促凋亡蛋白FasL结肠肿瘤细胞外源性凋亡中的作用

目的 探讨促凋亡蛋白Fas配体(Fas-ligand,FasL)在结肠癌、结肠腺瘤及正常结肠黏膜的表达差异.方法 应用免疫组织化学MaxVisionTM快捷法检测促凋亡蛋白FasL在62例结肠癌(肠癌组)、24例结肠腺瘤(腺瘤组)及21例正常结肠黏膜(正常组)组织中的表达.结肠癌Dukes分期为A期21例,B期10例,C期10例,D期16例.在光学显微镜下FasL的表达主要在细胞浆,细胞核和胞膜未见表达,表达程度采用半定量积分法.结果 FasL在肠癌组阳性表达率为19.35%(12/62例),明显低于腺瘤组的62.50%(15/24例)和正常组的47.62%(10/21例);其阳性表达肠癌组与腺瘤组及正常组相比,肠癌组明显低于腺瘤组与正常组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);腺瘤组与正常组FasL阳性表达相比未见差异(P>0.05);FasL在肠癌组16.67%(2/12例)及腺瘤组26.67%(4/15例)均见有高表达.肠癌组的FasL阳性表达与组织学类型有关,而与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、血管浸润及远处转移等因素无关.结论 结肠腺瘤是结肠癌的早期阶段,由于FasL缺失,细胞的凋亡程序不能正常进行,致使肿瘤细胞逃避免疫监视,在结肠癌的发生中发挥作用.     

乙型肝炎肝组织Fas，FasL和HBV抗原的表达

目的 评价Fas和FasL介导细胞凋亡在乙型肝炎肝损伤中的作用及其与HBV抗原的关系。方法 应用免疫组化方法检测了62例乙型肝炎患者肝组织内的Fas、FasL和HBsAg、HBcAg,并以6例下正常肝组织为对照。结果 Fas/FasL在正常肝组织内无表达;Fas主要在乙型肝炎患者肝细胞质内表达,58例阳性（93．5％）;FasL在肝内浸润的单个核细胞和肝细胞质内均见到,37例阳性（59．7％）。结论 Fas/FasL的表达程度与肝组织活动性炎症程度密切相关;Fas/FasL介导的细胞凋亡可能在乙型肝炎时肝损伤中起重要作用;Fas/FasL表达程度与肝内HBV抗原HBsAg、HBcAg无明显相关性。     

凋亡调节蛋白FasL，Fas和P53在乳腺癌的表达及其意义

目的 观察人乳腺癌组织、癌旁相对正常乳腺组织中凋亡调节蛋白FasL，Fas、P53的表达，探讨FasL，Fas及P53与乳腺癌发生发展的关系。方法 收集手术切除的人乳腺癌组织和癌周相对正常乳腺组织，用免疫组织化学方法对21例乳腺癌标本进行检测。结果 乳腺癌组织中Fas蛋白表达的阳性率明显低于癌周正常乳腺组织（P〈0．01），有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者（P〈0．05）。乳腺癌组织中FasL、P53蛋白表达的阳性率均明显高于癌周正常乳腺组织（P〈0．01），有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者（P〈0．05）。结论 乳腺癌组织中Fas／FasL表达异常使肿瘤逃脱机体自身免疫攻击，促使肿瘤的发生发展，对预测乳腺癌的预后有重要参考价值。突变型P53在乳腺癌中过表达，可能抑制肿瘤凋亡的发生，促进肿瘤生长。     

大肠癌组织中Fas/FasL系统、nm23表达与转移的关系

目的：探讨Fas、FasL和nm23蛋白在大肠癌组织中表达与淋巴结转移和远处肝转移 的关系及临床意义。方法：应用S－P免疫组化法检测80例大肠癌组织和20例正常肠黏膜组织中Fas、FasL及nm23的表达情况。结果：55％大肠癌有不同 程度的Fas表达，低于正常肠黏膜组织中的表达，其表达与Dukes分期密切相关。分期越高，Fas表达率越低，有淋巴结 转移 的C期和有远处肝转移的D期Fas阳性表达率低于无转移的A期和B期，其中D期显著低于AB期，但C期与AB期、C期与D期的表达差异无显著性。大肠癌组织FasL和nm23的表达率分别为68．75％和57．50％，高于正常组织中的表达，表达与有无淋巴结转移或肝转移均无相关性。Fas/FasL系统与nm23表达亦无相关性。结论：Fas/FasL系统中Fas可作为反映大肠癌生物 学行为和判断预后的重要指征，nm23表达增加可能在大肠癌进展早期而不是在进展播散期起重要作用，与其转移与预后无关。     

结直肠腺瘤及癌变组织CHOP蛋白表达与细胞凋亡的相关性研究

目的: 检测和探讨结直肠腺瘤及癌变组织C/EBP同源蛋白(CHOP)表达和细胞凋亡及其与临床病理的关系,并分析CHOP与细胞凋亡指数(AI)的相关性。方法: 采用免疫组织化学SABC法和原位末端标记法分别检测59 例正常肠黏膜、67 例结直肠腺瘤和56 例结直肠腺癌组织CHOP表达及细胞凋亡。结果: CHOP在伴高级别上皮内瘤变和恶变的腺瘤和腺癌组织阳性表达率均显著高于正常肠黏膜和早期腺瘤(P<0.05),且与腺瘤大小、病理类型和肠癌大小、浸润深度相关(P<0.05);伴高级别上皮内瘤变和恶变的腺瘤和腺癌组织AI显著高于正常肠黏膜和早期腺瘤(P<0.05),AI与腺瘤大小、病理类型和肠癌大小有关(P<0.05);伴高级别上皮内瘤变和恶变的腺瘤和腺癌组织CHOP阳性表达者AI显著高于阴性表达者(P<0.05),在具有某相同临床病理特征的腺瘤和肠癌组织中CHOP阳性表达者AI显著高于CHOP阴性表达者(P<0.05)。结论: CHOP和细胞凋亡异常共同参与结直肠腺瘤癌变,CHOP表达与细胞凋亡增加有关,CHOP可能通过促细胞凋亡介导腺瘤癌变。     

催乳素对葡萄球菌肠毒素A诱导的人外周血T细胞凋亡的影响

目的探讨催乳素（PRL）在T细胞的活化诱导凋亡（activation induced cell death，AICD）中的作用。方法用葡萄球菌肠毒素（SEA）体外刺激人外周血T细胞作为T细胞AICD的模型，在第2次向模型中加入SEA诱导T细胞凋亡的同时，分别加入3种不同浓度的hPRL（20、300和1000ng/ml）进行干预，同时设不含hPRL的对照组。0～24h内，以MTT法检测T细胞的增殖情况。PI染色后用流式技术检测细胞凋亡情况，并通过琼脂糖凝胶电泳检测T细胞凋亡DNA。流式检测T细胞的Fas和FasL的表达水平变化。Westem blot法检测T细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax。结果在T细胞的AICD模型中高浓度PRL组（300、1000ng／ml）其T细胞增殖得到显著维持（P〈0．05），各PRL处理组T细胞凋亡率比对照组降低了32．9％～78．2％（P〈0．05）。PRL组（300、1000ng/ml）Bax／Bcl-2比值比对照组下降了44．4％～46．0％（P〈0．05）。PRL可明显抑制细胞表面Fas和FasL的表达，其中各PRL处理组Fas的细胞阳性率比对照组下降了51．1％～75．0％（P〈0．01），FasL的细胞阳性率比对照组下降了28．2％～39．1％（P〈0．01）。结论在SEA诱导T细胞的AICD过程中，PRL可通过抑制Fas、FasL和Bax的表达，并提高Bcl-2的表达，来抑制T细胞凋亡，维持T细胞的增殖。     

脊髓全横断损伤后凋亡因子Fas和FasL的表达变化

本研究通过制备SD大鼠脊髓全横断性损伤模型,应用免疫组织化学ABC法和灰度值测定揭示促凋亡因子Fas和FasL在脊髓完全性损伤后,不同时间点之间的相互变化趋势,以探讨Fas和FasL在脊髓损伤中的作用。结果显示:正常和脊髓全横断损伤后的不同时间组SD大鼠脊髓灰质的前角神经元中均可观察到Fas和FasL的免疫阳性产物。与正常组比较,Fas、FasL阳性神经元细胞数在术后1、3、7、14d组均升高(P<0.05),21d组则降低(P<0.05)。前角Fas、FasL阳性神经元的灰度值在术后1、3、7d组较正常组降低(P<0.05),14、21d组无显著性差异(P>0.05)。结果提示大鼠脊髓全横断损伤后,在损伤节段尾侧脊髓前角神经元Fas与FasL的表达经历了由增高到降低的过程,Fas和FasL表达增加有诱导神经细胞凋亡的趋势,可能参与诱导了脊髓继发性损伤。     

结肠癌组织中Fas表达的定量分析

目的：探讨Fas在结肠癌中的表达及其与肿瘤发生、发展及肿瘤分化程度的关系。方法：用直接免疫荧光－流式细胞技术对50例结肠腺癌组织及手术切缘的正常结肠黏膜组织中Fas的表达进行定量检测，分析Fas表达与肿瘤大体类型、浸润深度、分化程度及淋巴结转移的关系。结果：Fas在结肠癌组织中的平均阳性率及平均荧光指数均低于其手术切缘的正常结肠黏膜组织，在12例伴有转移的结肠癌组织中Fas的平均阳性率及平均荧光指数均低于38例没有转移的结肠癌；9例肿瘤限于肌层以内的结肠癌组织中Fas平均阳性率及平均荧光指数均高于41例肿瘤侵及肌层以外的结肠癌病例。不同分化程度、不同大体类型的结肠癌组织中Fas的平均阳性率及平均荧光指数差异无显著性。结论：结肠腺癌组织中Fas的表达受到了抑制，Fas的表达与肿瘤的转移及浸润深度呈负相关，与肿瘤的分化程度及大体类型无关。     

Survivin和APC蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义

目的：研究survivin和APC蛋白在原发性胆囊癌中的表达情况，并分析其与病理特征可能关系。方法：收集胆囊癌标本50例、胆囊腺瘤20例、慢性胆囊炎20例。应用免疫组织化学方法检测survivin蛋白和APC蛋白的表达情况，同时收集胆囊癌患者的病理资料，并将结果进行分析。结果：（1）survivin蛋白在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中阳性表达率分别为64％（32／50）、20％（4／20）和10％（2／20），差异有显著性（P〈0．05）。胆囊癌组与胆囊腺瘤组及胆囊炎组比较差异均具有显著性（P〈0．05）。Survivin阳性表达与病理资料均无明显相关性（P〉0．05）。（2）APC蛋白在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组的阳性表达率分别为48％（24／50）、85％（17／20）及90％（18／20），差异有显著性（P〈0．05）。胆囊癌组阳性表达率显著低于胆囊腺瘤组和慢性胆囊炎组（P〈0．05）。APC蛋白的表达水平与患者的病理资料均无明显相关性（P〉0．05）。（3）Survivin阳性表达与APC蛋白表达呈明显负相关（rs=-0．530，P=0．000）。结论：胆囊癌组Survivin蛋白的表达显著高于胆囊腺瘤及胆囊炎组，说明凋亡可能在胆囊癌的发生中起重要作用；survivin和APC蛋白在胆囊癌中的表达呈明显的相关性，可能在胆囊癌的发生中起协同作用。     

呼吸道合胞病毒感染对细胞凋亡及FasL、Fas、Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的：研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染与细胞凋亡的关系及对凋亡相关基因FasL、Fas、bcl-2和bax表达的影响。 方法： 采用A549细胞，在RSV感染后不同时点收集细胞，流式细胞仪和透射电镜检测细胞凋亡，免疫组织化学法检测凋亡相关基因FasL、Fas、Bcl-2和Bax表达情况。 结果： 流式细胞仪检测结果RSV感染后72 h（6.61%）、120 h（10.94%）的细胞凋亡指数明显高于对照组（4.32%、5.31%）；免疫组化法检测结果对照组FasL、Bax基因呈现无表达或局部弱表达；随着RSV感染时间的延长，bax、 Fas、 FasL基因的表达均高于对照细胞，bcl-2基因呈现弱表达或无表达。 结论： RSV在感染后期能诱导宿主细胞发生凋亡，促凋亡基因FasL、Fas 、Bax和抗凋亡基因Bcl-2表达水平的差异是RSV诱导凋亡的机制之一。