实验性脑出血后细胞凋亡与神经损伤的关系

目的 探讨脑出血后血肿周嗣组织细胞凋亡、Bcl-2和Bax蛋白表达与神经功能损伤的关系。方法 SD大鼠70只，随机分为实验组和对照组，每组各35只。实验组采用胶原酶诱导尾状核脑出血模型，分别于术后6h、12h、24h、48h、72h、7d、14d共7个时相点（每个时相点5只）评测其神经功能缺损情况。之后处死大鼠，采用TUNEL法、免疫组化SP技术，检测血肿周嗣脑组织细胞凋亡及Bcl-2，Bax蛋白的表达。结果脑出血后大鼠出现不同程度的神经功能缺损，以术后48h左右损害严重．出血后6h血肿周嗣组织出现TUNEL阳性细胞，48h达高峰。Bcl-2和Bax蛋白表达高峰期分别是脑出血术后6h和48h。结论 脑出血后细胞凋亡与神经损伤程度一致，细胞凋亡在脑出血后神经功能损伤中起重要作用。     

脑出血周围组织细胞凋亡与bcl-2及bax蛋白表达的关系

目的：探讨脑出血灶周围组织中bcl-2，bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法：SD大鼠70只。随机分为两组（实验组和对照组）。实验组采用胶原酶诱导大脑尾状核脑出血模型，分别于术后第6h、12h、24h、48h、72h、7d、14d，7个时相点（每个时相点5只）处死大鼠，运用TUNEL法、免疫组化SP技术，检测血肿周围脑组织中细胞凋亡及bcl-2．bax蛋白表达。结果：实验组细胞凋亡、bcl-2，bax蛋白表达与对照组有非常显著性差异（P〈0．01）．高峰期分别为脑出血术后第6h、48h。bcl-2蛋白表达与凋亡阳性细胞数呈负相关（r=-0．7628，P〈0．05），bax蛋白表达与凋亡阳性细胞呈正相关（r=0.8438，P〈0．01）。结论：脑出血灶周围脑组织中存在细胞凋亡，bcl-2，bax蛋白对凋亡具有调控作用。     

大鼠脑出血血肿周围补体与细胞凋亡的动态观察

目的:动态观察大鼠脑出血后血肿周围组织补体激活与细胞凋亡的规律。方法:用胶原酶注入到大鼠尾状核的方法制作脑出血模型。将大鼠分为脑出血、假手术组、正常组3组。采用苏木素伊红(HE)染色、免疫组织化学染色及原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)分别观察各组在脑出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d时血肿周围补体C3、促凋亡基因(Bax)、抑凋亡基因(Bcl-xl)及TUNEL的表达。结果:补体C3的表达峰值在24～48 h;TUNEL、Bax蛋白表达术后12h增加,48～72 h达高峰,而Bcl-xl蛋白表达高峰在48h。结论:大鼠脑出血后血肿周围组织补体C3的表达增加与细胞凋亡的演变趋势一致,C3与凋亡有相关。     

大鼠脑出血后细胞凋亡与神经元特异性烯醇化酶及神经损伤关系的研究

目的：了解大鼠脑出血后血肿周围组织细胞凋亡与神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达及大鼠神经功能缺损程度的关系。方法：用胶原酶注入到大鼠尾状核的方法制作脑出血模型。将大鼠分为脑出血、假手术组、正常组3组。采用苏木素伊红（HE）染色、NSE免疫组织化学染色及TUNEL分别观察各组在脑出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d时血肿周围NSE及TUNEL的表达。用Longa评分法评价大鼠神经功能缺损程度。结果：大鼠在胶原酶注入6 h后形成稳定的血肿,在造模24～48 h神经功能缺损程度最重;6 h即见到TUNEL阳性细胞的表达,在48 h最明显;NSE从神经元中漏出弥散到细胞间隙也在48 h达高峰。结论：脑出血血肿周围凋亡与神经功能缺损及NSE的变化有关,凋亡可能在脑出血的神经损伤中起重要的作用。     

运动训练对大鼠试验性脑出血后血肿周围组织细胞凋亡的影响

目的：观察运动训练对血肿周围组织细胞凋亡的影响。方法：120只SD大鼠被随机分为3组，实验组（40只。出血并运动）、对照组（40只，出血不运动）和假手术组（40只，无出血，不运动），前两组又分为术后24h，7d，14d，21d，28d，5个时相点，每个时相点3只用于TUNEL，5只用于流式细胞仪检测。结果：TUNEL阳性细胞数在脑出血（ICH）24h时实验组和对照组无区别，但与假手术组相比差异有非常显著性（P〈0．01），凋亡于ICH术后7-14d一度下降，21d后回升，28d又下降，但实验组表达明显低于对照组（P〈0．05）。凋亡不仅存在于血肿周围组织和皮质，海马区也可见明显凋亡现象。流式细胞分析：不同时间细胞凋亡率的变化趋势与TUNEL阳性细胞数一致，而且实验组凋亡率明显低于对照组，差异有显著意义（P〈0．05），但双参数分析较单参数灵敏性更高，差异有非常显著意义（P〈0．01）。结论：运动训练可以通过抑制脑出血后血肿周围的神经细胞凋亡，从而改善神经功能。     

运动训练对实验性脑出血大鼠血肿周围组织细胞凋亡及海马CA1区超微结构的影响

目的观察运动训练后血肿周围组织细胞凋亡情况和组织学改变，以及海马CA1区超微结构方面的表现，以研究运动对出血性脑损伤细胞凋亡的影响及其改善神经功能的机制。 方法88只SD大鼠被随机分为3组，实验组（40只，出血并运动）、对照组（40只，出血不运动）和假手术组（8只，无出血，不运动），前两组又分为术后24 h、7 d、14 d、21 d、28 d等5个时相点，每个时相点取5只用于TUNEL检测及光镜观察，3只用于电镜观察。 结果实验组和对照组血肿周围、大脑皮质、海马等脑组织在ICH后24h出现典型的细胞凋亡特征（电镜及TUNEL染色），实验组不同时相点凋亡细胞数明显较对照组和假手术组减少（P<0.05），而血管增生却较对照组和假手术组更明显（光镜）。 结论运动训练可以通过抑制脑出血后血肿周围及海马区的神经细胞凋亡，增加血管再生，从而改善神经功能。     

运动训练对出血性脑损伤细胞凋亡基因caspase-3及其蛋白表达的影响

目的： 观察运动训练对脑出血大鼠神经细胞凋亡基因caspase-3 及其蛋白表达的影响。方法：实验动物用健康雄性SD大鼠120只。随机分为3组，实验组（出血后运动，40只）、对照组（出血后不运动，40只）、假手术组（无出血不运动，40只）。各组又分为术后7d，14d，21d，28d共4个时相点，每个时相点5只用于免疫组化检测，5只用于RT-PCR 和Western印迹法检测。实验组于术后24h开始跑笼训练，其余大鼠在标准笼内自由活动。结果：①免疫组化结果：caspase-3阳性细胞表达为细胞胞浆着棕黄色，阳性细胞主要分布于血肿周围和大脑皮质的神经元。实验组随运动训练时间延长似乎有表达上调趋势，28d时表达虽有下降迹象，但仍处于较高水平。对照组表达水平较实验组更明显，但两组差异无显著性意义（P>0.05），实验组和对照组与假手术组相比差异有非常显著性意义（P<0.01）。②Western blotting和RT-PCR 结果与免疫组化一致。结论：caspase-3参与了脑出血后细胞凋亡的发生，但运动训练对caspase-3基因及其蛋白表达的抑制作用不明显。     

大鼠脑出血模型中神经细胞凋亡的特征及Bcl-2蛋白对细胞凋亡的调控

目的：研究大鼠脑出血灶周围是否存在细胞凋亡及Bcl-2蛋白的表达。方法：SD大鼠50只，随机分为5组，10只为对照组，其余40只建立大鼠脑出血模型，分别于模型制备后12，24，48，72h取脑组织，应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡，免疫组化SP法检测Bcl-2蛋白。结果：正常细胞对照中未见TUNEL及Bcl-2阳性细胞，其余各组中TUNEL及Bcl-2阳性细胞均有不同程度表达。凋亡率随出血后时间不同而发生相应改变，在出血后48～72h达到高峰，TUNEL阳性细胞率峰值为(24．50&;#177;2．69)％，实验组与对照组间差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。Bcl-2蛋白在出血灶周围细胞中亦有表达，其阳性表达率峰值为(20．76&;#177;1．97)％，且Bcl-2蛋白的表达与凋亡细胞之间并无明显线性关系。结论：细胞凋亡参与了脑出血后神经细胞的继发损伤过程，其在出血后的表达存在一个时间窗，对临床及时治疗有一定指导意义；Bcl-2蛋白在出血后一定时间内持续升高，但与细胞凋亡不同步，表明了bcl-2的抑制细胞凋亡的作用。     

实验性脑出血灶周Caspase-3和Bcl-2的表达及意义

目的 观察脑出血后不同时间出血灶周凋亡细胞、Caspase-3、Bcl-2的表达.方法 健康雄性Wistar大鼠48只随机分成假手术组和脑出血组,大鼠尾壳核区注入自体非抗凝动脉血建立脑出血模型,采用TUNEL法检测凋亡细胞,免疫组织化学方法观察术后不同时间点Caspase-3和Bcl-2的动态变化.结果 脑出血组大鼠出血灶周凋亡细胞及Caspase-3、Bcl-2的表达较假手术组显著增强（p〈0.01）.结论 脑出血后血肿周围神经细胞损伤有凋亡机制参与,且与Caspase-3和Bcl-2蛋白表达有关.     

脑出血患者血肿周围组织炎性反应与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨脑出血患者血肿周围组织炎性反应与细胞凋亡的关系。方法对30例手术的脑出血患者于血肿旁约1cm处取少许脑组织作为试验组，按发病到手术的时间将试验组分为〈6h（6例）、6～12h（7例）、12～24h（5例）、24～72h（6例）、〉72h（6例）。从前两组中选7例患者于手术入颅路径上远隔血肿处取少许脑组织作为对照组。应用苏木素-伊红（HE）染色、免疫组化染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分别观察组织病理、炎性细胞浸润和小胶质细胞增生、凋亡细胞、促凋亡基因（Bax）、抗凋亡基因（Bcl-X）的变化情况。结果光镜观察显示：对照组和试验组6h内脑组织基本正常，试验组6～12h损伤较轻，12～24h损伤较重，24～48h损伤严重，以后逐渐好转，8d时与对照组相似。免疫组化显示：中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞浸润从6～12h逐渐明显，12～24h达高峰（P均〈0．01），小胶质细胞增生从24～72h开始，72h以后明显增强（P均〈0．01）；凋亡细胞、Bax蛋白表达从6～12h开始增加，12～24h达高峰（P〈0．05或P〈O．01）。Bcl—X蛋白及其mRNA表达从12～72h有增加的趋势，但差异无显著性。RT—PCR显示：Bax mRNA表达与免疫组化结果相似；相关分析显示：中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞浸润和小胶质细胞增生与凋亡细胞、Bax蛋白和BaxmRNA表达呈显著正相关（P〈0．05或P〈0．01）．与Bcl—X蛋白及其mRNA表达无相关性（P均〉0．05）。结论脑出血后血肿周围组织的炎性反应与细胞凋亡关系密切，并与组织病理损伤相一致。