肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭营养不良大鼠Leptin-下丘脑NPY、POMC轴的影响

目的观察肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)营养不良大鼠瘦素(leptin,LP)-下丘脑神经肽Y(neusropeptide Y,NPY)及阿片-促黑素细胞皮质素原(proopiomelanocortin,POMC)轴的影响。方法 42只SD雄性SPF级大鼠,随机选取正常组8只,其余大鼠采用5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,随机分为肾衰养真胶囊组(SSYZC组)11只、复方α-酮酸组(对照组)11只、模型组12只。治疗4周后,检测肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24小时尿蛋白(24 hour urine protein,24 h Upr)、白蛋白(albumin,ALB)、血红蛋白(haemoglobin,Hb)、胰岛素样生长因子-1(type-1 insulin like growth factor,IGF-1)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三脂(triglyeride,TG),动态观察摄食量及体重变化,应用放射免疫法检测血浆瘦素(leptin,LP)、下丘脑神经肽Y(neusopeptide Y,NPY)和RT-PCR法检测下丘脑OB-Rb mRNA、NPYmRNA和POMCmRNA表达水平。结果 CRF大鼠在术后10周末出现营养不良,SSYZC组大鼠摄食量、体重显著增高(P0.05),肾功能及营养状况明显改善(P0.05),肾衰养真胶囊可降低血浆LP、NPY水平(P0.05);可上调下丘脑NPY mRNA表达(P0.01)及下调OB-Rb mRNA、POMC mRNA表达(P0.01)。结论肾衰养真胶囊可能通过上调下丘脑NPY mRNA表达及下调OB-Rb mRNA、POMC mRNA表达,从而促进大鼠摄食,改善CRF营养不良。     

肾衰养真胶囊对5/6肾切慢性肾衰营养不良大鼠瘦素及其受体mRNA表达的影响

目的:观察5/6肾切除大鼠营养不良状态;以及肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭(CRF)营养不良大鼠瘦素(Lep-tin)及其受体mRNA表达的影响。方法:5/6肾切除制作CRF大鼠模型,同时予4%酪蛋白饮食,检测尿素氮、肌酐、白蛋白等生化指标和体重观察其营养不良发生时间,符合条件的随机分为模型组、肾衰养真胶囊治疗组和开同治疗组;另设正常对照组。灌胃6周后应用放射免疫法检测血浆Leptin水平和RT-PCR法检测下丘脑瘦素受体(OB-Rb)表达。结果:CRF大鼠在术后10周末出现营养不良,肾衰养真胶囊可减低增加血浆白蛋白、血红蛋白;肾衰养真胶囊可下调OB-Rb表达,降低Leptin水平。结论:肾衰养真胶囊可能通过调节下丘脑OB-Rb活性,从而进一步改善CRF大鼠营养不良。     

肾衰养真胶囊对腺嘌呤致CRF营养不良模型大鼠营养状态的影响

目的:观察肾衰养真胶囊(黄芪、人参、当归、大黄等)对慢性肾衰竭(CRF)营养不良大鼠的营养状况的影响.方法:予0.5%腺嘌呤和4%酪蛋白混合饲料喂养制作CRF营养不良大鼠模型,将符合条件的随机分为模型组、肾衰养真胶囊组和开同组,同时设正常组.治疗4周后检测体重、白蛋白、血红蛋白、甘油三脂、总胆固醇、胰岛素样生长因子-1等指标的变化,进行光镜(HE、PAS染色)观察肾组织病理学改变.结果:8周末大鼠造模成功,治疗后肾衰养真胶囊组摄食量和体重显著增加,与模型组比较,白蛋白、血红蛋白、胰岛素样生长因子-1显著升高;肌酐、尿素氮、24 b尿蛋白显著下降,大鼠的肾组织病理形态明显改善.结论:肾衰养真胶囊可明显改善腺嘌呤致CRF营养不良模型大鼠的营养状况,对CRF营养不良模型大鼠有肾保护作用.     

肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭大鼠蛋白质营养不良及ALB、IGF-Ⅰ基因表达的影响

目的 :观察中药肾衰养真胶囊对慢性肾衰竭大鼠蛋白质营养不良的治疗作用及探讨其可能的机制。方法 :5 /6肾切除造模后将大鼠随机分为正常组 (N)、模型组 (C)、肾衰养真胶囊高剂量组 (H)、中剂量组 (M )、低剂量组 (L)、西药对照开同组 (K)。给药四周后检测大鼠血清白蛋白 (ALB)、转铁蛋白 (TF)、胰岛素样生长因子 -Ⅰ (IGF -Ⅰ )、 2 4h尿蛋白定量(2 4hrUprV) ,RT -PCR法检测大鼠肝脏ALBmRNA、IGF -ⅠmRNA表达水平。结果 :(1)肾衰养真胶囊中剂量组的体重增长高于开同组 (P <0 0 5 ) ;(2 )治疗后肾衰养真胶囊各剂量组和开同组血清ALB、TF、IGF -Ⅰ水平显著高于模型组 ,IGF -Ⅰ水平较治疗前显著升高 ;(3)治疗后 ,2 4h蛋白尿治疗前后差值高剂量组 (10 8± 2 9 8)和中剂量组 (18 7± 4 9 4 )明显低于模型组 (5 0 3± 74 0 )、开同组 (6 3 8± 30 7) (P <0 0 5 ) ;(4 )治疗后肾衰养真胶囊高中低剂量组肝ALBmRNA和IGF -ⅠmRNA表达量较模型组、开同组显著增加 (P <0 0 1)。结论 :肾衰养真胶囊能纠正CRF蛋白质代谢紊乱 ,改善CRF蛋白质营养状态 ,其机制可能是通过上调CRF大鼠肝脏ALBmRNA表达促进ALB合成及上调IGF -ⅠmRNA表达提高血清IGF -Ⅰ水平 ,促进蛋白质合成 ,减少蛋白质分解。     

肾切除慢性肾衰竭大鼠营养不良与慢性炎症状态以及肾衰养真胶囊的干预试验

目的 :探讨慢性肾衰竭大鼠是否同时存在营养不良与慢性炎症反应状态 ,二者是否关联 ;以及中药肾衰养真胶囊干预慢性肾衰竭大鼠营养不良及慢性炎症状态的作用。方法 :5 / 6肾切除制作慢性肾衰竭大鼠模型 ,随机分为空白对照组 (对照组 ) ( n=8)、肾衰养真胶囊小剂量组 (小剂量组 ) ( n=6)、肾衰养真胶囊中剂量组 (中剂量组 ) ( n=6)、肾衰养真胶囊高剂量组 (高剂量组 ) ( n=7)。给药 4周后检测大鼠血肌酐、白蛋白 ;ELISA法检测血清 C反应蛋白 ( CRP)水平 ,RT- PCR检测肝组织 CRP m RNA表达。结果 :5 / 6慢性肾衰竭大鼠模型出现低白蛋白血症 ,CRP水平升高 ,肝组织 CRP m RNA表达上调。中药肾衰养真胶囊可提高血浆白蛋白水平 ,降低血清 CRP水平 ,使肝组织 CRPm RNA表达的下调。结论 :5 / 6肾切除慢性肾衰竭大鼠存在营养不良及慢性炎症反应状态 ,而且二者呈显著负相关 ;中药肾衰养真胶囊可改善慢性肾衰竭大鼠慢性炎症状态、纠正低蛋白血症 ,从而改善营养不良     

肾衰养真胶囊对5/6肾切慢性肾衰竭营养不良大鼠下丘脑信号传导蛋白SOCS-3表达的影响

目的探讨细胞因子信号传导抑制剂-3(SOCS-3)在慢性肾衰竭营养不良大鼠中的表达情况以及肾衰养真胶囊的调节作用。方法5/6肾切除制作慢性肾衰竭大鼠模型,同时予4%酪蛋白饮食,检测血尿素氮、肌酐、白蛋白、血红蛋白等生化指标和体重,观察其营养不良发生时间,符合条件的随机分为模型组、肾衰养真胶囊治疗组和开同治疗组;另设正常对照组。灌胃4周后应用放射免疫法检测血瘦素水平,免疫组织化学方法检测下丘脑SOCS-3蛋白的表达。结果慢性肾衰竭大鼠在术后10周末出现营养不良,肾衰养真胶囊可减低血浆尿素氮、肌酐、瘦素水平,增加白蛋白、血红蛋白水平;与正常组比较,模型组与肾衰养真胶囊治疗组SOCS-3当色阳性信号均强(P<0.001),但肾衰养真胶囊组SOCS-3染色阳性信号显著高于模型组(P<0.05)。结论肾衰养真胶囊可能部分是通过上调抑制蛋白SOCS-3,降低瘦素水平,从而改善慢性肾衰竭大鼠营养不良。     

肾衰养真胶囊对5/6肾切除慢性肾衰营养不良大鼠营养状态的影响

目的:观察肾衰养真胶囊对5/6肾切除慢性肾衰竭(CRF)营养不良大鼠营养状态的影响.方法:5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,观察其营养不良发生时间,将符合条件的大鼠随机分为正常组、模型组、肾衰养真胶囊组和开同组.治疗4周后检测体重、白蛋白、血红蛋白、甘油三脂、总胆固醇、胰岛素样生长因子-1等指标的变化,进行光镜(HE、PAS染色)观察肾组织病理学改变.结果:大鼠在5/6肾切后10周末出现营养不良,与模型组比较,经治疗4周后肾衰养真胶囊组大鼠体重及摄食量显著增加白蛋白、血红蛋白、胰岛素样生长因子-1、甘油三脂、总胆固醇水平显著升高,肾组织病理形态明显改善,肾功能有明显的改善.结论:肾衰养真胶囊能改善5/6肾切慢性肾衰竭营养不良模型大鼠的营养状态.     

助阳舒心方对抑郁模型大鼠HPA轴调控机制的研究

目的:探讨助阳舒心方对抑郁模型大鼠HPA轴调控的机制。方法:采用慢性轻度不可预见性刺激(CUMS)结合孤养建立大鼠抑郁模型,将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、盐酸氟西汀组及助阳舒心方低、中、高剂量组,观察助阳舒心方对大鼠体质量及糖水消耗的影响;运用逆转录聚合酶联反应(RTPCR)法检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、糖皮质激素受体(GR)和垂体阿黑皮素原(POMC)mRNA表达情况。结果:助阳舒心方可逆转慢性应激大鼠体质量减轻、糖水消耗减少,下调下丘脑CRH和垂体POMC mRNA表达,上调下丘脑GR mRNA表达。结论:助阳舒心方对慢性应激大鼠具有抗抑郁作用,其调控HPA轴的机制与下调下丘脑CRH、垂体POMC mRNA表达和上调下丘脑GR mRNA表达有关。     

慢性肾衰竭营养不良大鼠骨骼肌细胞凋亡及中药的干预实验

目的:观察慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)营养不良大鼠骨骼肌细胞凋亡情况,及中药肾衰养真胶囊对其的影响。方法:SD雄性大鼠,采用5/6肾切除同时予4%酪蛋白饮食制作CRF营养不良大鼠模型,随机分为正常组,模型组,中药组和西药组。治疗4周后,检测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb)、血红蛋白(Hb),TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡率,Western Blot检测骨骼肌细胞凋亡蛋白酶3(Caspase-3)活性片段(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因相关蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:模型组大鼠骨骼肌细胞凋亡率明显增加(P0.01),Cleaved Caspase-3和Bax表达均显著增加(P0.01),Bcl-2表达显著下降(P0.01)。中药干预后,CRF营养不良大鼠骨骼肌细胞凋亡率显著减少(P0.01),Cleaved Caspase-3和Bax表达均显著下降(P0.01),Bcl-2表达显著增加(P0.01),同时大鼠Alb、Hb显著升高(P0.01)。结论:Caspase-3依赖的细胞凋亡可能参与了CRF营养不良骨骼肌蛋白的降解,并诱导了骨骼肌萎缩。中药肾衰养真胶囊可能通过下调Cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制骨骼肌细胞凋亡,从而改善CRF营养不良。     

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Klotho蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨复肾功方(Fushengong decoction,FSGD)对慢性肾衰竭(Chronic renal failure,CRF)大鼠Klotho蛋白及mRNA表达的影响。方法将55只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。采用腺嘌呤含量为0.5%的饲料建立CRF模型,连续喂养21 d。模型复制成功后,所有大鼠改用常规饲料喂养;复肾功方低、中、高剂量组按照体质量分别以含生药4、8、16 g·kg^-1的复肾功方水煎剂灌胃给药,正常组及模型组给予同体积生理盐水,给药体积20 mL·kg^-1·d^-1,每日1次,连续灌胃给药30 d。实验结束后,取各组大鼠血清检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的含量;HE染色法检测大鼠肾脏组织的病理形态学变化;采用Western Blot法和免疫组化法检测肾脏组织Klotho蛋白的表达;Real-time PCR法检测肾脏组织Klotho mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清SCr、BUN的含量均显著升高(P<0.01),肾脏组织病理损害明显,肾脏Klotho蛋白及mRNA的表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,复肾功方各剂量组大鼠的肾脏组织病理损害明显减轻,血清SCr、BUN含量显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠肾脏组织Klotho蛋白及mRNA的表达明显升高(P<0.05)。结论复肾功方能够降低CRF大鼠血清SCr、BUN的含量,减轻肾损伤,可能与上调肾脏组织的Klotho蛋白及mRNA的表达有关。     

The effect of the leptin and its receptor expression in CRF rat by the Reinforcing Kidney and Exhausting Toxin Mixture

Recently ,therelationbetweenleptinandmalnutritioninCRFcausedwidespreadconcernofthedomesticandin ternationalscholars〔1〕.TheeffectofReinforcingKidneyandExhaustingToxinMixtureontheleptinanditsreceptor’sexprssioninkidneyandadipocyteswasobservedbyim munohistochemistry .TheaimistodiscussthetreatmentmechanismofReinforcingKidneyandExhaustingToxin MixtureonCRFmalnutrition .MaterialsandMethods1.Animals:Sixtyhealthywistarrats(halfmaleandhalffemale)wereobtainedfromQingdaoanimallaboratory(ident…     

通腑醒神胶囊对急性缺血损伤大鼠脑钠离子通道基因表达的影响

目的 探讨通腑醒神胶囊对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用是否与调节神经细胞膜上Na离子通道基因表达有关.方法 观察通腑醒神胶囊治疗对大脑中动脉阻塞模型大鼠各时间点神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死体积的影响;运用荧光定量RT-PCR技术检测各组动物损伤侧及健侧大脑神经细胞膜上Na离子通道α亚基基因各亚型(Nav1.1、Nav1.2、Nay1.3、Nav1.7、Nav1.8)mRNA在不同时间点的表达水平.结果 治疗组在1、2、3、7 d时神经功能缺损评分,3 d时脑含水量,3、7 d时的脑梗死体积均较模型组低,差异显著(P<0.01);治疗组损伤侧脑组织在1、2 d时Nav1.1 mRNA表达水平高于模型组,其中2 d时差异显著(P<0.05),但低于健侧、假手术组及对照组(P<0.05);模型组及治疗组损伤侧Nav1.2、Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8 mRNA的表达水平与健侧、假手术组及对照组相比,在各时间点均未见显著性差异(P>0.05).结论 通腑醒神胶囊对缺血性神经细胞具有保护作用,可能与调节Nav1.1表达有关.     

六味地黄加味胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C活性及结缔组织生长因子的影响

目的观察六味地黄加味胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用,对肾脏蛋白激酶C(PKC)活性及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法ip链脲佐菌素(STZ)建立大鼠DN模型,模型成功后随机分为5组:对照组、模型组、洛汀新组、六味地黄加味胶囊组、洛汀新与六味地黄加味胶囊合用组,药物干预12周后,透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构,免疫组织化学法检查肾皮质CTGF表达,检测相对肾质量、血糖、尿白蛋白排泄率(UPER)、血肌酐(SCr)、尿肌酐(UCr)、内生肌酐清除率(CCr)、肾脏PKC活性等。结果DN大鼠肾脏胶原沉积明显,相对肾质量、血糖、UPER、CCr、肾脏PKC活性、肾皮质CTGF表达等显著升高,洛汀新、六味地黄加味胶囊及两药合用均可降低肾脏PKC活性和肾皮质CTGF的表达,改善DN大鼠蛋白尿、肾功能,减轻肾脏胶原沉积,两药合用能更显著降低肾脏PKC活性、肾皮质CTGF的表达,降低蛋白尿和改善肾功能作用更强。结论洛汀新、六味地黄加味胶囊及两药合用均能保护DN大鼠肾脏,且两药合用较单用洛汀新作用更强。     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑前阿黑皮原mRNA的影响

目的探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)的作用机理。方法取新生SD雌性大鼠随机分为3组，于9日龄时注射丙酸睾丸酮，制成ASR模型，用中药天癸方治疗14天，于106日龄左右(动情前期)处死，并取血清，用放免法测定总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)，下丘脑前阿黑皮原mRNA(POMCmRNA)。结果模型组大鼠均无排卵，对照组(未造模)大鼠均排卵，中药组大鼠排卵率为58%。TT和FT模型组均明显高于对照组和中药组(P＜0.01)。3组大鼠在下丘脑弓状核神经元雄激素受体(AR)和β-内啡肽(β-EP)共存。下丘脑POMCmRNA水平模型组高于对照组(P＜0.01)，中药组降至基本正常。结论ASR模型的血清雄激素水平升高，有可能通过下丘脑β-EP神经元上的AR引起POMCmRNA表达增加，中药天癸方可使血清雄激素水平和下丘脑POMCmRNA下降。     

二神丸中药物炮制前后对肠道菌群和UCP2基因表达的影响

目的:观察二神丸中补骨脂、肉豆蔻炮制前后对脾肾阳虚泄泻模型大鼠肠道菌群和肾脏线粒体解偶联蛋白2(UCP2)基因表达的影响,探讨二神丸中药物炮制增效的机制。方法:将24只SD雄性大鼠随机等分为正常组、模型组、二神丸生品组(补骨脂生品+肉豆蔻生品)和二神丸炮制品组(盐补骨脂+煨肉豆蔻),运用复合造模方法复制大鼠脾肾阳虚泄泻模型,后二组灌胃给药量3.5 g·kg~(-1),正常组和模型组给予同等体积生理盐水。采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测各组肠道菌群,研究二神丸对肠道菌群的影响;使用免疫组化染色SP法测定各组大鼠肾脏组织UCP2基因表达。结果:脾肾阳虚泄泻大鼠肠道菌群和UCP2含量与造模前相比发生明显变化,其中长双歧杆菌、乳酸杆菌菌群异常低下,大肠埃希菌、粪肠球菌含量显著增加,肾脏组织UCP2含量明显升高。给予二神丸后,对肠道菌群失调和UCP2异常均有明显的调节和改善作用,尤以炮制组(盐补骨脂+煨肉豆蔻)效果为最佳。结论:由盐炙补骨脂和麸煨肉豆蔻组方的二神丸促进脾肾阳虚泄泻模型有益菌的增殖、抑制有害菌以及下调肾脏组织UCP2效果更加明显,提示其增效可能与调节肠道菌群及机体基础代谢率相关。