光敏生物素标记质粒DNA检测双链DNA抗体ELISA的建立及初步应用

建立一种既可定性也可定量检测血清抗双链ＤＮＡ抗体的ＥＬＩＳＡ，进一步提高对系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）诊断和监测的水平。以链霉亲合素处理微孔板，包被光敏生物素标记的质粒ＤＮＡ，用ＨＲＰ－羊抗人ＩｇＧ测定血不表双链ＤＮＡ抗体。分别以自制ＥＬＩＳＡ和Ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ公司ＥＬＩＳＡ抗ｄｓＤＮＡ定量试剂盒和胶体金斑点免疫渗滤法定性检测了３２例活动期ＳＬＥ，６例类风湿关节炎（ＲＡ），３０例健康人血清，阳     

HEP-2细胞为靶细胞的ELISA检测血清抗核抗体

以ＨＥＰ－２细胞株为靶细胞包被塑料微孔扳，运用ＨＲＰ羊抗入ＩｇＧ为二抗对８例活动期ＳＬＥ，１例混合结缔组织病（ＭＣＴＤ），８例类风湿性关节炎，７例风湿性关节炎和３０例健康者做了血清抗核抗体的的ＥＬＩＳＡ检测，同时以间接免疫荧光法作对照。并对高滴度阳性血清作了稀释度与吸光度值的直线回归分析。结果表明，ＥＬＩＳＡ检测血清抗核抗体特异性为９８．５％，敏感性为１００％，值得推广应用     

左旋门冬酰胺酶脱敏疗法

左旋门冬酰胺酶脱敏疗法谢晓恬，顾龙君，王耀平，应大明左旋门冬酰胺酶（Ｌ－ＡＳＰ）是目前治疗儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的有效联合化疗方案中主要药物之一［１～３］。但由于Ｌ－ＡＳＰ是异种蛋白，少数患儿可对其致敏而无法应用。我科曾对２例Ｌ－ＡＳＰ皮试...     

过氧化物酶与苏丹黑B两种白细胞染色方法灵敏度的比较

在急性白血病（ＡＬ）中，过氧化物酶（ＰＯＸ）与苏丹黑Ｂ（ＳＢＢ）为最基本的细胞化学染色，当两项的阳性率≥３％时为急非淋（ＡＮＬＬ），≤３％时为急淋（ＡＬＬ）。在ＡＬ的细胞化学诊断中，ＳＢＢ染色优于ＰＯＸ染色；特别在ＡＮＬＬ的Ｍ５亚型中，ＳＢＢ的反应尤...     

链霉亲和素—生物素—ELISA方法的建立及其在HBsAg测定中的应用

根据链霉亲和素（ＳＡ）与生物素（Ｂ）之间有很强亲和力的原理，建立了ＥＬＩＳＡ板先用ＳＡ包被再与生物素化抗体结合的间接包被方法。通过试验，选择了生物素化白蛋白（Ｂ－ＢＳＡ）预包被，再连接ＳＡ以制备ＳＡ酶标板。应用生物素化的ＨＢｓ单抗及酶标记的抗ＨＢｓ单抗，建立了检测ＨＢｓＡｇ的ＳＡＢ－ＥＬＩＳＡ方法，得到良好的效果。     

儿童急性淋巴细胞白血病的免疫表型与预后的关系

应用流式细胞仪和一组单克隆抗体对５８例儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）免疫表型进行研究。３２例为Ｂ－ＡＬＬ，１０例为Ｔ－ＡＬＬ，１３例为“淋、髓或Ｔ、Ｂ同时表达的ＡＬＬ”，３例是未分化白血病（ＡＵＬ）。经三年生存概率的统计学处理，Ｔ－ＡＬＬ明显低于Ｂ－ＡＬＬ（Ｐ＜０．０１），且男性发病率明显高于女性（９∶１）。淋、髓或Ｔ、Ｂ同时表达的ＡＬＬ又低于Ｔ－ＡＬＬ和Ｂ－ＡＬＬ（Ｐ＜０．０１），其中５０％患儿在第１年内死亡，表明淋、髓或Ｔ、Ｂ同时表达的ＡＬＬ病情凶险，生存期短     

咳嗽变异型哮喘唾液SIgA含量的探讨

目的：探讨咳嗽型变异型哮喘患者唾液中ＳＩｇＡ 含量。方法：应用白桂木凝集素－ＨＲＰ夹心法,测定３３例咳嗽变异型哮喘患者与 ２８例支气管哮喘患者及 ３５例正常人唾液中 ＳＩｇＡ含量作对照。结果：咳嗽变异型哮喘和支气管哮喘患者唾液中的ＳＩｇ含量均明显高于正常人（Ｐ＜０．０１）;而咳嗽变异患者唾液中ＳＩｇＡ与支气管哮喘患者唾液中ＳＩｇＡ合量比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：咳嗽变异型哮喘患者唾液ＳＩgＡ含量增高,机体处于感染期。     

血清P53-IgG抗体测定及其临床价值初步研究

目的 建立血清Ｐ５３蛋白ＩｇＧ抗体（Ｐ５３－ＩｇＧ）酶免疫测定法,初步探讨其临床价值。方法 以Ｐ５３ｏＡｂ为包被抗体,以亲和的纯化浓缩Ｐ５３蛋白作为中介,自行建立了血清Ｐ５３－ＩｇＧ酶免疫测定法。结果 ７８例消化道癌Ｐ５３－ＩｇＡ阳性率３４．６２％（２７／７８）,而３２名献血员和３０例非癌住院患者均为阴性,Ｐ均〈０．０１。４８例经免疫组化Ｐ５３蛋白染色阳性患者血清Ｐ５３－ＩｇＧ阳性率５６．２５％（     

柯萨奇B组病毒IgM抗体检测方法的建立及在产科中的应用

应用间接免疫荧光法检测孕产妇血清中柯萨奇Ｂ组病毒ＩｇＭ抗体（ＣＢＶ－ＩｇＭ）并与ＥＬＩＳＡ法作比较，两法结果无显著性差异（ｘ＾２＝０．５，Ｐ〉０．５），１３７０名早，中，晚期孕产妇血清ＣＢＶ－ＩｇＭ抗体检出率均高于非孕组（Ｐ〈０．０５）。     

液相放大酶免疫法检测血清总免疫球蛋白

我们用液相放大酶免疫分析法（ＬＢＡＥＩＡ）［１］检测血清总ＩｇＥ,并与传统ＢＡ酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）法进行了比较。一、材料和方法（１）总ＩｇＥ工作标准：标准液浓度为：０,１０,２５,１００,２５０和５００ＩＵ／ｍｌ（ＷＨＯ７５／５０２）...     

选择性抑制法测定淀粉酶同工酶

本文报道用选择性抑制法结合酶偶联法测定淀粉酶（Ａｍ）同工酶。通过数学推导和实验，建立了结果计算公式和标准曲线。方法线性范围０－１１００Ｕ／Ｌ。批内，批间ＣＶ＜９．９％。参考范围：血清Ｐ－Ａｍ７－５５Ｕ／Ｌ，Ｓ－Ａｍ１．８－６８．３Ｕ／Ｌ；尿Ｐ－Ａｍ２．５－２２．６Ｕ／ｍｍｏｌＣｒ，Ｓ－Ａｍ２．２－３１．３Ｕ／ｍｍｏｌＣｒ。本法制备的抑制剂溶液稳定期长，保存，使用方便。     

免疫印迹法检测表上下大疱病患者基底膜带自身抗体

目的 探讨免疫印迹法在不同自身免疫性表皮下大疱病（ＳＡＢＤ）患者基底膜带自身抗体（ＢＭＺ抗体）分布情况及其在ＳＡＢＤ诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法 以热分离法制备的人真皮、表皮提取物作为抗原,免疫印迹法检测９７例ＳＡＢＤ患者血清中ＢＭＺ抗体与基底膜抗原结合情况。结果 不同ＳＡＢＤ患者血清中存在结合不同真皮、表皮抗原的ＩｇＧ型和（或）ＩｇＡ型ＢＭＺ抗体。大疱性类天疱疮患者血清中ＩｇＧ和（或）ＩｇＡ     

淋巴因子激活的骨髓细胞或脾细胞对小鼠移植物抗宿主病的预…

根据淋巴因子激活的骨髓细胞（ＬＡＢＭＣ）或脾细胞（ＬＡＳＣ）具有介导否决（Ｖｅｔｏ）效应和自然抑制（ＮＳ）效应的特性，实验分别以新生小鼠和亚致死剂量照射的成年小鼠为受鼠，腹腔注射同种脾细胞制备移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）模型，实验组同时注射ＬＡＢＭＣ或ＬＡＳＣ。结果显示：与受鼠带相同Ｈ－２单型的ＬＡＢＭＣ可明显减轻新生小鼠ＧＶＨＤ（Ｐ＜０．００１）；与受鼠带相同Ｈ－２单型的ＬＡＳＣ可有效预防致死性Ｇ     

急性髓系白血病细胞表面逆转录病毒抗体的测定

急性髓系白血病细胞表面逆转录病毒抗体的测定王跃华王世徐荣臻张克奇我们利用羊抗人ＩｇＧ－ＨＲＰ和制备的结合ＨＲＰ的纯化逆转录病毒（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ，ＲＶ）抗原，采取直接酶免疫法，检测３７例急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞培养前后其表面特异性ＲＶ抗体的...     

血清稀释度对捕捉法ELISA检测抗HAV IgM影响的探讨

在捕捉法ＥＬＩＳＡ检测抗ＨＡＶＩｇＭ时,分别使用了单克隆和多克隆抗ＨＡＶ－ＨＲＰ以确定血清标本的最适稀释度。发现抗ＨＡＶＩｇＭ阳性血清Ａ值均随稀释度增高而上升,绝大多数在１０－３达高峰。部分阳性血清原倍（１００）的Ａ＜临界值（假阴性）。部分抗ＨＡＶＩｇＭ阴性血清在低稀释度时不论加入ＨＡＡｇ与否,能与两种酶抗体结合物之一或同时反应呈假阳性,Ａ值随稀释度增高而下降。结果表明最适血清稀释度为１０－３,既能防止阳性漏检,也可防止因原倍血清所致的假阳性。本文还提示使用单克隆抗ＨＡＶ－ＨＲＰ能防止ＲＦ等因素对结果的干扰。     

脑脊液D-二聚体水平与小儿中枢神经系统白血病的关系

为探讨检测脑脊液（ＣＳＦ） Ｄ－二聚体（Ｄ－ｄｉｍｅｒ,ＤＤ）对中枢神经系统白血病（ＣＮＳＬ）的诊断、疗效评价的价值,我们检测了６４例急性白血病（ＡＬ）患儿血浆、ＣＳＦ中 ＤＤ水平,现报道如下。１资料和方法１．１研究对象６４例患儿为我院１９９７年１月一１９９９年６月的住院患者,均符合急性白血病诊断标准。男３９例,女２５例;年龄５－１３岁（平均８．３岁）。急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ） ４２例,急性非淋巴细胞白血病（ＡＮ－ＬＬ） ２２例,经治疗（ＡＬＬ采用 ＶＤＬＰ或 ＶＤＣＰ方案,ＡＮＬＬ采用ＨＡ或ＤＡ…     

白细胞介素8及其受体在急性白血病的表达及其意义

目的探讨白细胞介素８（ＩＬ８）及其Ａ、Ｂ受体（ＩＬ８ＲＡ、ＩＬ８ＲＢ）的表达与急性白血病（ＡＬ）的分型、疗效及并发症的关系。方法用酶联免疫夹心法检测７７例初诊ＡＬ患者外周血ＩＬ８含量,用间接免疫荧光及流式细胞术检测骨髓单个核细胞（ＭＮＣｓ）表达ＩＬ８Ｒ,并检测了１５例ＡＬ完全缓解（ＣＲ）期脑脊液（ＣＳＦ）中ＩＬ８水平。结果ＡＬ患者外周血ＩＬ８水平高于正常人,其中急性髓系白血病（ＡＭＬ）高于急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）,Ｍ４、Ｍ５高于Ｍ１～Ｍ３,ＢＡＬＬ高于ＴＡＬＬ（Ｐ＜０．０５）。ＡＬＬ中ＩＬ８＞１００ｎｇ／Ｌ组比≤１００ｎｇ／Ｌ组疗效差（Ｐ＜０．０５）;约３６．３６％的ＡＬ患者ＩＬ８Ｒ（＋）,ＩＬ８Ｒ（＋）者的外周血白细胞计数及幼稚细胞比例显著高于ＩＬ８Ｒ（－）者（Ｐ＜０．０５）;ＣＲ期患者ＣＳＦ中ＩＬ８水平与治疗前比较,差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,合并中枢神经系统白血病（ＣＮＳＬ）时明显升高。结论外周血和ＣＳＦ中ＩＬ８水平的检测及检测骨髓ＭＮＣｓ膜ＩＬ８Ｒ的表达有助于ＡＬ各亚型的鉴别及预后判断;ＣＮＳＬ发生时ＣＳＦ中ＩＬ８增高。     

GATA—2与免疫球蛋白重链胚系基因Cμ在白血病细胞中的表 …

应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对不同类型白血病患者骨髓（ＢＭ）或外周血（ＰＢ）细胞ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因ＣμｍＲＮＡ的表达进行检测，探讨ＧＡＴＡ－２与ＩｇＨ胚系基因Ｃμ在白血病细胞中的表达与共表达及意义。在正常人ＢＭ和ＰＢ细胞中未检测到ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因Ｃμ。在急性髓性白血病（ＡＭＬ）和急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）以及慢怀粒细胞白血病慢性期（ＣＭＬ－ＣＰ）ＧＡＴＡ－２检出     

SLE病人T淋巴细胞亚群及体液免疫功能分析

为探讨系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）病人Ｔ淋巴细胞亚群的改变及免疫球蛋白含量的变化，为临床诊治提供理论依据，应用流式细胞仪和酶联检测仪，分析ＳＬＥ患者Ｔ细胞亚群及免疫球蛋白。结果显示与正常对照组比较， ＳＬＥ患者外周血中 ＣＤ_２~＋、 ＣＤ_２~＋、 ＣＤ_２~＋细胞显著增加（ Ｐ ＜０． ０１）， Ｔ细胞表面 ＴＩＡ－１含量增加（ Ｐ＜０． ０５），血清中 ＩｇＧ、 ＩｇＭ、 ＩｇＡ含量也都显著升高（ Ｐ＜０．０１），但外周血中ＣＤＪ_３~＋、 ＣＤ_４~＋、 ＣＤ_４５ＲＡ~＋细胞显著降低（Ｐ＜０．０１）， ＣＤ_４~＋／ＣＤ_８~＋明显倒置（Ｐ＜０． ０１）， Ｔ细胞表面 Ｔ细胞抗原受体（ＴＣＲ）含量及血清中 Ｃ_３、 Ｃ_４也明显降低（ Ｐ ＜０．０１）。提示ＳＬＥ患者存在Ｔ细胞亚群紊乱，体液免疫功能亢进，抗感染能力下降。     

嗜异性IgM抗体ELISA检测法的建立和初步应用

从小牛红细胞膜中提取，纯化嗜异性抗原，并以该抗原为包被抗原，配以ＨＲＰ酶标抗人ＩｇＭμ锭单抗建立了检测嗜异ＩｇＭ抗体的ＥＬＩＳＡ方法，并对临床标本与ＥＢＶ－ＩｇＭ细胞涂片酶酶免法进行了对比检测。本法简便快速，有推广应用价值。