肠源性内毒素血症所致肝微循环障碍在肝损伤中的作用

目的　探讨肠源性内毒素血症诱导的肝微循环障碍在肝损伤中的作用。方法　用硫代乙酰胺(TAA)构建肠源性内毒素血症大鼠模型。25只雄性Wistar大鼠分为4组生理盐水组,肝素对照组,TAA组,TAA+肝素组。采用生化检测方法　、组织化学方法　和电镜技术,检测实验各组血浆内毒素、丙氨酸转氨酶(ALT)和丙二醛(MDA)水平的变化及肝组织形态学改变。结果　TAA组血浆内毒素为(0.1899±0.0540)EU/ml、ALT为(1006.80±9182)U/L、MDA为(636±1.96)nmol/ml;对照组分别为(0.0911±0.0068)EU/ml、(31.15±10.58)U/L、(366±0.86)nmol/ml,两组相比TAA组明显升高(P<0.05);TAA+肝素组与TAA组相比,内毒素(0.1597±0.0357)略有下降(P＞005),ALT(586.69±221.97)和MDA(3.64±0.95)显著降低(P＜005)。肝组织形态学改变,苏木精-伊红染色显示TAA组肝坏死面积达50%,纤维素染色TAA组肝窦及微血管内可见大量蓝色丝状团块样的微血栓;电镜结果　显示TAA组窦腔内红细胞聚集、白细胞粘附贴壁,肝窦内皮细胞窗孔数目减少,而TAA+肝素组上述改变明显减轻。结论　肠源性内毒素血症可诱导肝微循环障碍导致缺血、缺氧性肝损伤,肝素可明显改善肠源性内毒素血症所致的肝微循环障碍,从而使缺血、缺氧所致的肝损伤明显减轻。     

急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症形成机理及其作用的实验研究

探讨急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症的形成机理及肠源性内毒素血症在急性肝损伤过程中的作用.采用皮下注射硫代乙酰胺（TAA）600 mg/kg制作大鼠急性肝损伤动物模型,取回肠内容物、肝、脾、淋巴结作细菌培养,检测血浆及回肠内容物内毒素含量.行血浆D-乳酸的检测.取肝脏和回肠作病理切片.结果显示TAA诱导大鼠急性肝损伤后,血浆及回肠内容物内毒素水平上升明显（P＜0.01）,血浆TNF-α含量升高明显（P＜0.01）,且与内毒素水平升高呈正相关（P＜0.01）.同时出现肠道菌群失调,肠道通透性增加,肠道细菌移位.回肠病理所示肠绒毛明显变短、破坏、炎性细胞浸润增多.因此肠道菌群失调、肠粘膜结构改变、肠道通透性增加及肠道细菌移位是形成肠源性内毒素血症的重要因素.内毒素可直接或通过诱导TNF-α加重肝损伤.     

大承气汤对急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症生物学效应的阻断作用

目的：观察大承气汤对急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症生物学效应的阻断机制及作用。方法：取Wistar大鼠30只随机分为3组，正常对照组（A组），大承气汤治疗组（B组），急性肝损伤模型组（C组），每组各10只。B、C两组大鼠均以皮下注射硫代乙酰胺（TAA）600mg／kg造模。A组大鼠给予生理盐水灌胃。B组大鼠于造模前2走开始以大承气汤灌胃，直至造模成功后3天。处死大鼠取肝脏行病理学检测厦免疫组化检测，并测定血浆内毒素和肿瘤坏死因子（TNF-α）、血清ALT、TBil水平。结果：与A组相比，C组大鼠血浆内毒素、THF-α、血清ATL、TBil明显升高（P〈0.05）。经大承气汤治疗后，其血浆内毒素、TNF-α、血清ALT、TBil明显降低（P〈0．05）。肝脏病理检测结果显示，C组大鼠肝细胞呈弥漫性大片状坏死，肝窦结构被破坏，汇管区可见大量炎症细胞浸润，B组大鼠肝脏病理改变明显减轻。免疫组化结果显示，C组大鼠肝组织可见核因子-κB及CD14明显活化。与C组相比。B组核因子-κB及CDl4活化明显减弱。结论：急性肝损伤大鼠肝组织中核因子-κB及CD14活化明显，大承气汤对急性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症生物学效应具有阻断作用。     

TNF-α,IL-6及ICAM-1在急性肝损伤时肠源性内毒素血症中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）-α,白细胞介素（IL）-6及细胞间黏附分子（ICAM）-1在急性肝损伤肠源性内毒素血症中的作用机制。方法取Wistar大鼠20只随机分为2组,正常对照组（A组）及急性肝损伤造模组（B组）,每组各10只。测定大鼠血浆内毒素、谷丙转氨酶（ALT）及血浆TNF-α,IL-6水平,RT-PCR方法检测肝脏组织ICAM-1 mRNA的表达,取肝脏行病理学检测。结果与A组相比,B组血浆内毒素,ALT,TNF-α,IL-6水平明显升高（P〈0.01）,ICAM-1 mRNA的表达明显增加（P〈0.01）。肝脏病理检测结果显示,B组大鼠肝细胞呈弥漫性大片状坏死,肝窦结构被破坏,汇管区可见大量炎症细胞浸润。结论TNF-α,IL-6及ICAM-1在急性肝损伤肠源性内毒素血症中起着重要作用。     

促肠动力药对肝硬化肠源性内毒素血症的影响

目的：评价促肠动力药对肝硬化肠源性内毒素血症的治疗价值。方法：肝硬化大鼠分为促肠动力药治疗组和对照组,治疗前后分别采血测内毒素水平,另设正常对照组。52例肝硬化病人分成促肠动力药组（A组）,乳果糖组（B组）和对照组（C组）,疗程2周,治疗前后分别抽血测内毒素,结果：治疗前两组肝硬化大鼠的血清内毒素水平无差别（P＞0．05）,高于正常大鼠（P＜0．01）,经促肠动力药物治疗后内毒素明显降低（P＜0．01）,治疗肝肝硬化病人内毒素水平在A、B组均有下降（P＜0．01）,两组间差异无统计学意义;对照组前后两次血内毒素水平无明显差异。结论：促肠动力药能降低肝硬化大鼠和病人的血清内毒素水平,提示其对肝硬化肠源性内毒素血症的治疗有益。     

血必净对肝癌经导管肝动脉化疗栓塞术后血浆内毒素及肝功能的影响

[目的]探讨血必净注射液对肝癌患者经导管肝动脉化疗栓塞术（TACE）后血浆内毒素及肝功能的影响。[方法]将56例肝癌患者随机分为治疗组与对照组;TACE后,2组均行常规保肝（还原性谷胱甘肽、甘草酸二胺等）治疗,疗程7d;治疗组在此基础上加用血必净注射液疗程7d。检测2组TACE前后肝功能和血浆内毒素水平。[结果]治疗组血浆内毒素水平和血清ALT、AST、TBil与术前相比轻度升高（P〈0.05）,而对照组血浆内毒素水平和血清ALT、AST、TBil与术前相比明显升高（P〈0．05）。治疗组TACE后血浆内毒素水平,血清ALT、AST、TBil升高程度低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。[结论]血必净注射液能降低肝癌患者TACE后血浆内毒素水平,从而减轻对肝功能的损伤。     

温阳解毒化瘀颗粒对肠源性内毒素血症大鼠肠黏膜上皮紧密连接的影响

目的：研究温阳解毒化瘀颗粒对肠源性内毒素血症（ IETM ）模型大鼠结肠黏膜上皮紧密连接的影响,探索其抗肝衰竭的作用机制。方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、温阳解毒化瘀颗粒（实验组）和对照组4组,采用D-半乳糖胺（D-gal）腹腔注射致肝衰竭ITEM大鼠模型。正常组在腹腔注射生理盐水24h后处死,模型组、实验组、对照组分别于造模后24h、48h、72h各取6只、7只、7只大鼠处死,检测各组肝功能、内毒素、结肠黏膜上皮咬合蛋白（occludin）及肌球蛋白轻链激酶（MLCK）。结果：模型组血清ALT/AST、内毒素、 MLCK表达水平均高于正常组, occludin表达低于模型组（ P＜0.01）;实验组血清ALT/AST、内毒素、 MLCK表达水平均低于模型组, occlu-din表达高于模型组（ P＜0.05）。结论：增强结肠粘膜上皮紧密连接功能,降低内毒素的吸收是温阳解毒化瘀颗粒抗肝衰竭的作用机制之一。     

肝硬化大鼠小肠黏膜形态结构改变与内毒素血症

目的研究药物和胆汁淤积引起的肝硬化大鼠小肠黏膜形态结构改变和血浆内毒素水平。方法分别以硫代乙酰胺(TAA)(n=10)诱导和行胆管结扎术后(BDL)(n=7)的肝硬化大鼠为模型组,另以正常大鼠(n=12)作为正常对照组,分别观察光镜和透射电镜下小肠黏膜的形态,并采用鲎试剂基质显色法测定腹主动脉血浆内毒素含量。结果光镜下观察到模型组肝硬化大鼠小肠肠黏膜绒毛稀疏、萎缩,上皮细胞坏死,黏膜水肿伴有炎性细胞浸润;电镜下观察到模型组大鼠小肠壁超微结构有明显改变,肠黏膜绒毛破坏,减少,变短,倒伏,缺失,肠黏膜紧密间隙增宽,肠黏膜杯状细胞分泌减少,肠黏膜上皮细胞内线粒体和内质网肿胀。正常对照组大鼠的小肠黏膜绒毛形态及超微结构没有明显改变。模型组大鼠的血浆内毒素水平明显高于正常对照组(P<0.01)。结论模型组肝硬化大鼠都存在小肠黏膜结构的改变和内毒素水平的增高,提示肝硬化大鼠小肠黏膜的损伤与肠源性内毒素血症密切相关。     

肝大部切除大鼠所致的IETM对血浆与肝组织IL-1β的影响

目的 探讨肝大部分切除(PH)诱导的肠源性内毒素血症(IETM)对血浆及残余肝组织IL-1β的影响或可能存在的关系.方法 102只健康雄性成年wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、假手术(SO)组和肝大部切除(PH)组,在不同时间点检测血浆内毒素(ET)、IL-1β、ALT的水平以及残余肝组织IL-1β的蛋白表达...     

清毒汤对大鼠实验性肝损伤内毒素血症的治疗作用

目的：探讨清毒汤对大鼠肝损伤内毒素血症的作用机制。方法：建立硫代乙酰胺（TAA）所致大鼠肝损伤内毒素血症模型，以清毒汤进行干预，通过血液生化及病理检查，观察其对内毒素血症大鼠肝功能、肿瘤坏死因子、内毒素的影响。结果：清毒汤能明显降低肿瘤坏死因子（TNF-α）、内毒素的含量，减轻肝细胞坏死程度，与模型组比较差异有显著性意义（P〈0．05，P〈0.01）。结论：清毒汤能使内毒素含量、TNF-α水平降低是其对TAA所致大鼠肝损伤具有防护作用的机制之一。     

硫代乙酰胺致大鼠肠源性内毒素血症模型探讨

目的 探讨不同剂量硫代乙酰胺(TAA)所制备的大鼠肠源性内毒素血症(IETM)模型的量效关系.方法 将40只大鼠分为4组,每组10只.TAA组分别以200、400、600mg/kg剂量的TAA灌胃,24h后相同剂量TAA重复灌胃一次,建立不同剂量TAA致大鼠IETM的动物模型;健康对照组以等体积0.9%氯化钠溶液灌胃.观察造模后24、48h大鼠死亡情况,48h后采集存活大鼠腹主动脉血,检测血浆内毒素、血清ALT和AST,观察肝组织病理变化.采用单因素方差分析,组间比较采用t检验.结果 造模48h后,健康对照组无大鼠死亡,200mg/kgTAA模型组死亡2只,400mg/kg TAA模型组死亡5只,600mg/kg TAA模型组死亡8只.200、400、600mg/kg TAA模型组大鼠血清ALT水平分别为(305.09±116.78)、(901.67±274.31)和(1454.84±473.49)U/L,明显高于健康对照组的(47.81±22.61)U/L(t=14.583、25.896、20.596,均P＜0.05);200、400、600mg/kg TAA模型组大鼠血清AST水平分别为(465.88±139.96)、(884.37±250.90)和(1889.23±159.67)U/L,明显高于健康对照组的(69.33±22.04)U/L(t=12.988、18.455、13.542,均P＜0.05);200、400、600mg/kg TAA模型组大鼠血浆内毒素水平分别为(0.436±0.110)、(0.550±0.095)和(0.620±0.057)EU/mL,明显高于健康对照组的(0.103±0.056)EU/mL(t=7.335、5.260、8.191,均P＜0.05).病理学显示不同剂量TAA模型组有不同程度的肝细胞变性坏死.结论 TAA剂量为200～600mg/kg时可成功制作IETM模型,200mg/kg TAA模型组大鼠死亡率较低,适于进一步的实验研究.     

实验性肝损伤大鼠肠道屏障功能障碍研究

目的 观察不同程度肝损伤大鼠血浆及肠道组织内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶的动态变化,探讨肝损伤时肠道机械屏障功能的损伤情况.方法 15只大鼠作为正常对照组(A组),15只大鼠作为急性肝损伤组(B组),25只大鼠作为急性肝功能衰竭组(C组),采用分光光度法测定血浆内毒素、D-乳酸、二胺氧化酶,回肠组织内毒素及二胺氧化酶水平的动态变化,HE染色及电镜观察肝组织细胞形态和亚细胞的结构变化.组间比较采用单因素方差分析.结果 B、C组大鼠血浆D-乳酸活性均明显高于A组,分别为(4.32±1.13)mg/L和(11.62±5.44)mg/L对比(0.77±0.25)mg/L,P＜0.05;血浆二胺氧化酶活性先升高后降低,但均明显高于A组,分别为(0.81±0.26)U/ml和(0.62±0.22)U/ml对比(0.47±0.11)U/ml,P＜0.05;回肠二胺氧化酶活性逐渐降低,B、C两组与A组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);B组血浆及肠组织内毒素活性与A组相比差异不明显(P＞0.05);c组则明显高于A、B两组(P＜0.05).HE染色发现C组存在大片肝细胞坏死,回肠黏膜明显萎缩,部分绒毛断裂、脱落或相互融合,上皮细胞变性、坏死、脱落.电镜观察可见肠黏膜微绒毛稀疏脱落,细胞内线粒体肿胀.结论 D-乳酸和二胺氧化酶在肝损伤早期即可以明显升高,是检测肠黏膜屏障功能的敏感指标,内毒素血症是肝损伤加重的重要因素.     

温阳解毒化瘀方对肝衰竭大鼠内毒素血症的影响

目的:动态观察温阳解毒化瘀方对肝衰竭大鼠内毒素血症(ITEM)的影响。方法:将85只SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组(予乳果糖+三联活菌溶液)及温阳解毒化瘀颗粒组(实验组),采用D-半乳糖胺(D-gal)腹腔注射致肝衰竭ITEM大鼠模型。正常组在腹腔注射生理盐水12小时后处死,其余各组分别于造模后12小时、24小时各取10只大鼠处死,检测各组大鼠血清转氨酶(ALT、AST)、肝组织病理学、门静脉及结肠内毒素水平。结果:模型组12小时时ALT和AST较正常组升高(P<0.05),24小时时门静脉及结肠内毒素水平明显升高(P<0.01),肝组织大面积坏死;实验组及对照组在造模后12小时各观察指标与模型组比较,差异无显著性意义,造模后24小时两组ALT和AST、门静脉及结肠内毒素水平较模型组降低(P<0.05),肝组织病变减轻。结论:D-gal腹腔注射可建立大鼠肝衰竭ITEM模型,温阳解毒化瘀方可通过降低门静脉及结肠内毒素水平减轻ITEM而达到抗肝衰竭的效应。     

肝病患者内毒素血症的临床意义

目的探讨四种肝病内毒素血症（ｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ,ＥＴＭ）的发生率及其临床意义方法１９９７－０２／１９９８－０６山西医科大学第一医院传染病科住院的急、慢性肝炎、肝炎肝硬变及重症肝炎患者３２０例采用基质显色法鲨试验定量检测血浆内毒素（ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ,ＥＴ）水平,应用放射免疫分析法测定血浆肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒＴＮＦ）水平,采用琼脂单向免疫扩散法测定血浆纤维连接蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ,Ｆｎ）含量,采用速率法在全自动生化分析仪．上测定血浆丙氨酸转氨酶（ａｌａｎｉｎｅ　ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＡＬＴ）活性．结果肝病患者血浆ＥＴ,ＡＬＨ,ＴＮＦ含量明显高于健康对照组（Ｐ＜０．０１）,而在肝炎肝硬变、重症肝炎组Ｆｎ含量均明显低于对照组重症肝炎、肝炎肝硬变、慢性肝炎、急性肝炎患者肠源性内毒素血症（Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａ,ＩＥＴＭ）发生率分别为９３．３％,８４．３％,７９．０％与７５．０％．结论肝病患者长期持续存在的ＩＥＴＭ可加剧肝细胞损伤,在急性肝炎重症化与慢性化中均具有其重要作用     

Expression of lipopolysaccharide binding protein and its receptor CD14 in experimental alcoholic liver disease

AIM:To evaluate the relationship between the expression oflipopolysaccharides(LPS)binding protein(LBP)and CD14mRNA and the severity of liver injury in alcohol-fed rats.METHODS:Twenty Wistar rats were divided into twogroups:ethanol-fed group(group E)and control group(group C).Group E was fed with ethanol(5-12g.kg~(-1).d~(-1))and group C received dextrose instead of ethanol.Rats ofthe two groups were sacrificed at 4 weeks and 8 weeks.Levels of endotoxin and alanine transaminase(ALT)inblood were measured,and liver pathology was observedunder light and electronic microscopy.Expressions of LBPand CD14 mRNA In liver tlssues were determined by RT-PCRanalysis.RESULTS:Plasma endotoxln levels were increased moresignificantly in group E(129±21 )ng.L~(-1) and(187±35)ng·L~(-1) at 4 and 8 wk than in control rats(48±9) ng·L~(-1) and(53±11)ng·L~(-1),respectively(P<0.05).Mean values ofplasma ALT levels were(1867±250)nkat·L~(-1) and(2450±367) nkat.L~(-1) in Group E.The values were increased moredramatically In ethanol-fed rats than in Group C after 4 and 8weeds.In liver section from ethanol-fed rats,there weremarked pathological changes(steatosis,cell infiltration andnecrosis).In ethanol-fed rats,ethanol administration led toa significant increase in LBP and CD14 mRNA levelscompared with the control group(P<0.05).CONCLUSION:Ethanol administration led to a significantIncrease in endotoxin levels in serum and LBP and CD14mRNA expressions in liver tissues.The increase of LBP andCD14 mRNA expression might wake the liver more sensitiveto endotoxin and liver injury.     

Effect of acute ethanol administration on the intestinal absorption of endotoxin in rats

BACKGROUND: Endotoxin has been implicated in the pathogenesis and progression of alcoholic liver disease. Not only inactivation of reticuloendothelial function, which reduces clearance of endotoxin, but also an increase in absorption of endotoxin from the intestine may be involved in mechanisms of ethanol-induced endotoxemia. However, it is unclear how ethanol affects absorption of endotoxin from the intestine in vivo. METHODS: We gave 10 mg/kg of lipopolysaccharides to rats with water (group 1), 5% ethanol (group 2), or 20% ethanol (group 3) using an intubation tube to the stomach. Blood samples were collected and plasma endotoxin levels were measured. We used fluorescence spectrophotometer to examine permeability of the gut to macromolecules (fluorescein isothiocyanate-dextran; 4,000 Da [FD4] or 20,000 Da [FD20]). RESULTS: Plasma endotoxin levels were not different between group 1 (9 +/- 2 pg/ml) and group 2 (14 +/-3 pg/ml), whereas they significantly increased in group 3 with a peak at 60 min (87 +/- 35 pg/ml). Acute ethanol administration did not affect clearance of endotoxin in rats. Hemorrhagic erosions of the proximal small intestine with epithelial cell loss were observed in group 3 at 4 hr, but no significant histological change was observed at 30 min by light microscopy. Acute ethanol administration (20%) increased the permeability of the small intestine to FD4 and FD20 in 30 min when no hemorrhagic erosions of the proximal small intestine with epithelial cell loss were observed. CONCLUSIONS: Acute ethanol administration increases intestinal permeability before pathological changes are revealed by light microscopy. Acute ethanol ingestion, especially at high concentrations, facilitates the absorption of endotoxin from rats' small intestine via an increase in intestinal permeability, which may play an important role in endotoxemia observed in alcoholic liver injury.