我国8城市HBsAg阳性和阴性乙肝患者的病毒血清型和基 …

目的 对我国８个城市的４３株乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性和５２株ＨＢｓＡｇ阴性血清进行乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ扩增及其血清型和基因型分型，并对该两类血清的乙肝病毒型别构成及其地理分布进行比较。方法 对长春、大同、杭州、深圳、青岛、西安、昆明和拉萨等８个城市共计４３例ＨＢｓＡｇ阳性和５２例ＨＢｓＡｇ阴性的乙肝病人血清进行ＨＢＶ ＤＮＡ ＰＣＲ扩增（Ｓ基因第３３￣５３３位核苷酸）并用ＰＣＲ扩增产     

应用聚合酶链反应技术检测肝组织中的HBV－DNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对４２例肝活切组织石蜡切片中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ进行检测，并与乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的免疫组织化学及血清学检测进行比较，ＨＢＶ－ＰＣＲ阳性率为７３．８％，高于组织及血清ＨＢｓＡｇ阳性率（分别为５９．５％和５０．０％）。３例病理形态呈肝炎改变，而血清ＨＢｓＡｇ（─）的肝组织中有２例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，提示ＰＣＲ的高度敏感性和准确性。８３．３％的门脉性肝硬变和８７．５％的肝细胞癌组织中ＨＢＶ－ＰＣＲ呈阳性，进一步证实了上述两病与ＨＢＶ的关系密切。我们还发现肝细胞淤胆患者ＨＢＶ感染率较高，ＨＢＶ－ＤＮＡ及组织ＨＢｓＡｇ阳性比例各为６／９和４／８。     

孕产妇和新生儿血清乙肝免疫标志物与HBV—DNA检测结果的比较…

利用ＨＢＶ－ＤＮＡ出现先于血清其它血清学指标理论依据。采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对乙肝免疫标志物至少一项改变的２００例孕产妇、新生儿血清进行ＰＣＲ扩增，结果有１０８份标本ＨＢＶ ＤＮＡ阳性、总阳性率为５４％。其中ＨＢｅＡｇ阳性率８３．３％（７０／８４），ＨＢｓＡｇ阳性率４８％（２４／５０），ＨＢｅＡｂ阳性率１０．５％（２／１９），ＨＢｓＡｂ９．８％（２／２２），可见ＰＣＲ早期诊断，判断其传染性，     

文摘

文摘０４４在ＨＢｓＡｇ阳性患者中，ＨＢｅＡｇ／抗－Ｈｂｅ　ＡＬＴ水平及ＨＢＶ　ＤＮＡ的ＰＣＲ结果的相互关系［英］／ＬｉｕｎｇｇｒｅｎＫＫ…ＪＭｅｄＶｉｒｏｌ．－１９９３，３９．－１９７用高敏感的多聚酶链反应（ＰＣＲ）对瑞典ＨＢｓＡｇ阳性患者的血清样品...     

用热启动聚合酶链反应检测血清中乙型肝炎病毒DNA技术的建立和应用

建立了热启动聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的技术。ＰＣＲ所有反应成分被２次加样。先加Ａ液（含ｄＮＴＰｓ、一对引物和ＭｇＣｌ＿２）与一粒石蜡珠。７０℃加热后冷却至室温，使蜡珠先融化后凝固形成蜡盖封住Ａ液，然后在向其上加入Ｂ液（含耐热性ＤＮＡ聚合酶、ＨＢＶＤＮＡ模板和ＫＣｌ）并开始循环扩增。当反应管内第一次变性温度升至６０℃以上时，中隔蜡层融化，蜡上浮形成防蒸发屏障，Ａ、Ｂ两液则由于热分子运动而混匀，从而保证引物与靶基因在较高温度下严格退火以减少错导非特异性扩增和引物聚体形成。提高了ＰＣＲ的特异性和灵敏性，应用这种技术对７６例肝炎血清进行了检测，结果ＨＢＶＤＮＡ检出率为６８％，其中ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为１００％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢｅ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）血清检出率为７０％；ＨＢｓＡｇ（＋）、抗－ＨＢＣ（＋）血清检出率为８９％；抗ＨＢＣ（＋）血清检出率为对％；标记全阴性血清检出率为３３％。     

应用PCR检测406例HBV—DNA与HBVM关系的初步观察

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了４６例患者血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并同时检测乙肝标志物（ＨＢＶＭ），结果表明，急性乙型肝炎和慢性活动性肝炎患者的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率较高。２８名乙肝标志物均为阴性的患者中有２名ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；也性率占７．１４％，表明ＰＣＲ技术比ＨＢＶＭ更为敏感、特异。血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测有助于发现ＨＢｓＡｇ阴性的乙肝患者，这对于筛选献血员，保证血源质量及肝病的早期     

应用PCR检测406例HBV－DNA与HBVM关系的初步观察

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了４０６例患者血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并同时检测乙肝标志物（ＨＢＶＭ），结果表明，急性乙型肝炎和慢性活动性肝炎患者的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率较高。２８名乙肝标志物均为阴性的患者中有２名ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；阳性率占７．１４％，表明ＰＣＲ技术比ＨＢＶＭ更为敏感、特异。血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测有助于发现ＨＢｓＡｇ阴性的乙肝患者，这对于筛选献血员，保证血源质量及肝病的早期诊断有较大的价值。     

乙型肝炎病毒感染剂量用于评价HBsAg阳性血液传染性方面的价值

用聚合酶链反应技术(ＰＣＲ)极量稀释法定量检测乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)ＤＮＡ,探讨ＨＢＶ感染剂量在评价ＨＢｓＡｇ携带者血液传染性方面的价值。从连续入院的992例外科病人检出ＨＢｓＡｇ阳性者156例,对其ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ进行检测,将套式ＰＣＲ检ＨＢＶＤＮＡ低?..     

乙型肝炎病毒基因聚合酶链反应分型方法的建立

根据乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的Ｓ区序列设计了３条引物：ＨＢＳ１、ＨＢＳ２和ＨＢＳ３，与ＨＢＳ１和ＨＢＳ２配对，经２次聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增。即可在检测有无ＨＢＶ－ＤＮＡ存在的同时对其基因型分类，可检出１０ａｇ的ＨＢＶ－ＤＮＡ，比免疫学方法更灵敏和特异。２５份不同亚型的标准血清中的绝大多数用Ｓ－ＰＣＲ和ＡＧＩＤ／ＲＰＨＡ的分型结果一致，Ｓ－ＰＣＲ的另一突出优越性的于能够对ＨＢｓＡｇ低滴度和阴性标本     

乙/丙型肝炎病毒双重感染患者前C区终止变异低频率

目的了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）双重感染患者前Ｃ区基因变异，及其可能的临床意义。方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）与限制片段长度多态性（ＲＦＬＰ）来分析２５例ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性（Ａ组）和３１例ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ阳性但抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ均阴性（Ｂ组）的慢性肝病患者前Ｃ区密码２８终止变异（终２８）。结果ＨＢＶ和ＨＣＶ双重感染患者（Ａ组）血清ＨＢＶＤＮＡ第１次ＰＣＲ阳性率（１６％）明显低于单独ＨＢＶ感染组（６５％）（Ｐ＜０．００１）；前Ｃ终２８检出率（２８％）亦明显低于单独ＨＢＶ感染（６８％）（Ｐ＜０．００１）。结论提示双重感染患者ＨＢＶ前Ｃ终止变异低频率可能与ＨＢＶ低水平复制有关     

重型乙型肝炎病人中乙型肝炎病毒C基因启动子变异的研究

目的　了解重型乙型肝炎（ 乙肝） 病人血清乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡＣ基因启动子（ＣＰ） 的变异。方法　对用聚合酶链反应（ＰＣＲ） 法扩增的血清ＨＢＶＤＮＡ 直接测序。结果　７ 例亚急性重型肝炎病人的ＨＢＶ 分离株ＣＰ区分别有２～１２ 个替代变异，１ 例病人有１１ｂｐ 的碱基插入。ＣＰ变异主要发生于ＣＰ的第１ 和第２ 个ＡＴ丰富区，ｎｔ１ ７６２ 和ｎｔ１ ７６４ 的替代变异见于７ 例亚急性重型肝炎病人的４ 例中，是ＣＰ变异的热点，其中３ 例ＨＢｅＡｇ 阴性，说明和ＨＢｅＡｇ 阴性表型相关。ＣＰ的第３ 个ＡＴ丰富区、ＨＢＶ逆转录起始位点（ＤＲ１） 和前Ｃ基因、前基因组转录起始位点未见变异。结论　重型肝炎病人的ＨＢＶＣＰ区存在较多的变异，ＣＰ变异主要发生于和前Ｃ基因相关的第１ 和第２ 个ＡＴ丰富区，可能和ＨＢｅＡｇ 阴性表型相关     

慢性肝炎和肝癌病人血清中乙型肝炎病毒DNA的检测

为了了解慢性肝炎和肝癌病人患者体内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制与ＨＢＶ血清标志之间的关系，用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交方法对６１例慢性肝炎和４７例肝癌患者的ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、相关ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、表面抗体（抗－ＨＢｓ）、核心抗体（抗－ＨＢｃ）、相关ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）进行了检测。结果表明：ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、／抗－ＨＢｃ阳性的慢性肝炎和肝癌患者血清中的检出率分别为９０．５０％和５０．００％；在ＨＢｓＡｇ／抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性者的检出率分别为４５．４０％和７．１４％；在ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阴性者中的检出率分别为６０．００％和４０．００％；ＨＢｓＡｇ阴性、／抗－ＨＢｃ阳性或／抗－ＨＢｅ阳性或／抗－ＨＢｓ阳性者中的检出率分别为２０．００％和２２．２２％；在血清学指标全阴性时，慢性肝炎和肝癌患者血清中ＨＢＶＤＮＡ的检出率均为０。实验提示：无论是肝炎或肝癌，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ同时阳性时，ＨＢＶ复制最为活跃；在单独ＨＢｓＡｇ阳性时，ＨＢＶ有一定程度的复制；ＨＢＶ复制在肝癌细胞中受到一定程度的抑制。     

套叠式（Nested）PCR检测乳汁中HBV－DNA

本文应用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ技术，检测了５２例血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性（ＰＣＲ检测）产妇和１５例血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性（ＰＣＲ检测）产妇乳汁中的ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果表明：５２例阳性产妇乳汁中ＨＢＶ－ＤＮＡ经第一次扩增后，１２例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性。经第二次扩增后，４０例阳性（阳性率７６．９％）；１５例阴性产妇乳汁中ＨＢＶ－ＤＮＡ经两次扩增后均为阴性。作者认为，Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ技术是检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性产妇乳汁是否排泌ＨＢＶ的简便、灵敏、特异的方法。乳汁中含有ＨＢＶ应停止哺乳。     

血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其与病毒复制的关系

用抗Ｓ和抗前Ｓ１单抗的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测１５０例慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）携带者和健康人血清中的ＨＢＶ前Ｓ１抗原，其结果和ＨＢＶＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）、乙型肝炎血清标志的检测结果进行比较。结果表明：前Ｓ１抗原在乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性组中的检出率和相对滴度显著高于ＨＢｅＡｇ阴性组（Ｐ＜０．０１）；在ＨＢｅＡｇ阴性组中，抗－ＨＢｅ阴性人群前Ｓ１抗原的检出率和相对滴度也显著高于抗－ＨＢｅ阳性人群（Ｐ＜０．０１）。前Ｓ１抗原和ＨＢＶＤＮＡ检测结果的符合率达８０％，两者检出率的相关系数ｒ＝０．９８２６（Ｐ＜０．０１）。结论：血清前Ｓ１抗原和乙型肝炎病毒的存在关系密切。     

用聚合酶链反应检测人肝细胞癌乙型肝炎病毒DNA和丙型肝炎病毒RNA

为研究乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）和丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＤＮＡ）与肝细胞癌的关系，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和巢式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）分别检测４２例肝肿瘤组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。结果：１例胆管细胞癌组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性，１例胆管囊腺瘤ＨＢＶＤＮＡ阳性。４０例肝细胞癌组织中，单纯ＨＢＶＤＮＡ阳性１９例，单纯ＨＣＶＲＮＡ阳性３例，二者均阳性１０例。ＨＢＶＤＮＡ阳性率７２．５％，ＨＣＶＲＮＡ阳性率３２．５％。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ感染与肝癌组织学分型无关；且肝细胞癌中ＨＣＶ感染与ＨＢＶ未见相关。结果提示，我国ＨＢＶ感染仍是引起肝细胞癌的主要原因。但由于肝细胞癌患者中ＨＣＶ的感染率也较高，且有上升趋势，因此ＨＣＶ可能也是肝细胞癌发生的重要原因之一。     

154例HBV血清学标志物阳性PCR检测结果分析

１５４例ＨＢＶ血清学标志物阳性ＰＣＲ检测结果分析黄华健邵阳市中心医院检验科为了解ＨＢＶ—ＤＮＡ与乙型肝炎５种血清学标志物——即乙肝二对半（ＨＢｓＡｇ、Ａｎｔｉ—ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，Ａｎｔｉ—ＨＢｅ，Ａｎｔｉ—ＨＢｃ）之间关系，本文对１５４例乙肝二对半...     

套式PCR和原位杂交技术检测肝病患者单个核细胞？…

目的 了解慢性乙型肝炎（中度）和原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ存在情况。方法 采用套式ＰＣＲ以及原位杂交技术检测外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 套式ＰＣＲＳＷＩＭ２６例慢性乙型肝炎（中度）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ阳性７例。阳性率２６．９％,非常显著高于健康对照（Ｘ＾１２＝１４．３,Ｐ〈０．００１）;２１例原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）虱ＰＢＭＣ内ＴＴ     

多种方法检测HBV血清标志物结果分析

ＰＣＲ技术直接检测血清中的ＨＢＶ－ＤＮＡ［１］，并与反向间接血凝法（Ｒ－ＩＨＡ）、乳胶凝集法（ＬＡＴ）和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测乙型肝炎血清标志物进行对比观察，以探讨ＰＣＲ技术在乙型肝炎病原诊断中的应用及ＨＢｖ－ＤＮＡ与乙肝五项标志物（ＨＢＶ－ｍ）之间的关系。材料与方法检测对象：１４６例肝炎患者，其中急性肝炎９１例，慢性肝炎４１例，肝炎后肝硬化１１例，重症肝炎３例，均符合１９９０年上海全国病毒性肝炎会议制订的诊断标准。方法：１４６例均用ＰＣＲ技术俭测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，用Ｒ－ＩＨＡ检测…     

定量聚合酶链反应检测肝病患者血清中乙型肝炎病毒 …

目的 了解肝病患者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的含量，以便观察临床抗病毒治疗效果及血清ＨＢＶ ＤＮＡ水平与病情及预后的关系。方法 应用荧光素标记的半巢式引物在扩增中能量转移的定量聚合酶 链反应（ＱＰＣＲ），对６３例肝功能异常的肝病患者血清进行ＨＢＶ ＤＮＡ含量测定，并与普通ＰＣＲ及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）进行比较。结果 ＱＰＣＲ阳性率为８２。５４％，普通ＰＣＲ法为７１．４３％，ＥＬＩＳＡ     

慢性乙型肝炎肝内HBVDNA和HBsAg的双标记定位研究

应用原位杂交和免疫组化ＰＡＰ法双标记技术，结合病人乙型肝炎（乙肝）病毒血清学标志物检测结果，研究了３１例慢性乙肝病人肝穿刺组织中乙型肝炎病毒ＤＡＮ和ＨＢｓＡｇ的分布及意义。结果显示，肝辔内检ＨＶＤＮＡ２３例，ＨＢｓＡｇ２６例，二者同时检出者２１例。从同组病人肝组织的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ双标检测结果与其乙肝病毒血清学标志物检测结果的比较来看，肝组织内ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ同时很可能表明ＨＢＶ正