切值重设定在串联质谱法筛查新生儿高苯丙氨酸血症中的临床价值

目的对中山市85 323例新生儿行串联质谱法筛查高苯丙氨酸血症(HPA)的结果进行回顾性分析,评价重设定苯丙氨酸(Phe)、Phe/酪氨酸(Tyr)切值在新生儿HPA筛查中的临床价值。方法选取2014年2月至2018年9月行串联质谱法筛查HPA的新生儿为研究对象,分析切值重设定前后的初筛和确诊情况,了解切值重设定的临床意义。结果切值重设定前后新生儿HPA的筛查阳性率分别为4.57%(1 716/37 527)、0.47%(223/47 796),分别确诊HPA 2、3例,该市新生儿HPA发病率约为1/17 064(5/85 323)。Phe与Phe/Tyr新切值联用对全部新筛结果、切值设定前后及男女新筛结果进行分析,筛查阳性率分别为0.02%、0.01%、0.02%、0.02%、0.02%,均明显低于分别使用Phe原新切值、Phe与Phe/Tyr原切值及HPA诊断"金标准"(120μmol/L)对其进行新筛的阳性率,进一步验证新切值筛查性能结果显示无漏筛,且随访未发现假阴性案例,表明Phe、Phe/Tyr新切值联用在保持筛查敏感性的同时,可提高新生儿HPA的筛查特异度;新生儿性别对Phe、Phe/Tyr切值的影响差异无统计学意义(P0.05)。结论串联质谱法筛查新生儿HPA在实验室积累一定样本量情况下,应重设定本实验室的参考值,以获得更高的筛查特异性,指导临床早期确诊和治疗新生儿HPA。     

高苯丙氨酸血症检测技术联合应用及家系基因研究

目的 通过分析该院近3年新生儿高苯丙氨酸血症(HPA)筛查结果,了解该地区HPA筛查技术应用及家系基因变异情况,可进一步提高筛查、诊治、产前诊断的能力.方法 采用荧光法和串联质谱法检测2018年1月至2020年12月自愿接受筛查的128997例新生儿足跟血苯丙氨酸(Phe)浓度,对筛查阳性者进行血串联质谱、生化、尿气相...     

串联质谱法和荧光分析法检测滤纸干血片苯丙氨酸的比较

目的比较荧光分析法和串联质谱法检测滤纸干血片上苯丙氨酸(Phe)水平的分布和差异,为实验室开展新生儿高苯丙氨酸血症(HPA)的筛查提供方法学依据。方法选择进行遗传代谢病筛查的滤纸干血片样本62 510例。采用荧光分析法和串联质谱法同步检测新生儿滤纸干血片的Phe浓度,同时还用串联质谱法检测酪氨酸(Tyr)浓度。采用配对Wilcoxon检验和等级相关分析评价2种方法间的差异和相关性,采用Bland-Altman一致性分析评价2种方法间的一致性。结果荧光分析法和串联质谱法均在62 510例新生儿滤纸干血片样本中检出3例HPA,敏感性均为100%。荧光分析法的阳性预期值为33.3%,串联质谱法的阳性预期值为18.8%,若联合Phe/Tyr比值,串联质谱法的阳性预期值可达100%。正常新生儿Phe浓度呈偏态分布,荧光分析法和串联质谱法检测结果60μmol/L者分别占96.31%和95.08%,≥120μmol/L者仅占0.01%和0.03%。荧光分析法的测定值先低于串联质谱法,至97%位点(Phe≈63μmol/L)处基本持平,然后逐渐高于串联质谱法,2种方法的测定值呈正相关(r=0.43,P0.01)。以不同浓度的Phe测定值作Bland-Altman分析,Phe浓度越高,2种方法的偏移越小,Phe120μmol/L的19个样本点全部落在95%的一致性限内,2种方法有很好的一致性,检测结果有可替代性。结论荧光分析法和串联质谱法检测Phe在低浓度时有差异,高浓度时一致性好。2种方法对于HPA的临床判断无影响,均能用于新生儿筛查。串联质谱法可同时检测Phe和Tyr浓度,若联合Phe/Tyr比值,检出HPA的阳性预期值很高。     

32 例高苯丙氨酸血症鉴别诊断分析

目的对32例新生儿高苯丙氨酸血症（hyperphenylalaninemia,HPA）进行鉴别分析。方法203_1年1月至2013年2月,四川省新生儿筛查中心共确诊32例HPA。通过尿蝶呤谱分析、红细胞二氢蝶啶还原酶测定、BH。负荷实验和串联质谱分析,进一步鉴别诊断。结果32例HPA新生儿中,1例四氢生物蝶呤缺乏症,3例经典型苯丙酮尿症（classicalphenylke-touria,CPKU）,15例轻度PKU,11例轻度HPA,1例枫糖尿病,1例希特林蛋白缺乏症。结论对所有HPA必须进行鉴别分析,尽早确诊和治疗。     

姐妹同患高苯丙氨酸血症2例临床护理

高苯丙氨酸血症(HPA)是指血苯丙氨酸(Phe)浓度>120μmol/L,HPA中绝大多数是由于苯丙氨酸羟化酶(PAH)缺乏所导致的苯丙酮尿症(PKU),极少数是由于PAH的辅酶-四氢生物喋呤(BH4)缺乏而导致的BH4缺乏症[1]。两者治疗截然不同,早期鉴别诊断尤为重要。血清和组织中高浓度Phe     

顺德地区新生儿先天性甲状腺功能减退症和高苯丙氨酸血症调查

目的分析顺德地区先天性甲状腺功能减退症(CH)和高苯丙氨酸血症(HPA)的发病情况及治疗效果。方法回顾性分析顺德地区2001年7月至2012年9月260 765例新生儿CH、HPA初筛、确诊结果,对接受治疗的患儿进行随访。结果 260 765例新生儿中,确诊CH 121例,发病率1/2 155;确诊HPA 7例,发病率1/37 251,其中经典型苯丙酮尿症2例、轻～中度HPA 3例、四氢生物蝶呤缺乏症2例。所有确诊患儿经有效治疗,未见智力及体格发育障碍。结论顺德地区CH发病率较高,HPA发病率较低;顺德地区CH初筛促甲状腺激素临界值定为8mIU/L较为适合;早期诊断和鉴别诊断有利于指导治疗和保证疗效。     

低苯丙氨酸饮食对苯丙酮尿症儿童体格生长及营养素状况的影响

苯丙酮尿症(phenylketonuria)是一种氨基酸遗传代谢病,由于肝脏中苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)活性降低或四氢生物蝶呤(tetrahydrobiopterin)缺失,不能将苯丙氨酸(phenylalanine,phe)转化为酪氨酸(tyrosine,tyr),导致苯丙氨酸及其酮酸蓄积并从尿中大量排出[1]。该疾病可通过新生儿疾病筛查早期发现,主要治疗方法是使用低苯丙氨酸的特殊饮食,即     

北京地区新生儿全血10种氨基酸含量参考值范围的调查研究

目的 建立北京地区新生儿全血10种氨基酸含量的正常参考值范围,为临床诊治新生儿氨基酸代谢异常性疾病提供依据.方法 采用串联质谱法检测北京地区313例正常新生儿的10种氨基酸水平,其中包括有苯丙氨酸(Phe),蛋氨酸(Met),异亮-亮氨酸(Leu-Ile),缬氨酸(Val),精氨酸(Arg),瓜氨酸(Cit),半胱氨酸(Cys),组氨酸(His),鸟氨酸(Orn),酪氨酸(Tyr).将所有新生儿根据性别不同分成男、女两组;根据胎龄分为足月儿组、早产儿组.分析比较不同性别和胎龄组之间的氨基酸水平是否存在差异,进而得到串联质谱检测新生儿干血滤纸片氨基酸参考范围.结果 经过正态性检验,新生儿氨基酸水平呈偏态分布,因此,所有数据均经过对数转换后进行统计分析.经统计后发现不同性别新生儿组的氨基酸水平之间差异无统计学意义(P>0.05).不同胎龄的新生儿组部分氨基酸(Met,Phe,Tyr)水平差异有统计学意义(P<0.05).计算新生儿各种氨基酸的正常参考值范围.结论 建立串联质谱法检测新生儿的各种氨基酸的正常参考值范围对于临床诊治和筛查氨基酸代谢异常性疾病十分重要.     

苯丙氨酸羟化酶基因突变研究进展

苯丙氨酸羟化酶(PAH)是由苯丙氨酸羟化酶基因编码,通过将苯丙氨酸转化为酪氨酸,参与苯丙氨酸的代谢,该酶主要存在于肝脏中。PAH基因突变导致PAH活性几乎缺如时,该酶不能将苯丙氨酸转化为酪氨酸,血液中苯丙氨酸含量     

细菌抑制法测定苯丙氨酸查新生儿苯丙酮尿症

苯丙酮尿症（简称PKU）是指苯丙氨酸羟化酶基因缺陷或基因突变导致了宋丙氨酸代谢障碍,使苯丙氨酸在体内蓄积起来,从而影响了大脑及神经系统的发育,造成不可逆的智力障碍。它是一种可以早期诊断和早期治疗的先天性氨基酸代谢病。因PKU在新生儿期缺乏特异的症状,给早期诊断带来困难,敌对新生儿进行筛查,做到早期发现、及时诊断、尽早治疗,以免发生智力障碍。为此,本病在我国部分地区已列为法定筛查项目之一。我们自1997年开始在全省建立了新生儿疾病筛查网络,用细菌抑制法对新生儿足跟血片作苯丙氨酸测定进行PKU筛查。1筛查方法…     

自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的应用评价

目的 为推动国内新生儿苯丙嗣尿症(PKU)筛查技术的发展和新生儿PKU筛查的普及,自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统,并对自建系统进行基本的分析性能进行评价.方法 参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件和相关文献,以labsystems配套检测系统作为可溯源参比系统,对自建系统的精密度、灵敏度、线性进行评价,并用临床样本进行比对试验和偏倚评估,回归相关系数大于0.975,偏倚以中国卫生部临检中心苯丙氨酸室间质评的1/4允许系统误差(靶值±30%)作为检测系统可比性的临床接受标准;通过检测1 353例正常新生儿样本,建立参考值,并对引用参考值进行确认.结果 自建检测系统分析内、分析间不精密度均小于15%;检测灵敏度为0.55 mg/dl;在1.00～15.00 mg/dl内,回归系数r=0.999 1;与参比系统比对试验回归方程为Y(自建)=1.007 8X(参比)-0.041 6,r=0.998 7,相对偏倚小于7.50%.参考值可以直接引用2.00 mg/dl作为切值判断.结论 自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的基本性能可以满足临床需要,值得推广应用.     

高苯丙氨酸血症综合征的诊断及治疗现状

自Folling首次报道典型的苯丙酮尿(PKU)的50多年来,在研究苯丙氨酸代谢的生理和病理生理上已有很大进展。特别是对新生儿苯丙酮尿的普查,使人们认识到高苯丙氨酸综合征的临床和生化的异质性。本文目的是回顾高苯丙氨酸综合征的病因、诊断和治疗方面的新进展。     

石家庄市苯丙氨酸羟化酶缺乏症的基因突变研究

目的 分析石家庄市新生儿疾病筛查诊治中心确诊的苯丙氨酸羟化酶缺乏症(PAHD)患儿中PAH基因的突变规律及特点,为石家庄市PAHD的产前诊断、治疗提供有力的科学依据.方法 收集在石家庄市新生儿疾病筛查诊治中心确诊的PAHD患儿67例作为研究对象,提取患儿及其父母外周血DNA标本进行二代测序,测序范围包括13个外显子和外...     

苯丙酮尿症患者病情控制前后血清氨基酸含量比较

目的:观察经治疗病情得到控制的苯丙酮尿症患者血清中支链氨基酸与芳香族氨基酸的变化,及与正常人群的区别。方法:实验于2005-12在北京大学医学部基础医学院细胞生物学系完成。选择山西省妇幼保健院提供的10例苯丙酮尿症患者为实验对象。年龄8个月～10岁,均为男性。根据新生儿疾病筛查方法,婴儿出生72h取足跟部血,发现血液苯丙氨酸浓度>120μmol/L时,诊断为苯丙酮尿症。均无并发症和其他基础疾病。由院方告之家长同意后取血。体质量均正常。治疗根据患者不同年龄,分别采用国产低(无)苯丙氨酸蛋白质、低(无)苯丙氨酸配方奶粉、低(无)苯丙氨酸的特殊营养食品,来控制苯丙氨酸的摄入量。于治疗前后进行血清氨基酸测定。结果:10例患者的测试数据均进入结果分析。10例患者治疗后病情得到控制的患者其苯丙氨酸水平较治疗前下降,未达到正常值但在理想范围之内,酪氨酸正常或上升,支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值高于治疗前,但仍低于正常值[苯丙氨酸:正常值:(0.07±0.00)mmol/L,治疗前:(1.56±1.51)mmol/L,治疗后:(0.09±0.16)mmol/L;酪氨酸:正常值:(0.06±0.02)mmol/L,治疗前:(0.22±0.06)mmol/L,治疗后:(0.08±0.04)mmol/L;支、芳比值:正常值:>3.00±0.06,治疗前:0.47±0.21,治疗后:1.44±0.24,治疗后与治疗前比较,P<0.05]。结论:经治疗后的苯丙酮尿症患者血清氨基酸水平有明显改变。提示氨基酸代谢异常征,当其做为病因的主要氨基酸达到理想水平后,其余氨基酸的比例与正常值的比较,是否是此类疾病所特有的,与其他疾患的关联性以及其临床意义,应需进一步研究。     

串联质谱检测干血滤纸片氨基酸方法的建立

目的　建立可靠的串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸方法,以便用于氨基酸代谢紊乱疾病的筛查和诊断。方法　取含不同浓度氨基酸(苯丙氨酸、酪氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、瓜氨酸和缬氨酸)的血滤纸片,用含已知量相应氨基酸内标的甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生后,用串联质谱仪检测血片中氨基酸谱及其浓度。分析该方法的精确性、样品回收率及浓度相关性。结果　氨基酸批内和批间变异系数分别为6. 3% ~9. 7%、9. 9% ~14. 3%。低浓度回收率为92% ~100%,中等浓度回收率为94% ~104%,高浓度回收率为98% ~107%。不同浓度的氨基酸实测浓度与加入浓度之间的相关系数为0. 999 0~0. 999 9。结论　串联质谱技术检测干血滤纸片中氨基酸能够达到较高的精确性、准确性和回收率,为临床进行氨基酸分析提供了一项新技术,可用于新生儿遗传代谢病筛查、高危儿童遗传代谢病的诊断及其他与氨基酸代谢有关的疾病诊治。     

新生儿苯丙氨酸荧光分析法的建立及其试剂盒的临床评价

目的建立新生儿苯丙氨酸荧光分析法并评价其试剂盒性能。方法以滤纸为载体制备标准品和质控品干血片,琥珀酸盐缓冲液、L-亮氨酸-L-丙氨酸二肽和茚三酮溶液作为反应液,硫酸铜为主要成分的溶液作为增强剂和稳定剂,应用荧光定量法检测新生儿滤纸干血片中的苯丙氨酸,并对方法进行性能评价。比对试验采用线性回归分析,配对计数资料结果的一致性采用Kappa检验分析。结果自研试剂的曲线线性相关系数r大于0.99,检测限不高于0.5mg/dl,标准品的效价比在0.9667～1.0060,批内、批间的变异系数均不高于10%,20mg/dl以内的常见的氨基酸干扰物对检测方法无明显影响;2～8℃保存的试剂可以稳定13个月;与国外试剂比对,回归方程为Y(自研试剂盒)=0.8565X(AniLabsystemsKIT)+0.1448,r=0.9853;不同包装规格的试剂比对检测,线性回归方程Y(96人份/盒)=1.0101X(960人份/盒)-0.0098,r=0.9854。国内外的检测仪器比对检测,回归方程为Y(TAKEEN)=1.011X(1420)-0.0058,r=0.9948;Y(TAKEEN)=1.027X(FLUOROSKAN)-0.011,r=0.9937;参考值定为2.0mg/dl;临床研究评价一致程度百分比可达99.81%。结论自研试剂盒灵敏度高,特异性强,准确度好,精密度好,稳定性良好,与AniLabsystems的试剂盒比对试验检测结果的相关性好,符合率高,不同包装规格的试剂盒分析性能一致,并且适合于国内外的检测仪器,自建方法和自研试剂盒能满足临床新生儿苯丙酮尿症筛查的需要。     

芳香族氨基酸的检测进展

芳香族氨基酸包括苯丙氨酸（phe)，酪氨酸（phe)，酪氨酸（tyr)，色氨酸（trp)。其中苯丙氨酸，色氨酸是人体必需氨基酸。在生命活动中起着极为重要的作用。芳香族氨基酸及其代谢产物儿茶酚胺，高香草酸，5－羟色胺，犬尿氨酸等物质与肝，免疫，神经精神疾病，癌症等密切相关，因此准确测定这些小分子物质对疾病的基础研究与临床诊断十分重要。高效液相色谱法，毛细管电泳技术，质谱联用准确度高，干扰因素少，因此在临床研究工作中，是进行复杂生物样品分析的主要手段。本文就芳香族氨基酸的测定方法的实验室研究进展作一简要综述。     

血清苯丙氨酸、酷氨酸的高效毛细管电泳分析

目的 建立和完善用高效毛细管电泳（HPCE）快速测定血清中苯丙氨酸（Phe）和酪氨酸（Tyr）的方法。方法 用HPCE检测7例正常儿童和10例苯丙酮尿症息儿血清中苯丙氨酸和酪氨酸,用苯丙氨酸和酪氨酸标准液测定后绘制校正曲线,并使用高效液相色谱法（HPLC）对部分标本同步测定进行比较。结果 对HPCE实验条件和电泳条件进行优化和选择,最终采用：水浴温度50℃,水浴时间40min,硼酸钠缓冲溶液pH为9．8,分离电压28kV,分离温度15℃。苯丙氨酸迁移时间为6．8min,酪氨酸迁移时间为5．9min;用HPCE检测苯丙酮尿症患儿血清中Phe和Tyr的水平,与HPLC的检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 该方法快速、简便、准确、灵敏度高,为临床检测苯丙酮尿症提供了一种有效的方法。     

尿液对羟基苯丙氨酸水平在癌症筛选中的应用研究

目的探讨尿液中对羟基苯丙氨酸(酪氨酸)尿液检测(TUT)在癌症筛选中的应用。方法取癌症组、非癌症组、健康受试组晨尿,用对水平TUT试剂盒检测,统计分析各组及同组各种疾病间检测结果的差异性。结果癌症组、非癌症组、健康受试组阳性检出率分别为81.3%、30.8%、33.8%,癌症组显著高于非癌症组和健康受试组,差异有统计学意义(P0.05);非癌症组和健康受试组阳性检出率差异无统计学意义(P=0.653)。癌症组中胃、食管癌、肠癌阳性检出率显著高于其他类型癌症,差异有统计学意义(P0.05);其他类型癌症检出率差异无统计学意义(P=0.449)。非癌症组中糖尿病患者阳性检出率高于其他各种疾病,差异有统计学意义(P0.05);其他各种疾病患者阳性检出率差异无统计学意义(P=0.327)。结论尿液TUT能很好地用于癌症患者的筛选,尤其是胃肠道癌症患者。     

高效液相色谱法在高苯丙氨酸血症鉴别诊断中的应用

高苯丙氨酸血症(HPA)是一种常见的遗传代谢病,根据病因学可分为两大类:经典型苯丙酮尿症,由于苯丙氨酸羟化酶(PAH)缺乏所造成;四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症:由于苯丙氨酸羟化酶的辅酶--BH4缺乏所造成,经典型苯丙酮尿症主要治疗措施是给予患儿低苯丙氨酸饮食,而BH4缺乏症则需要补充BH4以及必要的神经递质,如果按照经典型PKU控制饮食,即使血苯丙氨酸浓度降至正常范围仍会出现进行性的神经系统损害的症状,早期鉴别诊断HPA的类型并给于正确的治疗尤为重要。通过测定尿液中新蝶呤(N)和生物蝶呤(B)的含量计算B%并结合BH4负荷试验可以准确快…