化的评价指标,能全面地反应食管癌的治疗效果.有研究表明QOL评价为食管癌外科治疗的手术方式、淋巴结清扫、消化道重建等方面提供了新的选择.QOL评价的深入研究运用,将进一步提高外科治疗效果,改善食管癌患者的QOL.